人类白血病多药耐药细胞株K562/ADM、HL60/ADM的耐药性及耐药逆转的研究

目的：研究K562／ADM、HL60／ADM的耐药性及CsA对其耐药的逆转作用。方法：MTT比色法检测细胞耐药性及CsA对细胞耐药性的影响，流式细胞仪检测Pgp、MRP的表达及细胞内柔红霉素(DNR)的浓度。结果：K562／ADM、HL60／ADM对DNR、ADM、VCR、Har、VP16、MIT交叉耐药，对Acla和Ara—C基本不耐药。K562／ADM细胞Pgp过度表达，HL60／ADM细胞的MRP过度表达。CsA使K562／ADM、HL60／ADM细胞内药物浓度增加，逆转了K562／ADM、HL60／ADM的耐药性，而对K562、HL60的耐药性基本无影响。结论：两种不同耐药机制的细胞株对8种常用化疗药物的耐药谱相似，对Acla基本不产生耐药性，故在防止和克服多药耐药的基础上，Acla可能取代DNR、ADM。环孢菌素A(CsA)对两种不同耐药机制的细胞株的耐药性均有逆转作用，主要是通过增加胞内药物浓度来达到逆转作用。     

浙江蝮蛇蛇毒成分逆转多药耐药白血病K562/ADM细胞耐药性分析

[目的]探讨浙江蝮蛇蛇毒提取物逆转K562/ADM细胞耐药的作用及机制.[方法]通过MTT法检测不同浓度浙江蝮蛇蛇毒提取物对K562/ADM细胞阿霉素(ADM)的IC50影响,分析其逆转耐药活性;通过实时定量PCR法检测浙江蝮蛇蛇毒提取物对K562/ADM细胞MDR1及GST-π耐药基因表达的影响.[结果]浙江蝮蛇蛇毒提取物呈浓度依赖性地降低K562/ADM细胞对ADM的IC50.实时定量PCR法检测结果显示,浙江蝮蛇蛇毒提取物作用后K562/ADM细胞内MDR1及GST-π基因表达水平有下调趋势,且随蛇毒提取物浓度增加下调趋势逐渐明显.[结论]浙江蝮蛇蛇毒提取物具有较强的逆转人白血病K562/ADM细胞多药耐药活性作用.     

雷公藤红素逆转K562/A02细胞多药耐药的实验研究

目的探讨雷公藤红素逆转人慢性粒细胞白血病红白血病急变细胞株K562/A02多药耐药的效果。方法采用CCK-8法测定细胞的药敏性及耐药逆转性,应用流式细胞术检测细胞内ADM浓度、P-gp蛋白表达。结果雷公藤红素对K562/A02、K562的半数抑制率浓度（IC50）分别为（295.58±23.288）μmol/L、（411.59±26.551）μmol/L。K562/A02细胞对ADM的耐药性是K562细胞的79.78倍。细胞毒剂量的雷公藤红素作用后,ADM对K562/A02细胞的IC50显著下降（P〈0.05）,逆转倍数为117.860倍。细胞毒剂量（IC50）和非细胞毒剂量（IC10）的雷公藤红素处理后的K562/A02细胞内的ADM浓度显著增加（P〈0.05）,增加倍数分别为1.537倍和1.102倍。雷公藤红素能明显下调K562/A02细胞的P-gp表达。结论雷公藤红素对逆转K562/A02细胞的耐药性有一定的作用,其机制可能与下调P-gp表达有关。     

槲皮素逆转白血病细胞株K562/ADM多药耐药的研究

目的探讨槲皮素逆转白血病细胞多药耐药在膜转运蛋白方面的机制.方法通过MTT体外药敏法证明槲皮素对柔红霉素的增敏作用并确定逆转的浓度范围,作用于K562/ADM耐药株及相应敏感株K562/S,运用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)和流式细胞术检测多药耐药基因(Mdr1)及其膜蛋白产物P-170糖蛋白(P-gp)的表达情况,在激光共聚焦显微镜观察柔红霉素在亚细胞水平的分布变化.结果 20～40 μmol/L终浓度槲皮素在体外能明显提高柔红霉素对K562/ADM耐药株的敏感性,并能下调Mdr1基因及其膜蛋白产物P-gp的表达,恢复柔红霉素在亚细胞水平的异常分布,回归其作用靶点--细胞核,从而逆转多药耐药,且有效浓度范围的药物对细胞本身无毒性作用.结论槲皮素有可能成为蒽环类药物治疗白血病中有效且低毒的化疗增敏剂.     

K562／ADM耐药细胞株的建立及其生物学特性的初步观察

我们建立的K562/ADM耐药细胞株,在ADM浓度为2.4μg/m1(4.46μM)中已稳定培养3.5个月,传了30—35代,K562/ADM亦具有多药耐受件(Multidrug Resistance,MDR)的特点,对ADM、VCR、AT—1258和DDP的耐受性分别为K562的114.7、94.0、13.3和7.4倍,但对5—FU不产生交叉耐药。K562和K562/ADM的倍增时间分别为19.2h和52.8h,集落生成率分别为37.5％和11.1％,K562染色体数为34—68,中位数为56;K562/MDM染色体数为32—90,中位数为50,K562/ADM可做为耐药机理和克服耐药措施研究的极好模型。     

二甲亚砜对K562/ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用

目的：研究二甲亚砜对K562／ADM耐药细胞的逆转作用。方法：通过加入二甲亚砜后耐药细胞的生长情况，逆转倍数的计算，细胞内过氧化物染色的阳性程度以及电镜下观察耐药细胞诱导前后的变化。结果：二甲亚砜诱导K562／ADM耐药细胞前后生长情况有显著差异且逆转借故为4．0，Pox染色阳性程度明显递增，电镜下可观察诱导后K562／ADM耐药细胞有向成熟分化趋势。结论：二甲亚砜对逆转K562／ADM的耐药性是有益的。     

二甲亚砜对K562／ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用

目的：研究二甲亚砜对Ｋ５６２／ＡＤＭ耐药细胞的逆转作用，方法：通过加入二甲亚砜后药细胞的生长情况，逆转倍数的计算，细胞内过氧化物染色的阳性程度以及电镜下观察耐药细胞诱导前后的变化。结果：二甲亚砜诱导Ｋ５６２／ＡＤＭ耐药细胞前后生长情况有显著差异且逆转倍数为４．０Ｐｏｘ染色阳性程度明显递增，电镜下可观察诱导后Ｋ５６２／ＡＤＭ耐药细胞有向成熟分化趋势，结论：二甲亚砜对逆转Ｋ５６２／ＡＤＭ耐药性是有益的     

环腺苷酸对人白血病多药耐药 K562/ADM 细胞的诱导分化作用

目的：研究环腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate,cAMP)对人白血病多药耐药K562／ADM细胞的诱导分化作用。方法：K562／ADM细胞经0.25-2.0mmol/L cAMP处理后,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术（flow cytometry,FCM)检测细胞周期和P－糖蛋白（P－glycoprotein,P-gp)的表达,免疫细胞化学法检测细胞周期蛋白cyclin D1和转录因子E2F的表达;同时观察细胞形态学变化和血红蛋白合成功能。结果：cAMP呈浓度和时间依赖性地抑制K562／ADM细胞的增殖（P＜0．01）,细胞形态学上出现红系细胞的形态特征;被诱导的细胞能够合成血红蛋白、cyclinD1和E2F的表达减低。cAMP(0.25mmol/L和1.0mmol/L)诱导24h,多数细胞被阻滞在G1期,S期和G2＋M期细胞显著降低,诱导72h后K562／ADM细胞P－gp表达的阳性率无明显变化（99．8％－99．9％）,但P－gp的表达量显著增加,平均荧光强度分别增高1．24倍和1．28倍。结论：K562／ADM细胞仍保留了分化成熟的潜能,可被cAMP诱导向正常血细胞分化,但在分化诱导过程中,化学诱导剂可导致耐药细胞发生P－gp的应激性表达增强而可能阻抑后续的化学治疗,或对诱导剂产生耐受性。     

维甲酸逆转K526／ADM耐药细胞株耐药性的研究

维甲酸逆转Ｋ５２６／ＡＤＭ耐药细胞株耐药性的研究沈世人王衡邹长木炎苏颖高频关键词维甲酸Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞多药耐药逆转中图号Ｒ７３－３６肿瘤患者反复用药引起耐药性的产生是治疗失败的重要原因，研究如何克服耐药性是提高癌症化疗效果的关键之一。本实验结果提...     

氧化苦参碱逆转多药耐药细胞系K562/A02耐药性的研究

目的: 观察非细胞毒性浓度(生长率>95%)氧化苦参碱对耐阿霉素的人白血病细胞系K562/A02多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制。 方法: 采用MTT法测定氧化苦参碱的细胞毒性及其对K562/A02细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测非细胞毒性浓度的氧化苦参碱处理后K562/A02细胞膜表面糖蛋白P170表达的变化与细胞内柔红霉素的浓度,应用SPSS13.0软件包对实验结果进行统计学处理。 结果: 氧化苦参碱对K562/A02细胞有一定的细胞毒作用,其非细胞毒性浓度为50μg/ml,低细胞毒性浓度(生长率为85%～90%)为135μg/ml,把非细胞毒性剂量的氧化苦参碱作为最佳逆转浓度,非细胞毒性浓度氧化苦参碱可显著降低阿霉素对K562/A02细胞的IC₅₀,使K562/A02细胞的IC₅₀由原来的(34.9±0.21)μg/ml降低至(13.3±0.21)μg/ml,其逆转倍数为2.62倍;氧化苦参碱作用于K562/A02细胞后,细胞膜糖蛋白P170的表达从90.22%下调至44.24%(P<0.01);柔红霉素外渗试验显示,氧化苦参碱作用于K562/A02细胞后,细胞内化疗药物的浓度明显增加。 结论: 氧化苦参碱可部分逆转人白血病K562/A02细胞对阿霉素的耐药性,氧化苦参碱通过下调K562/A02细胞膜糖蛋白P170的表达,使其将化疗药物泵出细胞外的功能受到了抑制,使化疗药物在白血病细胞内能达到有效浓度,从而可以杀灭耐药的白血病细胞,达到逆转白血病细胞耐药性的目的。     

汉防己甲素逆转白血病细胞株K562/ADM多药耐药性机制研究

目的 研究汉防己甲素(TTD)对慢性粒细胞白血病急性变白血病细胞株K562／ADM多药耐药(MDR)逆转的机理。方法 采用流式细胞仪检测细胞内化疗药物的浓度及细胞表面P糖蛋白(P-gp)的表达；荧光定量PCR法检测MDR1 mRNA；通过流式细胞仪检测Anexin—V判断凋亡细胞的数量。结果 10μmol/L的TTD处理K562／ADM细胞后，细胞内阿霉素(ADM)的浓度明显提高；K562／ADM细胞MDR1 mRNA／P-gp的表达下降；TTD能增强ADM致细胞凋亡的作用。结论 汉防己甲素的耐药逆转机制除了下调MDR1 mRNA／P-gp的表达引起细胞内抗癌药物的积聚外，增加抗癌药物致细胞凋亡也是耐药逆转的重要原因。．     

补骨脂素逆转K562/ADM多药耐药细胞系耐药性研究

目的:研究补骨脂素对白血病细胞阿霉素耐药株(K562/ADM)多药耐药(multidrug resistance,MDR)性的逆转作用及其机制.方法:采用MTT法检测药物细胞毒性作用,计算其逆转倍数.结果:补骨脂素在1～20μmol·L-1范围内,对K562和K562/ADM无明显细胞毒作用,但与ADM联合用药可使ADM对K562/ADM的IC50明显下降,补骨脂素(1～20μmol·L-1)能不同程度地降低ADM对K562/ADM细胞的IC50值.结论:补骨脂素能逆转K562/ADM细胞的多药耐药.     

三氧化二砷对人胃癌耐药细胞系SGC7901/ADM耐药逆转及凋亡诱导作用的探讨

目的:探讨中药三氧化二砷(As2O3)对人胃癌多药耐药细胞系(SGC7901/ADM)的耐药逆转及凋亡诱导作用.方法:应用免疫细胞化学方法(PV法)测定不同剂量的As2O3用药前后细胞内mdr-1基因产物P-gp的表达变化;同时用流式细胞仪对以上各组细胞进行细胞周期解析和凋亡率的测定.结果:As2O3在0.10～0.75μmol/L浓度范围内能够逆转SGC7901/ADM细胞内P-gp的表达,并将细胞阻滞于G0～G1期、诱导细胞凋亡(P＜0.01),其作用随As2O3剂量增加而增大.结论:在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADM中,As2O3具有耐药逆转和凋亡诱导双重作用,并呈剂量依赖性.     

As_2O_3对胃癌细胞SGC7901/ADR阿霉素耐药性逆转作用

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对胃癌细胞SGC7901/ADR阿霉素(ADM)耐药性的逆转作用和对Pgp、GSTπ表达的影响。方法以胃癌多药耐药细胞株SGC7901/ADR为靶细胞,用MTT法检测SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内药物浓度及免疫组织化学法检测细胞Pgp、GSTπ表达。结果0.4～0.8μmol/LAs2O3对耐药细胞SGC7901/ADR无明显毒性(P>0.05)。As2O3可下调Pgp、GSTπ表达,提高SGC7901/ADR细胞内ADM浓度,增加SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性。结论As2O3能够抑制SGC7901/ADR细胞Pgp、GSTπ表达,增加细胞内ADM药物浓度而部分逆转其对ADM的耐药性。     

INDEPENDENT AND SYNERGIC INHIBITION OF DIPYRIDAMOLE AND RADIATION ON K562-AND K562/ADM CELL LINES IN VITRO

It is first demonstrated that dipyridamole (DP) and radiation were capable of significantly inhibiting, independently and synerglcally, clonogenlc growth in the two kinds of K562 cell lines, adriamycin (ADM) -sensitive and ADM- resistant. DP or radiation alone Increased clonogenlc Inhibition rate (CIR) in the two kinds of cell lines in a dose- dependent fashion. DP potentiated radiosensitivity and radiation increased inhibition of DP in the two kinds of cell lines. K562/ ADM cell lines were higher sensitive to DP. radiation and combination of them than K562 cell lines (P<0. 01). There was stronger synergic inhibition of clonogenlc growth in the two kinds of cell lines when pretreated with DP than when posttreated with DP (P<0. 01).     

SiRNA逆转T24/ADM细胞耐药性的研究

目的探讨siRNA（small interfering RNA）对膀胱癌多药耐药性的逆转作用。方法设计针对MDR1基因的siRNA,转染膀胱癌T24/ADM细胞,应用RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,免疫印迹检测MDR1蛋白表达,流式细胞仪检测细胞内阿霉素积累量。MTT法检测阿霉素对T24/ADM细胞的半数抑制浓度（IC50）。结果 3条siRNA均能不同程度地逆转T24/ADM细胞的多药耐药性,使MDR1基因的mRNA及蛋白表达水平下调,细胞内阿霉素积累量显著增加（P〈0.05）。结论 siRNA可逆转膀胱癌的多药耐药性。