凋亡抑制基因Survivin与肿瘤防治的研究

Survivin是1997年发现的一种新的凋亡抑制基因，是凋亡蛋白抑制因子(inhihitor of apoptosis protein，IAP)家族的成员，它选择性地表达于胚胎发育组织和几乎所有常见的人类恶性肿瘤组织而正常成人终末分化组织中不表达，其表达与多种肿瘤患者的预后密切相关。survivin通过直接抑制凋亡信号传导途径中最下游的效应分子easpase 3的活性而发挥其抑凋亡作用。抑制survivin的表达，以阻断其抑凋亡作用，可以达到治疗肿瘤的目的。此种方法初步验证一般不会产生副作用，治疗中会对患者的生活质量带来正性效应。近年来体外和动物实验中发现，针对此基因的反义核酸及此基因决定基缺失的突变体，能够诱导细胞自发性凋亡和明显抑制肿瘤的生长，为评价肿瘤预后及防治研究提供了新的靶位。     

凋亡抑制基因Survivin的研究进展

肿瘤是严重危害人类健康的常见的重大疾病,机体对细胞的生长和分裂失去控制,细胞的增殖与凋亡调节失衡是肿瘤发生主要因素之一。细胞失控性异常增殖是肿瘤最突出的生物学特性。生存素(Survivin)作为近年来被发现的凋亡抑制蛋白(IAP)家族中的新成员,研究表明其细胞凋亡抑制效应最强,组织学表达具备肿瘤高度特异性,在抑制肿瘤细胞凋亡方面发挥重要作用。本文就Survivin的分子结构、生物学性能、与肿瘤发生发展的关系及其在肿瘤基因治疗中的作用作一综述。     

凋亡抑制基因Survivin的表达在肿瘤预后评估中的作用

目的：克隆、表达SW基因，并探讨其在肿瘤预后中的作用。方法：从人白血病细胞系HL60提取总RNA，用RT-PCR方法扩增出SW基因片段。将SVV基因片段插入载体pGEM-T Easy中，经全自动序列分析仪测序正确后用NdeⅠ／XhoⅠ双酶切，亚克隆到原核表达载体pRSET-C中，构建重组表达载体pRSET-c-SW，并转化大肠杆菌BL2l菌株。取工程菌，经IPTG诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE鉴定并初步纯化。结果：经RT-PCR，测序和酶切鉴定，成功地克隆了人SW基因；经IPTG诱导的重组质粒pRSET-C-SW表达出相对分子质量约为16500u的蛋白，与预期的结果相符。结论：成功克隆了人肿瘤细胞的抗凋亡基因SW，并在大肠杆菌BL2l中表达出SW蛋白。该基因的高效表达为进一步探讨以SVV为基础的肿瘤的防治及预后判断提供工具。     

凋亡抑制基因Survivin与肿瘤防治的研究

Survivin是1997年发现的一种新的凋亡抑制基因,是凋亡蛋白抑制因子(inhibitorofapoptosisprotein,IAP)家族的成员,它选择性地表达于胚胎发育组织和几乎所有常见的人类恶性肿瘤组织而正常成人终末分化组织中不表达,其表达与多种肿瘤患者的预后密切相关。survivin通过直接抑制凋亡信号传导途径中最下游的效应分子caspase3的活性而发挥其抑凋亡作用。抑制survivin的表达,以阻断其抑凋亡作用,可以达到治疗肿瘤的目的。此种方法初步验证一般不会产生副作用,治疗中会对患者的生活质量带来正性效应。近年来体外和动物实验中发现,针对此基因的反义核酸及此基因决定基缺失的突变体,能够诱导细胞自发性凋亡和明显抑制肿瘤的生长,为评价肿瘤预后及防治研究提供了新的靶位。     

凋亡抑制基因Survivin与泌尿系肿瘤

Survlvin是近几年来发现的肿瘤凋亡抑制基因，它在恶性肿瘤的表达有高度的选择性。Survivin不仅参与细胞分裂，而且具有抗凋亡作用。研究表明，Survivin与肿瘤的发生、发展、预后及复发密切相关，且可作为基因治疗的新靶点。本文对Survivin在泌尿系肿瘤的研究进展作一综述。     

Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达与增殖和凋亡及预后的关系

目的：探讨survivin蛋白在不同类型及不同分期的膀胱移行细胞癌组织中的表达，初步探讨survivin与膀胱移行细胞癌组织增殖及凋亡发生之间的关系，为膀胱移行细胞癌的发生、治疗及康复介入提供理论依据。方法：2000—03／2004—09在遂宁市人民医院病理科证实膀胱移行细胞癌55例，病理分级：Ⅰ级组22例，Ⅱ级组10例，Ⅲ级组23例(其中TNM分期T1期12例，T2期25例，T3期12例，T4期6例)。应用免疫组化链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(strept avidin biotin peroxidase complex，SABC)法进行survivin和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)表达的定位和半定量检测，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase TdT-mediated biotin dUTP nick end—labeling．TUNEL)进行细胞凋亡率的检测。结果：膀胱移行细胞癌病理分级Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级组survivin表达平均灰度值为[0．547&;#177;0．124，0．598&;#177;0．112，0．601&;#177;0．097)，均显著高于正常对照组（0．114&;#177;0．034)(t=2．875～3．657，P&;lt;0．01)。不同分期组survivin表达也显著高于正常对照组(t=3．547～5．458，P&;lt;0．01)，其中T4期表达程度最高0．634&;#177;0．875。肿瘤细胞凋亡指数随肿瘤恶性程度增高而增高，增殖指数／凋亡指数比值同样随着肿瘤分期增加而增高。结论：Survivin在膀胱移行细胞癌的发生中起重要作用，survivin表达与膀胱移行细胞癌组织的增殖及凋亡发生有一定关系，为患者预后生活指标判断提供理论依据。     

凋亡抑制基因Survivin 在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制基因Survivin 在甲状腺癌中的表达及其与病理预后之间的关系.方法 应用免疫组化SP法检测68 例甲状腺癌、54 例甲状腺腺瘤、32 例癌旁组织和23 例正常甲状腺组织中Survivin 的表达情况,评价Survivin 的阳性表达率与甲状腺癌的病理预后之间的关系.结果 Survivin 在甲状腺腺癌组织、甲状腺腺瘤组织、癌旁甲状腺组织及正常甲状腺组织中的阳性表达率分别为44.1%、25.9%、18.8%和0.甲状腺未分化癌和髓样癌组织中Survivin 的阳性率明显增高,存在转移和临床Ⅲ、Ⅳ期病例中,Survivin 的阳性率明显增高.结论 Survivin 过量表达可能与甲状腺肿瘤的发生发展有关,癌组织中Survivin 的表达可作为判断甲状腺癌病理类型和预后的参考指标.     

抑癌基因PTEN和凋亡抑制基因Survivin在胃癌中的表达及其临床意义

胃癌是常见的恶性肿瘤之一,在我国胃癌死亡率占所有恶性肿瘤死亡的23％,居各类癌症死亡的第一位。磷酸酶基因（PTEN）是迄今发现的第一个具有双特异磷酸酶活性的抑癌基因,PTEN蛋白表达是推测进展期胃癌的分子标志物。Survivin是1997年发现的凋亡蛋白抑制因子家族（inhibitor of apoptosis protein,IAP）的一个重要成员。我们采取免疫组化技术检测胃癌组织中Survivin、PIEN蛋白的表达。     

凋亡抑制基因Survivin与宫颈癌的发生

目的:探讨凋亡抑制基因Survivin生存素在宫颈癌发生、发展中的作用。方法:选取宫颈上皮内瘤样病变60例、宫颈浸润癌32例和正常宫颈组织25例作为研究对象,用TUNEL法测定凋亡指数及S—P免疫组化法进行Survivin基因表达检测,分析比较各组间凋亡指数及Survivin表达差异。结果:凋亡指数随着宫颈上皮病变的发展而减少(P＜0．05),但在CINⅢ与宫颈浸润癌间无明显差异。正常宫颈组织Survivin基因表达均为阴性,随着宫颈上皮病变的发展,Survivin表达强度显著增加(P＜0．05)。Survivin基因表达强度与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0．67,P＜0．01)。结论:细胞凋亡的改变与宫颈癌发生的早期过程有关,凋亡抑制基因Survivin在宫颈从癌前病变向宫颈癌演变的过程中起重要作用。     

膀胱移行细胞癌尿液脱落细胞中survivin的表达及意义

目的:研究膀胱移行细胞癌(TCC)尿液脱落细胞中survivin的表达及意义。方法:留取49例TCC患者、10例泌尿系统其他疾病患者和8例正常健康成人的新鲜尿液,离心收集脱落细胞,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测TCC尿液脱落细胞中survivin的表达,并行尿脱落细胞学检查。结果:49例膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞中有41例检测出survivin表达,而10例泌尿系统其他疾病患者和8例正常健康成人的尿脱落细胞中均未检测出survivin的表达。以RT-PCR检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中survivin的方法敏感性为83.7%,特异性为100%。结论:初步的试验结果显示,RT-PCR法检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中survivin的方法可以作为诊断膀胱癌的无创性方法。     

Survivin蛋白的原核表达及在肿瘤诊断中的初步应用研究

目的实现Survivin蛋白在大肠杆菌BL21中的可溶性表达,建立基于Survivin蛋白的Survivin抗体检测方法,为survivin的深入研究及肿瘤的早期诊断奠定基础。方法从食管癌细胞Eca109中提取RNA,经RT-PCR扩增,克隆出Survivin基因;用PCR将Survivin克隆至载体pET32a( );用双酶切和DNA测序技术对构建的载体进行鉴定;IPTG诱导Survivin蛋白表达,用镍离子亲和层析纯化,ELISA及Western blot鉴定;建立基于重组融合蛋白的Survivin抗体检测方法,并对肿瘤和癌前病变患者血清进行检测。结果构建了Survivin蛋白原核表达载体pET32a( )/Survivin/BL21,实现了Survivin蛋白在大肠杆菌BL21中的可溶性表达;建立了检测Survivin特异性抗体的间接ELISA,对44份健康血清1、42份肿瘤患者血清1、86份癌前病变患者血清进行了检测,结果显示:anti-Survivin在肿瘤患者中的检出率为32%,特异性为88%;anti-Survivin阳性率与年龄和性别无关(P>1.0,P>0.912);在69例消化系统肿瘤中,血清anti-Survivin阳性率32%;186例癌前病变患者anti-survivin阳性率31.7%,AFP和CEA阳性率分别为10.8%和16.7%(χ2=28.0705,P<0.005);在消化性溃疡患者,anti-survivin和CEA阳性率均为33.3%;在直肠息肉中anti-survivin阳性率33.3%,CEA阳性率仅为5.6%(χ2=34.309,P<0.005);在慢性结肠炎患者,anti-survivin阳性率40%,CEA阳性率20%(χ2=13.41,P<0.005)。结论本研究获得的Survivin蛋白和建立的Survivin抗体检测方法,为survivin作为肿瘤标志物的深入研究奠定了重要基础。     

Survivin在宫颈鳞癌中的表达及临床意义

目的 探讨宫颈鳞癌组织中survivin基因表达的特征及临床意义。方法 采用免疫组织化学方法（PV法）检测54例宫颈鳞癌，16例正常官颈组织中Survivin基因的表达，并分析其临床病理特征。结果 Survivin在正常宫颈组织中不表达，在官颈鳞癌组织中阳性表达率与年龄、临床分期及淋巴结转移有关。结论 Survivin基因在官颈鳞癌组织中的稳定表达。预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后，可能成为有效的预测官颈鳞癌侵袭性的监测指标及判断预后的指标，对指导临床治疗具有重要意义。     

Survivin和b-FGF在食管癌中的表达及临床意义

目的探讨Survivin与b-FGF在食管癌中的表达度临床意义。方法采用免疫组织化学法检测60例食管癌和30倒食管炎组织中Survivin和b—FGF的表达。结果食管癌中Survivin和b-FGF的阳性表达率分别为78．33％和65．00%。明显高于对照组（食管炎组织）（P〈0．05）；Survivin、b—FGF在中晚期食管癌中的阳性表达比早期显著升高（P〈0．05），而与食管癌的组织学类型、病理分级无关（P〉0．05）；Survivin与b-FGF在食管癌中的表达呈正相关（P〈0．05，f=0．364）。结论Survivin和b-FGF可能在食管癌的发生发展中起关键作用，二者与食管癌的临床病理分期密切相关，二者联合检测对食管癌的诊断有一定价值。     

Survivin、Caspase-3、突变型p53对膀胱移行细胞癌预后的意义

目的:探讨survivin、caspase-3、突变型p53蛋白表达对膀胱移行细胞癌(BTCC)预后的作用。方法:应用SP免疫组织化学法检测50例BTCC及10例正常膀胱黏膜组织石蜡切片中survivin蛋白、caspase-3蛋白、突变型p53蛋白的表达,结合临床资料进行分析。结果:Survivin在BTCC标本中的阳性表达率为76.0%(38/50),在正常组织中不表达,与BTCC的组织学分级、预后有关(均P<0.05),但与临床分期无关(P>0.05);p53阳性表达率为68.0%(34/50),与正常组织阳性表达率[30.0%(3/10)]相比差异有统计学意义(P<0.05);caspase-3阳性表达率为36.0%(18/50),与正常组织阳性率[90.0%(9/10)]相比差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin与caspase-3表达呈显著负性相关(rs=-0.457,P<0.05),survivin与p53表达呈显著正性相关(rs=0.317,P<0.05)。结论:Survivin与caspase-3的表达在BTCC中呈负相关,突变型p53缺乏对survivn表达的抑制而呈正相关,对...     

Survivin在肺癌中的表达及其临床意义的研究

目的研究肺癌组织中Survivin表达与临床病理及预后的关系。方法应用免疫组织化学（SP法）方法．共检测肺癌及正常肺组织96例，其中腺癌28例，鳞形细胞癌27例，腺鳞癌10例，大细胞癌4例，小细胞癌7例．正常肺组织20例。结果Survivin在肺癌组织中总阳性率为68．4％（52／76），腺癌为64．3％（18／28），鳞癌阳性率70．4％（19／27），腺鳞癌为70％（7／10），大细胞癌为75％（3／4），小细胞癌71．4％（5／7）；在正常肺组织中未见表达。在76倒肺癌患者中，Survivin蛋白表达分别为Ⅰ期肺癌54．3％（19／35），Ⅱ期肺癌72．7％（8／11），Ⅲ期肺癌82．1％（23／28），Ⅳ期肺癌100％（2／2）。结论Survivin表达与肺癌病理类型无相关性，与病理分级及临床分期呈密切相关性，检测Survivin在肺癌中的表达情况判断其预后有重要的意义，Survivin可以作为评估其预后的一项重要指标。     

生存素检测在膀胱癌实验诊断中的意义

目的:检测膀胱癌患者血液和尿液细胞中生存素(survivin)基因的表达并评价其临床意义。方法:取40例膀胱移行细胞癌患者(TCC组)、19例其他泌尿系统疾病患者(对照组)和20名健康成人(正常人组)的外周血和新鲜尿液,以实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测外周血有核细胞及尿液脱落细胞中生存素基因的表达,并检测甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的表达作为对照。结果:TCC组患者外周血生存素25例阳性(62.5%),对照组和正常人组均为阴性;尿脱落细胞检测结果示TCC组28例阳性(70.0%),对照组仅2例阳性(10.5%),而正常人组均为阴性。TCC组阳性率与其他2组差异有显著性(P<0.01),而在不同病理分级的TCC患者的阳性率无统计学差异(P>0.05)。合并分析血液和尿液中的生存素检测结果对TCC的总检出率达87.5%,对TCC组Ⅱ级和Ⅲ级的检出率(96.6%)显著高于Ⅰ级(63.6%)(P<0.05)。结论:生存素基因在膀胱癌患者血液和尿液细胞中重新表达,运用实时RT-PCR法测定血液和尿液细胞中生存素表达具有较好的肿瘤特异性,可作为一种新的检测膀胱癌的无创性方法。     

survivin在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨survivin在胃癌诊断、预后等方面的意义。方法利用RT-PCR技术检测38例胃癌组织标本和38例相应癌旁组织标本中survivin mRNA表达情况。结果38例胃癌组织标本中有20例survivin基因表达阳性，高、中、低分化胃腺癌的阳性表达率分别为0％、45．5％和60％；发生淋巴结及远处转移的胃癌组织标本中72％表达survivin，明显高于无转移组。38例癌旁组织标本均无该基因的阳性表达。结论survivin在胃癌组织中有较高的表达率。且表达具有高度肿瘤特异性；survivin的表达与胃癌的侵袭性和预后有关。     

联合检测尿膀胱癌抗原和survivin诊断膀胱癌的临床应用

目的临床评价联合检测尿液中尿膀胱癌抗原（urinary bladder cancer antigen,UBC）和survivin基因诊断膀胱癌的临床应用价值。方法对64例膀胱癌患者、20例泌尿系其他良性疾病患者,在膀胱镜检查之前留尿将尿样分为3份,分别进行UBC、survivin和脱落细胞检测,分析比较三种方法诊断膀胱癌的临床应用价值。结果 UBC和survivin诊断膀胱癌的敏感度分别为85.9%（55/64）和93.8%（60/64）,与脱落细胞学（40.6%）比较,差异有统计学意义（P〈0.01〉,三种方法诊断膀胱癌的特异度分别为85.0%（17/20）、95%（19/20）和95%（19/20）。各分级和分期UBC和survivin诊断膀胱癌的敏感度均高于尿脱落细胞学检查;UBC值和survivin检测的敏感度在各分级和分期中差异无统计学意义（P〉0.05）;而尿脱落细胞学检查,肿瘤的分级越高,其敏感度越高（P〈0.01）,各分期之间差异无统计学意义（P〉0.05）。联合运用UBC和survivin,敏感度和特异度均达到100%。结论尿液中的UBC和survivin是早期诊断膀胱癌较好的肿瘤标志物,联合检测能提高诊断的敏感度和特异度。     

Survivin的研究现状

Survivin是一个新发现的凋亡蛋白抑制剂 (inhibitorofapoptoticprotein ,IAP)家族成员 ,它具有独特的结构和功能。本文就Survivin的结构和生物学特性 ,Survivin在胚胎、肿瘤和正常成人组织的表达及Survivin与肿瘤的诊断、治疗和预后的研究现状作一综述