急性白血病多药耐药相关基因表达与临床关系的研究

目的：分折和评估急性白血病bcl—2、bax、p170及CD34等耐药相关指标表达的临床价值。方法：p170、CD34检测采用活细胞间接免痰荧光法，bcl—2、bax检测采用使亲和素--胶体全原位杂交法(ISH—SAG)。结果：急性白血病复发难治组的bcl--2、bcl—2/bax的阳性表达率(76．9％，88．5％)均显著高于缓解组(44．1％、20．6％)及初治组(42．0％、59．0％)(P＜0．05)，而bax的阳性表达率在缓解组(70．6％)显著高于复发难治组(34．6％)(P＜0．05)，CD34的阳性表达在复发难治组(23．1％)显著高于缓解组(2．9％)(P＜0．05)．而p170的表达率在两组之间无显著性差异(P＞0．05)。疗效分析发现bcl—2、bcl—2/bax的表达与临床缓解密切相关，其阴性组的完全缓解率(CR)显著高于阳性组(P＜0．05)。而p170、CD34及bax三个指标均显示与CR无关(P＞0．05)。线性相关分析发现bcl—2和bax之间显著相关(r＝0．33，P＜0．01)，而p170、CD34与二者均无相关性。bcl—2及bcl—2/bax的敏感性(76．90％、88．50％)高于p170、CD34及bax(46．2％、23．1％、34．6％)，这些指标联合检测的敏感性为92．3％。结论：bcl—2及bcl—2/bax的高表达预示者急性白血病预后不良，可作为预测急性白血病疗效、预后的较敏感的指标，多指标联合检测有利于临床耐药分折。     

白血病bcl-2,pI7O,CD_(34)表达的临床意义及其相关性

目的 :探讨和分析白血病bcl- 2 ,p170 ,CD34 表达的临床意义及其相关性。方法 :用ABC免疫细胞化学法检测 77例急性白血病和 2 3例慢性粒细胞白血病bcl- 2 ,p170 ,CD34 的表达。结果 :复发、难治急性白血病bcl- 2 ,p170 ,CD34 的表达率明显高于初治急性白血病 ;bcl- 2 ,p170 ,CD34 高表达的急性白血病完全缓解率显著低于不表达或低表达者 ;加速 /急变期的慢性粒细胞白血病CD34 表达高于慢性期 ;bcl- 2高表达的阳性符合率为 90 .9% ,略高于p170或CD34 ;白血病bcl- 2 ,p170的表达有轻度正相关性 (r =0 .3 86,P <0 .0 0 1)。 结论 :bcl- 2为较敏感的临床预测指标 ,联合检测bcl- 2 ,p170 ,CD34 可能提高单一指标的预测价值。CD34 可能是CML病程进展的指标。而不同多药耐药机制可能有一定的联系     

复发／难治性急性白血病bcl-2、P170的检测研究

目的：探讨bcl-2、p170在复发／难治性急性白血病中的表达及其与预后的关系。方法：采用链亲和素—胶体金法和活细胞间接免疫荧光法分别检测了73例急性白血病(AL)患者的bcl-2、p170表达。结果：不管在初治还是复发／难治AL患者中bcl-2、p170的表达均与患者一般情况无关。在复发／难治组中bcl-2、p170的表达率明显高于初治组。在接受化疗的AL中bcl-2-组的29例中有23例达完全缓解(CR)(CR率79.3％)，bcl-2+组的13例仅2例CR(CR率15.4％)，两组CR率差异具有显著性(P＜0.001)，而p170+组4例，2例CR(CR率50.0％)；p170-组38例，23例CR(CR率60.5％)，二者相比差异无统计学意义(P＞0.05)。bcl-2与AL的阳性符合率84.6％，阴性符合率79.3％。结论：bcl-2+高表达的AL其CR率低，其过度表达是造成耐药的重要原因，是判断AL的预后的一项敏感指标。     

急性白血病组织中端粒酶活性与p170共同表达及其临床意义

目的：探讨急性白血病(acutc leukemia，AL)组织中中端粒酶和p170共同表达与患者化疗疗效及预后的关系。方法：采用TRAP法检测43例AL患者治疗前、后端粒酶活性；流式细胞仪检测p170表达。结果：端粒酶活性与p170表达呈正相关性，r=0．745，P=0．02；双阳者CR率为29．4％(5/17)；双阴者CR率高达83．3％(10／12)；两者差异有统计学意义，P=0．04。结论：AL患者端粒酶与p170共表达者临床缓解率更低，更有预后意义。     

白血病bcl-2、CD_(34)表达的临床意义

目的探讨白血病bcl-2、CD34表达的临床意义和相关性。方法用ABC免疫细胞化学方法检测77例急性白血、23例慢性粒细胞白血病bcl-2、CD34的表达。结果复发／难治急性白血病bcl-2、CD34的表达高于初治者;慢粒白血病加速期／急变期组高于慢性期组。bcl－2、CD34高表达的急性白血病完全缓解率低,早期复发率高.bcl-2与CD34的表达呈轻度正相关（r＝0．367,P＜0．001）。结论bcl－2、CD34高表述可能与急性白血病预后不良有关。bcl－2的表达增高可能是CD34高表达的急性白血病预后不良的原因之一。     

60例儿童初治急性白血病p170表达及其临床意义

目的 :探讨儿童急性白血病 (AL ) p170表达与临床预后及其他临床特征的关系。方法 :流式细胞仪间接免疫荧光法检测 6 0例 AL患者 p170表达。结果 :6 0例患者中 p170阳性表达率为 33.3% ,p170表达与性别、年龄、外周血白细胞数、FAB分型、免疫分型、染色体改变等无关。在急性淋巴细胞性白血病 (AL L ) ,p170阳性与阴性患者的完全缓解 (CR)率分别为 10 0 %、96 % (P>0 .1) ,复发率为 40 %、0 (P=0 .0 0 6 ) ;在急性非淋巴细胞性白血病(ANL L ) ,p170阳性与阴性患者 CR率分别为 6 2 .5 %、10 0 % (P=0 .0 49) ,复发率为 6 0 %、0 (P=0 .0 2 2 ) ,难治性为75 %、0 (P=0 .0 0 15 )。结论 :在儿童 AL患者 p170表达阳性是一个独立的预后不良因素     

105例急性髓系白血病p 170、GSTP—1表达分析

目的 分析成人急性髓系白血病（AML）的原发性耐药蛋白p170、GSTP－1表达和疗效、预后的关系。方法 采集AML患者治疗前骨髓液,采用ABC－AP法检测p170、GSTP－1。结果 1．105例初治AML中12例（11．4％）出现p170或GSTP－1的阳性表达。2．耐药表达阳性的12例中CR6例（50％）,有效率9CR＋PR）66．7％;3．12例耐药表达阳性的患者中目前7例死亡,2例复发,从总生存曲线来看下降较快。无病生存曲线反映18个月追踪仅剩25％左右,与耐药表达阴性组比较有显著性差异（PO＜0．05）。结论 成人AML原发性耐药的表达是治疗效果差的指标之一,与预后直接相关。     

bcl—2,bax和mdr1基因表达与急性白血病的治疗及预后

目的：研究探讨bcl-2基因,bax基因和mdr1基因表达与急性白血病的治疗及预后的关系，方法：用链亲和亲－胶体金原位杂交检测了56例AL患者的bcl-2,bax和mdr1基因表达。结果：bcl-2和mdr1基因低表达及bax基因高表达患者的完全缓解率（CR）高，bcl-2／bax比值＜0．6,患者的CR率更明显高于＞1．2者（P＜0．001）。结论：bcl-2,mdr1及bax基因表达是AL相对预后不良因素，bcl/bax比值更是决定AL预后好坏的关键指标。     

CD45设门多参数流式细胞术在急性白血病免疫表型分析中的应用

目的：分析急性白血病的抗原表达及其临床意义。方法：采用一组系列相关单抗直接免疫荧光标记CD45设门的多参数流式细胞术,检测35例急性白血病患者的免疫表型。结果：11例ALL中B－ALL8例,T－ALL3例,其中出现髓系抗原表达4例,占36．4％,CD34表达10例,占90．1％;24例AML中伴淋系抗原表达7例,占29．17％,CD34表达16例,占70．8％,DR的表达与CD34一致,5例M3患者均无CD34和HLA DR表达。伴髓系统原表达的ALL CR率低于髓系抗原阴性表达者（1／3及5／6）,但统计学上差异无显著性（P＞0．05）;伴淋系抗原表达的AML患者CR率明显低于淋系抗原阴性表达者（0／5及10／10）,两组间差异具有显著性（P＜0．01）。结论：CD45设门的多参数流式细胞术是分析白血病免疫表型的最好方法,白血病抗原的错义表达是预后不良的因素之一。     

Bcl-2、CD44在肺癌组织中的表达及意义

 目的　探讨Bcl 2、CD4 4s及CD4 4v6在肺癌中的表达情况及其与肺癌预后及转移的关系。方法　以SP法研究 83例原发性肺癌及 16例肺良性疾患。结果　Bcl 2、CD4 4s及CD4 4v6在肺癌组织中表达显著升高 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,且表达强度与肺癌类型及临床分期有关 (P <0 .0 1) ,但与肺癌的分化程度无关 (P >0 .0 5 )。结论　Bcl 2可能参与了肺癌的发生发展过程 ,并可作为肺癌预后的一个指标。CD4 4v6阳性可能对肺癌转移及临床分期起一定作用。     

免疫分型对急性白血病诊断及预后诊断的意义

目的探讨免疫分型对急性白血病的分型诊断及预后诊断的价值。方法采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶复合物(APAAP)法检测53例急性白血病患者的免疫分型。结果 免疫分型诊断急性髓系白血病(AML)27例,T淋巴细胞白血病(T-ALL)8例,B淋巴细胞白血病(B-ALL)10例,混合型自血病(ABL)6例,未分化型自血病(AUL)2例。T-ALL CD7阳性最常见,B-ALL CD19阳性最常见。AML中抗原表达依次为CD33>CD13>CD14>CD15,CD34/CD34/HLA-DR表达阳性率为64.2％。AML中阳性病例完全缓解率低于阴性病例。ABL及AUL治疗效果差。结论 白血病免疫分型可提高确诊率,并为预后判断提供依据。     

白血病bcl-2,p170,CD34表达的临床意义及其相关性

目的：探讨和分析白血病ｂｃｌ－２,ｐ１７９０,ＣＤ３４表达的临床意义及相相关性。方法：Ｅ和ＡＢＣ免疫细胞化学法检测急性白血病和２３例慢性粒细胞白血病ｂｃｌ－２,Ｐ１７０,ＣＤ３４４的表达。结果：复发、难治急性白血病ｂｃｌ－２、ｐ１７０、ＣＤ３４的表达率明显高于初治急性白血病;ｂｃｌ－２,Ｐ１７０,ＣＤ３４高表达的急性白血病完全缓解率显著低于低于不表达或低表达者;加速／急变期的慢性粒细胞白血病（ＣＤ     

CD56~ 急性髓系白血病血液学特征及其临床意义

目的 :研究CD5 6 急性髓系白血病 (AML)血液学特征及临床意义。方法 :流式细胞计数仪检测白血病细胞分化抗原的表达 ;RT PCR检测EBV mRNA ;电镜及免疫电镜观察超微结构 ;回顾性分析初诊时血液学特点、临床表现及对化疗的反应。结果 :CD5 6表达率为 30 .6 2 %(79 2 5 8) ;CD5 6 AML中未见EBV感染 ;电镜及免疫电镜发现CD5 6 AML细胞核中存在 1— 2团絮状结构 ;CD5 6的表达与年龄、性别、WBC、Hb、BPC、BM中白血病细胞数、CR率及CR期无关 (P值分别为 0 .12 8,0 .877,0 .181,0 .86 6 ,0 .6 2 9,0 .40 7,0 .998,0 .0 96 ) ;与较多的髓外侵润(77.78%对 6 1.11%,P =0 .0 19)、CD34表达 (6 6 .6 7%对 46 .48%,P =0 .0 3)、P170表达 (5 1.79%对 34 .94%,P =0 .0 48)及较短的生存期有关 (中位数 ,11.5个月对 18个月 ;P值 0 .0 478)。结论 :CD5 6 AML是一种特殊类型的白血病 ,预后较差 ,应进一步分型并针对性治疗。     

流式细胞术检测急性白血病P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白及bcl-2的临床意义

目的 研究急性白血病(AL)患者的P-糖蛋白(p170)、多药耐药相关蛋白(MRP)及bcl-2三种相关蛋白的表达情况,探讨其在AL患者多药耐药中的作用及相互关系.方法 AL患者44例,其中急性非淋巴细胞白血病(ANLL)29例,急性淋巴细胞白血病(ALL)15例,采用不同的化疗方案分别进行2个疗程的标准剂量化疗,按照治疗效果分为完全缓解(CR)组和诱导缓解失败(NR)组.选用12例同期就诊的健康人及良性血液病患者为对照,采用流式细胞术分别测定其p170、MRP、bcl-2的表达情况.结果 AL患者p170、MRP、bcl-2蛋白的表达均显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).p170和MRP表达在各型白血病中CR组均低于NR组;NR组24例中22例至少有一或二种蛋白表达增高,且表达具有一定的一致性(P＜0.01).bcl-2的高表达与治疗反应差有关,CR组患者的bcl-2表达明显低于NR组(P＜0.05).结论 p170、MRP、bcl-2均与AL多药耐药的发生有关,是导致预后不良的重要因素.提示bcl-2导致耐药的机制不同于经典的p170途径.     

急性白血病患者造血干细胞P-选择素表达的研究

 目的　研究急性白血病（AL）患者骨髓白血病干细胞表面分子P-选择素（CD62P）的表达情况及其临床意义。方法　采用流式细胞术（FCM）检测56例初治AL患者骨髓CD62P的表达情况,以15例健康成年人骨髓标本为对照。结果　38例急性髓系白血病（AML）患者干细胞（CD+45 CD+34 CD-38）中CD62P平均表达水平为（6.72±7.64）%,12例急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者干细胞（CD+45 CD+34 CD+19）为（3.46±2.51）%,6例急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患者干细胞（CD+45 CD+34 CD+7）为（6.23±4.95）%,均明显高于健康对照组[（1.04±1.23）%]（t值分别为2.847、3.284、3.091,P＜0.01）。经过正规方案治疗后,完全缓解组患者CD62P表达与健康对照差异无统计学意义（t＝0.397,P＞0.05）。另外CD+62P的AML及T-ALL患者白细胞计数、血红蛋白及血小板计数均明显高于CD-62P 患者（t值分别为4.153、8.095、8.289、7.235、8.692、9.832,P＜0.05）;而CD+62P与CD-62P的B-ALL患者无明显差异（t值分别为0.340、1.142、0.019,P＞0.05）。结论　CD62P是血小板活化的标志物之一,在不同类型的AL中有不同程度的表达。AL骨髓造血干细胞中CD62P可能作为白血病造血干细胞的标志,以及临床疗效观察预后判断的指标之一。     

71例急性白血病免疫表型特征分析及意义

目的:分析急性白血病(AL)免疫表型特点及其临床意义。方法:采用单克隆抗体直接免疫荧光标记法的流式细胞术,对71例AL进行免疫表型检测。结果:71例AL患者以系列专一型表达为主,同时亦存在抗原交叉表达、不表达特异性抗原及混合型等情况。AL患者CD34和HLA蛳DR表达分别占56.3 %和61.9 %,M3患者均不表达HLA蛳DR。My+ALL患者完全缓解(CR)率(60.0 %)低于My - ALL患者CR率(80.6 %),两组相比有显著性差异(P<0.05)。CD+34 ALL与CD蛳34 ALL患者缓解率基本相同;CD+34 AML患者CR率(58.3 %)明显低于CD蛳34 AML患者CR率(88.9 %),两组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:白血病免疫表型检测结合FAB分型可以提高诊断的准确率,部分免疫表型特征对判断预后有一定的意义。     

Prognostic significance of surface marker expression on blasts of patients with de novo acute myeloblastic leukemia

The prognostic significance of the expression of surface membrane antigens on the blasts of 123 consecutive patients with de novo acute myeloblastic leukemia (AML) was evaluated. For this purpose, reactivity of monoclonal antibodies (mAbs) CLB-ERY3 (antiblood-group H antigen), VIM-D5 (CD15), WT1 (CD7), MY7 (CD13), MY9 (CD33), VID-1 (antihuman leukocyte antigen locus DR [anti-HLA DR]), VIM-2 (CDw65L), VIM-13 (CD14), 63D3 (CD14) and anti-TdT with leukemic blast cell populations was prospectively analyzed with respect to the rates of complete remission (CR), continuous complete remission (CCR), and survival. The overall rate of CR was 65%, the 6-year rates of overall CCR and survival were 23% and 13%, respectively (median period of patient observation, 30 months). Of all Abs tested, four (CLB-ERY3, MY7, anti-TdT, and VIM-D5) were found to be of prognostic value. Reactivity of CLB-ERY3, MY7, and anti-TdT was predictive for CR (CLB-ERY3+, 43% v CLB-ERY3-, 73%, P less than .02; MY7+, 59% v MY7-, 91%, P less than .003; TdT+, 28% v TdT-, 71%, P less than .001, respectively) and probability of survival (significantly lower survival rates: CLB-ERY3+, P less than .02; MY7+, P less than .03; and TdT+ cases, P less than .001, respectively). Reactivity of VIM-D5 was significantly associated with a higher probability of CCR (P less than .01). Our results confirm earlier reports on the prognostic significance of expression of CD13 and TdT in AML and indicate CLB-ERY3 (antiblood-group H antibody) and VIM-D5 (CD15) as further markers predictive for the clinical outcome in patients with de novo AML.     

Clinical significance of CD95, Bcl-2 and Bax expression and CD95 function in adult de novo acute myeloid leukemia in context of P-glycoprotein function, maturation stage, and cytogenetics.

Resistance to chemotherapy-induced apoptosis and a multidrug-resistance (MDR) phenotype, mainly mediated by P-glycoprotein (P-gp), contribute to chemotherapy failure in hematologic malignancies. To study apoptosis-regulating factors in acute myeloid leukemia (AML), we investigated cell samples of adults with de novo AML by flow cytometry for constitutive expression levels of the apoptosis-related molecules CD95 (n = 135), Bcl-2 (n = 131), and Bax (n = 66), as well as spontaneous apoptosis in vitro (n = 104) and susceptibility to anti-CD95-induced apoptosis (CD95 sensitivity) (n = 93). We correlated these findings with P-gp function as detected by the rhodamine123-efflux test (n = 121), immunophenotype, FAB morphology, cytogenetics, and clinical data of the examined patients. Immature FAB M0/1 AML cells expressed significantly more Bcl-2 (P < 0.0002) and less CD95 (P < 0.0003) compared with AML cells of the more mature FAB M2-5 subtypes. No maturation-dependent difference in Bax expression was observed. FAB M2-5 AML cells were more susceptible to anti-CD95-induced apoptosis (P < 0.008) and showed a lower P-gp function (P < 0.002) than FAB M0/1 AML cells. Leukemic cells of AML patients who achieved a complete remission (CR) after induction chemotherapy expressed less Bcl-2 than non-responder (NR) (69 CR, 23 NR; P = 0.05). CR was associated with a higher extent of spontaneous apoptosis in vitro (58 CR, 17 NR; P=0.05) and a tendency towards a higher CD95 expression (73 CR, 23 NR; P = 0.08) compared to NR. CR also correlated with a low P-gp function (70 CR, 21 NR; P = 0.008) and a tendency towards CD34 negativity (73 CR, 23 NR; P = 0.08). No correlation between Bax expression and response to induction chemotherapy (49 CR, 12 NR) was observed. In stepwise logistic regression analyses, P-gp function and the extent of spontaneous apoptosis in vitro as well as CD95 sensitivity but not Bcl-2, CD95, Bax, and CD34 expression levels emerged as significant markers for response to induction chemotherapy. We conclude that the constitutive expression of CD95 and Bcl-2, as well as CD95 sensitivity and P-gp function but not constitutive Bax expression depend on the maturation stage of leukemic cells in adult de novo AML. P-gp function, the extent of spontaneous apoptosis in vitro and CD95 sensitivity are more predictive for response to induction chemotherapy in adult de novoAML than the constitutive expression levels of the apoptosis-related molecules CD95, Bcl-2 and Bax.