妊娠期糖尿病中胎盘外泌体对滋养细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

目的：探讨妊娠期糖尿病（GDM）中胎盘外泌体对滋养细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法： 选取2018 年3 月至2019 年4 月间重庆市第七人民医院50 例诊断为GDM患者（GDM组）,另选取50 例正常孕产 妇作为对照组。分离纯化GDM组和对照组孕产妇外周血血浆中的胎盘外泌体,通过透射电镜观察外泌体的形 态,纳米粒径分析检测外泌体的直径,免疫印迹检测外泌体标志性蛋白CD63、TSG101 及胎盘标志性分子胎盘 碱性磷酸酶（PLAP）的表达。PKH67染色后荧光共聚焦显微镜观察体外培养滋养细胞系对外泌体的摄取情况; 应用MTT实验检测外泌体对滋养细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测外泌体对滋养细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI 双染色结合流式细胞术检测外泌体对滋养细胞凋亡的影响。结果：成功从外周血中分离获得了胎盘外 泌体,形态呈典型的杯状或双凹状,直径为40 ～ 120 nm,CD63、TSG101、PLAP 表达呈阳性;与对照组相比, GDM组胎盘外泌体以浓度依赖性促进滋养细胞的增殖、细胞周期进展,并抑制滋养细胞的凋亡。结论：GDM中 胎盘外泌体可能通过促进滋养细胞的增殖、细胞周期进展,抑制滋养细胞凋亡等参与GDM的发生和发展。     

胎盘间充质干细胞来源人工外泌体的一种制备方法

目的探讨一种利用小鼠胎盘间充质干细胞(mPMSCs)制备人工外泌体的方法。方法采用胶原酶消化法从小鼠胎盘组织中分离培养mPMSCs,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,鉴定其多向分化潜能;利用机械挤压法使mPMSCs依次通过孔径为10、5、1μm的径迹蚀刻膜,经离心纯化后得到人工外泌体;采用超速离心法分离mPMSCs来源的外泌体,并采用透射电镜对比观察形态结构、纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)检测粒径和浓度、蛋白免疫印迹法检测表面标志物。结果通过胶原酶消化法分离培养的小鼠mPMSCs,形态呈长梭型,较为均一,细胞表面高表达CD29、CD44、CD105,不表达CD45、CD34,具有成骨、成脂细胞诱导分化潜能;通过机械挤压法制备得到的人工外泌体在电镜下形态呈圆球形囊泡状,与mPMSCs来源外泌体形态类似;人工外泌体平均粒径为(130.7±5.7)nm,浓度为(5.01±1.08)×10~(11) particles/mL,mPMSCs来源外泌体粒径为(146.7±4.9)nm,浓度为(4.34±0.97)×10~9 particles/mL;蛋白免疫印迹法检测得到人工外泌体和mPMSCs来源外泌体表面均表达抗原CD63、CD81和Tsg101。结论通过机械挤压法可较高效获得人工外泌体,该人工外泌体与通过超速离心法提取得到的mPMSCs来源外泌体具有相似的生物学特性,这为后期将其作为药物载体奠定了一定的研究基础。     

阿司匹林对早发子痫前期外泌体诱导滋养细胞功能的作用

目的 构建子痫外泌体细胞模型研究阿司匹林改善滋养细胞功能并预防子痫前期（PE）的作用及分子机制。方法 收集早发型PE病例14例和正常孕妇作为对照8例,提取血浆外泌体。体外培养人滋养细胞HTR-8/SVneo,分别加入不同浓度的PE外泌体造模并给予阿司匹林处理;CCK-8法检测滋养细胞增殖情况;细胞划痕和Transwell小室检测滋养细胞迁移、侵袭变化;RT-qPCR和Western blot检测血管内皮生长因子（VEGF）mRNA和蛋白表达水平情况;ELISA法检测孕妇血浆VEGF水平。结果 PE外泌体可以显著抑制滋养细胞活力,且PE孕妇血浆中VEGF浓度低于NC组。体外PE外泌体滋养细胞模型实验证实,与NC组相比,100μg/mL PE外泌体显著抑制滋养细胞增殖、影响滋养细胞迁移、侵袭能力,抑制内皮细胞HUVEC小管形成功能,降低VEGF的表达（P<0.001）;而给予阿司匹林处理后,滋养细胞增殖、迁移、侵袭能力以及内皮细胞小管形成功能均改善。结论 阿司匹林提高滋养细胞增殖、迁移和侵袭能力,改善PE外泌体诱导后滋养细胞功能损伤,提高VEGF水平。这为阿司匹林用于早发型PE的预防...     

外泌体定量技术研究

正在上世纪80年代Trams等~([1])最早于培养的绵羊红细胞上清液中发现外泌体(exosomes,ES),并首先提出了ES概念。ES是由细胞主动分泌的直径在40~100 nm的囊泡结构~([2]),由磷脂双分子层包裹了细胞质组成,它包含亲代细胞的蛋白质、DNA、RNA、小分子等。近年来,研究人员陆续观察了不同类型细胞中ES的形成过程,并且能够从血浆、尿     

外泌体调控树突状细胞免疫功能的研究进展

树突状细胞（DC）是机体内抗原提呈能力最强的一类抗原提呈细胞（APC）,是联系固有免疫和适应性免疫的纽带。外泌体为体内活细胞分泌的双层囊泡小体,携带多种生物活性物质,参与细胞间信息传递和物质交换。内容物含量、大小、细胞来源等特征的不同组合导致了外泌体的高度异质性,因此,外泌体对DC功能调节的方式及机制具有复杂性和不确定性。本文系统回顾近年外泌体参与DC功能调控的研究进展,并对工程化外泌体的开发策略与应用现状进行总结,以期为后续研究和应用提供参考。     

外泌体miRNAs在器官纤维化中作用的研究进展

外泌体是由多种细胞主动分泌产生的可携带蛋白质、脂质、miRNAs等生物分子的微小囊泡。外泌体微小RNAs(miRNAs)稳定的存在于体液循环中,参与器官多项病理过程。在器官纤维化疾病中,外泌体miRNAs的含量与正常组织相比呈现出明显的差异性表达,通过调控不同信号通路促进或抑制器官纤维化。外泌体miRNAs可作为临床诊断器官纤维化及判断其纤维化程度的最新生物指标和纤维化疾病新的治疗靶点。     

外泌体在病毒感染中的研究进展

外泌体（exosomes）是由细胞释放至胞外的膜性囊泡,直径40~100nm。外泌体可介导细胞间信息传递和物质交换,在疾病的发生发展中发挥着重要作用。在病毒感染过程中,外泌体既可传递病毒核酸、RNA和蛋白质,又可传递抗病毒分子引起免疫应答。通过对外泌体的深入研究,可在病毒感染临床治疗中提供新前景。     

外泌体在骨再生领域的应用进展

外泌体(Exos)是一种由细胞分泌的具有脂质双分子层结构的囊泡,形态似杯状,分子直径在30～140 nm。目前,外泌体在疾病的早期诊断、药物靶向运输、组织再生上已经表现出了强大的潜力。在骨组织工程中,外泌体能够传递特殊的蛋白、miRNAs、生物活性因子等促使间充质干细胞朝着成骨细胞分化,通过激活某些信号通路来上调成骨相关的基因,修复骨缺损和实现骨再生。     

外泌体miRNA在心血管疾病中的研究进展

<正>心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)是全球高发性疾病,其中冠心病(coronary heart disease,CHD)是世界范围内的主要死亡原因,在老年人群中死亡率和发病率不断上升[1],与微小RNA(microRNA,miRNA,miR)的调节密切相关[2]。研究报道,miRNA调节大量信号通路,可通过外泌体(exosome)实现细胞间传递,参与细胞间的信息交流[3],其严格     

外泌体与肿瘤发展相关性的研究进展

外泌体是一类直径介于30～100 nm之间的胞外囊泡,包含多种蛋白质、核酸与脂类成分,可由大多数细胞分泌.外泌体在细胞间通讯中发挥着重要作用.越来越多的研究表明,外泌体可通过多种途径将其内含物运送至受体细胞,进而调控受体细胞的功能,特别是促进肿瘤细胞的生长与转移,但其中的机制尚未完全清楚.同时,凭借其传递特性,外泌体在运载药物与肿瘤诊断方面也具有巨大潜能.本综述主要介绍外泌体的基本概况及其与肿瘤发展相关的最新进展,为肿瘤的诊疗提供新的靶点与方向.     

外泌体在心血管疾病中的研究进展*

AIM: Exosomes are bi-lipid membrane originated in the cell endocytosis system and secreted into the extracellular matrix. The cells secrete exosomes into extracellular matrix to impact target cells with the significant functions of cell-cell information transmission and immunological regulation. Recent studies show that cell-cell communication regulated by exosomes can be found in both physiological and pathological conditions of cardiovascular diseases (CVD). Exosomes derived from many types of cells (such as myocardial cells, endothelial cells and stem cells) play an important regulatory role in the pathogenetic mechanism of CVD. Meanwhile, exosome-based investigations have shown huge potential for the treatment of CVD. This review will focus on the biological characteristics and functions of exosomes in the diagnosis and treatment of CVD.     

外泌体在肿瘤血管新生中的作用

肿瘤的生长与转移依赖于充足的血管生成以及血液供养,越来越多的研究证实肿瘤来源的外泌体参与促进肿瘤血管新生。本文通过综述外泌体如何驱动血管新生,为改进现有的抗血管生成疗法增加新的选择。     

外泌体的功能浅析

外泌体是一种由多种细胞分泌,直径在40~100 nm左右的微小囊泡,其间包含了丰富的蛋白质, miRNA以及RNA片段,能够参与细胞之间的物质转导和信号交流。本文将从外泌体的形成、分泌、构成,以及与肿瘤,心血管疾病,神经系统疾病的关系等方面进行综述。     

外泌体在前列腺癌诊疗中的研究进展

前列腺癌(PCa)是男性常见的恶性肿瘤。外泌体是存在于人体多种体液中的双层膜囊泡,携带核酸、蛋白等物质,介导细胞间通讯。外泌体可以促进前列腺癌的生长,协助免疫逃逸及化学治疗耐药,诱导血管生成、上皮细胞间充质转化(EMT)并为转移前生态位的形成提供条件,进而促进前列腺癌的侵袭和转移。基于肿瘤细胞与正常细胞分泌的外泌体成分不同,外泌体可作为前列腺癌诊断、预测侵袭转移、评估患者预后及药物疗效的生物标志物,并有望作为药物运输载体,在肿瘤的精准治疗中具有广阔的前景。     

间充质干细胞及其外泌体在脊髓损伤中的研究进展

脊髓损伤(SCI)往往给患者带来巨大的心理、经济负担。随着研究的深入,人们对SCI的病理生理机制逐步有了清晰的认识。细胞移植治疗给SCI患者带来了新的希望,诸多研究表明间充质干细胞(MSCs)移植能够对SCI的各个病理生理过程产生一定积极的作用。但SCI极其复杂的病理生理机制加之MSCs移植本身也存在一定局限性,使得MSCs移植疗法陷入了瓶颈。近年来,针对外泌体的研究兴起为MSCs治疗SCI提供了新的思路,从过去的"细胞移植疗法"中诞生出了"无细胞疗法"。     

胎盘生长因子与妊娠

胎盘生长因子(PGF)是血管内皮生长因子(VEGF)家族的一个成员,主要在胎盘表达,但在病理情况下,PGF也在其他组织表达.在胎盘形成过程中,PGF可能直接或间接调节血管的形成、血管的通透性以及内皮细胞和滋养细胞成活.在妊高征、胎儿宫内发育迟缓(IUGR)、Down氏综合征和妊娠合并滋养细胞疾病中,PGF表达发生改变.     

外泌体在缺血性脑卒中的研究进展

正1外泌体概述外泌体是直径在30~100 nm的胞外囊泡,通过细胞被释放到细胞外液中~([1])。它们存在于生物体液中,诸如血液和脑脊液。外泌体携带有DNA、RNA、蛋白质和脂质等。由于外泌体的微泡结构为其内在的小分子提供了一个安全稳定的环境,同时这些信号小分子利用循环系统在胞间信号交换发挥重要作用,这让外泌体表现出一个成熟、稳定的信号传输系统~([2])。研究发现,外泌体中的m RNA和micro RNA