曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞表达α-SMA的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的NRK-52E转分化过程中转分化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况及曲尼司特对其的影响。方法 NRK-52E经培养传代后随机分为阴性对照组,TGF-α1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞仪测定α-SMA(+)细胞的百分数,Western-blot分析细胞表达α-SMA的程度。结果流式细胞术分析显示阴性对照组α-SMA阳性细胞百分比明显增多,说明细胞发生EMT;曲尼司特干预组细胞表达α-SMA阳性细胞百分比呈剂量依赖性递减,且与阳性对照组比较有显著性差异(P<0.05);Western-blot结果也表明,曲尼司特能剂量依赖性降低NRK-52E胞质α-SMA表达的程度。结论曲尼司特可以抑制肾小管上皮细胞α-SMA的表达,从而抑制EMT,减少ECM的积聚,保护肾脏。     

曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞E-cadherin表达的影响

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的NRK-52E细胞转分化过程中转分化标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况及曲尼司特对其转分化过程的影响。方法应用TGF-β1(8 mg/L)刺激NRK-52E细胞,分别分为阴性对照组、TGF-β1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞术和蛋白质印迹检测各组E-cadherin的表达情况。结果流式细胞术和蛋白质印迹检测结果表明,TGF-β1刺激后,NRK-52E细胞E-cadherin的表达均显著减低。结论曲尼司特能够抑制TGF-β1诱导的NRK-52E转分化,其机制可能与上调E-cadherin的表达有关。     

曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞E—cadherin表达的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）诱导的NRK-52E细胞转分化过程中转分化标志物E-钙黏蛋白（E—cadherin）的表达情况及曲尼司特对其转分化过程的影响。方法应用TGF—β1（8mg／L）刺激NRK-52E细胞,分别分为阴性对照组、TGF—β1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞术和蛋白质印迹检测各组E—cadherin的表达情况。结果流式细胞术和蛋白质印迹检测结果表明,TGF—β1刺激后,NRK-52E细胞E—cadherin的表达均显著减低。结论曲尼司特能够抑制TGF—β1诱导的NRK-52E转分化,其机制可能与上调E—cadherin的表达有关。     

葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织TGF-β_1和α-SMA表达的影响

目的：研究葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织转化生长因子-β1（TGF-β1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的调控作用，探讨葛根素对酒精性肝损伤的防治机制。方法：将75只SD大鼠随机分成5组：正常组10只、模型组20只（乙醇等混合液，2次／d）、阳性对照组15只（乙醇等混合液＋复方鳖甲软肝片，1g&#183;kg^-1&#183;d^-1。）、葛根素大剂量组15只（乙醇等混合液＋葛根素片1．5g&#183;kg^-1&#183;d^-1）、葛根素小剂量组15只（乙醇等混合液＋葛根素片0．75g&#183;kg^-1&#183;d^-1），8周后抽取股静脉血并处死，观察肝脏组织病理变化，检测肝组织TGF-β1和α-SMA的表达。结果：模型组大鼠肝组织病理变化和肝纤维化积分与其他各组相比都有显著性改变（P〈0．05）；葛根素大、小剂量组肝组织TGF--β1和α-SMA表达水平明显低于模型组（P〈0．01）；且葛根素大剂量组α-SMA水平明显低于对照组（P〈0．05），小剂量组与模型组相比无显著性差异。结论：酒精性肝损伤大鼠肝脏组织TGF-β1和α-SMA有不同程度的升高，葛根素对其有调控作用，葛根素对酒精性肝损伤有保护作用。     

膈下逐瘀汤对大鼠纤维化肝组织α-SMA和TGF-β1表达的影响

目的:观察膈下逐瘀汤抗猪血清诱导的大鼠肝纤维化作用及其可能的作用机制。方法:采用猪血清腹腔注射诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,VG染色法检测肝组织病理学改变,ELISA检测肝组织TGF-β1含量,定量RT-PCR检测肝组织TGF-β1和α-SMA mRNA表达。结果:与模型组大鼠比较,膈下逐瘀汤可显著降低猪血清诱导的肝纤维化程度,减少肝组织TGF-β1蛋白和mRNA表达,降低肝组织α-SMA mRNA表达。结论:膈下逐瘀汤可有效地逆转实验性大鼠肝纤维化,其机制可能与抑制肝星状细胞活化有关。     

三七总皂苷提取物Rg1对CsA慢性肾毒性大鼠肾组织TGF-β1及α-SMA表达的影响

目的:探讨人参皂苷Rg1对环孢素A(Cs A)引起的肾间质纤维化的保护作用。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、模型组、G-Rg1干预组,采用低盐饮食及Cs A灌胃的方法建立Cs A慢性肾纤维化的模型。观察Rg1对大鼠尿量、肾功能、肾脏病理及纤维化指标TGF-β1、α-SMA表达的影响。结果:Rg1能减轻肾组织的病理改变,并下调TGF-β1、α-SMA在肾组织的表达。结论:Rg1通过抑制TGF-β1及α-SMA的表达而发挥保护肾脏的作用。     

当归多糖及小分子提取物对TGF-β1诱导的HELF表达α-SMA、CTGF的影响

目的:观察当归多糖及小分子提取物对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞HELF的增殖及α-SMA、CTGF影响的作用。方法:建立肺纤维化细胞模型,分为空白组、模型组、12.5μg/ml当归多糖组、25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归多糖组、25μg/ml当归小分子提取物组、50μg/ml当归小分子提取物组、100μg/ml当归小分子提取物组。结合形态观察,检测细胞增殖、羟脯氨酸、MMP-9、TIMP-1含量及α-SMA、CTGF蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,各组细胞吸光度值、羟脯氨酸、MMP-9、TIMP-1含量、CTGF、α-SMA蛋白表达均明显增高。与模型组比较,25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归小分子提取物组细胞吸光度值、羟脯氨酸含量、CTGF、α-SMA蛋白表达均降低,50μg/ml当归小分子提取物组MMP-9含量下降,25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归小分子提取物组TIMP-1含量均增高。形态学观察,模型组细胞数量增多,体积增大,生长旺盛。25μg/ml当归多糖组、50μg/ml当归小分子提取物组细胞数量较少,体积较小。结论:当归多糖及小分子提取物能抑制TGF-β1诱导的HELF增殖,减少羟脯氨酸的合成,其作用可能与下调α-SMA、CTGF表达,调节维持MMP-9/TIMP-1之间的平衡有关。     

软肾散对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1及α-SMA的影响

目的:观察软肾散对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质纤维化(RIF)的影响及可能的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利治疗组和软肾散治疗组,后3组建立UUO大鼠模型。治疗结束后测定大鼠肾功能、行HE染色观察肾组织病理变化,计算肾小管间质病理积分,用免疫组化方法测定肾TGF-β1、α-SMA的表达情况。结果:两治疗组大鼠BUN、SCr低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);肾间质病理积分显示两治疗组显著低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,两治疗组TGF-β1和α-SMA的表达均低于模型组(P<0.01),两治疗组组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:软肾散能一定程度上减轻UUO大鼠RIF程度,其作用机制可能与下调TGF-β1和α-SMA表达有关。     

加味黄风汤对IgA肾病大鼠肾组织α-SMA及TGF-β表达的影响

目的:观察加味黄风汤对IgA肾病模型大鼠肾组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β(TGF-β)的影响。方法:IgA肾病大鼠造模后,随机分为空白正常组、模型组、雷公藤对照组、加味黄风汤单倍剂量及双倍剂量治疗组,给药12周。检测大鼠尿液、生化、肾组织病理及α-SMA及TGF-β表达改变。结果:加味黄风汤治疗组尿蛋白水平低于模型组(P<0.05)。治疗组肾小球系膜区IgA沉积较模型组明显减弱,系膜基质及系膜细胞增生程度较模型组轻,免疫组化α-SMA及TGF-β表达强度较模型组弱(P<0.05)。加味黄风汤治疗组α-SMA及TGF-β蛋白表达明显下降(P<0.05),m RNA表达亦明显下降(P<0.05)。结论:加味黄风汤能减少尿蛋白,减少肾组织系膜区IgA沉积,减轻系膜细胞及系膜基质增生,下调α-SMA及TGF-β蛋白及m RNA的表达,保护肾脏功能。     

温莪术对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1、α-SMA、COLⅠ表达的影响

目的:观察温莪术对肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用及对TGF-β1、α-SMA、COLⅠ表达的影响,探讨温莪术肾脏保护作用的机制.方法:取SPF级雄性3个月龄SD大鼠,采用UUO模型,随机分为4组:假手术组(SO组),模型组(M组),莪术组(E组),氯沙坦组(L组).于术后第7、14、21天时各组随机处死6只大鼠,取左侧肾组织,免疫组织化学法(IHC)检测肾组织中TGF-β1、α-SMA、COL工的表达情况.结果:各时相点模型组、莪术组、氯沙坦组大鼠的肾脏TGF-β1、α-SMA、COL Ⅰ表达均明显增多,而且模型组三者的表达高于莪术组、氯沙坦组(P＜0.05),莪术组与氯沙坦组比较无明显差异.结论:温莪术可以延缓肾间质纤维化的进展,其作用机制是通过抑制TGF-β1表达,下调α-SMA的表达,抑制成纤维细胞活性和COLⅠ的合成,抑制EMT和ECM的积聚.     

温莪术对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

目的探讨温莪术对转化生长因子-β1（transforming growthfactor-β1,TGF-β1）诱导的肾小管上皮细胞转分化（epithelial-myofibroblast transdifferentiation,EMT）拮抗作用。方法将体外培养的正常肾小管上皮细胞随机分为6组：正常对照组（C组）、TGF-β1诱导模型组（T组）、温莪术低浓度组（E．组）、温莪术中浓度组（E：组）、温莪术高浓度组（E3组）、盐酸贝那普利组（Y组）,除C组外,各组TGF-β1,诱导24h后,温莪术各剂量组及Y组加入药物作用48h。运用倒置显微镜观察细胞形态的改变,细胞免疫荧光法、RT—PCR法及ELISA法检测各组NRK-52E细胞EMT过程中细胞骨架成分β-肌动蛋白（β-actin）的分布,仅．平滑肌肌动蛋白（α—Smooth muscleactin,α-SMA）mRNA、E钙黏蛋白（E—cadherin,E—cad）mRNA表达,纤维粘连蛋白（fibronectin,FN）浓度。结果TGF-β．诱导3天后,T组细胞出现肥大、拉长,呈梭形,细胞骨架结构β-actin表达增多（P〈0．05）,胞浆内出现束状纤维样结构,细胞内α-SMAmRNA表达显著上调（P〈0．05）,E-cadmRNA表达降低（P〈0．05）,细胞上清液中FN浓度升高（P〈0．05）。与T组比较,E1-3组细胞仅见部分呈成纤维样改变,伴随胞浆内β-actin表达及FN浓度的降低（P〈0．05）,E2—3组细胞内仅．SMAmRNA表达升高（P〈0．05）,E-cadmRNA表达减少（P〈0．05）,但E,组E-cad及OL-SMAmRNA表达量与之比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。与E1组比较,E2-3组胞浆内β-actin蛋白表达及FN浓度降低（P〈0．05）,E3组细胞内E3-cadmRNA表达升高伴α-SMAmRNA表达降低（P〈0．05）。与Y组比较,E1组细胞浆内13-actinmRNA及细胞上清液中FN浓度均升高（P〈0．05）,E3组β—actin表达升高（P〈0．05）,E—cadmRNA表达降低（P〈0．05）,E1-3α-SMAmRNA表达量则差异无统计学意义（P〉0．05）。结论温莪术可抑制TGF-β,诱导的EMT发生,可作为临床治疗慢性肾功能不全的有效药物之一。     

黄芪毛蕊异黄酮对转化生长因子β1诱导内皮细胞转分化的影响

目的:探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人脐静脉内皮细胞转分化的影响,以阐明黄芪毛蕊异黄酮对肾脏纤维化的保护作用。方法:人脐静脉内皮细胞系ECV-304为研究对象,体外培养ECV-304细胞株,分为正常对照组,TGF-β1组(10μg/L),TGF-β1+毛蕊异黄酮低、中、高剂量组(0.1、1、10mg/L)。各组细胞培养72h后,采用荧光倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,Western Blot检测肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果:与正常对照组相比,TGF-β1组细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞形态,TGF-β1明显促进α-SMA蛋白的表达(P<0.01);毛蕊异黄酮与TGF-β1共培养后可明显抑制TGF-β1诱导的细胞形态学改变及α-SMA的表达(P<0.05),高剂量组比低、中剂量组有更强的抑制效应,低剂量组抑制效应最弱。结论:黄芪单体毛蕊异黄酮可以抑制TGF-β1诱导的内皮细胞(ECV-304)向肌成纤维细胞转化,具有保护内皮细胞的作用,从而为防治慢性肾脏病提供了依据。     

BMP7对CsA诱导的NRK-52E细胞EMT的影响

目的 观察骨形成蛋白7（BMP7）对环孢素A（CsA）诱导的NRK-52E细胞转分化的影响.方法 NRK-52E经培养传代后随机分为5组：无血清阴性对照组、CsA阳性对照组及BMP7低、中、高剂量干预组（rhBMP7终浓度分别为10,50,100μg/L）,每组设5个复孔.24h后采用Western blot分析各组细胞α-SMA和E-cadherin的表达情况,ELISA法检测各组细胞培养上清液中ColⅠ、Col Ⅵ浓度.结果 Western blot结果表明,BMP7能剂量依赖性降低α-SMA表达,同时上调E-cadherin表达.结论 BMP7可以逆转CsA诱导的肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化,从而减少细胞外基质的生成,发挥肾脏保护作用.     

大黄䗪虫丸对TGF-β1诱导A549细胞Rho/ROCK信号通路表达的影响

目的:观察大黄?虫丸含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导后A549细胞RhoA/ROCK信号通路表达情况的影响,探讨其防治特发性肺纤维化(IPF)的作用机制.方法:正常培养并取对数生长期A549细胞,TGF-β1对其诱导48 h,电子显微镜下观察A549细胞的形态学变化;选择吡非尼酮作为阳性对照药,RT-P...     

软肾散对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1及α—SMA的影响

目的：观察软肾散对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质纤维化（RIF）的影响及可能的作用机制。方法：将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利治疗组和软肾散治疗组,后3组建立UUO大鼠模型。治疗结束后测定大鼠肾功能、行HE染色观察肾组织病理变化,计算肾小管间质病理积分,用免疫组化方法测定肾TGF—β1、α-SMA的表达情况。结果：两治疗组大鼠BUN、SCr低于模型组（P〈0．01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P〉0．05）;肾间质病理积分显示两治疗组显著低于模型组（P〈0．01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P〉0．05）;免疫组化结果表明,两治疗组TGF—β1和α—SMA的表达均低于模型组（P〈0．01）,两治疗组组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：软肾散能一定程度上减轻UUO大鼠RIF程度,其作用机制可能与下调TGF—β1和α-SMA表达有关。     

茶多酚对氧化低密度脂蛋白诱导系膜细胞TGF-β1mRNA表达的影响

目的：观察茶多酚对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1mRNA表达的影响。方法：以ox-LDL刺激体外培养的大鼠系膜细胞，不同浓度的茶多酚干预后，检查系膜细胞内总胆固醇(TC)含量，用原位杂交法测TGF-β1mRNA的表达。结果：ox-LDL与系膜细胞共同孵育后细胞内TC含量、TGF-β1mRNA表达与细胞对照比较，均明显增高；茶多酚干预后系膜细胞中TC含量下降，TGF-β1mRNA的表达下降。结论：茶多酚可抑制系膜细胞摄取氧化低密度脂蛋白和TGF-β1mRNA的表达。     

大黄素对高糖介导的大鼠NRK52E TSP1和TGF-β1表达的影响

目的:探讨大黄素对高糖介导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,TSP1)和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)表达的影响.方法:在NRK52E体外培养的基础上,观察高糖(30mmol/L)诱导下低、中和高浓度的大黄素(10ug/ml、20ug/ml和40ug/ml)对NRK52E TSP1、TGF-β1的mRNA和蛋白表达的影响.采用Real Time PCR检测TSP1、TGF-β1 mRNA表达,采用Western blot检测TSP1、TGF-β1蛋白表达.总TGF-β1和活性TGF-β1检测采用ELISA法.结果:与空白对照组比较,高糖(30mmol/L)明显上调了NRK52E TSP1的mRNA表达(3.34±0.18 vs 1.12±0.13; P＜20.05)、伴有TGF-β1的mRNA表达增加(3.52±0.22 vs 1.24±0.09; P＜20.05).同时高糖(30mmol/L)也上调了TSP1蛋白表达(0.5184±0.0736 vs 0.1204±0.0376; P＜20.01),伴有TGF-β1蛋白表达的增加(0.5698±0.0324 vs 0.1032±0.0322; P＜20.01).与高糖阳性对照组比较,中浓度和高浓度大黄素明显抑制了高糖(30mmol/L)诱导的TSP1、TGF-β1的mRNA(P＜20.05;P＜20.01 )和蛋白表达(P＜0.05;P＜20.01 ).中浓度大黄素干预组总的TGF-β1含量和活性TGF-β1含量均减少,(P＜20.05);高浓度大黄素干预组总的TGF-β1含量和活性TGF-β1含量均明显减少(P＜20.01).结论:大黄素能抑制大鼠肾小管上皮细胞TSP1、TGF-β1的mRNA和蛋白表达,并下调总的和活性TGF-β1.     

肾络通对阿霉素诱导的肾病大鼠 TGF-β1、TGF-β1mRNA及c-fos表达的影响

目的: 观察中药肾络通对肾小管-间质纤维化大鼠TGF-β1、TGF-β1mRNA及c-fos基因表达的影响.方法: 建立单侧肾切除加重复阿霉素注射所诱导的肾病模型,采用病理形态学、免疫组化、原位杂交、流式细胞仪检测等方法,观察TGF-β1、TGF-β1mRNA及c-fos基因表达特点及肾络通的影响.结果: 模型组呈强阳性表达,肾络通组较模型组明显减弱.结论: 活血化瘀中药肾络通能够抑制TGF-β1、TGF-β1mRNA及c-fos基因表达,减轻肾小管间质纤维化,减缓慢性肾功能衰竭的进展.     

益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1、α-SMA、HGF的影响

目的:研究益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织TGF-β1、α-SMA、HGF蛋白及其mRNA表达的影响,探讨本方抑制肾间质纤维化的作用机制。方法:132只雄性SD大鼠以单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型,造模成功后大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,西药组,益气活血降浊复方大、中、小剂量组。益气活血降浊复方大剂量组给药34.6g/kg,中剂量组17.3g/kg,小剂量组8.6g/kg灌胃给药,模型组和假手术组、正常组灌入相应0.9%氯化钠溶液,西药组灌胃福辛普利钠10g/kg,1次/d。采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1、α-SMA、HGF蛋白表达,采用Real-time PCR方法检测TGF-β1、α-SMA、HGF mRNA表达。结果:与正常组、假手术组相比,模型组大鼠第1、2、3周肾间质中TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显增多(P0.01),益气活血降浊复方大、中、小剂量组及西药组正常组、假手术组在各个时间点TGF-β1、α-SMA蛋白表达有所增加,但与模型组比较显著降低(P0.01)。正常组肾小管上皮细胞胞浆中HGF呈弱阳性表达,随着梗阻时间的延长模型组HGF蛋白表达逐渐减少,益气活血降浊复方大、中、小剂量组与模型组相比,HGF蛋白阳性表达显著增加(P0.01)。与正常组、假手术组相比,造模后第3周模型组肾组织TGF-β1、α-SMA基因高表达(P0.05,P0.01),益气活血降浊复方大、小剂量组和福辛普利钠组与模型组比较TGF-β1、α-SMA基因低表达(P0.05)。造模后第1周,正常组、假手术组HGF基因低表达,益气活血降浊复方大、中、小剂量组与模型组比较HGF基因高表达(P0.05)。结论:益气活血降浊复方可以促进内源性HGF蛋白和基因的生成,使肾组织α-SMA基因、TGF-β1基因表达降低,抑制肾间质纤维化的发展。     

抵当芪桂汤对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠心肌CTGF、α-SMA表达的影响

目的观察抵当芪桂汤对STZ诱导糖尿病大鼠心肌结缔组织生长因子(CTGF)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。方法 80只SD大鼠随机抽取10只为空白对照组(A,n=10),其余大鼠予以链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。造模成功后,将模型动物随机分为模型对照组(B,n=11)、达美康组(C,n=11)、抵当芪桂汤组(D,n=11)、抵当芪桂汤大剂量组(E,n=11)、抵当芪桂汤加达美康组(F,n=11),分别给予相应干预。于灌胃第8周末,用免疫组化法测大鼠心肌组织CTGF和α-SMA的表达。结果干预结束时与B组比较,各干预组空腹血糖均降低,以C、F组最为明显(P<0.05),各干预组大鼠心肌组织中CTGF、α-SMA表达均降低,其中以D、F组最为明显(P<0.05)。结论抵当芪桂汤可下调实验大鼠心肌组织CTGF、α-SMA的高表达,保护血管功能,延缓糖尿病心肌纤维化进程。