青春双歧杆菌细胞壁免疫调节作用及其对膀胱癌细胞抑制作用研究

目的 探讨青春双歧杆菌细胞壁对小鼠腹腔巨噬细胞的激活作用及其对人移行细胞膀胱癌细胞的体外抑制作用.方法 ①选择KM小鼠,随机分成BCW注射组和对照组.采用超声波细胞粉碎法提取双歧杆菌细胞壁(BCW),BCW注射组小鼠腹腔注射BCW悬液,对照组腹腔注射生理盐水,连续7天.第8天处死小鼠,无菌收集腹腔巨噬细胞,以ELISA法分别测定腹腔巨噬细胞产生的细胞因子IL-2、IFN-γ的含量;②采用MTT法测定双歧杆菌细胞壁体外对人移行细胞膀胱癌细胞的抑制作用:将处于对数生长期的人移行细胞膀胱癌细胞(T24)接种于细胞培养板中,加入不同浓度的BCW,继续培养,1、3、5天换液,每孔加入MTT,继续培养4h,每孔加入DMSO,振荡摇匀,在酶标仪上测定490nm处的A值,计算抑瘤率;镜下观察细胞生长状态:将处于对数生长期的T24细胞接种于内含玻片的细胞培养板中,培养24h后,加入BCW,继续培养24h、72h、120h,取出玻片,染色,镜下观察细胞形态的改变.对照组不加BCW,每次更换培养液.结果 ①青春双歧杆菌细胞壁注射组腹腔巨噬细胞产生的IL-2、IFN-γ的含量均高于对照组,两者比较具有显著性差异(P＜0.01);②不同浓度双歧杆菌细胞壁在体外均能抑制T24细胞生长,且浓度越大,对该细胞的抑制作用越强,且镜下观察到T24细胞的生长状态逐渐减弱.结论 青春双歧杆菌细胞壁成分能激活小鼠腹腔巨噬细胞,使之分泌多量的IL-2、IFN-γ,并且在体外能抑制人移行细胞膀胱癌细胞的生长.     

青春双歧杆菌细胞壁免疫调节和抑瘤作用研究

目的 探讨青春双歧杆菌细胞壁对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响及其对人移行细胞膀胱癌细胞的体外抑制作用。方法 采用青春双歧杆菌细胞壁腹腔注射于KN小鼠,以ELISA法测定腹腔巨噬细胞产生的细胞因子,如IL-1、IL-12及TNF-α的含最,采用NIT法测定双歧杆菌细胞壁体外对人移行细胞膀胱癌细胞的抑制作用。结果 青春双歧杆菌细胞壁注射组腹腔巨噬细胞产生的IL-1、IL-12及TNF-α的含量分别明显高于对照组,两者比较具有显著差异;不同浓度双歧杆菌细胞壁在体外均能抑制T24细胞生长,且浓度越大,对该细胞的抑制作用越强。结论 青春双歧杆菌细胞壁成分能激活小鼠腹腔巨噬细胞,使之分泌多量的IL-1、IL-12及TNF-α,并且在体外能抑制人移行细胞膀胱癌细胞的生长。     

青春双歧杆菌细胞壁的免疫调节和体内抑瘤作用研究

目的:探讨青春双歧杆菌细胞壁对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响及其对人膀胱癌细胞的体内抑制作用.方法:将青春双歧杆菌细胞壁腹腔注射于KM小鼠,以ELISA法测定腹腔巨噬细胞产生的IL-1、IL-12及TNF-α的含量;建立膀胱癌小鼠模型,腹腔注射双歧杆菌细胞壁,2周后,剥离瘤体,计算抑瘤率.结果:青春双歧杆菌细胞壁注射组腹腔巨噬细胞产生的IL-1、IL-12及TNF-α的含量分别高于对照组,两者比较具有显著差异(p＜0.01);细胞壁注射组可以使小鼠局部肿瘤体积减小、肿瘤重量减轻,与对照组之间比较有显著性差异(p＜0.01).结论:青春双歧杆菌细胞壁成分能激活小鼠腹腔巨噬细胞,并且在体内能抑制人膀胱癌细胞的生长.     

双歧杆菌细胞壁抗肿瘤机理的研究

目的：观察双歧杆菌细胞壁（Ｂ－ＣＷ）的抗肿瘤作用,并探讨其作用机理。方法：把临床新分离的肿瘤细胞加入含Ｂ－ＣＷ的培养孔中,用四基偶氮唑盐比色法（ＭＴＴ法）测各孔杀伤率。体内法用荷Ｓ１８０肿瘤小鼠经Ｂ－ＣＷ治疗后,分别检测抑瘤率,及其对ＴＮ－Ｆα,ＮＯ,ＡＮＡＥ,巨噬细胞,ＩＦＮ,ＮＫ细胞的影响。结果：Ｂ－ＣＷ不仅能够在体外抑瘤,而且使巨噬细胞,ＮＫ细胞,ＩＦＮ,ＮＯ,ＡＮＡＥ水平均明显升高。结果     

双歧杆菌对兔VX2瘤组织的靶向性及其对肝癌细胞抑制作用的研究

目的 探讨青春型双歧杆茵对兔VX2瘤肿瘤组织的靶向性及其对人肝癌细胞的体外抑制作用.方法 ①建立荷VX2瘤兔模型,实验组经耳缘静脉注射青春型双歧杆菌;对照组经耳缘静脉注射生理盐水.处死动物,取出脏器和肿瘤组织粉碎后进行厌氧培养和革兰氏染色,观察双歧杆菌对肿瘤的靶向性.②采用超声波细胞粉碎法提取双歧杆茵细胞壁(BCW),应用MTT法和镜下观察来证明BCW体外对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用.结果 ①实验组瘤组织中可见革兰氏阳性菌落,对照组及实验组各正常组织培养未查见.②不同浓度BCW均能抑制HepG-2细胞生长,且BCW浓度越大,抑制作用越强(P<0.05),且镜下观察到HepG-2细胞的生长状态逐渐减弱.结论 青春型双歧杆菌能够在兔VX2瘤组织中靶向定植,且其细胞壁能够在体外抑制肝癌细胞的生长.     

双歧杆菌细胞壁抗肿瘤机理的研究

目的:观察双歧杆菌细胞壁(B- CW)的抗肿瘤作用,并探讨其作用机理。方法:把临床新分离的肿瘤细胞加入含B- CW 的培养孔中,用四基偶氮唑盐比色法(MTT法) 测各孔杀伤率。体内法用荷S180 肿瘤小鼠经B- CW 治疗后,分别检测抑瘤率,及其对TNF- α、NO、ANAE、巨噬细胞、IFN、NK 细胞的影响。结果:B- CW 不仅能够在体外抑瘤,而且使巨噬细胞、NK细胞、IFN、NO、ANAE水平均明显升高。结论:B- CW 具有抗肿瘤作用     

双歧杆菌对大肠癌细胞凋亡的影响

目的探讨双歧杆菌的体外抗肿瘤作用及其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法将双歧杆菌体外直接作用于大肠癌LoVo细胞,以MTT法检测双歧杆菌对肿瘤细胞的杀伤作用;用流式细胞仪检测双歧杆菌对肿瘤细胞凋亡的影响。结果双歧杆菌在体外对大肠癌LoVo细胞具有显著的杀伤作用,且浓度越大、作用时间越长,其抑制作用越强,具有浓度和时间依赖性,且双歧杆菌能诱导肿瘤细胞凋亡。结论双歧杆菌对大肠癌LoVo细胞具有生长抑制作用,其机制可能是通过诱导细胞凋亡达到抑制肿瘤生长的作用。     

椰子汁对青春双歧杆菌体外增殖的影响

目的探讨椰子汁(CM)对青春双歧杆菌(BFA)体外增殖的作用。方法将BFA接种于不同浓度的CM培养基和MRS液体培养基中,37℃厌氧培养;通过测定光密度值的改变(△OD)及平板菌落数,分析BFA的体外生长情况。结果各浓度CM培养基24 h的△OD值均大于对照组(P<0.05),且E>0;培养0 h时各浓度CM培养基的平板菌落数与对照组相比差别无统计学意义(P>0.05),培养4 h、8 h、12 h、16 h、20 h时的平板菌落数均多于对照组(P<0.05);12 h、16 h、20 h时平板菌落数均多于同组培养0 h、4 h、8 h时,差异有统计学意义(P<0.05),但各CM组培养12 h、16 h、20 h时培养基的平板菌落数组内比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组培养基培养16 h及20 h时的平板菌落数相比差别无统计学意义(P>0.05),与同组培养0 h、4 h、8 h、12 h时相比差别有统计学意义(P<0.05)。结论各浓度的CM对BFA体外增殖均起促进作用,并可以缩短该菌到达生长稳定期的时间,可以作为BFA体外培养的天然培养基。     

青春双歧杆菌对2型糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用

目的探讨早期应用青春双歧杆菌对2型糖尿病大鼠发病及对胰岛细胞的影响。方法给予2型糖尿病模型大鼠口服青春双歧杆菌,观察实验组和对照组（PBS）糖尿病发病率,HE染色观察胰岛细胞,免疫组化检测胰岛Bcl-2和Bax的表达。结果实验组胰岛细胞损伤程度较对照组明显减轻（P〈0.01）,胰岛Bcl-2的表达高于对照组,而Bax的表达低于对照组（P〈0.05）。结论青春双歧杆菌对2型糖尿病大鼠的胰岛细胞有保护作用。     

双歧杆菌细胞壁与富锗灵芝的协同抑瘤作用

目的：双歧杆菌细胞壁与富锗灵芝联合应用于荷瘤动物体内，观察抑瘤效果。方法：将纯系小鼠随机分４组，建立Ｓ１８０实体瘤模型后，分别用双歧杆菌细胞壁及双歧杆菌细胞壁加富锗灵芝进行治疗。结果：检测巨噬细胞活性及干扰素活性有明显的升高。结论：双歧杆菌细胞壁加富锗灵芝比单元应用双歧杆菌细胞壁对机体的免疫促进作用更为明显。     

FK506和CSA对异体造血干细胞在粒单白血病小鼠存活及其血清IL-2和IL-4水平的影响

目的 探讨环孢霉素A (CSA)和FK506对造血干细胞异体移植及其对IL-2和IL-4表达的影响.方法 用WEHI23细胞从尾静脉注入建立小鼠粒单白血病模型.取绿色荧光蛋白转基因鼠的骨髓,体外扩增纯化培养造血干细胞 (HSC), 移植入粒单白血病小鼠,观察FK506和CSA对植入细胞的存活及其对IL-2和IL-4水平的影响.结果 植入的HSC在正常小鼠和粒单白血病模型小鼠仅存活1周,而在经CSA和FK506处理的粒单白血病鼠,HSC可存活至2周, 且后者的存活数较前者增多.此外,IL-2、IL-4水平在FK506和CSA处理组亦较正常和模型小鼠组下调(P<0.05).结论 FK506能有效抑制宿主对植入HSC的排斥作用,其机制可能与降低IL-2、IL-4水平有关.     

用细胞培养法组建动脉壁及电镜观察

在体外用细胞培养的方法,将人脐带静脉内皮细胞种植在已培养成复层的人脐带动脉平滑肌细胞上面,人工组建成动脉壁结构。在营养液中含内皮细胞生长因子及维生素C条件下,两种细胞生长良好,构成活的具有代谢过程及增殖力的血管壁。光镜及电镜下观察,两种细胞组成典型的血管壁的结构层次,在内皮细胞与平滑肌细胞之间,在平滑肌细胞与平滑肌细胞之间,充填有大量胶原纤维、网状纤维与少量的弹力纤维,并发现这些纤维结构物质是由血管平滑肌细胞产生的。为研究血管壁的生理与病理过程提供了良好的血管壁模型。     

双歧杆菌及其细胞壁对荷瘤小鼠干扰素的体内诱导

目的：观察双歧杆菌及其细胞壁（Ｂ－ＣＷ）对干扰素（ＩＦＮ）诱导而发挥的抗肿瘤作用。方法：荷Ｓ１８０肿瘤小鼠经双歧杆菌及其细胞壁治疗后,收集腹腔巨噬细胞,采用细胞病变抑制法检测培养上清的ＩＮＦ活性;结果：双歧杆菌及其细胞壁均能提高荷瘤小鼠机体内ＩＦＮ的活性。结论：两者都能够通过增强机体的ＩＦＮ活性来发挥抗肿瘤作用     

三种治法方药对肝癌H22荷瘤小鼠免疫功能影响的比较研究

目的:观察比较活血化瘀方、清热祛湿方和养阴柔肝方三种不同治法中药复方对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:采用皮下接种肝癌H22细胞的方法建立荷瘤小鼠模型,分别用上述三种中药复方水煎液灌胃处理11 d,称量各组脾脏重量,计算脾指数;应用双抗体夹心ABC-ELIA法检测荷瘤小鼠血清IL-2、TNF-α含量的变化.结果:活血化瘀、清热祛湿、养阴柔肝方对H22小鼠脾指数无显著影响(P>0.05);与正常对照组相比,模型对照组血清IL-2的含量显著降低(P<0.05),各用药组与模型时照比较显著升高(P<0.05),三个用药组之间两两比较,也具有显著性差异(P<0.05);与正常对照组相比,各组血清TNF-α的含量均显著升高(P<0.05),与模型对照比较,各用药组显著降低(P<0.05).结论:三种治法均可有效提高移植性H22荷瘤小鼠的IL-2水平,提高小鼠的免疫力,从而对机体起到保护作用,这可能是其有效抗肝癌的疗效机制之一;三种治法(尤其是清热祛湿组)具有抑制荷瘤鼠机体TNF-α水平异常升高的作用,使其维持在一定水平而发挥抗肿瘤、调节机体免疫功能等积极作用.     

双歧杆菌培养上清对人食管癌109细胞的抑制作用

目的：探讨双歧杆菌培养上清对人食管瘤109细胞（Eca－109）的影响。方法：采用体外细胞培养、镜检及细胞排染试验,观察双歧杆菌培养上清对Eca－109细胞的形态学及细胞活度变化。结果：高浓度双歧杆菌培养上清可抑制Eca－109细胞贴壁生长,并使其活度明显下降,与生理盐水组相比有显著差异（P＜0．05）。结论：双歧杆菌培养上清对人食管癌109细胞有抑制生长作用。     

益筋方对实验性重症肌无力小鼠T细胞及IL-2的影响

目的探讨温肾活血、益气升清的益筋方对实验性自身免疫性重症肌无力（MG）小鼠的治疗机理。方法采用重症肌无力患者的血清被动免疫小鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力模型。分组后分别给予益筋方、强的松灌胃21d,处死动物、采血。利用流式细胞技术,以T细胞及其亚群、IL-2为指标,观察益筋方、强的松对实验性重症肌无力小鼠细胞免疫和细胞因子的影响。结果强的松、益筋方均能升高CD3^＋,降低CD4^＋／CD8^＋比值;降低IL-2。结论益筋方能通过影响T细胞及其亚群、细胞因子,调控细胞免疫和体液免疫,起到治疗重症肌无力的作用。     

内障丸对青春期PCOS大鼠血清中免疫细胞因子TNF-α和IL-6的影响

目的：探讨内障丸对青春期PCOS大鼠血清中的免疫细胞因子TNF-α和IL-6的影响。方法：以24日龄雌性SD清洁大鼠为研究对象,应用皮下埋植左炔诺孕酮硅胶棒联合皮下注射HCG法建立多囊卵巢动物模型,运用光镜、HE染色、免疫组化技术等方法,检测大鼠造模前后及给药前后血清中的免疫细胞因子TNF-α和IL-6的影响。结果：造模后,模型组IL-6、TNF-α水平与正常对照比较明显升高。就IL-6而言,经内障丸治疗后,内障丸治疗高、中、低剂量组均有明显降低。对TNF-α而言,内障丸治疗高、中、低剂量较模型组均有明显降低。结论：内障丸可以降低PCOS大鼠血清中的免疫细胞因子IL-6和TNF-α水平,提示内障丸可以改善PCOS的免疫内环境。     

三百胶囊对实验性肺结核病小鼠血清IL-2和IL-10影响的实验研究

目的 观察三百胶囊对肺结核病小鼠血清IL-2和IL-10的作用,为三百胶囊治疗肺结核提供实验依据.方法 实验动物用结核杆菌造模后随机分为模型组、抗痨药物组、三百胶囊小剂量组和三百胶囊大剂量组,另设空白对照组.除模型组外,分别给予对氨基水杨酸异烟肼片、三百胶囊以及生理盐水灌胃28 d,用ELISA法检测实验小鼠血清IL-2和IL-10的改变情况.结果 与空白对照组比较,模型组血清IL-2水平显著降低、IL-10显著升高,其差异具有统计学意义(P＜0.01);三百胶囊小剂量组、三百胶囊大剂量组与模型组比较,IL-2含量显著升高、IL-10显著降低,其差异具有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论 三百胶囊有调节肺结核病小鼠血清IL-2和IL-10水平的作用.