载脂蛋白E对脾脏淋巴细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探究载脂蛋白E(Apo E)对髓鞘抗原刺激的小鼠脾脏淋巴细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)作为抗原诱导免疫Apo E基因缺失型(Apo E-/-)和野生型(WT)型的C57BL/6J小鼠,免疫后第7天取小鼠脾脏,分离并体外培养淋巴细胞,随机分为4组,即Apo E-/-实验组(E-Apo E-/-)、WT实验组(E-WT)、Apo E-/-对照组(C-Apo E-/-)、WT对照组(C-WT)。予以MOG35-55刺激E-Apo E-/-组和E-WT组淋巴细胞,C-Apo E-/-组和C-WT组给予等量生理盐水作为对照处理,24 h后离心并收集上清。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的浓度。结果 (1)小鼠被诱导免疫后,Apo E-/-小鼠和WT小鼠脾脏淋巴细胞均能分泌TNF-α、IL-17、MMP-9,Apo E-/-小鼠脾脏淋巴细胞分泌的量较多,差异有统计学意义(P0.05);(2)体外用MOG35-55刺激脾脏淋巴细胞后,E-Apo E-/-组和E-WT组淋巴细胞TNF-α、IL-17、MMP-9的浓度明显升高,且E-Apo E-/-组较E-WT组更显著,差异有统计学意义(P0.05);(3)各组小鼠脾脏淋巴细胞分泌TIMP-1的量未见明显差别,差异无统计学意义(P0.05)。结论 Apo E可以调节脾脏淋巴细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-17和基质金属蛋白酶MMP-9,进而可能影响血脑屏障的完整性。     

载脂蛋白E对EAE星形胶质细胞的影响

目的探索载脂蛋白E(apolipoprotein E,apo E)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型小鼠病灶星形胶质细胞的影响。方法采用MOG35-55诱导apo E基因敲除的C57BL/6小鼠(apo E-/-EAE组)及野生型C57BL/6小鼠(普通EAE组),建立EAE模型。取免疫后35 d的EAE小鼠的大脑及脊髓切片,行HE染色,免疫组织化学染色法观察各组小鼠水通道蛋白4(AQP4)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果 apo E-/-EAE组和普通EAE组大脑和脊髓AQP4、GFAP的表达量均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);apo E-/-EAE组大脑和脊髓AQP4、GFAP表达量均高于普通EAE组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 EAE中存在星形胶质细胞水肿、增生,apo E缺乏可以加重这一病变。     

载脂蛋白E拟肽对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响

目的探讨载脂蛋白E(Apo E)拟肽对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法将30只雌性C57BL/6J小鼠随机分为Apo E拟肽组、EAE组和正常组,每组10只小鼠。EAE模型通过以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55为抗原诱导。Apo E拟肽组在免疫后第2 d到30 d每隔2 d按5 mg/(kg·d)背部皮下注射Apo E拟肽。EAE组和正常组均以等体积生理盐水替代。免疫后第0~35 d每日对小鼠进行神经功能评分。免疫后第35d解剖小鼠,分离大脑和脊髓并行HE染色。采用免疫组化染色法检测各组小鼠大脑、脑干和脊髓的MMP-9和TIMP-1的表达。结果正常组小鼠均未发病。Apo E拟肽组、EAE组的小鼠全部发病,但各有1只小鼠发病后死亡。Apo E拟肽组与EAE组的发病潜伏期差异无统计学意义(P=0.72)。Apo E拟肽组的神经功能评分在峰值和慢性期(第35 d)均明显低于EAE组(均P0.05)。HE染色示,正常组未见炎症细胞浸润;EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓均有不同程度的炎性细胞浸润,以脑干和脊髓较为明显;Apo E拟肽组小鼠CNS炎性细胞浸润相对于EAE组明显减少。EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓的MMP-9表达均高于正常组(均P0.05)。Apo E拟肽组小鼠大脑和脊髓的MMP-9表达要明显低于EAE组(均P0.05),其中Apo E拟肽组小鼠中脑和脊髓的MMP-9表达与正常组相比无明显差异(均P0.05)。正常组小鼠脊髓TIMP-1的表达明显高于EAE组和Apo E拟肽组(均P0.05)。而Apo E拟肽组与EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓TIMP-1表达的差异均无统计学意义(均P0.05)。结论 Apo E拟肽能通过抑制大脑和脊髓MMP-9的表达改善EAE小鼠的症状。     

基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)在人脑星形胶质细胞瘤的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMP)与人脑星形胶质细胞瘤浸润性生长之间的关系，以及基质金属蛋白酶的阳性表达与星形胶质细胞瘤病理分级的关系。方法 应用免疫组织化学染色法(SP法)检测44例人脑星形胶质细胞瘤组织中MMP-2、MMP-9的表达。结果 Ⅲ、Ⅳ级中MMP-2、MMP-9蛋白的表达显著高于Ⅰ、Ⅱ级，而正常脑组织中无表达；在人脑星形胶质细胞瘤中MMP-2和MMP-9的表达之间无明显相关性。结论 MMP-2、MMP-9的表达与星形胶质细胞瘤的恶性程度有关，其高表达可能与星形胶质细胞瘤的侵袭转移有关。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子和基质金属蛋白酶-9在人脑星形细胞瘤中的表达及其意义

目的探讨人脑星形细胞瘤中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,以及它们在星形细胞瘤侵袭性生长中的作用。方法采用免疫组织化学S-P法对49例星形细胞瘤、11例脑膜瘤和7例正常人脑组织中的EMMPRIN和MMP-9的表达进行检测。结果EMMPRIN和MMP-9的表达在Ⅲ-Ⅳ级星形细胞瘤显著高于Ⅰ-Ⅱ级星形细胞瘤(P<0.01),在Ⅰ-Ⅱ级星形细胞瘤又显著高于脑膜瘤(P<0.01),在脑膜瘤高于正常脑组织(P<0.05)。且EMMPRIN和MMP-9的表达呈显著正相关(r=0.378,P<0.01)。结论EMMPRIN和MMP-9表达均是反映人脑星形细胞瘤侵袭和预后的重要标记物,它们可能相互影响和共同调节星形细胞瘤的侵袭性生长。     

蜂胶黄酮对人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶9的影响

背景：研究表明，基质金属蛋白酶9与动脉粥样硬化斑块的稳定性有关，蜂胶黄酮具有抗动脉粥样硬化的作用。 目的：拟证实蜂胶黄酮对人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶9表达的影响。 设计、时间及地点：对比观察。实验于2008-01/08在山东泰山医学院生命科学研究所完成。 材料：蜂胶黄酮由泰山医学院生命科学研究所实验室提取；出生1 h内新生儿脐带由山东泰安市中心医院提供，产妇知情同意。 方法：进行人脐静脉内皮细胞的体外培养和鉴定。按四甲基偶氮唑盐实验筛选的浓度，分别加入25，50，100，200 mg/L不同剂量的蜂胶黄酮处理细胞24 h，以空白组做对照。 主要观察指标：免疫细胞化学染色和ELISA法测定蜂胶黄酮对基质金属蛋白酶9表达的影响。 结果：不同剂量的蜂胶黄酮作用人脐静脉内皮细胞24 h后均能明显抑制细胞基质金属蛋白酶9的表达，并且随着浓度的升高抑制作用明显增强。 结论：蜂胶黄酮能明显降低人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶9的表达。     

脑缺血后适应对基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:探讨缺血后适应对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及与MMP-9的关系。方法:应用线栓法制做大鼠脑缺血再灌注损伤模型;对大鼠脑缺血再灌注1h和48h进行神经功能评分;48h后TTC染色测定脑梗死体积和脑水肿程度;4h、8h、24h、48h后免疫组化定位定量MMP-9水平。结果:缺血后适应组大鼠脑梗死体积、水肿程度、术后神经功能评分较对照组明显改善(P<0.05),各时间点后适应组大鼠基底节区MMP-9表达较对照组显著减少(P<0.05),梗死侧皮层MMP-9表达无显著改变。结论:缺血后适应能减少脑缺血后MMP-9的表达,缩小梗死体积,减轻脑水肿程度,改善术后神经功能。MMP-9下调可能是缺血后适应脑保护的分子机制之一。     

基质金属蛋白酶-2、-7、-9在人脑星形细胞瘤中的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)在人脑星形细胞瘤侵袭、转移中的作用。方法 用免疫组织化学方法(S-P法)检测了45例人脑星形细胞瘤组织中MMP-2、MMP-7、MMP-9的表达情况。结果 Ⅲ、Ⅳ级中MMP-2、MMP-9蛋白表达要明显高于I、Ⅱ级，而MMP-7在部分Ⅳ级星形细胞瘤中过度表达，而在T、Ⅱ、Ⅲ级中无表达。结论 MMP-2、MMP-7、MMP-9蛋白的表达与星形细胞瘤的恶性程度有关，其高表达可能与星形细胞瘤的侵袭、转移等恶性生物学行为有关，并有可能成为星形细胞瘤恶性程度、侵袭能力的判断指标。     

基质金属蛋白酶-2在星形细胞瘤中的表达及意义

目的　探讨基质金属蛋白酶 (MMPS)中MMP 2在星形细胞瘤中的表达及其意义。方法　 4 6例星形细胞瘤标本 ,其中Ⅰ级星形细胞瘤 16例 ,Ⅱ级星形细胞瘤 14例 ,Ⅲ级星形细胞瘤 8例 ,Ⅳ级星形细胞瘤 8例。用免疫组织化学SP法进行染色。结果　低级别星形细胞瘤与高级别星形细胞瘤MMP 2的表达差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1)。结论　MMP 2的表达与星形细胞瘤恶性程度密切相关。     

缺氧与复氧对星形胶质细胞水通道蛋白-9表达的影响

目的探讨体外培养星形胶质细胞缺氧及复氧后水通道蛋白-9(AQP9)表达的变化特点及其所起的作用。方法取生后2d的Wistar大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞纯培养,缺氧时间分别为:12、24、48h,并取缺氧24h后复氧12、24、48h的细胞进行存活率、乳酸脱氢酶活性的测定,采用免疫细胞化学方法检测细胞AQP9的表达。结果缺氧组及复氧组的星形胶质细胞死亡数与对照组相比无明显变化,缺氧和复氧后乳酸脱氢酶活性亦无明显改变(P(0.05),缺氧组细胞AQP9表达较对照组增高,并随缺氧时间延长而明显增高(P<0.05),复氧后24h内AQP9表达逐渐下降,24h后AQP9表达仍未恢复正常水平。结论星形胶质细胞对缺氧较为耐受,缺氧对星形胶质细胞存活能力无明显影响,缺氧引起AQP9的表达上调,而复氧使其表达明显下降。     

17β-雌二醇对解聚素金属蛋白酶9表达水平的影响

目的 研究17β-雌二醇对解聚素金属蛋白酶9(ADAM9)表达水平的影响. 方法 应用盐析法提取人类基因组DNA,扩增ADAM9基因启动子目的片断,构建表达ADA M9启动子的报告基因质粒.应用脂质体转染法,分别转染入人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH、人胚肾细胞HEK293和宫颈癌细胞HeLa内.17β-雌二醇处理各组细胞后,检测ADAM9启动子转录效率.结果 成功扩增了ADAM9启动子区1676 bp目的片段,构建了ADAM9启动子报告基因质粒pGL-ADAM9,瞬时转染入细胞内.17β-雌二醇处理SK-N-SH细胞后,ADAM9启动子转录活性上升至31.250±1.328,较处理前的15.471±1.256增加约2倍,差异有统计学意义(P＜0.05).HEK293细胞内,ADAM9启动子转录活性上升至13.499±0.866,较处理前的8.513±1.356增加约1.6倍,差异有统计学意义(P＜0.05).HeLa细胞中没有观察到17β-雌二醇对ADAM9启动子转录活性的影响. 结论 17β-雌二醇能上调人ADAM9启动子的表达水平,是ADAM9基因表达的激活剂.     

基质金属蛋白酶-9与血脑屏障

血脑屏障的破坏引起血管源性脑水肿是缺血性脑梗死急性期一个重要的病理生理改变，其所导致的颅内高压、脑疝是临床重要的致死原因。近年来，关于基质金属蛋白酶-9参与血脑屏障破坏引发缺血性脑水肿的研究较多，现就其关系作一综述。     

基质金属蛋白酶-9与脑缺血

基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9．MMP-9）是一种依赖锌离子的蛋白酶，因其表达细胞众多，作用底物广泛而备受重视，与脑血管病发病过程关系密切．已成为研究热点之一。脑缺血后表达的MMP-9能降解基底膜而破坏血脑屏障（blood brain barrier，BBB），导致血管源性脑水肿和出血转化．新近的研究还发现了MMP-9在脑缺血后神经元凋亡中的作用。MMP-9抑制剂被认为是治疗缺血性脑血管病很有前景的药物，充分理解脑缺血后MMP-9的作用机制将对缺血性脑血管病冶疗有重要的启示。     

基质金属蛋白酶-9与脑缺血

脑缺血后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)因其表达细胞众多、作用底物广泛而备受医学界重视。脑缺血后表达的MMP-9能降解基底膜而破坏血脑屏障,导致血管源性脑水肿和出血性转化。MMP-9抑制剂有可能成为治疗脑血管病的一条新途径。     

β-淀粉样蛋白对星形胶质细胞分泌组织蛋白酶B作用的研究

目的研究β-淀粉样蛋白(Aβ)对星形胶质细胞活性、形态学以及分泌组织蛋白酶B(CB)的影响。方法体外培养星形胶质细胞,采用免疫细胞化学方法对星形胶质细胞进行鉴定;观察加入不同浓度溶解状态的Aβ1-40后细胞形态学改变,采用四唑盐法检测细胞活性,Western blot法测定细胞上清CB表达水平。结果将不同浓度新鲜Aβ1-40加于星形胶质细胞分别培养24 h,各浓度Aβ1-40对星形胶质细胞活性均无明显影响(P0.05);随时间延长,经40～60μmol/LAβ1-40处理的星形胶质细胞逐渐出现肿胀、坏死;经15、20、25μmol/L Aβ1-40诱导的星形胶质细胞上清中检测到CB表达,随Aβ1-40浓度增高可见蛋白质显影增强且带形清晰。结论 Aβ1-40可激活星形胶质细胞并诱导其释放CB,提示Aβ激活的星形胶质细胞及其释放的CB可能在AD发病中起着一定作用。     

基质金属蛋白酶-9与颅内动脉瘤

颅内动脉瘤是常见的脑血管疾病,是由于局部血管异常改变产生的脑血管瘤样突起,其人口的发病率约为1/万左右。颅内动脉瘤破裂导致的蛛网膜下腔出血是中风的重要原因,在我国年发病率约为10.5/10万人口[1],仅次于脑     

基质金属蛋白酶-9与神经系统疾病

基质金属蛋白酶-9（MMP-9）是一种Zn^2＋依赖性蛋白水解酶，能降解和重塑细胞外基质，破坏血脑屏障，介导炎症反应，促进神经细胞死亡，同时也有利干运动功能的恢复。MMP-9激活和调控与神经系统疾病的发病机制有密切的关系。MMP-9是研究过程中发现的新靶点，为神经系统疾病的早期诊断、并发症的预防和治疗开辟了新的途径，为神经系统疾病患者的治疗带来曙光。     

5α-双氢睾酮对解聚素金属蛋白酶9表达水平的影响

目的研究5α-双氢睾酮(5α-DHT)对解聚素金属蛋白酶9(ADAM9)表达水平的影响。方法应用盐析法提取人类基因组DNA,扩增ADAM9基因启动子区目的片断,构建表达ADAM9启动子的报告基因质粒。应用脂质体转染法,分别转染入人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)、人前列腺癌细胞(LNCaP)和人宫颈癌上皮细胞(HeLa)内。5α-DHT处理各组细胞后,检测ADAM9启动子转录效率。结果我们扩增了ADAM9启动子区1676bp目的片断,构建了ADAM9启动子报告基因质粒pGL-ADAM9,将其瞬时转染入上述细胞内。5α-DHT干预细胞后,ADAM9启动子转录活性与非处理组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论上述三种细胞中,5α-DHT对ADAM9启动子表达水平无显著影响。     

尿激酶溶栓对大鼠局灶性脑缺血基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的研究大鼠局灶性脑缺血后应用尿激酶(urokinase,UK)溶栓对基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,探讨MMP-9在UK溶栓引起的再灌注损伤及出血性转化中的作用。方法将实验动物随机分成3组进行研究(1)UK溶栓组;(2)缺血对照组;(3)假手术组。分别用免疫组织化学方法分析3组缺血后24hMMP-9的表达,对比研究两组MMP-9表达的差异性。结果缺血后24h前两组均有MMP-9的表达,但是UK溶栓组表达的程度明显高于缺血对照组;假手术组无MMP-9的表达。结论(1)缺血能导致MMP- 9的表达。(2)UK溶栓引起MMP-9表达的上调。     

基质金属蛋白酶-9与脑梗死的关系

近年研究发现炎症在动脉粥样硬化及脑梗死中发挥重要作用，炎性标志物基质金属蛋白酶-9（MMP-9）可降解细胞外基质，削弱纤维帽的结构，增加动脉粥样硬化斑块的不稳定性，加速斑块裂解，促进斑块破裂和血栓形成。脑梗死时MMP-9过度表达可破坏血-脑脊液屏障并形成脑水肿，在继发性脑出血和脑损伤过程中发挥了关键性作用。