孕激素对不同PGRMC2表达的卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及发生机制

目的探讨孕激素对不同孕激素受体膜成分2(progesterone receptor membrane component 2, PGRMC2)表达的卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响以及发生机制。方法体外应用不同浓度孕激素对SKOV3(PGRMC2低表达)、HO-8910(PGRMC2高表达)两株卵巢癌细胞进行干预。每株细胞均分4组:对照组(0μmol/L)、实验组(10、20、40μmol/L)。运用CCK-8法检测SKOV3、HO-8910细胞增殖情况;Transwell迁移和侵袭实验检测SKOV3、HO-8910细胞转移能力和侵袭能力;Western blot法检测SKOV3、HO-8910细胞的PGRMC2、β-catenin蛋白表达。结果 CCK-8结果显示,孕激素可抑制卵巢癌细胞的增殖,呈浓度-时间依赖性降低,且对HO-8910细胞抑制增殖的作用较SKOV3细胞明显(P0.05)。Transwell迁移、侵袭实验结果显示,孕激素相同浓度及时间作用下,SKOV3细胞转移能力较HO-8910细胞强,且细胞的转移能力均随着孕激素浓度的升高而降低(P0.05)。此外,Western blot法结果显示,HO-8910、SKOV3细胞中实验组的PGRMC2蛋白表达与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05),但HO-8910细胞PGRMC2蛋白表达明显高于SKOV3细胞(P0.05)。与对照组相比,两细胞株各实验组的β-catenin蛋白表达呈降低趋势(P0.05)。结论孕激素可能通过PGRMC2介导下调Wnt/β-catenin信号通路的活性,从而影响卵巢癌SKOV3、HO-8910细胞迁移、侵袭能力。     

γδT细胞及其亚群在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨γδT细胞及其主要亚群在卵巢癌患者肿瘤组织中的表达及其与卵巢癌患者临床病理特征间的关系。方法流式细胞术检测15例卵巢癌组织、10例卵巢良性肿瘤组织和4例正常卵巢新鲜组织中γδT、Vδ1 T、Vδ2 T细胞比例;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测上皮性卵巢癌(40例)、卵巢交界性肿瘤(20例)和卵巢良性肿瘤(20例)组织切片中γδT、Vδ1 T细胞的表达,比较卵巢癌样本中阳性表达细胞数与患者年龄、肿瘤体积、病理类型、FIGO分期、组织学分化和淋巴结转移的关系。结果卵巢癌组织γδT、Vδ1 T细胞的比例显著高于卵巢良性肿瘤组织(P0.01)和正常卵巢组织(P0.01);Vδ2 T细胞在卵巢良性肿瘤组织浸润比例高于卵巢癌组织(P0.01);免疫组化染色发现卵巢癌组织中γδT、Vδ1 T细胞数量显著高于卵巢交界性肿瘤组织(P0.01)和卵巢良性肿瘤组织(P0.01);卵巢癌组织中γδT、Vδ1 T细胞数与患者FIGO分期和淋巴结转移均有统计学关系(P0.05);另外,卵巢癌中γδT细胞数与肿瘤体积具有统计学关系(P0.05)。结论卵巢癌组织中具有较高水平的γδT细胞,尤其是亚群Vδ1 T细胞,可能与卵巢癌患者疾病临床进展有重要联系。     

褪黑素通过自噬途径降低卵巢癌细胞表面PD-L1表达促进T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用

目的：探讨褪黑素对卵巢癌细胞表面PD-L1表达的影响。方法：褪黑素作用于卵巢癌细胞OVCAR3,流式细胞术检测不同处理后卵巢癌细胞表面PD-L1表达水平,Western blot检测不同处理后卵巢癌细胞中PD-L1及LC-3的表达,加入自噬抑制剂Autophinib后,流式细胞术检测卵巢癌细胞表面PD-L1表达,卵巢癌细胞经褪黑素处理或褪黑素和自噬抑制剂共同处理后与人T淋巴细胞Jurkat共孵育,流式细胞术检测卵巢癌细胞凋亡比例。结果：褪黑素处理显著降低了卵巢癌细胞表面PD-L1表达,促进了卵巢癌细胞的自噬,自噬抑制剂能够逆转褪黑素下调的PD-L1表达,Jurkat细胞杀伤更多褪黑素处理后的卵巢癌细胞,自噬抑制剂能够逆转Jurkat细胞对卵巢癌细胞的杀伤。结论：褪黑素能够增强T细胞对卵巢癌细胞的杀伤。     

肿瘤相关M2型巨噬细胞在卵巢癌组织中的分布及意义

目的探讨卵巢癌组织中M2型巨噬细胞的分布及其对卵巢癌侵袭转移相关基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法免疫组织化学法检测上皮性卵巢癌(34例)、交界性卵巢肿瘤(16例)和卵巢良性肿瘤(18例)组织切片中CD68、CD206和MMP-9的表达,比较卵巢癌样本中阳性表达细胞数与患者年龄、病理类型、FIGO分期、组织学分化和淋巴结转移的关系。并利用流式细胞术比较其中12例上皮性卵巢癌和11例卵巢良性肿瘤新鲜组织中CD68+~CD206+~细胞比例。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印记(Western blot)方法分别评价卵巢癌和卵巢良性肿瘤组织内MMP-2、MMP-9和MMP-10水平。结果卵巢癌组织中CD68+~、CD206+~和MMP-9+~细胞数量明显高于交界性卵巢肿瘤和卵巢良性肿瘤组织(P0.05),卵巢癌组织中CD68+~、CD206+~和MMP-9+~细胞数与患者FIGO分期和淋巴结转移均有统计学关系(P0.05)。卵巢癌组织中CD68+~和CD206+~细胞数量呈正相关关系(r=0.508,P0.05),且MMP-9+~与CD68+~和CD206+~细胞数量也分别呈正相关(r=0.611,P0.001;r=0.744,P0.001)。卵巢癌新鲜组织中CD68+~CD206+~细胞比例明显高于良性卵巢肿瘤(P0.05),且卵巢癌组织MMP-2、MMP-9和MMP-10 m RNA和蛋白表达水平较卵巢良性肿瘤具有统计学意义(P0.05)。结论卵巢癌组织中具有较高水平的M2型巨噬细胞,与卵巢癌侵袭转移和临床进展有重要的联系。     

长链非编码RNA PVT1调控miR-551通过Wnt信号通路对卵巢癌迁移和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制。方法:q PCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的变化;双萤光素酶报告基因检测PVT1与微小RNA(miR)-551的相互作用;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后miR-551-inhibitor对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测沉默PVT1后Wnt信号通路相关蛋白的表达情况。裸鼠皮下成瘤实验检测沉默PVT1对卵巢癌成瘤重量及体积的影响。结果:与正常卵巢组织相比,卵巢瘤组织中PVT1表达明显增高(P0.05);卵巢癌细胞株ES-2中PVT1表达水平最高(P0.05);沉默PVT1可以抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;PVT1能与miR-551的位点特异性结合;沉默PVT1后,miR-551-inhibitor可以促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;沉默PVT1后Wnt信号通路蛋白的表达相应下调;与阴性对照组相比,PVT1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小(P0.05)。结论:PVT1在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,它可以靶向调节miR-551,通过Wnt信号通路调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。     

磷酸化修饰对p53线粒体作用的影响以及与卵巢癌顺铂耐药的关系

目的探讨磷酸化修饰对p53直接线粒体转移的影响以及在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用以及与卵巢癌顺铂耐药的关系。方法应用Western Blot检测顺铂作用前后卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008、A2780s和顺铂耐药细胞C13＊、A2780cp的线粒体和细胞浆中Smac蛋白含量以及线粒体和全细胞中磷酸化p53（P-p53）的含量,并应用Hoechst染色法检测卵巢癌细胞的凋亡率。结果顺铂能引起卵巢癌敏感细胞OV2008、A2780s线粒体释放Smac至胞浆并引起细胞凋亡,但在C13＊和A2780cp中无此反应。顺铂处理后进入卵巢癌敏感细胞线粒体中的p53蛋白为磷酸化的p53。结论顺铂能引起p53转移至线粒体并导致卵巢癌敏感细胞线粒体释放Smac至胞浆,促进卵巢癌细胞的凋亡,并且磷酸化修饰作用可以影响p53的直接线粒体功能,与卵巢癌化疗耐药有关。     

树突状细胞表型抗原在人卵巢癌组织中的表达

目的：观察人卵巢癌中CD1c、S－100阳性细胞数和表达强度的变化，探讨其与卵巢癌发生发展及预后的关系。为卵巢癌的生物治疗提供实验依据。方法：应用ABC免疫组化技术和图像分析法对31例卵巢癌标本进行检测。结果：在卵巢癌中CD1c S－100阳性细胞数与正常卵巢组织比较明显减少（P＜0．01），且其表达强与正常卵巢组织比较明显减弱（P＜0．01）。结论：树突状细胞表型抗原在人卵巢癌组织中的表达总量下降，树突状细胞在抗卵巢癌的免疫反应中起重要作用。     

miR-198在卵巢癌中的表达及对卵巢癌细胞增殖作用的机制研究

目的 研究微小RNA-198 (microRNA-198,miR-198)在卵巢癌中的表达水平及对卵巢癌细胞增殖的影响,并探讨其发挥作用的分子机制.方法 采用qRT-PCR检测miR-198在卵巢癌和正常卵巢组织中的表达水平;t检验分析卵巢癌中miR-198的表达水平与患者临床病理参数的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析miR-198的表达对癌患者预后的影响;qRT-PCR检测miR-198在卵巢癌细胞SKOV3、CAOV4、CoC1和正常卵巢上皮细胞IOSE80中的表达;选择低表达miR-198的卵巢癌细胞系,转染miR-198模拟物(mimic),分为对照组NC和实验组miR-198 mimic,qRT-PCR检测各组细胞中miR-198的表达水平;MTS实验检测各组细胞的增殖活性;平板克隆检测各组细胞的克隆形成能力;流式细胞仪检测各组细胞的周期比率;Western blotting检测miR-198对增殖周期相关蛋白CDK4、CDK6、cyclinD1和p21表达的影响.结果 qRT-PCR结果显示miR-198在卵巢癌中的表达低于正常卵巢组织(t=6.55,P＜0.001),且miR-198的表达与患者淋巴结转移和FIGO分期相关(P ＜0.05);miR-198低表达的卵巢癌患者预后较差(x2=4.14,P=0.035).与正常卵巢上皮细胞IOSE80相比,miR-198在卵巢癌细胞SKOV3、CAOV4、CoC1中的表达降低,在SKOV3细胞系中的表达最低(F=59.07,P＜0.001).与对照组NC相比,实验组miR-198 mimic细胞中miR-198的表达增加(t=16.50,P＜0.001),miR-198 mimic组细胞增殖活性和克隆形成能力降低及诱导细胞周期阻滞在G0/G1期(P＜0.05);与对照组NC相比,miR-198 mimic组细胞中CDK4、CDK6和cyclinD1蛋白表达降低,p21蛋白表达增加(P＜0.05).结论 miR-198可能通过调控细胞周期抑制卵巢癌细胞的增殖.miR-198可能是治疗卵巢癌的潜在靶点.     

卵巢细胞微囊移植对去卵巢小鼠的骨胶原代谢的影响

背景：性激素对维持骨骼的完整性是必要的,体外培养的卵巢细胞可以分泌雌激素和孕激素,海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸钠微球可以在移植物和受体间提供一个屏障,有利于异体移植物的存活。 目的：探讨异体移植的微囊化卵巢细胞在去卵巢小鼠体内的生存和分泌功能,以及对骨胶原代谢的作用。 方法：用6周龄雌性昆明小鼠分离培养卵巢细胞,并用海藻酸-多聚赖氨酸-海藻酸钠盐微囊化分离培养的卵巢细胞。将24只8周龄雌性昆明小鼠随机分为3组(n=8),正常组：未进行卵巢切割;去卵巢组：切除卵巢;移植组：卵巢切除后立即将微囊化的卵巢细胞移植入腹腔。射免疫分析法检测微囊化卵巢细胞培养液和小鼠血清雌二醇和/或孕激素水平,Van Gieson染色法显示骨基质中的Ⅰ型胶原纤维,测小鼠左侧股骨羟脯氨酸、钙和磷的含量。 结果与结论：卵巢细胞和微囊化卵巢细胞培养液中分泌雌二醇和孕激素水平没有显著差异,移植90 d后小鼠血清雌二醇浓度与正常组无显著差异,而去卵巢组血清雌二醇浓度明显低于正常组。Van Gieson染色显示,移植组的胶原纤维分布与正常组相似,而去卵巢组的骨小梁减少、游离末端增多,脱钙骨基质变薄,胶原纤维减少。与正常组比较,去卵巢组小鼠左侧股骨羟脯氨酸、钙和磷的含量降低。 提示,微囊化卵巢细胞异体移植后能继续生存并分泌雌激素,并能在某种程度上减缓由去卵巢引起的骨胶原的分解代谢。     

脂肪间充质干细胞通过激活EZH2促进卵巢癌的增殖及侵袭

目的探讨脂肪间充质干细胞是否通过调节EZH2的表达促进卵巢癌细胞生长、侵袭及迁移。方法体外分离、培养健康人大网膜脂肪间充质干细胞并制备脂肪间充质干细胞条件培养基(ADSCs-CM),建立EZH2shRNA稳定转染的卵巢癌细胞系。条件培养基处理稳定转染及未转染的卵巢癌细胞,实时定量PCR及Western blot免疫印迹法检测2组细胞中EZH2mRNA及蛋白的表达差异,CCK-8方法及Transwell培养体系检测条件培养基对2组卵巢癌细胞增殖及侵袭能力的影响。结果条件培养基处理后的卵巢癌细胞较普通培养基培养的卵巢癌细胞EZH2表达显著升高,并伴随增殖及侵袭能力的增强;我们通过shRNA沉默卵巢癌细胞中的ezh2基因,建立稳定转染的卵巢癌细胞系,再用条件培养基处理EZH2shRNA稳定转染的卵巢癌细胞,处理后EZH2表达较未转染细胞未见明显升高,说明siRNA成功抑制细胞系中EZH2的表达。CCK-8检测和Transwell侵袭实验结果表明,稳定转染的卵巢癌细胞经条件培养基处理后,脂肪干细胞条件培养基对卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的促进作用消失。结论人脂肪间充质干细胞可能通过调节卵巢癌细胞中EZH2的表达对卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力起促进作用。     

HOTAIR 促进卵巢癌恶性生物学行为

目的:研究沉默HOTAIR后对上皮性卵巢癌恶性生物学行为的影响。方法:实时荧光定量聚合酶链反应检测HOTAIR在卵巢癌细胞株SKOV3、OVCAR3和A2780的表达情况。沉默HOTAIR后,划痕实验检测卵巢癌细胞转移能力,侵袭实验检测卵巢癌细胞侵袭能力,胸腺嘧啶核苷类似物检测卵巢癌细胞增殖能力。结果:HOTAIR在SKOV3和OVCAR3细胞中表达高于A2780细胞;沉默HOTAIR后,卵巢癌SKOV3细胞转移、侵袭和增殖能力降低;结论:沉默HOTAIR可以抑制卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为。     

lncRNA PVT1促进卵巢癌细胞自噬相关机制研究

目的探究长链非编码RNA PVT1对卵巢癌细胞自噬的影响及其调控机制。方法 Real-timePCR检测PVT1在卵巢癌组织样本中表达情况及PVT1在卵巢癌细胞株中的表达;免疫荧光实验和Western blot检测过表达PVT1对卵巢癌细胞自噬水平的影响;Western blot用于研究过表达PVT1对自噬相关蛋白ATG7表达的影响;利用共转染实验验证PVT1通过上调ATG7从而影响自噬水平。结果 Real-time PCR结果表明卵巢癌组织中PVT1的表达水平高于正常组织,各卵巢癌细胞系(ES2、OVCAR3、A2780)中PVT1表达高于正常卵巢细胞系(HOSEpiC)。Western blot和免疫荧光实验结果表明,与对照组相比,过表达PVT1能增加自噬标志蛋白LC3II/LC3I比例,能够显著促进卵巢癌细胞的自噬并通过上调ATG7的表达促进细胞自噬的发生。结论 lncRNA PVT1能够上调ATG7表达,促进卵巢癌细胞自噬的发生,有望成为卵巢癌新的治疗靶点。     

HOXA5通过调控Egr-1抑制体外培养卵巢癌细胞增殖和侵袭

目的探讨HOXA5对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响及相关机制。方法利用pcDNA.3.1质粒构建重组质粒pcDNA.3.1-HOXA5,转染卵巢癌细胞SKOV3和UACC-1598,过表达HOXA5;Egr-1 siRNA转染过表达HOXA5的卵巢癌细胞,干扰Egr-1表达;qRT-PCR法检测卵巢癌细胞中HOXA5和Egr-1 mRNA的表达量;Western blot法检测卵巢癌细胞中HOXA5和Egr-1的蛋白表达量;BrdU法检测卵巢癌细胞的增殖能力;Transwell侵袭实验检测卵巢癌细胞的侵袭能力。结果 HOXA5 mRNA(P0.01)和蛋白表达量(P_(SKOV3)0.01,P_(UACC-1598)0.05)在卵巢癌细胞中的表达量降低;pcDNA.3.1-HOXA5转染卵巢癌细胞,HOXA5 mRNA和蛋白表达量显著升高(P0.01);过表达HOXA5显著抑制卵巢癌细胞的增殖(P0.01)和侵袭能力(P0.01);过表达HOXA5且干扰Egr-1,细胞增殖(P0.01)和侵袭能力(P_(SKOV3)0.01,P_(UACC-1598)0.05)显著提升,抑制了HOXA5过表达时对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响。结论过表达HOXA5可通过调控Egr-1的表达量有效抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力,为卵巢癌的治疗提供一定的理论基础。     

几种癌组织细胞中雌、孕激素受体的初步研究

用人卵巢癌,宫颈癌组织及小鼠骨髓癌SP2/0细胞,经匀浆、离心及蔗糖密度梯度离心等方法,分离得到细胞膜和胞浆,对其作雌、孕激素结合反应,结果发现,三种肿瘤细胞中均有雌、孕激素结合活性。其中宫     

miR-211 对上皮性卵巢癌细胞HO8910 增殖及细胞周期相关蛋白的影响

目的:探讨miR-211 与上皮性卵巢癌发生的关系,及其对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:对30 例上皮性卵巢癌组织标本及卵巢癌细胞系HO8910 中miR-211、Cyclin D1 和CDK6 表达情况进行研究,同时选取30 例非卵巢癌患者组织标本及正常卵巢上皮细胞株IOSE80 作为对照,并分析上皮性卵巢癌组织及卵巢癌细胞系中miR-211、Cyclin D1、CDK6 表达情况及表达相关性;miR-211 对卵巢癌细胞增殖,以及对Cyclin D1 和CDK6 表达的影响。结果:卵巢癌组织miR-211 相对表达水平显著低于正常组织(P<0.05),卵巢癌细胞中miR-211 相对表达水平显著低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05);在上皮性卵巢癌细胞系HO8910 中,第3 天和第4 天miR-211 组细胞数显著低于miR-Ctrl (P<0.05);上皮性卵巢癌组织中Cyclin D1、CDK6相对表达水平显著高于正常卵巢上皮组织(P<0.05);上皮性卵巢癌细胞系中miR-211 显著抑制Cyclin D1 和CDK6 的表达;在卵巢癌组织中,Spearman 相关性分析结果显示miR-211 和Cyclin D1 和CDK6 相对表达水平呈负相关(r =-0.583,P =0.010)。结论:miR-211 可抑制卵巢癌细胞增殖,并抑制周期相关蛋白Cyclin D1 和CDK6 的表达,miR-211 与周期相关蛋白Cyclin D1 和CDK6 在卵巢癌发生中可能存在调控关系。     

凋亡抑制因子5在卵巢癌中的表达及临床意义

目的检测凋亡抑制因子5(API5)在卵巢癌中的表达,分析其与临床病理特征的关系。方法Western blotting方法检测2例正常卵巢组织及6例不同级别的卵巢癌组织的表达,组织化学方法检测10例正常卵巢、119例卵巢癌(浆液性腺癌61例、黏液性癌5例、内膜样癌10例、透明细胞癌10例及未分化癌33例)组织中API5的表达,分析其表达与临床病理参数及5年生存率之间的相关性,细胞转染及凋亡流式细胞分析检测API5及顺铂对卵巢癌细胞的作用。结果 API5在卵巢癌组织中的表达高于正常卵巢组织,API5的表达与临床病例特征之间密切相关,Kaplan-Meier生存曲线揭示API5表达高的卵巢癌患者较低表达患者生存率低,流式细胞术分析显示,抑制API5的表达能增加顺铂对卵巢癌细胞的敏感性。结论 API5的异常表达与卵巢癌的发生密切相关,提示API5在预后评价中具有潜在的临床应用价值,有可能成为卵巢癌治疗的潜在靶点。     

Ku70高表达促进人卵巢癌细胞系的增值并与卵巢癌患者不良预后相关

目的 探究X射线修复交叉互补蛋白6(Ku70/XRCC6)在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达及对卵巢癌细胞的增殖、凋亡及迁移的影响。方法 Western blot检测9例卵巢癌患者的不同级别的癌组织及3例健康人正常卵巢组织中的Ku70的表达;免疫组化检测119例卵巢癌组织中Ku70的表达;分析其表达与临床病理参数的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析其与患者5年生存率之间的关系;集落形成实验及CCK-8法分析卵巢癌细胞系HO8910中Ku70的表达对卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞测量术分析Ku70的表达对卵巢癌细胞凋亡的作用;划痕实验及Transwell小室法分析Ku70的表达对卵巢癌细胞迁移的影响。结果 Ku70在卵巢癌组织中的表达高于正常卵巢组织;Ku70的表达与临床病理特征之间密切相关(P<0.05);Ku70表达高的卵巢癌患者较低表达患者生存率低(P<0.05);抑制Ku70的表达能降低卵巢癌细胞的增殖及迁移,增加卵巢癌细胞的凋亡(P<0.05)。结论 Ku70的异常表达与卵巢癌的发生密切相关,有可能成为卵巢癌治疗的潜在靶点。     

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移

目的探讨C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(CTRP6)对卵巢癌细胞增殖和转移的抑制作用。方法 ELISA分别检测卵巢癌患者与健康志愿者血清,SKOV3、3AO和HO8910上皮性卵巢癌细胞与IOSE80正常卵巢上皮细胞培养上清中CTRP6的水平;采用人CTRP6重组蛋白处理高转移性卵巢癌HO8910细胞,ELISA检测HO8910细胞白细胞介素8(IL-8)和血管内皮生长因子(VEGF)的分泌水平,采用CCK-8法检测细胞增殖、TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力;采用CTRP6小干扰RNA(CTRP6 siRNA)或CTRP6抗体处理HO8910细胞,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力、细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果CTRP6在卵巢癌患者血清和上皮性卵巢癌细胞培养上清中水平降低;CTRP6重组蛋白处理HO8910细胞48 h后,细胞增殖和侵袭能力显著下降;利用siRNA抑制CTRP6表达后,细胞增殖和迁移能力显著增强;CTRP6抗体处理后,细胞增殖和迁移能力亦显著增强。结论 CTRP6在卵巢癌患者血清和上皮性卵巢癌细胞上清中水平降低;CTRP6可阻断IL-8/VEGF通路从而抑制上皮性卵巢癌细胞的增殖和迁移。     

卵巢癌中gC1qR的表达及其凋亡机制

目的探讨球状C1q受体(g C1qR)在卵巢癌中的表达,并分析其潜在的分子机制。方法收集48例卵巢癌组织和卵巢癌细胞株SKOV3为分析对象,采用PCR、Western blot分别检测g C1qR mRNA及蛋白质的表达;采用MTT比色法、Transwel实验及流式细胞技术检测卵巢癌细胞的增殖、迁移及凋亡情况;以分子荧光探针H2DCFDA、Fluo-3/AM、JC-1分别测定细胞内活性氧(ROS)、Ca~(2+)浓度以及线粒体膜电位,评估卵巢癌细胞线粒体功能的变化。结果卵巢癌组织中g C1qR mRNA及蛋白质表达分别为2.61±0.34、0.20±0.02,均明显低于其相应的癌旁正常卵巢组织7.32±1.25和0.67±0.06,差异有显著性(P0.001)。g C1qR基因过表达,可显著降低卵巢癌细胞增殖活性、迁移率;其细胞凋亡率明显增加,且呈现显著的细胞凋亡特征;同时,卵巢癌细胞线粒体中ROS含量、细胞内Ca~(2+)浓度显著增高,线粒体膜电位显著减少。结论 g C1qR基因在卵巢癌细胞凋亡中发挥重要作用,可通过引发线粒体功能障碍诱导卵巢癌细胞凋亡。     

上皮性卵巢癌中CD105的表达与肿瘤侵袭性的关系

卵巢癌是临床上死亡率最高的妇科恶性肿瘤之一,预后差,其对化疗药物产生的耐药性被认为是卵巢癌复发的根源。相关研究表明,CD105是TGF-β家族受体蛋白,多出现在肿瘤组织中新生血管内皮细胞中,与血管形成关系密切,而新生血管的形成在肿瘤的浸润及转移中都是关键性的因素,因此,CD105的表达上调可能会相应地影响肿瘤的侵袭性,继而成为一种更为显著的特异性肿瘤标记物。目的:通过流式细胞技术和细胞侵袭性试验,比较卵巢癌紫杉醇耐药细胞OC3/TAX300和原代敏感细胞OC3中CD105及相关干细胞基因的表达程度和两者侵袭性的差异,进一步探讨两者的关系及卵巢癌细胞的耐药机制。方法:培养获得稳定的人卵巢上皮癌紫杉醇耐药细胞株OC3/TAX300和原代敏感的卵巢癌细胞株OC3,并测定耐药细胞的耐药性,再分别进行免疫荧光标记用流式细胞试验的方法检测其中CD105、CD44、VCAM-1的表达,并用Transwell小室侵袭实验观察两种细胞侵袭能力的差异。结果与结论:卵巢癌耐药细胞OC3/TAX300中CD105、CD44、VCAM-1的表达明显高于原代敏感的卵巢癌细胞(P0.01);卵巢癌耐药细胞穿膜细胞数目显著高于原代敏感的卵巢癌细胞(P0.01)。CD105及相关干细胞基因在卵巢癌耐药细胞株OC3/TAX300中的表达明显高于原代敏感株OC3,且前者的侵袭能力显著高于后者,说明卵巢耐药肿瘤细胞的侵袭能力的增强可能与细胞中CD105的高表达有关。CD105表达的上调可能与卵巢癌细胞的侵袭性及紫杉醇化疗耐药有一定的相关性。因CD105在血管生成过程中的促进作用,使其有希望成为抗肿瘤治疗的新靶点,有良好的研究前景。