异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型支配器官形态学的影响

目的:观察异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型支配器官形态学的影响,从组织病理学角度探讨异常黑胆质证的本质,阐明异常黑胆质成熟剂可能的作用机理。方法:采用多因素复制小鼠异常黑胆质载体动物模型,分别用异常黑胆质成熟剂小剂量2.53 g.kg-1,中剂量5.06 g.kg-1,大剂量10.12 g.kg-1对模型进行全程干预。取脑、心脏、肝脏支配器官,观察和比较异常黑胆质载体动物模型组和药物干预组支配器官的组织形态学改变。结果:与模型组相比,异常黑胆质成熟剂小剂量和中剂量组支配器官(脑、心脏、肝脏)细胞修复性指标增强,而损伤性组织病理学改变减轻;大剂量组修复性指标明显提高,损伤性组织病理学改变显著减轻。结论:异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型的支配器官组织病理学改变有一定的保护和修复作用。     

异常黑胆质成熟剂抗抑郁作用研究

目的:观察异常黑胆质成熟剂(ASMq)对不同抑郁动物模型行为学的影响,探讨ASMq的抗抑郁作用。方法:采用小鼠强迫游泳、悬尾应激、利血平拮抗实验以及大鼠慢性应激抑郁模型实验,分别用ASMq低、中、高剂量(小鼠2.0、4.0、8.0 g·kg-1;大鼠1.5、3.0、6.0 g·kg-1)对上述模型进行全程干预,观察ASMq的抗抑郁作用效果。结果:ASMq能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间(P0.01)、悬尾不动时间(P0.01);具有拮抗利血平所致的体温下降(P0.01)、眼睑下垂(P0.01)及运动不能(P0.01)作用,并呈明显的剂量依赖关系(P0.05);与正常组相比,慢性应激抑郁模型组大鼠糖水摄入量减少,敞箱实验中水平运动、站立次数明显下降,处于抑郁状态。ASMq干预组能够增加糖水摄入量、水平运动及站立次数(P0.01)。结论:ASMq能够改善不同抑郁动物模型的行为学缺损,具有明显的抗抑郁作用。     

异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节作用研究

目的阐明异常黑胆质成熟剂对异常黑胆质载体动物模型丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能的调节。方法根据维吾尔医学理论采用多因素复制小鼠异常黑胆质载体动物模型,并用异常黑胆质成熟剂不同剂量(8.58,17.16,34.32g/kg),14d全程干预给药,此后用ELISA法检测血清ACTH和CORT含量;采用高效液相-荧光检测分析法分析了异常黑胆质载体动物模型小鼠血清和脑去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、3,4二羟基本乙酸(DOPAC)等单胺类神经递质含量。结果异常黑胆质成熟剂不同剂量可以降低异常黑胆质载体动物模型血清NE含量(P<0.01),增加血清DA、5-HT和DOPAC含量(P<0.01),同时发现异常黑胆质成熟剂能降低异常黑胆质载体动物模型脑组织中NE含量(P<0.01),异常黑胆质成熟剂大剂量能增加DA含量(P<0.05),小剂量和大剂量能增加DOPAC含量(P<0.01)。结论提示异常黑胆质成熟剂可能通过参与神经内分泌系统的内在调节,改善异常黑胆质载体动物模型的丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能的紊乱。     

异常黑胆质成熟剂化学成分初步研究

目的 初步了解异常黑胆质成熟剂中含有的化学成分.方法 采用不同化学定性方法对异常黑胆质成熟剂中化学成分进行研究.结果 糖、皂苷、酚、黄酮、生物碱、香豆素(和/或内酯)、有机酸和氨基酸等化学成分的鉴别试验均呈阳性.结论 异常黑胆质成熟剂中可能含有的化学成分有糖、皂苷、酚、黄酮、生物碱、香豆素和/或内酯、有机酸和氨基酸等.     

异常黑胆质载体动物模型饮食量和饮水量的观察

目的:观察维吾尔医学异常黑胆质证载体动物模型饮食量和饮水量的变化。方法:选用ICR小鼠,在干寒环境下,采用干寒性饲料饲养、慢性电击等多因素复合建立维吾尔医学异常黑胆质证载体动物模型,观察动物饮食量、饮水量。结果:与对照组比较,经历慢性电刺激,干寒属性饲料饲养、干寒喂养环境等因素的动物,饮食量增多P<0·05、饮水量增多P<0·05。结论:异常黑胆质载体动物饮食量、饮水量增多与临床表现中异常黑胆质征候特点极为相似,并此症状维持较长时间,是较理想的可靠的动物模型,饮水量和饮食量可以视为异常黑胆质载体动物模型的部分评价指标。     

异常黑胆质成熟剂和清除剂抗氧化作用的ESR研究

目的：探讨异常黑胆质成熟剂和清除剂抗氧化的作用机理。方法：采用电子顺磁共振技术（ESR）分别检测异常黑胆质成熟剂和清除剂对超氧阴离子自由基（O2^-）,羟自由基（OH）的清除作用。结果：异常黑胆质成熟剂和清除剂均能有效清除O2^-,OH,但其作用强度不同,清除剂作用大于成熟剂。结论：异常黑胆质成熟和清除剂是维医药中两种有效的天然抗氧化剂,其抗氧化作用可能是治病的重要机理之一。     

维吾尔医异常黑胆质载体动物模型下丘脑-垂体-肾上腺轴细胞超微结构的改变

目的：探讨异常黑胆质载体动物模型下丘脑、垂体、肾上腺组织细胞的变化。方法：选用ICR小鼠，在干寒环境下，采用干寒性饲料饲养、慢性电击等多因素复合建立维吾尔医学异常黑胆质载体动物模型，透射电镜观察其下丘脑、垂体、肾上腺的超微结构变化。结果：与正常对照纽相比，模型组小鼠下丘脑、垂体、肾上腺细胞的超微结构可见明显的改变。结论：维医异常黑胆质病证与下丘脑-垂体-肾上腺组织细胞的变化有密切的关系。     

异常黑胆质成熟剂对抑郁症模型大鼠海马ERK信号通路的影响

目的:观察异常黑胆质成熟剂(ASMq)对抑郁症模型大鼠海马ERK信号通路的影响,探讨异常黑胆质成熟剂抗抑郁作用机制。方法:84只雄性SD大鼠,随机分为6组:正常对照组、抑郁症模型组、阳性对照组(氟西汀,3.5mg/kg)及异常黑胆质成熟剂低、中、高剂量组(浓度分别为1.5、3.0、6.0g/kg),每组14只。除正常对照组外,其它组采用慢性不可预见性温和应激(CUMS)诱导建立大鼠抑郁症模型,阳性对照组和异常黑胆质成熟剂各剂量组连续灌胃给药24天,1次/天。通过Open-field实验和糖水消耗实验来评估大鼠抑郁活动状态。末次给药24h后断头处死大鼠、迅速分离海马组织、冻存备用,蛋白印迹法(Western blot)检测大鼠海马p-ERK1/2,ERK1/2表达。结果:应激结束后与正常对照组相比,抑郁症模型组大鼠体重增加量降低、糖水消耗量减少,水平穿越格数、竖立次数均明显降低,处于抑郁状态;各组之间ERK1/2的表达没有显著性差异。与正常对照组相比,抑郁症模型组大鼠海马p-ERK1/2表达明显下降,差异有显著性。与抑郁症模型组相比,阳性对照组和异常黑胆质成熟剂中、高剂(浓度为3.0、6.0g/kg)量组大鼠体重增加量上升、糖水消耗量升高,水平穿越格数、竖立次数均明显增加;与抑郁症模型组相比,阳性对照组、异常黑胆质成熟剂中剂(浓度为3.0 g/kg)量组海马组织p-ERK1/2表达量明显升高,差异有显著性。结论:异常黑胆质成熟剂可能是通过调节ERK信号通路来发挥抗抑郁作用。     

异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物诱导HepG2细胞凋亡机制的研究

目的：观察异常黑胆质成熟剂中黄酮类化合物对人肝癌细胞株(HepG2)体外生长、凋亡及相关基因表达的调控作用,探讨异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物诱导癌细胞凋亡及抗癌活性的物质基础及其作用机制。方法：采用四氮甲基唑蓝法(MTT)、琼脂糖凝胶电泳技术、流式细胞术及逆转录-多聚酶链式反应技术(RT-PCR)等,观察异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物对HepG2生长、凋亡及凋亡基因调控的影响。结果：异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物明显抑制HepG2细胞体外生长,HepG2细胞在sub-G₁期受到阻滞,并能诱导细胞发生凋亡,明显下调Bcl-2 mRNA表达水平,同时可上调p53,p21,Bax基因mRNA表达水平。结论：异常黑胆质成熟剂黄酮类化合物对癌细胞体外生长、凋亡及凋亡基因表达具有明显的调控作用。黄酮类化合物可能是异常黑胆质成熟剂发挥抗癌作用的主要活性成分,而抑制细胞生长、诱导细胞凋亡及调控凋亡基因表达等可能是其发挥抗癌活性的重要途径。     

异常黑胆质体液成熟剂散剂质量标准的研究

目的:建立异常黑胆质体液成熟剂散剂的质量标准。方法:采用薄层色谱法,对异常黑胆质体液成熟剂散剂中的全方药味分别进行定性鉴别。结果:建立了异常黑胆质体液成熟剂散剂中甘草的薄层色谱鉴别方法。结论:建立的甘草薄层色谱鉴别方法重现性好,专属性强,可用于该制剂的质量控制。     

异常黑胆质成熟剂总黄酮和总酚的含量测定

目的检测异常黑胆质成熟剂中总黄酮和总酚的含量。方法以芦丁为对照品,采用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法测定了总黄酮含量;以没食子酸为对照品,采用Folin—Ciocalteu比色法测定了总酚含量。结果芦丁浓度在0．011—0．130mg／ml范围内线性关系良好,最低检测限为0．06μg/ml,最低定量限为0．18μg/ml。该方法加样回收率为95．1％～97．5％,精密度为1．34％,水提物和醇提物中总黄酮含量分别为16．2mg／g和19．0mg／g。没食子酸浓度在1．1～7．7μg/ml范围内线性关系良好,最低检测限为0．01μg／ml,最低定量限为0．03μg/ml。该方法加样回收率为99．5％～104．8％,精密度为3．39％,水提物和醇提物中总酚含量分别为38．28mg／g和21．54mg／g。结论此两种方法灵敏、准确性强,精密度高,重复性好,分别可以用作异常黑胆质成熟剂中总黄酮和总酚含量的测定。     

维吾尔药异常黑胆质成熟剂总黄酮逆转肝癌细胞耐药性的作用

目的研究维吾尔药异常黑胆质成熟剂总黄酮(ASMq)体外对肝癌耐药细胞株Bel/Fu逆转肿瘤耐药性的作用。方法应用MTT法测定应用ASMq前后5-Fu对Bel/Fu耐药细胞株的IC50,计算其逆转倍数;浓度依赖试验确定ASMq逆转浓度;耐药性的集落形成实验初步确定ASMq逆转Bel/Fu的作用。结果ASMq对Bel/Fu细胞IC50是2000.68μg/mL,其浓度为390μg/mL时对细胞无明显的杀伤作用,逆转倍数为7.8,与抗癌药物5-Fu有协同作用,CDI为0.89。集落形成实验从形态上证实ASMq逆转MDR作用,随ASMq浓度的加大集落逐渐变小。结论ASMq对肝癌耐药细胞株Bel/Fu细胞多药耐药有逆转作用。     

异常黑胆质性肝癌病证模型肝硬化期支配器官的组织形态学研究

目的:观察异常黑胆质性肝癌病证模型肝硬化期支配器官的组织形态,阐明异常黑胆质体液对异常黑胆质性肝癌病证模型肝硬化期肝脏病变发生,发展的影响。方法:根据维吾尔医学理论,采用多因素复合作用3周建立维医异常黑胆质证载体动物模型后,用二乙基亚硝胺(DEN)诱导建立异常黑胆质性肝癌病证模型至发生肝硬化,分别采用光学显微镜和透射电镜观察其对各组大鼠的支配器官(心、脑、肝)的组织形态学。结果:与正常对照组相比,模型对照组、异常黑胆质证组和异常黑胆质病证模型组支配器官的组织形态明显改变,且与模型对照组相比,异常黑胆质性病证模型组损伤性病理改变更加显著。结论:异常黑胆质体液可能通过改变机体的支配器官的组织形态来促进异常黑胆质性肝癌病证模型肝硬化的发生和发展。     

异常黑胆质成熟剂水提物和醇提物对HepG2细胞m5dc及8-OH-cG形成的影响

目的：观察异常黑胆质成熟剂水提物和醇提物对人肝癌细胞株（HepG2）细胞5-甲基脱氧胞核嘧啶（5-methyldeoxycytosine,m5dC）及8-羟基-2′-鸟嘌呤脱氧核苷酸（8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OH-dG）等表遗传信息的影响,从而探讨异常黑胆质成熟剂水提物和醇提物抗癌作用的分子生物学机制.方法：采用高效液相色谱联用紫外检测技术（HPLC-UV）,分别观察以2.5、5.0及7.5mg/ml浓度的异常黑胆质成熟剂水提物或醇提物作用48h后,对HepG2细胞m5dC及8-OH-dG形成的抑制作用.结果：异常黑胆质成熟剂水提物作用后,HepG2细胞m5dC生成率分别为27.0、24.2及18.6%,而醇提物分别为23.5、20.2及16.8%,与空白对照组（34.0%）比较均具有显著性差别（P＜0.05）;异常黑胆质成熟剂水提物作用后,HepG2细胞8-OH-dG的生成率分别为0.58、0.45及0.32%,醇提物分别为0.46、0.36及0.23%,与空白对照组（0.69%）比较具有明显差异（P＜0.05）.结论：异常黑胆质成熟剂水提物和醇提物对HepG2细胞m5dC及8-OH-dG等表遗传学信息的产生具有浓度依赖性的抑制作用,而醇提物的作用优于水提物,说明抑制癌细胞m5dC及8-OH-dG等表遗传学信息的产生是异常黑胆质成熟剂抗癌作用的重要分子生物学机制之一.     

维药异常黑胆质成熟剂总酚对宫颈癌细胞体外生长的影响

目的:探讨维药异常黑胆质成熟剂总酚治疗人宫颈癌的可行性。方法:分别用不同浓度的异常黑胆质成熟剂总酚作用于人宫颈癌Hela细胞及SiHa细胞,于作用后24、48、72、96 h,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,MTT比色法测定各组细胞的抑制率和半数抑制浓度(IC50)。结果:在25～125μg/mL浓度区间,总酚对Hela细胞的增殖有明显的抑制作用;在75～175μg/mL浓度区间,总酚对SiHa细胞的增殖有明显的抑制作用,且对2种细胞的抑制作用都呈明显的量效关系和时效关系(P<0.01);总酚作用于Hela细胞后48 h的IC50=(125.26±16.15)μg/mL,而作用于SiHa细胞后48 h的IC50=(134.51±2.55)μg/mL。两者比较差异无统计学意义(P>0.05);两种细胞经总酚作用后均出现明显的凋亡特征,且随着药物浓度增高及作用时间延长细胞形态学变化更明显。结论:异常黑胆质成熟剂总酚能抑制宫颈癌Hela细胞及SiHa细胞体外生长,且对两种宫颈癌细胞的抑制作用基本相同。故异常黑胆质成熟剂总酚可作为临床治疗宫颈癌的药物进一步深入研究。     

异常黑胆质载体动物模型的下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱的物质基础研究

目的:观察异常黑胆质载体动物模型下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)有关指标的变化,探求异常黑胆质载体动物模型HPAA功能紊乱的物质基础。方法:采用干寒饲养环境、干寒属性的饲料饲养、慢性间断足底电击等多因素复制小鼠异常黑胆质载体动物模型,用ELISA法检测血清ACTH、CORT和-βEP含量;采用高效液相-荧光检测分析法分析血清和脑去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3、、4二羟基本乙酸(DOPAC)等单胺类神经递质含量。结果:血清ACTH、CORT和-βEP含量增加(P<0.05);异常黑胆质载体动物模型血清中NE含量明显增加(P<0.05),DA含量下降(P<0.05),5-HT(P<0.01)和DOPAC(P<0.01)含量减少;脑组织中NE含量明显增加(P<0.05),DA含量减少(P<0.05)和DOPAC含量降低(P<0.01),5-HT含量改变不明显(P>0.05)。结论:异常黑胆质载体动物模型实验动物下丘脑、垂体和肾上腺合成、分泌及调控功能紊乱,下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)处于应激激活状态,血清及脑组织单胺类神经递质存在异常。此可能是异常黑胆质载体动物模型存在HPAA紊乱的物质基础。     

异常黑胆质成熟剂醇提物诱导HepG2细胞凋亡机制的研究

目的:探讨异常黑胆质成熟剂醇提物的抗癌作用机理。方法:采用四氮甲基唑蓝法(MTT)观察样品对人肝癌细胞株(HepG2)体外生长的抑制作用;采用琼脂糖凝胶电泳技术、流式细胞术等观察样品对HepG2细胞凋亡的影响;采用逆转录-多聚酶链式反应技术(RT-PCR)观察样品对HepG2细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响;观察样品对HepG2细胞Caspase-3活性的影响。结果:异常黑胆质成熟剂醇提物可明显抑制癌细胞体外生长(P<0.05);明显阻滞癌细胞周期、诱导癌细胞凋亡(P<0.05);明显提高抑癌基因p53、p21基因mRNA的表达,抑制抗凋亡基因Bc l-2 mRNA的表达,对Bax基因mRNA表达不产生明显的影响;明显提高Caspase-3活性。结论:异常黑胆质成熟剂醇提物抗癌作用可能与其抑制癌细胞生长、阻滞癌细胞周期、诱导癌细胞凋亡、调节凋亡相关基因表达、激活Caspase-3活性等功能有密切联系。     

异常黑胆质成熟剂和清除剂对OH*引发的DNA损伤的保护作用

目的 :维医异常黑胆质成熟剂和清除剂对DNA化学发光的IC50 分别为 5 72 3 μg/ml、1 0 12mg/ml ,使用成熟剂和清除剂后 ,异常黑胆质型病人SOD、GSH Px活性显著增高 ,MDA浓度明显下降 ,表明异常黑胆质成熟剂和清除剂能有效保护OH·引发的DNA氧化损伤 ,提高异常黑胆质型病人抗氧化能力 ,抑制脂质过氧化损伤。提示异常黑胆质成熟剂及清除剂消除自由基、保护DNA氧化损伤、提高机体抗氧化功能等作用可能是它们成熟及清除异常体液、调节气质、防治肿瘤等疾病的重要作用机制之一。     

异常黑胆质成熟剂和清除剂对OH.引发的DNA损伤的保护作用

目的维医异常黑胆质成熟剂和清除剂对DNA化学发光的IC50分别为5.723μg/ml、1.012mg/ml,使用成熟剂和清除剂后,异常黑胆质型病人SOD、GSH-Px活性显著增高,MDA浓度明显下降,表明异常黑胆质成熟剂和清除剂能有效保护OH*引发的DNA氧化损伤,提高异常黑胆质型病人抗氧化能力,抑制脂质过氧化损伤.提示异常黑胆质成熟剂及清除剂消除自由基、保护DNA氧化损伤、提高机体抗氧化功能等作用可能是它们成熟及清除异常体液、调节气质、防治肿瘤等疾病的重要作用机制之一.     

维医异常黑胆质载体动物模型下丘脑-垂体-肾上腺轴组织超微结构的改变

目的：探讨异常黑胆质载体动物模型下丘脑、垂体、肾上腺组织细胞的变化。方法：选用ICR小鼠，在阴凉环境下采用干寒性饲料饲养、慢性电击等多因素复合，建立维吾尔医学异常黑胆质载体动物模型，透射电镜观察其下丘脑、垂体、肾上腺的变化。结果：与正常对照组相比，模型组小鼠下丘脑、垂体、肾上腺细胞的超微结构可见明显改变。结论：维医异常黑胆质病证与下丘脑-垂体．肾上腺组织细胞的变化有密切关系。