山东地区输血传播病毒(TTV)检测和部分基因克隆及序列测定

目的：了解TTV山东分离株感染状况及基因变异的情况。方法：应用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测26例来自山东泰安、莱芜、济宁、菏泽、枣庄及临沂、日照地区非甲－庚型肝炎和12例肝细胞癌患者，其中HBV感染者5例，HCV感染者2例，HBV＋HCV＋HGV混合感染2例，HBV＋HCV＋TTV感染者1例，HGV＋TTV感染者1例，HEV＋HGV感染者1例。在这26例非甲－非庚型肝炎中有输血或输血制品、手术、拔牙、针灸、注射以及肝炎密切接触史17例。另12例肝癌中有输血、手术、拔牙、静脉注射史10例。检出血清中TTV DNA阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序，分析其基因变异的情况。结果：26例非甲－庚型肝炎中11例TTVDNA阳性（42．3％）。对其中两株（TTVSD4、TTVSD5）部分基因克隆测序，并与日本株（ABOO8394）相比较，其核苷酸序列同源性分别为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性（25．0％），对其中一株（TTVSD6）部分基因克隆与测序，与日本株（ABOO8394）相比较，苷核苷酸序列同源性为99％；TTV山东株三株间核苷酸同源性均为99％。结论：本项研究证实山东地区非甲－庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染、TTV感染可能具有嗜肝性，而且可能与肝功能损害有关，是引起非甲－庚型肝炎重要病原。     

山东泰安地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

目的 探讨山东非甲-庚肝炎和肝癌患者输血传播病毒(TTV)感染状况和基因变异情况。方法 应用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测26例山东泰安地区非甲-庚型肝炎和12例肝细胞癌(HCC)患者血清中TTVDNA，并对阳性扩增的产物利用PCR技术片段直接克隆和测序，分析其基因变异的情况。结果 26例非甲-庚型肝炎中11例TTVDNA阳性(42．3％)。对其中两株(TTVSD4、TTVSD5)部分基因克隆测序，并与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性分别为99．9％和100％。而12例肝细胞癌患者中3例TTVDNA阳性(25．0％)，对其中一株(TTVSD6)部分基因克隆与测序，与日本株(AB008394)相比较，其核苷酸序列同源性为99％；TTV山东泰安三株问核苷酸同源性均为99％。结论 研究证实山东泰安地区非甲～庚型肝炎和肝细胞癌患者中存在着较高TTV感染，TTV感染可能具有嗜肝性，而且可能与肝功能损害有关，是引起非甲～庚型肝炎的重要病原。     

山东地区TTV检测和部分基因克隆及序列测定

了解ＴＴＶ山东分离株感染状况及基因变异的情况。应用逆转录聚合酶链反应检测 2 6例山东地区非甲～庚型肝炎和 12例肝细胞癌患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对阳性扩增的产物利用ＰＣＲ技术片段直接克隆和测序 ,分析其基因变异的情况。结果显示 ,2 6例非甲～庚型肝炎中 11例ＴＴＶＤＮＡ阳性 ( 4 2 .3% )。对其中 2株 (ＴＴＶＳＤ4、ＴＴＶＳＤ5)部分基因克隆测序 ,并与日本株(ＡＢＯＯ8394 )相比较 ,其核苷酸序列同源性分别为 99.9%和 10 0 % ,而 12例肝细胞癌患者中 3例ＴＴＶＤＮＡ阳性(2 5.0 % ) ,对其中 1株 (ＴＴＶＳＤ6)部分基因克隆与…     

山东泰安地区部分人群中TTV感染调查及TTV山东株部分基因序列分析

目的 了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型肝炎病例中TTV感染及基因变异的状况。方法应用套式PCR方法检测41例输血后丙型肝炎和16例非甲～庚型肝炎患者血清中TTV DNA,并对其中阳性的2例扩增产物直接克隆测序,分析其基因变异的情况。结果 41例输血后丙型肝炎患者血消中TTVDNA阳性检出率为19.5％(8/41),而16例非甲～庚型肝炎患者血清中阳性检出率为31.3％(5/16)。TTV山东第一株序列和山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本株和中国第一株相比较分别为94％和91％;山东TTV的两株序列间同源性为91％。结论 本项研究证实山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型肝炎患者中存在较高TTV感染,输血可能为传播TTV感染途径之一,是否该地区存在着不同的TTV亚型还有待于进一步调查证实。     

TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测及序列分析

目的研究TTV在非甲-庚型肝炎患者中的感染状况及临床意义。方法 采用套式PCR法检测50例非甲-庚型肝炎患者血清标本中TTV DNA,并对其中一株TTV的部分基因序列进行了测定。结果 在50例肝炎患者中,TTV DNA阳性检出率为28.0％(14/50)。TTV序列分析与日本株的同源性为98％。结论TTV感染可能是非甲-庚型肝炎的病因之一。     

山东地区部分人群中TTV感染调查及TTV山东株部分基因序列分析

了解山东地区输血后丙型肝炎和非甲～庚型病例中肝炎ＴＴＶ感染及基因变异的状况。应用套式ＰＣＲ方法检测 4 1例输血后丙型肝炎和 16例非甲～庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ ,并对扩增的产物直接克隆测序 ,分析其基因变异的情况。结果表明 ,4 1例输血后丙型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ阳性检出率为 19.5% ( 8/41) ,而 16例非甲～庚型肝炎患者血清中阳性检出率为 31.3% ( 5/16)。ＴＴＶ山东第一株序列与山东第二株序列相应位置核苷酸同源性与日本株和中国第一株相比较分别为 94 %和 91% ;山东ＴＴＶ的两株序列间同源性均为 91%。研究证实山…     

TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测及序列分析

目的：研究TTV在非甲～庚型肝炎患者中的感染状况及临床意义。方法：采用套式PCR法检测50例非甲～庚型肝炎患者血清标本中TTV DNA。并对其中1株TTV的部分基因序列进行了测定。结果：在50例肝炎患者中,TTV DNA阳性检出率为28．0（14／50）,TTV序列分析与日本株的同源性为98％。结论：TTV感染可能是非甲～庚型肝炎的病因之一。     

非甲～庚型肝炎患者中TTV感染的调查

目的了解TTV在我院非甲-庚型肝炎患者中的感染状况。研究TTV感染对非甲-庚型肝炎临床表现的影响,探讨TTV在病毒性肝炎中的致病作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)斑点杂交法对我院108例非甲-庚型肝炎患者血清标本进行TTV DNA检测。结果非甲-庚型肝炎患者TTV DNA阳性率为14.8％(16/108),急、慢性肝炎及重型肝炎患者中TTV DNA的检出率无统计学差异。TTV阳性组与TTV阴性组肝脏临床及生化指标无显著性差异。结论TTV可能并非是导致肝脏功能损害的真正病原。     

TTV在非甲～庚型肝炎患者中的检测及临床意义

目的 研究TTV在非甲～庚型肝炎中的临床意义。方法 用聚合酶链反应(PCR)方法检测了50例非甲～庚型肝炎的TTV DNA。结果 在50例肝炎患者中,TTV DNA阳性检出率为28.O％(14/50)。结论 TTV感染可能是非甲～庚型肝炎的病因之一。     

TT病毒感染的肝炎患者外周血单个核细胞中TT病毒复制的研究及克隆测序

目的 了解TTV阳性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)TTV DNA存在及复制情况。方法 采用巢式PCR技术和绿豆芽核酸酶消化方法研究其存在及复制情况,并克隆测序分析证实。结果 16例TTV阳性肝炎患者PBMC中有14例TTV DNA阳性,并同时用绿豆芽核酸酶消化所提取的PBMC DNA,有2例为TTV DNA阳性。这3个序列与日本株和中国株相应位置核苷酸序列同源性大于95％以上(95～98％)。结论 我们在国内外首次报道TTVDNA可在TTV阳性肝炎患者PBMC中存在及复制,表明肝细胞并非为TTV感染和复制的唯一场所。     

TTV在非甲-庚型肝炎患者中的检测、克隆及测序

目的分析ＴＴＶ（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｅｄｖｉｒｕｓ）深圳分离株ＯＲＦ１部分基因序列。方法在ＴＴＶＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ），检测４０例广东地区非甲－庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果４０例非甲－庚型肝炎中２１例ＴＴＶＤＮＡ阳性（５２．５％）。对其中一株ＴＴＶ（ＳＺ１）ＯＲＦ１部分基因克隆、测序，并与Ｏｋａｍｏｔｏ等报道的２株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）相比较，其核苷酸序列的同源性分别为９６．７％与９７．４％。结论本研究证实我国华南地区存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ的分子克隆与测序及ＰＣＲ诊断技术的建立对国内进一步开展ＴＴＶ感染的诊断与流行病学调查均具有重要意义     

陕西地区输血传播病毒的感染状况及部分基因序列分析

目的分析陕西地区不同人群中TVV(Transfusion transmitted virus,TTV)的感染情况及基因型。方法根据TTV ORFl区设计引物,建立巢式聚合酶链反应,检测不同人群中TTV-DNA。并对PCR阳性产物进行克隆、测序分析和同源性比较。结果 30例健康人群中,50例肝炎病人,40例非甲～非庚肝炎TTV-DNA阳性率分别为6.0％,22.5％,52.5％。对其中三组人群各任取1例(TTVSJ1、TTVSG2、TTVSF3进行PCR产物直接测序,其序列与日本株N22同源性分别为97.5％、97.8％和97.8％。结论陕西地区不同人群中均可有TTV感染存在;非甲～非庚型肝炎TTV-DNA阳性率占有较大比例;陕西地区TTV与日本株N22属同一亚型。     

新疆蒙古族肝炎患者的TTV检测、克隆与测序分析

目的：分析TTV在新疆蒙古族、汉族肝炎患者的部分基因序列，为新疆各民族中TTV感染的流行病学调查提供可靠的依据。方法：根据AB008394全基因序列设计引物，建立巢式聚合酶链反应（Nested-PCR)，检测新疆地区各民族肝炎患者262例血清中的TTV DNA，对其中的11例TTV阳性者进行了克隆测序。结果：本组11例部分基本序列与AB008394相比较，其核苷酸序列的同尖性10例均在90％以上，仅蒙古族为87．1％。结论：本研究证实新疆地区的蒙古族中存在TTV感染。     

High prevalence of G1 and G2 TT-virus infection in subjects with high and low blood exposure risk: identification of G4 isolates in Italy

BACKGROUND/AIMS: A non-enveloped single-stranded DNA virus (TTV) was detected in Japanese patients with fulminant hepatitis (47%) and chronic liver disease of unknown etiology (46%) more frequently than in blood donors (12%). Subsequent studies, however, questioned the association of TTV with liver disease. We further investigated the role of this novel virus in liver diseases. METHODS: We tested 106 patients and 102 blood donors for TTV by polymerase chain reaction using conserved region primers. RESULTS: TTV DNA was found in 19 of 102 volunteer blood donors (18.6%) and in 27 of 106 patients with liver disease (25.5%): 10 of 28 chronic hepatitis B (35.7%), 9 of 28 chronic hepatitis C (32.1%) and 8 of 50 (16%) cryptogenic liver disease patients. Previous interferon treatment was not associated with a significantly lower prevalence of TTV infection. TTV prevalence was higher in patients with blood exposure (42.8%, 6/14) than in patients without risk factors (21.4%, 18/84). Four of five patients (80%) with HBV familial infection and without blood exposure were also TTV positive. Partial nucleotide sequences from 3 Italian isolates diverged more than 30% from the 2 prototype genotypes G1 and G2 and were 88% homologous to the recently described genotype G4. CONCLUSIONS: G1 and G2 TTV are common in Italy and in the USA in liver disease patients and in blood donors. The prevalence is high in patients with blood exposure but also in subjects without risk factors; other routes of transmission should therefore be considered.     

输血传播病毒母婴传播的研究

目的：探讨深圳市孕产妇输血传播病毒（TTV）感染情况及其在母婴间的传播途径。方法：应用套式－聚合酶链反应（Nest－PCR）对400例正常孕产妇分娩前的血清及其新生儿的脐血血清标本、产妇的乳汁配对进行了TTV DNA检测，对阳性的母亲及其新生儿进行的6个月随访，并对其中13对TTV DNA阳性的母血、母乳及其婴儿的血，共做32株克隆，通过DNA序列测定比较分析母婴TTV感染株之间核苷酸的序列同源性。结果：在400对配对标本中，62例孕妇血清、4例新生儿脐血清、20例母乳检测出TTV DNA，孕母TTV感染率15．5％（62／400），出生时母婴TTV传播率6．5％（4／62），阳性母亲乳TTV DNA检出率32．2％（20／62），配对比较母婴间TTV感染株序列同源性为97．4％－99．8％，经6个月随访母血TTV DNA阳性的婴儿血TTV DNA由阴转阳率为38．1％（16／42）。 结论：TTV可通过围产期和哺乳期母婴传播的途径感染，对胎儿的危害及新生儿生长发育的影响值得重视。     

上海地区血液透析患者与供血者中输血传播病毒DNA检测及部分核苷酸序列分析

目的　了解上海地区暴露于血及血制品的血透患者中输血传播病毒（ＴＴＶ）感染率。方法　采用套式ＰＣＲ技术,检测了 ６例血透患者和 ４９例供血员血清中 ＴＴＶ ＤＮＡ,并对其中各 １例 ＰＣＲ产物（２７２ｂｐ）测］３。结果血透患者ＴＴＶ ＤＮＡ的检出率为 ３２．８％（２０／６１）,供血员的检出率为 ２４． ５％（１２／４９）。 ２０例 ＴＴＶＤＮＡ阳性血透患者中,６例为单纯ＴＴＶ感染,６例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染,４例为ＴＴＶ、ＨＣＶ和４例为ＴＴＶ、ＨＧＶ重叠感染。在所有ＴＴＶ感染者中,仅发现１例血清ＡＬＴ升高,该病例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染。对ＰＣＲ阳性扩增产物２７２ｂｐ测序结果显示,上海株（ＳＨＰ、ＳＨＤ）核苷酸的同源性为９９．６％,与深圳株、２株日本株核着酸的同源性分别为９７．４％、９８．７％和９８．７％,表明ＴＴＶ上海株与深圳株及日本株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）属同一亚型,首次证实了上海地区的ＴＴＶ感染。结论ＴＴＶ感染可经血传播。其致病性较弱,对ＴＴＶ的研究尚属开始,ＴＴＶ的病原学、流行病学及临床意义等问题还有待进一步探索和阐明。