铅对小鼠大脑皮层神经元磷脂酰肌醇3激酶影响

目的观察慢性铅暴露对小鼠大脑皮层神经元磷脂酰肌醇3激酶(PI3Ks)表达的影响。方法昆明系小鼠出生第1 d通过饮水饲以不同浓度醋酸铅(1.2,2.4,4.8,7.2,9.6 mmol/L)制备染铅模型,对照组饲以等量自来水;6周后用石墨炉原子吸收光谱法测血铅脑铅浓度;用蛋白印迹(Western blot)法观察各组小鼠大脑皮层神经元PI3Ks的表达状况。结果慢性染铅组小鼠大脑皮层神经元PI3Ks表达水平呈下降趋势,各染铅组PI3Ks表达与对照组比较,差异有统计学意义,并具有浓度效应关系(P<0.05);PI3Ks表达与血铅浓度呈负相关(r=-0.82,P<0.01)。结论慢性染铅可使大脑皮层神经元细胞PI3Ks表达水平下降;这可能是铅导致学习记忆功能损伤的原因之一。     

不同年龄大鼠胰腺组织中胰岛素受体与磷脂酰肌醇3激酶表达水平的研究

目的：探讨大鼠胰腺组织中胰岛素受体与磷脂酰肌醇3激酶（P13K）的表达随增龄的变化。方法：35只健康sD大鼠按月龄分为五组,分别为1月龄组7只,6月龄组7只,12月龄组7只,18月龄组7只,24月龄组7只。提取胰腺组织蛋白后用Western-Blot方法检测胰岛素受体和P13K的蛋白水平,应用免疫组化方法检测胰岛素受体的分布。结果：（1）胰腺组织内胰岛索受体集中分布在胰岛细胞表面,腺泡细胞也有表达。（2）1月龄组及18月龄组大鼠胰腺组织中的胰岛素受体蛋白表达量与6月龄组比较差异有统计学意义。1月龄组P13K蛋白质表达量与6月龄组比较差异有统计学意义。结论：进入老年期,大鼠胰腺组织中胰岛素受体及P13K的表达升高。     

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号转导通路在苯醌致HL-60细胞增殖过程中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号转导通路在苯醌(BQ)致HL-60细胞增殖中的作用.方法 取对数生长期的HL-60细胞,分为对照组(PBS处理细胞)、BQ染毒组(3 μmol/L BQ染毒)、LY294002+BQ染毒组(3μmol/L BQ染毒前加20 μmol/L LY294002),用alamar blue 法检测细胞增殖率,免疫印迹(Western blot)法检测细胞内p-Akt、Akt蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期情况.结果 BQ染毒组细胞增殖率(185.00%±30.00%)和S、G2期细胞比例(分别为48.23%±1.37%、15.40%±1.21%)均高于对照组(分别为100.00%±0.00%、42.47%±0.45%、5.40%±0.40%),G1期细胞比例(36.37%±0.40%)低于对照组(52.13%±0.75%),差异均有统计学意义(P＜0.05);BQ染毒组细胞内p-Akt蛋白表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),Akt表达量与对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).LY294002+BQ染毒组细胞增殖率(82.59%±15.00%)和S、G2期细胞比例(分别为42.03%±0.50%、3.87%±0.47%)比BQ染毒组低,G1期细胞比例(54.43%±0.40%)比BQ染毒组高,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞内p-Akt蛋白表达量明显低于BQ染毒组,差异有统计学意义(P<0.05);Akt蛋白表达量与BQ染毒组的差异无统计学意义(P>0.05).结论 PI3K/Akt信号转导通路在BQ致HL-60细胞增殖过程中可能起着重要作用.

Abstract：

Objective To explore the effects of phosphatidylinositol 3-kinase/ Serine-threonine kinase (PI3K/Akt) signal pathway on the proliferation of HL-60 cells exposed to benzoquinone (BQ). Methods HL-60 cells were divided into 3 groups: control group (treated with PBS), BQ group (treated with 3 μmol/L BQ) and LY294002 plus BQ group (treated with 20 μmol/L LY294002 plus 3 μmol/L BQ). The cell proliferation was measured with alamar blue dye assay. Western blot assay was used to detect the expression of p-Akt and Akt proteins and flow cytometer was used to observe the cell cycle. Results The cell proliferation rate and the cell proportion in the S, G2 phase of BQ group were 185.00%±30.00%, 48.23%±1.37% and 15.40%±1.21%, respectively, which were significantly higher than those ( 100.00%±0.00%, 42.47%±0.45% and 5.40%±0.40%) of control group (P<0.05 ). But the cell proportion rate (36.37%±0.40% ) in the G1 phase in BQ group was significantly lower than that (52.13%±0.75% ) in control group (P<0.05). The expression level of p-Akt protein in BQ group was significantly higher than that in control group (P<0.05). The cell proliferation rate and the cell proportion in the S, G2 phase of LY294002 plus BQ group were 82.59%±15.00%, 42.03%±0.50% and 3.87%± 0.47%, respectively, which were significantly lower than those of BQ group (P<0.05). But the cell proportion rate (54.43%±0.40%) in the G1 phase in LY294002 plus BQ group was significantly higher than that in BQ group (P<0.05 ). Conclusion The PI3K/Akt signal pathway may play an important role in the proliferation of HL-60 cells exposed to BQ.     

磷脂酰肌醇3激酶和蛋白激酶B在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 研究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达和临床意义.方法 运用Western Blot和免疫组化法检测41例EOC(EOC组)、20例正常卵巢(NO,NO组)和20例良性卵巢上皮性肿瘤(BEOT,BEOT组)组织中PI3K和Akt蛋白的表达.结果 PI3K在EOC组中阳性表达率为70.7％(29/41),显著高于NO组和BEOT组[10.0％(2/20)、20.0％(4/20)],差异有统计学意义(P＜ 0.01);Akt在EOC组中阳性表达率为73.2％(30/41),显著高于NO组和BEOT组[10.0％(2/20)、30.0％(6/20)],差异有统计学意义(P＜0.01).在EOC患者中,临床分期Ⅰ～Ⅱ期PI3K和Akt蛋白的表达与Ⅲ～Ⅳ期比较差异有统计学意义(P＜0.05);浆液性囊腺癌中PI3K和Akt蛋白的表达与黏液性囊腺癌比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PI3K和Akt蛋白在EOC组织中表达显著增强,它们在EOC发生、发展中起到～定的作用,PI3K/Akt通路有望作为抗肿瘤治疗的有效新靶点.     

酒精联合高脂饮食对大鼠脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶表达的影响

目的研究酒精和高脂饮食对雄性大鼠脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)P85αmRNA及蛋白水平表达的影响。方法酒精灌胃和高脂饮食方法建立动物模型。测定空腹血糖和血胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。通过RT-PCR和Western blotting方法测定P85αmRNA及蛋白水平。结果与普通对照组相比,高脂对照组HOMA-IR指数升高;与高脂对照组相比,各剂量酒精和高脂饮食组血糖升高,胰岛素抵抗指数在低中剂量组升高,各剂量酒精联合高脂饮食组脂肪组织PI-3KP85αmRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论高脂饮食导致胰岛素抵抗;与单独高脂饮食相比,酒精联合高脂饮食加剧胰岛素抵抗程度。磷脂酰肌醇3激酶P85α mRNA及蛋白水平改变。     

磷脂酰肌醇3-激酶/雷帕霉素靶蛋白抑制剂联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/mTOR)抑制剂BEZ235联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对宫颈癌HeLa细胞增殖与凋亡的影响,分析其相关机制。方法 将宫颈癌HeLa细胞分为对照组(未加任何药物刺激)、BEZ235组(100 nmol/L)、SAHA组(10μmol/L)、联合给药组(BEZ235 100 nmol/L+SAHA 10μmol/L)。采用噻唑蓝(MTT)法检测宫颈癌HeLa细胞活力,采用Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡情况,采用蛋白质印迹法检测bcl-2蛋白、Bax蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路激活情况。结果 对照组、BEZ235组、SAHA组及联合给药组宫颈癌HeLa细胞OD值分别为(0.77±0.05)、(0.62±0.05)、(0.60±0.04)、(0.45±0.05)。与对照组比较,BEZ235组、SAHA组及联合给药组宫颈癌HeLa细胞OD值均显著降低(t=5.959,P<0.05;t=7.690,P<0.05;t=13.280,P<0.05)。与BEZ235组和SAHA组比较,联合给药组宫颈癌HeLa细胞OD值均显著降低(t=7.187,P<0.05;t=6.631,P<0.05)。BEZ235组和SAHA组宫颈癌HeLa细胞OD值比较差异无统计学意义(t=1.183,P>0.05)。对照组、BEZ235组、SAHA组及联合给药组宫颈癌HeLa细胞凋亡率分别为(5.72±0.34)%、(13.11±0.67)%、(18.36±0.75)%、(30.46±1.10)%。对照组、BEZ235组、SAHA组及联合给药组bcl-2相对表达量分别为(0.84±0.06)、(0.47±0.05)、(0.40±0.04)、(0.20±0.04),Bax相对表达量分别为(0.19±0.03)、(0.46±0.05)、(0.67±0.05)、(0.82±0.05)。对照组、BEZ235组、SAHA组及联合给药组p-AKT相对表达量分别为(0.97±0.08)、(0.72±0.07)、(0.54±0.07)、(0.22±0.05),p-mTOR相对表达量分别为(0.84±0.06)、(0.43±0.07)、(0.61±0.08)、(0.16±0.05)。结论 PI3K/mTOR抑制剂BEZ235、组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA单独或联合应用能显著抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,诱导细胞凋亡,且具有协同效应,与PI3K/AKT/mTOR信号通路进一步抑制有关。     

Ⅲ型磷脂酰肌醇-3激酶复合物调节自噬的研究进展

自噬指细胞内的物质通过膜转运方式运输到溶酶体进行降解,是一个多种因子参与的复杂过程。Ⅲ型磷脂酰肌醇-3激酶(classⅢphosphoinositide 3-kinase,PI3KC3)是酵母中Vps34的同源蛋白,通过与多种蛋白结合形成复合物,即PI3KC3复合物,主要用于调节自噬。     

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号传导通路在结肠癌中的研究进展

结肠癌是常见的恶性肿瘤之一,在我国的发病率呈逐年上升的趋势,目前排我国恶性肿瘤发病率第3位.对磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号传导通路在结肠癌的发生、发展中研究的不断深入,发现该通路在结肠癌发生、发展及治疗中存在重要价值.现就PI3K/Akt信号传导通路在结肠癌中的研究情况综述如下.     

卵巢恶性肿瘤与磷脂酰肌醇细胞信号转导通路的关系

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)是一种与细胞信号转导有关的脂类第二信使。在人类肿瘤中,已发现PI3-K信号途径的各成员具有基因结构,蛋白质表达和激酶活性等的异常改变。PI3-K在卵巢癌中有异常表达,为肿瘤早期诊断、开发新的抗肿瘤药物和寻找新的基因治疗靶点提供了新的思路。     

长期酒精作用对大鼠骨骼肌PI-3K表达的影响

目的:研究酒精长期作用下对大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI-3K)调节亚基p85αmRNA及蛋白水平表达的影响,探讨酒精引起胰岛素抵抗的相关分子机制。方法:清洁级Wistar大鼠80只(雌雄各半),按体重随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别给予蒸馏水以及10%、20%、33%酒精溶液,灌胃剂量为10ml/(kg·bw·d)。第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。分离骨骼肌,通过RT-PCR和Westernblot方法测定p85αmRNA和蛋白表达水平。结果:雄性大鼠高剂量组空腹血糖,低、中剂量组空腹胰岛素水平升高,各酒精剂量组HOMA-IR指数均升高。p85αmRNA及蛋白表达水平表现为随着酒精剂量的增加先升高后降低;雌性大鼠高剂量组空腹血糖升高、空腹血胰岛素下降,p85αmRNA及蛋白的表达在中、高剂量组降低。各剂量组HOMA-IR指数与对照组比较差异无显著性。结论:长期摄入过量酒精可以造成骨骼肌组织p85α表达的改变,这可能是酒精降低胰岛素敏感性,引起胰岛素抵抗的分子机制。     

小儿呼吸道病毒感染的实验观察

目的探讨分析小儿呼吸道病毒感染的实验观察结果。方法使用桥联酶标(APAAP)法,对呼吸道疾病住院的97例患儿,取其呼吸道分泌物,进行合胞病毒(RSV)、流感甲(FLUA)、流感乙(FLUB)及副流感Ⅲ(PIV-3)的检测。结果其阳性率为RSV33.0%、FLUA25.8%、FLUB27.8%,PIV-325.8%。同一标本可检测2~4种病毒,少单一存在。结论说明小儿呼吸道病毒感染是多种病原,其中以RSV最多。本法操作简单,特异染色显色清楚易辩。     

A novel adipokine WISP1 attenuates lipopolysaccharide-induced cell injury in 3T3-L1 adipocytes by regulating the PI3K/Akt pathway

BackgroundTo study the effect of WISP1 on lipopolysaccharide (LPS)-induced cell injury in 3T3-L1 adipocytes.MethodLentivirus was transiently transfected into log phase 3T3-L1 adipocytes, which were then treated with LPS at a concentration of 10 μg/mL for 24 h. The cells were divided into the following groups: group A (control, untreated cells); group B (LPS-treated cells); group C (GFP), cells transfected with lentivirus-containing GFP; group D (GFP+LPS), group C treated with LPS;group E (WISP1OE), cells transfected with lentivirus, group F (shNC+LPS), cells transfected with lentivirus-containing nshRNA treated with LPS; group G (shWISP1 +LPS), cells transfected with lentivirus-containing shRNA treated with LPS; group H (WISP1OE+LPS), group E treated with LPS; group I (WISP1OE+LPS+LY294002), group E treated with LPS followed by LY294002 for 24 h.ResultsWISP1 overexpression notably ameliorated cell apoptosis, accompanied with the increased expression of bcl-2, the decreased expressions of bax and cleaved-caspase-3, and promoted the release of inflammatory factors, such as tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) in LPS-treated 3T3-L1 adipocytes. WISP1 knockdown exhibited the opposite results. In addition, WISP1 stimulated Akt phosphorylation and reduced nuclear translocation of Fork head box protein O3 (FoxO3a) in 3T3-L1 adipocytes treated by LPS. The inhibition of the PI3K/Akt signaling pathway diminished the protective effect of WISP1.ConclusionWISP1 prevents 3T3-L1 adipocytes from being injured by LPS by regulating the PI3K/Akt pathway.     

二苯甲烷二异氰酸酯哮喘患者血嗜碱细胞组胺释放试验

12例二苯甲烷二异氰酸酯(MDI)哮喘患者血嗜碱细胞组胺平均释放率为32.7%,显著高于15名无症状的MDI作业工人和30名不接触MDI的对照者。嗜碱细胞组胺释放试验(HRBT)与临床诊断的符合率为91.7%,诊断指数191.7%。HRBT与特异性IgE、全血组胺、特异性抗原皮肤试验的符合率分别为83.3%、66.7%、70%。结果表明,HRBT是诊断MDI哮喘特异、敏感的体外试验方法。     

青年人群血清甲_3型流感抗体检测和流行株的抗原性分析

采集４５０例战士血清标本，分别用国家代表株甲３／济防／１５／９０（Ｈ３Ｎ２）和甲３／北京／３２／９２（Ｈ３Ｎ２）作血清血凝抑制抗体测定，青年对甲３型抗体阳性率为６０％～６７％，其ＧＭＴ为３４～４５。１９９４～１９９５年两年中在军营人群中分离到３株Ｈ３Ｎ２毒株流行株，分别应用国际、国家和地方代表株作抗原性分析，证明流行株与它们之间抗原性有明显差异。本文分离到的３株流行株均上送国家流感中心鉴定，证实为Ｈ３Ｎ２亚型毒株。     

As2O3对消化道肿瘤的粘附分子E-CD、CD44表达的影响

[目的]通过观察消化道肿瘤术前短时间,小剂量As2O3应用,探讨As2O3对消化道肿瘤的E-CD、CD44表达变化的影响。[方法]分别在手术前给与8例确诊为消化道肿瘤的患者As2O3治疗3d。在用药前和术中提取患者的病理组织。利用免疫组织化学法检测8例消化道肿瘤组织中的E-CD、CD44表达情况。[结果]应用As2O3注射液化疗后与用药前比较,肿瘤组织中E-CD、CD44表达下调。[结论]体内实验证实,As2O3的抗肿瘤作用与下调CD44、E-CD有关,抑制肿瘤的浸润与转移而起到抑制肿瘤的作用。     

重庆市3所医疗机构2014人甲型H1N1流感血清流行病学分析

[目的]了解对医疗机构就诊者甲型H1N1流感抗体水平现状,为制定针对性的防治措施提供依据.[方法]对1 367名门诊病例、277名健康体检人群和370名献血者进行流行病学调查并采集血清进行甲型H1N1流感血凝抑制(HI)试验.[结果]HI试验总体阳性率为11.8％ (95％CI:10.5％～13.3％),高滴度者(≥1:320)占阳性数的11.3％（95％CI:7.0％～15.6％),2周前出现过流感样症状之间、5～年龄组与其余3个年龄组间和是否接种甲型H1N1流感疫苗之间阳性几何平均倒数滴度(GMRT)的差异有统计学意义(P＜ 0.05);Logistic回归分析结果均显示抗体阳性率与年龄、接种甲型H1N1流感疫苗和2周前出现过流感样症状者有统计学意义.[结论]重庆市甲型H1N1流感免疫水 平较低,易发生流行,及时接种甲型H1N1流感疫苗可提高人群免疫水平.