温心胶囊对心力衰竭大鼠心肌基质金属蛋白酶组织抑制物1mRNA表达的干预效应

目的：观察温心胶囊对异丙肾上腺素诱导的充血性心力衰竭大鼠心肌基质金属蛋白酶组织抑制物1mRNA表达的影响，探讨基质金属蛋白酶组织抑制物1在心力衰竭发病中的作用及温心胶囊防治心力衰竭心肌重塑的作用机制。 方法：①实验分别于黑龙江中医药大学中医基础理论实验室和哈尔滨医科大学遗传教研室分子生物学实验室完成。②选用健康Wistar雄性大鼠60只。大鼠被随机分为5组，空白对照组，模型组，西药对照组，温心胶囊低、高剂量组，每组12只。③温心胶囊（由桂枝、黄芪、赤芍、茯苓等组成）悬液：每毫升悬液含生药量2g。④除空白对照组外，其余各组皮下多点注射异丙肾上腺素，以每天20，10和5mg／kg的递减剂量连续注射3d，再以每天3mg／kg剂量维持9d。于造模前1天起开始灌胃给药各组连续给药6周。⑤治疗结束后，连接MP100A—CE多导生理记录仪记录左室收缩压、左室舒张末压、室内压最大上升速率、室内压最大下降速率。计算心脏质量指数（心脏湿重／体质量）。进行苦味酸天狼猩红特殊胶原染色法检测，运用彩色病理图像系统分析。计算胶原面积与统计场总面积比值（反映Ⅰ型胶原含量）。应用反转录多聚酶链反应法检测心肌基质金属蛋白酶组织抑制物1mRNA表达。⑥数据间差异性比较采用单因素方差分析。 结果：实验过程中模型组，药物对照组，温心胶囊高、低剂量组分别死亡1，2，1，3只，相应组进入心脏质量指数比较的只数分别为11，10，11．9只。①室内压最大上升速率、室内压最大下降速率、左室收缩压：西药对照组和温心胶囊高剂量组明显高于模型组（P〈0．05-0．01）。②左室舒张末压：西药对照组和温心胶囊高剂量组明显低于模型组（P〈0．05-0．01）。③心脏质量指数：西药对照组和温心胶囊高剂量组明显低于模型组（P〈0．05-0．01）。④大鼠心肌Ⅰ型胶原含量：西药对照组，温心胶囊低、高剂量组明显低于模型组（P〈0．05-0．01），以温心胶囊高剂量组差异最明显。⑤心肌细胞基质金属蛋白酶组织抑制物1mRNA表达：模型组明显低于空白对照组（P〈0．01），仅温心胶囊高剂量上调效果最显著（P〈0．05）。 结论：温心胶囊能抑制细胞外基质重塑和心肌肥厚，明显改善心力衰竭大鼠心肌收缩和舒张功能，可能与其上调基质金属蛋白酶组织抑制物1mRNA表达有关。     

卡维地洛对充血性心力衰竭大鼠心肌间质基质金属蛋白酶-2表达的干预作用

目的:探讨大鼠充血性心力衰竭心肌间质基质金属蛋白酶-2的表达和心力衰竭的关系及卡维地洛干预对此的影响。方法:110只SD大鼠结扎冠状动脉左主干制备成充血性心力衰竭模型,随机分成心力衰竭对照组和卡维地洛治疗组。两组又随机分为2,4,8周亚组。另设假手术组。应用超声心动图评价大鼠心功能变化。用免疫组化方法检测MMP-2蛋白表达情况。结果:与假手术组相比,心力衰竭对照组基质金属蛋白酶-2的蛋白表达在各亚组明显升高(均P<0.05),而卡维地洛治疗组基质金属蛋白酶-2蛋白表达在4周和8周亚组明显降低(均P<0.05)。超声心动图结果显示大鼠左心室结构和功能呈现动态变化,心功能进行性降低。结论:大鼠心肌梗死后心肌间质内基质金属蛋白酶-2的表达增高,是心室重塑和心力衰竭发生发展的机制之一。卡维地洛可通过抑制基质金属蛋白酶-2的表达而改善心室重塑及心力衰竭。     

大鼠心肌成纤维细胞组织金属蛋白酶抑制剂mRNA水平检测

目的 通过建立多重反转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法，旨在测定大鼠心肌成纤维细胞组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的mRNA水平。方法 采用胶原酶-胰蛋白酶消化法培养成年雌性SD大鼠的心肌成纤维细胞。提取细胞总RNA并进行反转录反应。自行设计大鼠FIMP-1．TIMP-2和内参照GAPDH的PCR引物序列，进行多重PCR反应，PCR产物经20g／L琼脂糖凝胶电泳分析目的基因片段。结果 20g／L琼脂糖凝胶电泳在同一条泳道显示TIMP-1，TIMP-2和GAPDH3条目的DNA条带，表明成功地同时扩增了TIMP-1，TIMP-2和GAPDH基因。结论 采用多重RT-PCR方法，测定了大鼠心肌成纤维细胞TIMP-1，TIMP-2 mRNA水平，此方法为研究高血压病心肌纤维化提供了可靠手段。     

雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的：探讨雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织中细胞外基质相关因子基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制因子1的表达的影响。 方法：①实验于2004—01／09在南京医科大学实验动物中心、南京医科大学生化教研室实验室和病理教研室实验室完成。选用健康雄性Wistar大鼠18只。按随机数字表将大鼠分为3组：对照组、哮喘组、药物组，每组6只。②哮喘组和药物组于第1，8天每只腹腔内注射抗原混悬液1mL致敏；第15天开始雾化吸入10g／L鸡卵清蛋白激发哮喘，1次／d，20min／次，连续4周制作哮喘模型。每天激发前30min，药物组预先灌胃雷公藤多甙悬浮液（1．5mL）50mg／（kg&#183;d）。对照组以等量生理盐水行致敏和激发，1次／d，20min／次，连续吸入4周。③采用免疫组化法观察大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1的蛋白表达，采用反转录聚合酶联反应技术测定3组大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA的表达。④多组间均数的比较采用方差分析，组间两两比较采用q检验。 结果：大鼠18只均进入结果分析。①大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1蛋白含量：哮喘组明显高于对照组（q=9．75，7．87，P〈0．01）；经药物干预后，明显低于哮喘组（q=5．99，3．27，P〈0．05），但仍明显高于对照组（q=3．76，4．59，P〈0．05）。②大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值：哮喘组〉1，明显高于对照组（q=3．87，P〈0．05）；经药物干预后〈1，明显低于对照组（q=3．47，P〈0．05），更低于哮喘组（q=7．34，P〈0．01）。③大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA表达水平：哮喘组明显高于对照组（q=16．71，15．37，P〈0．01）；经药物干预后显著下降，明显低于哮喘组（q=11．14，7．21，P〈0．01），但未完全降至正常，仍明显高于对照组（q=5．57，8．17，P〈0．01）。④大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA比值：哮喘组〉1，明显高于对照组（q=3．45，P〈0．05）；经药物干预后〈1，明显低于对照组（q=3．45，P〈．05），更低于哮喘组（q=6．89，P〈0．01）。 结论：雷公藤多甙可能下调基质金属蛋白酶9的表达，调节基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值的平衡，干预细胞外基质重塑。     

雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及其抑制剂1表达的影响

目的:探讨雷公藤多甙对哮喘大鼠肺组织中细胞外基质相关因子基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制因子1的表达的影响。方法:①实验于2004-01/09在南京医科大学实验动物中心、南京医科大学生化教研室实验室和病理教研室实验室完成。选用健康雄性Wis-tar大鼠18只。按随机数字表将大鼠分为3组:对照组、哮喘组、药物组,每组6只。②哮喘组和药物组于第1,8天每只腹腔内注射抗原混悬液1mL致敏;第15天开始雾化吸入10g/L鸡卵清蛋白激发哮喘,1次/d,20min/次,连续4周制作哮喘模型。每天激发前30min,药物组预先灌胃雷公藤多甙悬浮液(1.5mL)50mg/(kg·d)。对照组以等量生理盐水行致敏和激发,1次/d,20min/次,连续吸入4周。③采用免疫组化法观察大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1的蛋白表达,采用反转录聚合酶联反应技术测定3组大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA的表达。④多组间均数的比较采用方差分析,组间两两比较采用q检验。结果:大鼠18只均进入结果分析。①大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9和组织金属蛋白酶抑制剂1蛋白含量:哮喘组明显高于对照组(q=9.75,7.87,P<0.01);经药物干预后,明显低于哮喘组(q=5.99,3.27,P<0.05),但仍明显高于对照组(q=3.76,4.59,P<0.05)。②大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值:哮喘组>1,明显高于对照组(q=3.87,P<0.05);经药物干预后<1,明显低于对照组(q=3.47,P<0.05),更低于哮喘组(q=7.34,P<0.01)。③大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9、组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA表达水平:哮喘组明显高于对照组(q=16.71,15.37,P<0.01);经药物干预后显著下降,明显低于哮喘组(q=11.14,7.21,P<0.01),但未完全降至正常,仍明显高于对照组(q=5.57,8.17,P<0.01)。④大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA比值:哮喘组>1,明显高于对照组(q=3.45,P<0.05);经药物干预后<1,明显低于对照组(q=3.45,P<.05),更低于哮喘组(q=6.89,P<0.01)。结论:雷公藤多甙可能下调基质金属蛋白酶9的表达,调节基质金属蛋白酶9与组织金属蛋白酶抑制剂1比值的平衡,干预细胞外基质重塑。     

慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1与固本颗粒胶囊

背景:中医药防治慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的有效性和安全性已初步得到临床认证.目的:观察COPD模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及其特异性抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1表达与固本颗粒胶囊干预的影响.方法:将50只Wistar大鼠随机等分为5组,除正常组外,其余大鼠均以烟熏及气管内滴注脂多糖的方式建立COPD模型.造模 29 d,泼尼松组、固本颗粒胶囊低、高剂量组分别灌胃给予醋酸泼尼松 1.04 mg/(kg?d),固本颗粒胶囊0.47,0.94 g/(kg?d),1次/d,观察记录大鼠的一般状况.免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达.结果与结论:COPD大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达显著增强(P < 0.05).药物干预后,COPD大鼠的一般状况明显改善,肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达有所降低;其中,醋酸泼尼松的作用最为显著,固本颗粒高剂量次之,低剂量最弱.说明固本颗粒胶囊能以剂量依赖的方式缓解COPD大鼠的临床表现,改善气道重塑,纠正COPD大鼠体内蛋白酶和抗蛋白酶失衡.     

金属基质蛋白酶及其抑制物与子宫内膜癌

细胞外基质（ECM）降解是肿瘤侵袭转移的事要信号和途径。金属基质蛋白酶（MMPs）是溶解基质的一组重要酶类。金属基质蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）是MMPs的特异性抑制物，两者的表达，代谢平衡与子宫内膜癌的浸润转移，生理病理和临床预后有密切关系MMPs-TIMPs倜节失衡，ECM降解以及基底膜消失，均可促进子宫内膜癌的发生浸润转移．MMPs．TIMPs表达量的检测可作为早期诊断，监测妇科恶性肿瘤的理想标志物，并可针对其平衡采取相应的肿瘤治疗措施。     

慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1与固本颗粒胶囊半

背景：中医药防治慢性阻塞性肺疾痫（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）的有效性和安全性已初步得到临床认证。目的：观察COPD模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及其特异性抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1表达与吲本颗粒胶囊干预的影响。方法：将50只Wistar大鼠随机等分为5组,除正常组外,其余大鼠均以烟熏及气管内滴注脂多糖的方式建立COPD模型。造模29d,泼尼松组、固本颗粒胶囊低、高剂量组分别灌谢给予醋酸泼尼松1.04mg／（kg°d）,固本颗粒胶囊O.47,0.94g／（kg°d）,1次／d,观察记录大鼠的一般状况。免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中基质金腻蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达。结果与结论：COPD大鼠肺组织中基质金属蚩白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达显著增强（P〈0.05）。药物干预后,COPD大鼠的一般状况明显改善,肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达有所降低;其中,醋酸泼尼松的作用最为显著,固本颗粒高剂晕次之,低剂量最弱。说明固体颗粒胶囊能以剂量依赖的方式缓解COPD大鼠的l临床表现,改善气道重塑,纠正COPD大鼠体内蛋白酶和抗蛋白酶失衡。     

基质金属蛋白酶组织抑制物-1在宫颈癌的表达与临床意义

目的 :探讨基质金属蛋白酶组织抑制物 - 1(TIMP- 1)在早期宫颈癌的表达和临床意义。方法 :采用免疫组织化学 SP法检测 75例早期宫颈浸润癌 (宫颈癌组 )、18例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN组 )和 15例癌旁正常宫颈上皮 (对照组 )中 TIMP- 1的表达情况 ,并检测其中微血管密度 (CD34 标记 )和癌细胞增殖标记指数 (Ki- 6 7标记 )。结果 :TIMP- 1主要表达于宫颈癌细胞膜和 (或 )细胞浆 ,Ki- 6 7主要表达于癌细胞核 ,CD34 主要表达于癌巢间质血管内皮细胞。从对照组到 CIN组再到宫颈癌组 ,TIMP- 1的阳性表达率未见显著升高 (P>0 .0 5 )。 TIMP- 1在宫颈癌中表达与 FIGO分期、组织学分级、盆腔淋巴结转移和间质浸润深度有关 (P<0 .0 5 ) ;而与年龄、组织学类型、脉管浸润、Ki- 6 7表达及微血管密度无关 (P>0 .0 5 )。 FIGO分期为 期、组织学分级为 级、有盆腔淋巴结转移及突破深肌层间质浸润者 ,其 TIMP- 1阳性表达率分别显著低于 FIGO分期为 期、组织学分级在 级以内、无盆腔淋巴结转移和浸润深度在浅肌层间质以内者 (P<0 .0 5 )。结论 :宫颈癌 TIMP- 1表达降低可能在侵袭转移中起一定作用。检测宫颈癌 TIMP- 1表达对进一步了解宫颈癌生物学行为和判断预后有一定价值。     

耐力运动大鼠跟腱胶原、基质金属蛋白酶1及其抑制剂1的表达

背景：胶原是肌腱细胞外基质中的主要成分,基质金属蛋白酶是降解肌腱细胞外基质蛋白的重要蛋白酶。目的：观察12周跑台运动对大鼠跟腱胶原、胶原Ⅰ、基质金属蛋白酶1及其抑制剂1表达的影响。方法：将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和运动组。第1周每天运动20min,速度由12m/min递增至20m/min;以后跑台速度均为20m/min,第2周坡度为5%,时间为30min,第3～12周坡度为10%,时间为40min,共运动12周。对照组正常饲养。结果与结论：末次运动后24h取大鼠跟腱。与对照组比较,运动组大鼠跟腱前胶原Ⅰα1、基质金属蛋白酶1及其抑制剂1 mRNA的表达明显升高（P〈0.05或P〈0.01）,羟脯氨酸的含量也有所增多,但与对照组比较差异无显著性意义（P〉0.05）。表明长期耐力运动可以提高跟腱中胶原的合成和降解能力。     

洛沙坦对大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的干预作用

目的:观察大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2的表达和心室重塑、心功能变化的关系及洛沙坦干预的影响。方法:实验于2004-09/2005-08在华中科技大学协和医院心血管研究所实验室进行。①取180只SD大鼠,随机取8只为假手术组(不结扎冠状动脉),其余172只大鼠结扎冠状动脉前降支复制急性心肌梗死模型。②将造模成功的67只大鼠随机分成洛沙坦组[灌胃洛沙坦30mg/(kg·d),1次/d]和模型组(灌胃等量生理盐水),两组分为术后1,7,14,28d4个亚组。③应用反转录-聚合酶链反应法及免疫组化方法检测基质金属蛋白酶2,金属蛋白酶组织抑制因子2及Ⅰ/Ⅲ胶原的表达,超声心动图评价大鼠心功能变化和心室重塑的过程。结果:75只大鼠进入结果分析。①基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2蛋白表达:模型组除术后1d基质金属蛋白酶2表达与假手术组无差异外,其他各时间点表达均高于假手术组(P<0.05);洛沙坦组术后7,14,28d金属蛋白酶2表达均低于模型组(P<0.05)。②基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2mRNA表达:模型组各时间点均高于假手术组(P<0.05),洛沙坦组术后1,14,28d基质金属蛋白酶2mRNA表达均低于模型组(P<0.05)。③心肌Ⅰ/Ⅲ胶原比例:术后14,28d,模型组显著高于假手术组(P<0.05),洛沙坦组低于模型组(P<0.05)。④超声心动图显示模型组大鼠在术后7,14,28d时心功能明显低于假手术组(P<0.01),洛沙坦组14,28d时心功能指标均较模型组明显改善(P<0.05)。结论:大鼠心肌梗死后心肌间质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2表达增高,非梗死区Ⅰ/Ⅲ胶原比例升高可能是心室重塑和心力衰竭发生发展的原因之一。洛沙坦可通过抑制金属蛋白酶2表达,逆转Ⅰ/Ⅲ胶原比例改善心肌梗死后心室重塑及心力衰竭。     

洛沙坦对大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的干预作用

目的：观察大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2的表达和心室重塑、心功能变化的关系及洛沙坦干预的影响。 方法：实验于2004-09／2005-08在华中科技大学协和医院心血管研究所实验室进行。①取180只SD大鼠，随机取8只为假手术组（不结扎冠状动脉），其余172只大鼠结扎冠状动脉前降支复制急性心肌梗死模型。②将造模成功的67只大鼠随机分成洛沙坦组[灌胃洛沙坦30mg／（kg&;#183;d），1次／d]和模型组（灌胃等量生理盐水），两组分为术后1，7，14，28d4个亚组。③应用反转录-聚合酶链反应法及免疫组化方法检测基质金属蛋白酶2，金属蛋白酶组织抑制因子2及Ⅰ/Ⅲ胶原的表达，超声心动图评价大鼠心功能变化和心室重塑的过程。 结果：75只大鼠进入结果分析。①基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2蛋白表达：模型组除术后1d基质金属蛋白酶2表达与假手术组无差异外，其他各时间点表达均高于假手术组（P〈0．05）；洛沙坦组术后7，14，28d金属蛋白酶2表达均低于模型组（P〈0．05）。②基质金属蛋白酶2及金属蛋白酶组织抑制因子2mRNA表达：模型组各时间点均高于假手术组（P〈0.05），洛沙坦组术后1，14，28d基质金属蛋白酶2mRNA表达均低于模型组（P〈0．05）。③心肌Ⅰ/Ⅲ胶原比例：术后14，28d，模型组显著高于假手术组（P〈0．05），洛沙坦组低于模型组（P〈0．05）。④超声心动图显示模型组大鼠在术后7，14，28d时心功能明显低于假手术组（P〈0．01），洛沙坦组14，28d时心功能指标均较模型组明显改善（P〈0．05）。 结论：大鼠心肌梗死后心肌间质金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制因子2表达增高，非梗死区Ⅰ／Ⅲ胶原比例升高可能是心室重塑和心力衰竭发生发展的原因之一。洛沙坦可通过抑制金属蛋白酶2表达，逆转Ⅰ／Ⅲ胶原比例改善心肌梗死后心室重塑及心力衰竭。     

充血性心力衰竭患者左室心肌收缩性及非同步性组织速度成像研究

目的利用定量组织速度成像技术(QTVI)对充血性心力衰竭(CHF)患者左室心肌收缩功能评价及其非同步性分析。方法选择左室舒张末期内径(LVIDd)≥60mm,左室射血分数(LVEF)≤40%,NYHA心功能分级Ⅱ-Ⅳ级的CHF患者65例。二维超声采集心尖四腔心、二腔心和左室心尖长轴3个切面,左心6个室壁,利用QTVI分别测量各壁基底段、中间段和心尖段的18个节段收缩期峰值运动速度(Vs),以及6个壁基底段从心电图QRS波群起始到最大收缩峰值时限(Q-Ts),计算其最大差值(Max-△Ts)。与40例正常对照组进行对比研究。结果两组左室心肌各节段Vs规律均表现为基底段>中间段>心尖段(除CHF组后间隔心尖段>基底段>中间段外)。CHF组左室心肌各节段Vs均低于正常对照组,其中降低幅度最大的是基底段达57%,中间段次之为50%,心尖段最少是43%。18个节段中除后间隔的心尖段平均Vs下降值与对照组比较无统计学意义(P>0.05),其他17个节段两组对比均有统计学意义(P<0.05)和显著统计学意义(P<0.01)。CHF6个壁基底段Q-Ts均延长,Max-△Ts平均83.08±40.19ms,与对照组比较有显著统计学意义。结论QTVI技术能准确、同时显示CHF患者室壁多个节段的心肌运动速度和时相,从而了解心肌整体和局部功能,有效评估心肌运动协调性。     

川芎嗪对肝星状细胞基质金属蛋白酶13和金属蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

背景:既往动物实验表明,川芎嗪能降低肝纤维化大鼠血清Ⅲ型胶原、透明质酸及层粘连蛋白水平,延缓肝纤维化的形成,但其具体作用机制尚不清楚.目的:观察川芎嗪对肝星状细胞增殖及基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA表达的影响,并探讨川芎嗪抗肝纤维化的可能机制.设计、时间及地点:观察性实验,于2006-11/2007-06在重庆医科大学基础医学研究所完成.材料:盐酸川芎嗪注射液(10 mL∶80 mg),使用时用含体积分数为0.1小牛血清的1640培养基稀释,为巴里莫尔制药(通化)有限公司产品;肝星状细胞株HSC.T6,系SV40转染SD大鼠肝星状细胞而成,其表型为活化的肝星状细胞,由中国医学科学院肿瘤研究所提供.方法:培养肝星状细胞株,传至三四代时增殖明显即可用于实验.实验分为2组,空白对照组:仅加入细胞:药物干预组:分别加入川芎嗪0.01,0.1,1,10,50,100,200,400,600,1 000 mg/L后作用于HSC-T6.主要观察指标:四甲基偶氮唑盐比色法测定肝星状细胞增殖:ELISA法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原及透明质酸质量浓度;反转录-聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶13和基质金属蛋白酶13 mRNA的表达.结果:①与空白对照组相比,川芎嗪100～1 000 mg/L各剂量组作用不同时间的吸光度值均降低(P<0.01).在川芎嗪100-1 000 mg/L这一质量浓度范围内,随着药物质量浓度加大,对细胞的抑制作用增加.②川芎嗪(100,200 mg/L)对Ⅰ、Ⅲ型胶原、透明质酸的产生有抑制作用(P<0.05～0.01),并随着药物质量浓度增加,抑制作用增强.10 mg/L川芎嗪对Ⅰ、Ⅲ型胶原均没有影响,但可以降低透明质酸质量浓度(P<0.05).③100,200 mg/L川芎嗪可促进基质金属蛋白酶13的表达,随药物质量浓度增大,基质金属蛋白酶13/基质金属蛋白酶组织抑制因子1比值增大(P<0.05～0.01).结论:川芎嗪抗纤维化的可能机制是抑制肝星状细胞的增殖:促进基质金属蛋白酶13的表达,从而促进胶原降解,使细胞外基质减少.     

Myostatin expression in ventricular myocardium in a rat model of volume-overload heart failure

BACKGROUND: Mechanical stress increases myocardial myostatin expression. However, the expression of myostatin in chronic heart failure resulting from volume-overload and after treatment with beta-blockers is little known. The authors hypothesize that myostatin plays a role in the failing myocardium because of volume-overload. MATERIALS AND METHODS: Aorto-caval shunt was created over a 4-week period in adult Sprague-Dawley rats to induce volume-overload heart failure. RESULTS: Heart weight and body weight ratio significantly increased after shunting. The left ventricular end-diastolic dimension also significantly increased. Treatment with carvedilol in the shunt group reversed the increase in heart weight and ventricular dimension to the baseline values. Myocardial and skeletal myostatin proteins were up-regulated in the shunt group. The mRNA of myocardial myostatin also increased in the shunt group. Treatment with carvedilol reversed both protein and mRNA of myocardial myostatin to the baseline values. Treatment with N-acetylcysteine and doxazosin partially decreased myostatin mRNA and protein expression as compared with the shunt group. Carvedilol normalized the increased immunohistochemical labelling of myocardial myostatin in the shunt group. CONCLUSION: Myocardial myostatin mRNA and protein expression were up-regulated in the rat model of volume-overload heart failure. Treatment with carvedilol is associated with a limitation of increased myostatin expression in the failing ventricular myocardium.     

充血性心力衰竭患者血清基质金属蛋白酶-9的变化及临床意义

目的:探讨充血性心力衰竭(congestive heart failure,CHF)患者血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)浓度的变化及其临床意义.方法:80例CHF患者为CHF组,60名体检健康者为对照组.用酶谱法测定两组的血清MMP-9,用ELISA法测定血浆N末端前脑钠肽(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)的水平,并用UCG测定左心室收缩末期容积(left ventricular end systolic volume,LVESV)、LVEDV、左心室收缩末内径(left ventricular end systolic diameter,LVESD)、左心室舒张末内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD),计算左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF).分析CHF组的血清MMP-9与血浆NT-proBNP水平、LVESV、LVEDV、LVEF、LVESD、LVEDD的相关性.结果:CHF组的血清MMP-9水平显著高于对照组,且随着心力衰竭程度的加重而显著增加(P＜0.01);MMP-9与NT-proBNP的水平、LVEDV、LVEF具有良好的相关性(r=0.79,P＜0.01;r=0.34,P＜0.03及r=0.33,P=0.04).结论:血清MMP-9可能参与CHF的左心室重塑,检测其水平有助于判断CHF病情的严重程度.     

强心冲剂对慢性充血性心力衰竭模型大鼠心肌β受体的影响

目的　评价强心冲剂对慢性充血性心力衰竭模型大鼠心肌 β受体的影响。 方法　用腹主动脉缩窄法造成慢性充血性心力衰竭大鼠模型 ,采用放射配体结合试验检测方法 ,评价强心冲剂对慢性充血性心力衰竭模型大鼠 β受体的影响。结果　CHF模型大鼠 β -受体密度显著下调。卡托普利组和生脉饮组 β-受体密度显著低于对照组 (P <0 0 5 ) ,强心冲剂高剂量组 β -受体密度高于卡托普利和生脉饮组 ,达到4 835± 1 0 5 2fmol/l,仍低于对照组 ,但与对照组比较无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　强心冲剂可以提高CHF模型大鼠心肌 β -受体密度 ,而卡托普和生脉钦对CHF模型大鼠心肌 β -受体密度无明显影响     

阿司匹林对慢性心力衰竭患者凝血状态的干预作用

目的：了解慢性心力衰竭患者体内凝血状态的变化，并观察短期使用小剂量阿司匹林对其凝血状态的干预作用。方法：选择2004-01／2005-07安徽医科大学第一附属医院收治的60例慢性心力衰竭患者（心功能Ⅱ～Ⅳ级），随机分为标准抗心力衰竭组30例及阿司匹林组30例。标准抗心力衰竭组接受标准抗心衰治疗，包括血管紧张素转化酶抑制剂单用或加用利尿剂，合用地高辛0．125～0．25mg／d，心功能Ⅱ～Ⅲ级患者加用β-受体阻滞剂；阿司匹林组在标准抗心衰治疗基础上，加阿司匹林75～100mg／d。在进入试验第1天和治疗2周后采集血标本，分别测定血浆P-选择素、血浆血管性假性血友病因子、D-二聚体水平。以30例同期健康体检者为正常对照组。结果：90例受试者全部进入结果分析。①慢性心力衰竭患者血P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平明显高于正常对照组[（21．17&;#177;4．05），（16．78&;#177;3．26）g／L；（175．63&;#177;28．16）％，（125．78&;#177;24．95）％；（0．86&;#177;0．24），（0．51&;#177;0．15）mg／L，P均〈0．05]。②标准抗心力衰竭组治疗后P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平较治疗前均下降[（18.02&;#177;2.65），（21.45&;#177;3.97）g/L；（156.23&;#177;20．13）%，（175．23&;#177;25．6）%；（0．62&;#177;0．19），（0．87&;#177;0．21）mg／L；P均〈0．05]。③阿司匹林组治疗后P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平较治疗前也显著下降[（16．39&;#177;3．05），（20．87&;#177;4．06）g／L；（149．21&;#177;23．56）％，（176．01&;#177;28．12）％；（0．56&;#177;0．20）mg／L，（0．84&;#177;0．19）mg／L；P均〈0．05]。④标准抗心力衰竭组和阿司匹林组患者治疗前血P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平差异无显著性（P〉0．05）；治疗后阿司匹林组组各指标均低于标准抗心力衰竭组，但无统计学意义（P〉0．05）。结论：慢性心力衰竭患者体内存在高凝状态，有血栓形成的倾向，短期使用小剂量阿司匹林对心衰的凝血状态影响小，慢性心力衰竭患者阿司匹林使用的剂量及疗程有待于进一步研究。