Agilent 2100 Bioanalyzer在人乳头瘤病毒检测中的应用

目的探讨Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(简称Bioanalyzer)在人乳头瘤病毒(HPV)的PCR检测和分型中的应用。方法先分别进行通用引物介导PCR(GP-PCR)和型特异性引物介导PCR,扩增HPV高保守区(L1区)的共同序列和各型(包括HPV6、11、16和18型)的特异性序列,然后分别用常规的琼脂糖凝胶电泳技术和Bioanalyzer对PCR产物进行检测,并比较两种检测方法的准确度、重复性和灵敏度。结果Bioanalyzer在确定片段长度时的准确度和重复性比琼脂糖凝胶电泳高,前者的准确度在95%以上,后者仅为85%;Bioanalyzer的检测灵敏度比琼脂糖凝胶电泳高100倍。结论Bioanalyzer芯片分析系统结合PCR方法可对HPV进行特异、准确、稳定、灵敏的检测和型别鉴定,具有重要的推广价值。     

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的：观察Agilent2100 Bioanalyzer芯片分析系统（以下简称Bioanalyzer）在基因差异表达研究中的应用。方法：应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段，然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果：Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段，并且通过对差异片段进行定量比较，发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论：Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。     

Agilent 2100 Bioanalyzer在基因差异表达研究中的应用

目的观察Agilent 2100 Bioanalyzer 芯片分析系统(以下简称Bioanalyzer)在基因差异表达研究中的应用。方法应用限制性显示技术分别从正常和热休克处理后的酿酒酵母细胞中分离出cDNA片段,然后再用Bioanalyzer和传统的琼脂糖凝胶电泳技术对RD-PCR产物进行检测分析。结果Bioanalyzer能更快速、敏感地分离和显示差异表达的基因片段,并且通过对差异片段进行定量比较,发现了数个表达有明显差异的基因片段。结论Bioanalyzer在基因差异表达研究中具有重要的应用价值。     

人乳头瘤病毒检测研究进展

子宫颈癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤,其发病率位居世界女性恶性肿瘤的第2位,而在一些发展中国家和地区仍居第1位[1].子宫颈癌的发生是一个连续的过程,即由细胞分化失调到不典型增生,到原位癌,最后发展成子宫颈癌.很多研究发现,人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)的持续感染与宫颈病变的演进有着密切的关系,HPV可促使子宫内上皮样瘤变及子宫颈癌的发生.2009年5月召开的第25届国际乳头瘤病毒会议,阐明了全球HPV的感染率呈上升趋势且出现了新的基因型[2].     

人乳头瘤病毒检测在宫颈疾病诊断中的意义

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）检测在宫颈疾病诊断中的应用及临床意义。方法选取2009年5月—2010年11月520例在大连医科大学附属一院三部妇科就诊妇女为研究对象,取宫颈脱落细胞采用导流杂交基因芯片（HybriMax）法行HPV检测,同时结合组织病理学检查进行分析,明确HPV感染与宫颈疾病的关系及宫颈癌的发生、发展过程。结果 HPV总感染率为48.8%,30～39岁年龄组HPV感染率最高为54.5%;组织病理学诊断慢性宫颈炎症、低级别病变（CINⅠ）、高级别病变（CINⅡ～Ⅲ）、宫颈原位癌或浸润癌中高危HPV感染检出率以42.2%、65.8%、95.4%、100.0%依次递增。结论宫颈疾病与高危型HPV感染有着十分密切的关系,引起宫颈肿瘤的最主要原因是高危型HPV感染,高危型HPV检测可作为宫颈癌的一种重要筛查手段。     

外耳道乳头状瘤中的人乳头瘤病毒检测及其临床意义

目的外耳道乳头状瘤(papilloma of the external auditory canal,PEAC)发病率占外耳道良性肿瘤的第1位。文中探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)在PEAC发病中的作用及HPV检测在PEAC中的意义。方法观察45例PEAC中挖空细胞及异型增生的组织形态学变化,并采用原位杂交技术分别检测HPV低危型(6/11)DNA,HPV高危型(16/18)DNA。结果PEAC不伴挖空细胞、PEAC伴挖空细胞、PEAC伴挖空细胞同时伴异型增生组织中HPV低危型(6/11)DNA感染率分别为16.7%、80.6%、66.7%,三者间差异有统计学意义(P<0.05);HPV高危型(16/18)DNA感染率分别为0%、16.7%、66.7%,三者间差异有统计学意义(P<0.05)。HPV低危型(6/11)DNA的检出率与性别有关(P<0.05)。结论HPV感染是PEAC致病的重要因素,积极开展抗HPV感染的治疗对减低PEAC的发病,防止其复发及癌变均具有重要的意义。     

原位核酸杂交技术在人乳头瘤病毒检测中的应用

目的:评价原位核酸杂交技术在人乳头瘤病毒(HPV)检测中的敏感性。方法:用原位核酸杂交和免疫组织化学技术对60例外阴尖锐湿疣病例进行检测,并对检测结果进行了对比分析。结果:免疫组织化学检测出阳性反应37例,阳性率为61.67%;原位核酸杂交检测出阳性反应56例,阳性率为93.33%,且阳性细胞数及阳性表达强度均高于免疫组织化学检测,背景清晰。结论:原位核酸杂交技术用于HPV的检测中敏感性高,阳性细胞反应与背景显色对比清晰,可克服免疫组织化学检测中假阴性高的弊端。     

高危型人乳头瘤病毒检测及其临床意义

目的　探讨人乳头瘤病毒 (HPV)与宫颈癌的相关性及广东地区高危型HPV感染的调查。方法　第二代杂交捕获法 (HCⅡ )检测 1994例妇女宫颈刷出物中的高危型HPV。结果　宫颈癌患者HPV感染率显著高于健康体检者及宫颈炎患者 ,差异具有显著性 (P <0 0 1)。 1994例妇女高危型HPV感染率为 2 7 7% ,广州、深圳、东莞、新会 4城市分别为 2 4 9% ,34 2 % ,31 7%和 17 1% ,新会与其他 3个城市比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　高危型HPV是诱发宫颈癌的重要病因学因素 ,控制HPV感染可降低宫颈癌的发病率。     

人乳头瘤病毒检测在宫颈癌筛查中的作用

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈癌筛查中的作用。方法用薄层液基细胞涂片法进行宫颈细胞学检查,对细胞学异常患者采用第二代杂交捕获试验检测高危型HPV DNA。 HPVDNA检测阳性和细胞学检测结果为非典型鳞状细胞或低度鳞状上皮内病变(LISL)以上患者,均行阴道镜下活组织病理检查。分析HPV感染与宫颈上皮内瘤变的关系。结果HPV DNA检出率随宫颈病变程度加重呈上升趋势。非典型鳞状细胞者中HPV检测阳性为31.4％,HPV阳性的非典型鳞状细胞患者中51.1％为宫颈上皮内瘤变或更严重病变。结论HPV DNA检测在宫颈癌筛查中可作为细胞学的辅助手段提高诊断准确性,减少细胞学结果为轻度异常患者不必要的阴道镜检查。高危型HPV检测可指导早期HPV感染者的治疗及用于惠者的追踪随访。     

压电基因传感器芯片技术在快速检测人乳头瘤病毒中的应用

目的　快速检出尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒（HPV）并分型.方法　利用基因芯片（Gene chip）与压电传感器（Piezoelectric biosensor）相结合的技术,通过HPV6、11、16、18四种型特异寡核苷酸探针建立一种快速检测HPV并分型的方法.并与常规的PCR和斑点杂交方法比较.结果　取复发型尖锐湿疣及相应的原发病例组织标本各22份,用压电基因传感器芯片技术检测结果为：原发型组织标本全部为阳性结果,其中 HPV6: 17(77.3%), HPV11: 3(13.6%), HPV16: 2(9.1%), HPV18:未检出；复发型组织标本中除第18例标本为阴性结果外,其余21份为阳性结果,其中HPV6: 15（68.2%）,HPV11: 2(9.1%), HPV16: 4(18.2%), HPV18:未检出.用PCR方法检测结果全部阳性,PCR扩增的产物经斑点杂交分型结果与其基本一致.结论　压电基因传感器芯片技术具有准确、快速、灵敏的优点.     

压电基因传感器芯片技术在快速检测人乳头瘤病毒中的应用

目的：快速检出尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒（HPV）并分型。方法：利用基因芯片（Gene chip）与压电传感器（Piezoelectric biosensor）相结合的技术，通过HPV6、11、16、18四种型特异寡核苷酸探针建立一种快速检测HPV并分型的方法。并与常规的PCR和斑点杂交方法比较。结果：取复发型尖锐湿疣及相应的原发病例组织标本各22份，用压电基因传感器芯片技术检测结果为：原发型组织标本全部为阳性结果，其中HPV6：17（77.3％），HPV11：3（13.6％），HPV16：2（9.1％），HPV18：未检出；复发型组织标本中除第18例标本为阴性结果外，其余21份为阳性结果，其中HPV6：15（68.2％），HPV11：2（9.1％），HPV16：4（18.2％），HPV18：未检出。用PCR方法检测结果全部阳性，PCR扩增的产物经斑点杂交分型结果与其基本一致。结论：压电基因传感器芯片技术具有准确、快速、灵敏的优点。     

Multichannel piezoelectric genesensor for the detection of human papilloma virus

Ｗｉｔｈｉｎｔｈｅｐａｓｔｔｅｎｙｅａｒｓ,ｔｈｅｒｅｈａｓｂｅｅｎｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｉｎｔｅｒｅｓｔｉｎｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｓｐｅｃｉｆｉｃＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｓｕｓｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓｗｈｉｃｈｄｏｎｏｔｒｅｑｕｉｒｅｔｈｅｕｓｅｏｆｒａｄｉｏｉｓｏｔｏｐｅｓ ,ｅｎｚｙｍｅｓｏｒｆｌｕｏｒｏｐｈｏｒｅｓ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓｙｓｔｅｍｓｂａｓｅｄｏｎｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｎｏｔｏｎｌｙｅｌｉｍｉｎａｔｅｔｈｅｎｅｅｄｆｏｒｓｕｃｈｌａｂｅｌｓｂｕｔａｌｓｏｏｆｆｅｒｔｈｅｐｏｔｅｎ…     

高危型人乳头状瘤病毒检测在子宫颈癌筛查中的意义

目的:探讨高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)检测在子宫颈癌筛查中的意义。方法:对2 442例子宫颈疾病患者进行液基细胞学(TCT)检测,2 147例患者进行HPV杂交捕获法二代或核酸分子快速导流杂交技术检测(HPV检测),其中783例患者同时进行TCT和HPV检测。723例因细胞学异常或细胞学正常而HR-HPV检测阳性,或细胞学正常HR-HPV阴性临床高度怀疑病变的患者行阴道镜下多点活检、宫颈电圈切除术(LEEP),结合病理结果进行分析。结果:TCT联合HPV检测的样本中,TCT正常或炎症、不能明确意义的非典型鳞状上皮细胞(不除外高度病变非典型鳞状上皮细胞5例,合并计算)、低度鳞状上皮内瘤变、高度鳞状上皮内瘤变的HR-HPV阳性率分别为22.39%、48.09%、74.47%和88.46%,差异有统计学意义(P0.01);随着细胞学诊断级别的升高,HR-HPV阳性率显著上升。阴道镜下多点活检、LEEP病理结果:正常或炎症组、宫颈上皮内瘤变(CIN)1、CIN 2、CIN 3、鳞状细胞癌和湿疣中HR-HPV阳性率分别为23.72%、83.87%、85.19%、88.10%、92.86%、72.37%,差异有统计学意义(P0.01)。结论:持续的HR-HPV阳性与宫颈病变的演进有关,HR-HPV检测在子宫颈癌筛查中具有重要意义。     

鼻内翻性乳头状瘤与人乳头瘤病毒感染的相关性研究

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染与鼻内翻性乳头状瘤(NIP)发病及复发的相关性.方法 应用聚合酶链反应(PCR)和PCR产物斑点杂交技术,检测33例患者42份NIP石蜡和新鲜标本,以及20份正常鼻黏膜组织HPV6、11、16、18、33五个型别的HPV-DNA.结果 NIP组织HPV总阳性率为54 7%(23/42),其中HPV6为19.0%(8/42),HPV11为21.4%(9/42);HPV16为7.1%(3/42);HPV11 16为7.1%(3/42);HPV18 33均为阴性.对照组各型检测结果均为阴性.两组比较差别具有非常显著性意义(P＜0.001).结论 HPV感染在NIP的发病和复发过程中起一定的作用.良性NIP发病与HPV6、11型感染有关.     

高危型乳头状病毒在宫颈癌筛查中的价值

目的 探讨高危型人乳头状病毒（HPV）16/18与宫颈癌的相关性及其在筛查宫颈癌中的临床意义.方法 采用PCR荧光测定仪对187名妇女宫颈分泌物作HPV检测,并进行宫颈组织活检,并以组织病理学检测为确诊标准.结果 正常人与慢性宫颈炎患者的HPV感染率差异无显著性（P＞0.05）,CIN和宫颈癌的HPV感染率与正常人差异有显著性（P＜0.005）.结论 乳头状病毒在宫颈癌筛查中能够提高对宫颈疾病的诊断,对宫颈病变的早期诊断和治疗有重要意义.     

新疆地区人乳头瘤病毒感染的基因型研究

目的:应用PCR-反向点杂交(PCR-reverse dot blot,PCR-RDB)技术对新疆地区人乳头瘤病毒(Human papilloma virus-es,HPV)进行基因分型。方法:收集疑似HPV感染病例标本335例,提取HPV基因组DNA,应用PCR-RDB技术扩增HPV的L1基因并进行分型,计算不同基因型HPV的感染率,组间率的比较采用χ2检验。结果:335例病例标本中检出HPV阳性标本108例,阳性率为32.2%,共检出HPV16、18、33、45、56、68、6、11和66共9种基因型,其中HPV16、18和56亚型的感染较高。分组统计结果显示,HPV阳性率和高危型HPV的检出率在不同类型疾病患者中是不同的,在尖锐湿疣、高度子宫颈上皮内瘤变Ⅱ/Ⅲ和宫颈癌患者中HPV阳性率和高危型HPV的检出率均显著高于宫颈炎组和宫颈糜烂疾病组(P<0.05),而随着年龄的不断增加,HPV感染率降低。HPV的感染率在19～36年龄组较高,随着年龄的增加,HPV感染率有降低趋势。结论:在本地区宫颈病变患者中HPV的感染率较高,而基于PCR-RDB的基因分型可为HPV感染的诊断、治疗和随访提供依据。