海蜇头糖蛋白基本组成及结构

对海蜇头糖蛋白的基本组成和结构进行研究探讨.采用多步分离纯化方法获得电泳纯的海蜇头糖蛋白JGP-Ⅲ.经化学分析方法测定,JGP-Ⅲ中含有12.61%总糖,74.34%总蛋白,8.47%氨基糖,0.84%糖醛酸,1.06%硫酸根、0.92%唾液酸.JGP-Ⅲ的单糖组成主要有氨基葡萄糖,氨基半乳糖,葡萄糖,甘露糖,岩藻糖和鼠李糖.氨基酸组成中甘氨酸含量最高,其次为缬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、脯氨酸、天门冬氨酸等,缺乏色氨酸和组氨酸.JGP-Ⅲ经消除反应前后紫外吸收和氨基酸组成的变化以及糖肽酶F作用后分子量的变化,表明JGP-Ⅲ中即有O-连接糖肽键的存在又有N-连接糖肽键的存在.通过红外光谱分析,发现JGP-Ⅲ具有糖蛋白的典型结构.     

小球藻糖蛋白的分离纯化与抗氧化活性评价

小球藻经热水抽提、脱蛋白、醇析得粗糖蛋白,再经葡聚糖凝胶层析得到两种糖蛋白组分(CGPⅠ和CGPⅡ),经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,证明为电泳纯物质,分子量分别为63.7,21.0kDa。利用α-脱氧核糖法、连苯三酚自氧化法进行抗氧化实验,结果显示:CGPⅠ和CGPⅡ均有一定抗氧化能力,且CGPⅡ高于CGPⅠ。     

猪骨免疫活性肽的分离纯化

为了从猪骨中分离纯化出免疫活性肽,使用超滤、sephadex G-25凝胶层析、SP-sephadex C-25离子交换层析等手段对鲜猪骨的Alcalase碱性蛋白酶的酶解液进行分离纯化,采用MTT法测定各分离产物对小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示:猪骨酶解液经超滤分离获得的分子质量小于2 ku的组分对小鼠脾淋巴细胞增殖率最高;对分子质量小于2 ku的组分采用凝胶过滤层析,对层析后活性最高的组分再进行离子交换层析,最终得到的组分质量浓度为100μg/m L时,对小鼠脾淋巴细胞的增殖率为114.30%。     

甘薯糖蛋白分离纯化工艺研究

该文报道对甘薯活性成分糖蛋白提取纯化工艺研究;结果表明,甘薯糖蛋白提纯最佳条件为:室温条件下水浸提,料液体积比为1:6,提取时间为1h,提取次数3次,上清液加无水乙醇沉淀,透析3 d,经DEAE-52柱层析,再进一步经Sephadex G-100柱层析,经定性、定量分析得到甘薯糖蛋白纯品,这是一种可行的甘薯糖蛋白提纯生产方法。     

甘薯糖蛋白的分离纯化工艺研究

对甘薯中的活性成分糖蛋白提取纯化工艺进行了研究。结果表明,甘薯糖蛋白提纯的最佳条件为:室温条件下水浸提,料液体积比为1∶6,提取时间为1h,提取次数3次,上清液加无水乙醇沉淀,透析3d,经DEAE-52柱层析,进一步经SephadexG-100柱层析,经定性、定量分析得到了甘薯糖蛋白纯品,是一种切实可行的甘薯糖蛋白提纯生产方法。      

纳豆糖蛋白的分离纯化、结构表征及其免疫活性研究

为更充分了解纳豆中的成分对脾细胞增殖能力的影响,本实验通过DEAE-52纤维素离子交换柱层析以及Sephadex G-100凝胶柱层析,从纳豆糖蛋白粗提物中获得两种较纯的纳豆糖蛋白：NPPC-1-b和NPPC-2-a。由高效凝胶渗透色谱得到它们的分子质量分别为26.93、357.60 kD。对这两种糖蛋白进行进一步的红外光谱扫描、紫外光谱扫描、单糖组成分析以及氨基酸组成分析显示,NPPC-1-b中含有的是O-糖肽键,而NPPC-2-a中存在的是N-糖肽键。NPPC-1-b主要由甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖组成,且其含量比例分别为67.45%、25.67%和2.44%。NPPC-2-a主要由葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖以及半乳糖组成,其含量比例分别为36.64%、21.71%、10.35%、9.00%和5.17%。氨基酸自动分析结果显示,两种糖蛋白兼含有人体所需的17 种氨基酸。NPPC-1-b主要由谷氨酸、脯氨酸、赖氨酸和精氨酸组成,其含量分别为0.971%、0.791%、0.708%和0.603%;NPPC-2-a主要由谷氨酸、脯氨酸以及天冬氨酸组成,其含量分别为0.903%、0.689%和0.504%。此外,体外免疫活性探讨发现,100～200 μg/mL的NPPC-1-b以及12.5～200 μg/mL的NPPC-2-a可显著增强脾细胞增殖能力（P＜0.05）,其中以100 μg/mL的NPPC-2-a作用效果最佳。在细胞因子表达方面, NPPC-1-b和NPPC-2-a可显著促进细胞因子白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）以及干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）的表达,其中50 μg/mL的NPPC-2-a分泌IL-2最多,200 μg/mL的NPPC-2-a表达IFN-γ的量最高。以上研究结果表明NPPC-1-b和NPPC-2-a具有一定的免疫调节作用。     

甘薯糖蛋白的分离纯化工艺研究

对甘薯中的活性成分糖蛋白提取纯化工艺进行了研究。结果表明,甘薯糖蛋白提纯的最佳条件为:室温条件下水浸提,料液体积比为1∶6,提取时间为1h,提取次数3次,上清液加无水乙醇沉淀,透析3d,经DEAE-52柱层析,进一步经SephadexG-100柱层析,经定性、定量分析得到了甘薯糖蛋白纯品,是一种切实可行的甘薯糖蛋白提纯生产方法。     

河蚬免疫活性糖蛋白分离及结构初步分析

采用DEAE-52纤维素柱层析,SephadexG-75葡聚糖凝胶层析和RP-HPLC柱层析手段分离纯化,从河蚬中分离纯化得到一种酸性糖蛋白CFP。经RP-HPLC和SDS-PAGE测定,CFP纯度为94.74%,其相对分子量为19030D。经苯酚-硫酸法测定,CFP的含糖量为5.18%,蛋白质含量为93.22%。碱性β-消除反应表明,河蚬糖蛋白中存在O-糖肽键。经红外光谱分析,CFP具有多糖的特征吸收,含有吡喃糖β-型糖苷键。     

榛仁免疫活性肽分离纯化及结构鉴定

以榛仁分离蛋白水解肽经超滤获得的分子质量小于3 kDa的组分为研究对象,采用凝胶色谱及反相高效 液相色谱对其进行分离纯化,并对所得组分进行结构鉴定和验证。结果显示：经Sephadex G-15分离得到的组分B1 能极显著降低小鼠RAW264.7巨噬细胞肿瘤坏死因子和白介素-6水平（P＜0.01）;经质谱解析筛选出的肽段Pro-Glu- Asp-Glu-Phe-Arg（PEDEFR）对细胞无毒性作用,高浓度PEDEFR（＞50 μmol/L）能提高小鼠RAW264.7巨噬细胞吞噬能 力;当浓度达到100.0 μmol/L时,促进脾淋巴细胞增殖率达到44.21%,在伴刀豆蛋白A共同作用下,增殖率达到53.22%。 PEDEFR对小鼠RAW264.7巨噬细胞具有较好的免疫调节能力,本研究为榛仁免疫活性肽的开发提供了理论依据。     

甘薯糖蛋白的分离纯化和组成

甘薯粗糖蛋白经 (NH4 ) 2 SO4 分级沉淀、离子交换以及凝胶柱层析等方法分离纯化后得到一个糖蛋白组分SP -3 2 4,实验中测定了其组成和结构。氨基酸组成中天冬氨酸含量最高 ,占氨基酸总量的 1 3 80 % ,能够构成O 糖肽键的丝氨酸和苏氨酸分别占氨基酸总量的 6 0 5 %和 4 89;单糖组成主要含有葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖 ,其比例为 1 2∶1∶1 1 4,含有痕量的鼠李糖、木糖、甘露糖 ;测定结果表明 ,SP 3 2 4组分含蛋白质 74 0 0 % ,糖 7 80 % ;通过 β 消去反应证明了SP 3 2 4组分中的糖和蛋白是以O 糖肽键结合的。     

海蜇糖蛋白JGP-III2的结构及其免疫活性研究

从海蜇中获得一种新的糖蛋白JGP-III2,其糖含量为11.87%,蛋白含量为87.74%,分子量为39.5 k Da。JGP-III2中含有8种单糖分别为甘露糖、2-氨基-D-葡萄糖、氨基半乳糖、乳糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖,含量比例为:6.88:5.13:5.19:70.78:1.47:2.09:6.59:1.85;氨基酸含量为85.95%,甘氨酸、缬氨酸和谷氨酸所占比例较高;JGP-III2含有O-糖苷键和N-糖苷键,与海蜇体内获得的蛋白(gi|156215071)具有同源性。通过建立免疫低下小鼠模型,对JGP-III2的免疫活性及免疫机理进行研究,结果表明:与模型对照组比,JGP-III2能显著提高免疫低下小鼠的脾脏指数,胸腺指数,巨噬细胞吞噬能力,迟发性变态反应,血清溶血素水平及抗体生成细胞数,增强机体免疫能力。JGP-III2能促进Th1类细胞因子m RNA的表达,抑制Th2类细胞因子的m RNA的表达,对模型组中的"Th1/Th2漂移"现象有恢复作用。推测JGP-III2可能是通过调节机体Th1/Th2的平衡来提高机体免疫活性。     

小球藻糖蛋白的分离纯化与性质测定

小球藻经热水抽提、脱蛋白、乙醇沉淀得粗糖蛋白,粗糖蛋白经Sephadex-75层析得到糖蛋白纯品。糖蛋白纯品经Sephadex-200层析证明为单一物质。紫外可见光谱只出现280nm和195nm的单峰。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示糖蛋白分子量为63.7kDa。气相色谱分析表明该糖蛋白单糖组成主要是葡萄糖、半乳糖、鼠李糖。β-消去反应证明糖和蛋白是O-糖肽键连接的。     

免疫初乳中IgG的分离与纯化

本实验采用硫酸铵一次性盐析、DEAE—Sepharose FF离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤层析法，分离纯化免疫初乳中的IgG，并采用SDS—PAGE电泳、单向火箭免疫电泳及试管凝集法对IgG分离物进行了定性定量检测，结果表明所得IgG纯度高，活性大。     

大豆糖蛋白的分离纯化及结构分析

通过DEAE-Cellulose52离子交换层析和SephadexG-200凝胶层析从大豆中提取纯化一种糖蛋白,并对其结构进行了初步分析。用SDS-PAGE检测纯度,并测定其分子质量的大小,测定结果为61000,蛋白质含量为30.55%;β-消除反应说明其为O-连接型糖蛋白,红外光谱法推断其含有α型糖苷键。     

薇菜多糖的分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法制备薇菜粗多糖（water-soluble polysaccharide of Osmunda japonica,WOJP）,并用二乙氨乙基（diethylaminoethyl,DEAE）-纤维素层析法对其进行分离纯化,获得2?个多糖组分薇菜中性糖（neutral WOJP,WOJP-N）和薇菜酸性糖（acidic WOJP,WOJP-A）。WOJP-N的分子质量为31.8?kDa,由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,对应各成分物质的量比为9.1∶5.7∶13.3∶37.6∶5.6∶11.8;WOJP-A的分子质量为15.7?kDa,由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,对应各成分物质的量比为7.0∶56.4∶26.1∶5.2。傅里叶变换红外光谱分析结果表明,WOJP-N主要由β-构型的半乳糖组成;WOJP-A主要由吡喃半乳糖醛酸组成,且存在部分酯化修饰。体外抗氧化活性实验结果表明,WOJP的Fe3＋还原能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）清除能力和超氧阴离子清除能力与VC相当,具有较好的抗氧化活性,其中WOJP-N和WOJP-A在WOJP发挥抗氧化活性时具有协同作用,两者均是WOJP发挥抗氧化活性的多糖组分。本研究结果可为进一步研究薇菜多糖的构效关系和开发功能性食品提供依据,并为薇菜的应用提供理论参考。     

蔷薇藻藻蓝蛋白的分离纯化及其体外抗氧化活性

蔷薇藻(Rhodella reticulata)是属于红藻门的一种海洋单细胞微藻,在生长过程中会产生藻胆蛋白、胞外多糖等生物活性物质。文中研究了蔷薇藻的藻蓝蛋白的分离纯化及抗氧化性能,藻细胞经过破碎,通过硫酸铵沉淀和DEAE Sepharose FF柱层析后,可以分离出较纯的藻蓝蛋白,纯化的藻蓝蛋白在620 nm处有一个最高的吸收峰,纯度为3.92,经SDS-PAGE电泳后,测得藻蓝蛋白含有α和β两个亚基,分子质量分别为18 ku和22 ku。蔷薇藻藻蓝蛋白由17种氨基酸组成。蔷薇藻纯化后的藻蓝蛋白比粗藻蓝蛋白具有更高的抗氧化能力,且呈剂量依赖效应。     

牛初乳中乳铁蛋白的分离纯化与免疫功能检测

牛初乳经离心、盐析后获得乳铁蛋白粗提物，通过CM-Sephadex C50离子交换色谱和Heparin-Sepharose CL-6B亲和色谱纯化获得纯度分别为76．98％和92．75％的乳铁蛋白，经SDS-PAGE检测乳铁蛋白存在分子质量分别为76000Da和78000Da的两种异构体，免疫电泳说明提纯样品与乳铁蛋白标准品具有相同的免疫原性。小白鼠喂养和免疫实验说明乳铁蛋白可提高机体免疫功能。