降香提取物B3对斑马鱼模型促血管新生作用的研究北大核心CSCD

目的:评价降香提取物B3的促新血管生成作用及其机理。方法:采用转基因斑马鱼模型,通过观察转基因斑马鱼肠下血管(SIVs)新生模型及节间血管(ISVs)损伤模型来评价降香提取物B3的促新血管生成作用及其机理。结果:降香提取物B3能剂量依赖性地促进转基因斑马鱼SIVs区域的毛细血管出芽新生,30μg/ml效果最佳;能修复VEGF受体激酶抑制剂Ⅱ(VRI)诱导的ISVs区域血管损伤,且能上调VEGF受体激酶抑制剂Ⅱ诱导后的kdr、kdrl及flt-1等VEGF受体mRNA水平的下降。结论:降香提取物B3能通过调控VEGF受体mRNA水平以发挥其在转基因斑马鱼上的促血管新生效果,具有被开发为治疗性血管新生药物的潜力。     

通阳活血方在内皮细胞及斑马鱼模型上促血管新生作用及其机制的研究

目的:评价通阳活血方(GSE)在斑马鱼模型及内皮细胞模型上的促血管新生作用,并探讨其可能的作用机制。方法:采用VEGF受体抑制剂(VRI)诱导斑马鱼背部节间血管丢失和EA.hy926细胞毒性。利用内皮细胞标记绿色荧光的转基因斑马鱼Tg(Fli-1:EGFP),在荧光显微镜下在体观察通阳活血方的促血管新生作用。体外采用EA.hy926内皮细胞模型,用MTT法检测通阳活血益气方抑制VRI的细胞毒性作用。通阳益气活血方促血管新生机制研究则采用Real-time PCR的方法,在体检测斑马鱼体内内皮生长因子受体(VEGFR)的表达情况。结果:在斑马鱼模型上,模型组VRI明显抑制斑马鱼节间血管生成。与模型组相比,GSE处理后能够明显促进斑马鱼节间血管生长,其血管生长指数与模型组相比具有统计学差异(P0.01)。在细胞模型上,模型组VRI对内皮细胞EA.hy926的增殖具有抑制作用,而GSE药物处理后能够明显促进EA.hy926细胞增殖(P0.01)。Real-time PCR结果表明,模型组VRI显著抑制了斑马鱼体内VEGF受体的表达,GSE给药组flt1、kdr、kdrl表达量均明显增高(P0.01)。结论:通阳活血方在内皮细胞模型和斑马鱼模型上均具有血管新生作用,其机制可能与其上调VEGF受体flt1、kdr、kdrl的表达有关。     

黄芪提取物对人脐静脉内皮细胞的促血管新生作用

目的:研究黄芪提取物(RAE)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的促血管新生作用。方法:以体外培养HUVEC为模型,XTT法及细胞计数法检测不同剂量黄芪提取物对细胞增殖的影响;细胞迁移实验检测加药后细胞迁移能力;采用Transwell chamber进行细胞侵入实验检测黄芪提取物对细胞侵入能力的影响;管形形成实验观察加入黄芪提取物后细胞分化情况。结果:XTT法检测HUVEC在黄芪提取物浓度为12.5μg/ml时产生最大增殖效应,增殖率为42.04%。细胞计数法测得在黄芪提取物浓度为25μg/ml时细胞数目比对照组增多124.64%。同时发现在黄芪提取物浓度为25μg/ml时能够最大能力地诱导细胞侵入和管形形成,其侵入率为66.68%,管形分枝点增值率为44.38%;而在浓度为12.5μg/ml时能够最大限度地诱导细胞迁移,迁移率为74.94%。结论:黄芪具有促进血管新生的作用。     

中药对斑马鱼血管新生干预作用的研究进展

心血管疾病和恶性肿瘤等重大疾病的发生发展均有新生血管的参与,促进或抑制血管新生被认为是控制疾病发病进展的关键因素。中药因其良好的临床治疗效果、对血管新生显著的干预作用已成为研究的热点,斑马鱼模型作为理想的动物模型也为血管生成相关研究提供了良好的实验基础。基于斑马鱼动物模型实验,以中药单体、有效部位、复方及中成药等为研究对象,对中药干预斑马鱼血管新生的研究进展进行综述,旨在为斑马鱼实验模型的进一步开发应用以及中医药干预血管新生的深入研究提供参考。     

白芍对斑马鱼促血管生成和抗血栓作用的研究

目的采用斑马鱼模型比较白芍不同部位、主要成分及主要代谢产物的促血管和抗血栓生成作用。方法采用Tg(VEGFR2:GFP)系荧光转基因斑马鱼为模型动物,分别将白芍总样、不同萃取部位、芍药苷、白芍苷和芍药苷代谢素-I设置三个药物剂量组,用荧光显微镜观察并计数不同给药组有血流的斑马鱼体节间血管数;以三氯化铁为血栓诱导剂,在荧光显微镜下观察并记录不同给药组对斑马鱼腹部血管血流停止时间的影响。结果白芍总样、石油醚萃取物、水层样品、芍药苷、白芍苷和芍药苷代谢素-I均表现出抑制血栓生成、促进血液流动的活性;正丁醇相、乙酸乙酯相和芍药苷代谢素-I能够明显增加具有血流的节间血管数量。结论芍药苷代谢素-I具有显著的抑制血栓生成、促进血液流动的活性且优于总样和芍药苷。     

白芷提取物促糖尿病溃疡新生血管成熟作用及机制研究

目的研究白芷提取物对自发2型糖尿病db/db(C57BLKS/J)小鼠皮肤溃疡新生血管成熟的影响与机制。方法选取8周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组及白芷提取物组,同窝雄性db/m小鼠作为对照组。背部打孔法制备糖尿病溃疡小鼠模型。白芷提取物组以白芷提取物1.8 g/kg ig给药,对照组和模型组ig等量生理盐水,连续给药21 d。记录创伤后2、4、7、11、14、21 d小鼠创面大致情况;对创伤后11 d各组小鼠创面进行HE、免疫组化、免疫荧光染色观察创面组织形态、新生血管数量与成熟情况以及创面叉头转录因子(FOXO1)、血管生成素-2 (Ang-2)在创面组织中的定位表达;体外根据不同干预条件,将内皮细胞分为正常糖浓度缺氧组、高糖缺氧组、高渗缺氧组、高糖缺氧+白芷提取物组。并将不同干预条件下内皮细胞与周细胞共培养,观察白芷提取物干预高糖缺氧下内皮细胞对周细胞趋化作用及体外管状结构形成的影响。Western bloting法检测各组创面组织及内皮细胞中FOXO1、p-FOXO1、Ang-2蛋白水平及其上游蛋白激酶B (Akt)蛋白及磷酸化蛋白水平。结果创伤后4、7、11、14、21 d,白芷提取物组创面愈合速率、创面恢复大致情况、创面组织中血管形成数量及新生血管成熟情况明显优于模型组(P0.05);白芷提取物组中FOXO1和Ang-2蛋白表达水平明显高于模型组(P0.05),白芷提取物组中p-Akt、p-FOXO1蛋白表达均低于模型组(P0.05);体外实验中白芷提取物干预高糖缺氧下内皮细胞后,细胞中FOXO1和Ang-2蛋白表达水平明显降低(P0.05),p-Akt,p-FOXO1蛋白表达明显增加(P0.05);此外,白芷提取物能提高高糖缺氧下内皮细胞对周细胞的趋化作用,促进高糖缺氧下内皮细胞与周细胞体外管状结构形成。结论白芷提取物能促进新生血管形成与成熟,从而提高db/db小鼠创面愈合速率和质量,其作用机制可能与下调FOXO1/Ang-2通路,实现内皮细胞对周细胞募集及管状结构形成有关。     

丹参提取物对大鼠心肌缺血后血管新生的保护作用研究

目的 血管新生是治疗缺血性心脏病(ischemic heart disease, IHD)非常有效的一种方法。本研究的主要目的是探究丹参提取物对大鼠心肌缺血后血管新生的保护作用及其机制。方法 48只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、丹参提取物组和阳性药组,每组12只。手术结扎左冠状动脉前降支(left anterior descending, LAD)建立心肌缺血模型,造模成功后丹参提取物组以浓度为0.292 8 g/kg的丹参提取物药液灌胃,阳性药组以浓度为1 mg/kg瑞舒伐他汀药液灌胃,模型组、假手术组给予生理盐水灌胃。干预28天后通过超声评估心功能,通过激光多普勒评估心脏血流的变化。体外实验采用氧—葡萄糖剥夺法(oxygen-glucose deprivation, OGD)损伤人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs),通过CCK-8实验和Matrigel成管实验评估丹参提取物对HUVECs的保护作用,通过Western blots检测通路蛋白的表达变化。结果 丹参提取物不仅可以改善心肌缺血大鼠的心功...     

基于模式生物斑马鱼研究姜黄抗血管新生的作用及机制

目的 利用模式生物斑马鱼研究姜黄Curcuma longa抗血管新生作用,并采用网络药理学和分子对接技术探究姜黄抗血管新生的作用机制.方法 采用模式生物斑马鱼模型,考察姜黄挥发油、姜黄素以及姜黄水提液对斑马鱼节间血管生长的抑制作用,检测各给药组斑马鱼节间血管生成数,计算血管生成抑制率.利用网络药理学和分子对接技术预测姜...     

血府逐瘀汤促血管新生中VEGF通路的作用研究

目的:探讨VEGF通路在血府逐瘀汤促血管新生中的作用.方法:运用血清药理学方法,以1.25％,2.5％,5％的血府逐瘀汤含药血清和空白血清诱导处理血管内皮细胞ECV304,分别采用MTT比色法,Boyden小室迁移法和体外成血管实验检测内皮细胞增殖、迁移和成血管能力,并通过酶联免疫法、免疫组化和RT-PCR检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)分泌和表达的情况.结果:1.25％含药血清除了能提高体外成血管能力外,对其余指标均无影响;2.5％含药血清明显促进内皮细胞增殖、迁移及成血管,并能显著提高VEGF及VEGFR2的表达;5％含药血清仅上调胞内VEGF的表达,进而促进内皮细胞的迁移和黏附.结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF-VEGFR2途径,诱导内皮细胞增殖、迁移和血管形成,部分说明了药物促血管新生的作用机制.     

瓜蒌不同部位对斑马鱼促血管生成及心脏保护作用

目的采用斑马鱼模型探讨中药瓜蒌不同部位对心脏保护和促血管生成作用,为阐明瓜蒌的药效物质基础及作用机制提供研究基础。方法瓜蒌药材粉碎后用70%乙醇提取、浓缩,然后分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。以TG(VEGFR2∶GFP)系荧光转基因斑马鱼为模型动物,将瓜蒌总样和不同萃取部位设置不同质量浓度,观察他们对斑马鱼体节间血管(intersegmental vessels,ISV)数和心率的影响。结果 10μg/mL正丁醇萃取物和1μg/mL水层样品具有促进斑马鱼体间血管数生成活性;石油醚萃取物和总样对特非那定引起的心脏毒性具有明显的改善作用。结论瓜蒌能促进斑马鱼的血管生成并具有心脏保护作用。     

黄芪提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织血管新生的作用

目的:观察黄芪提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织血管新生的作用,并分析其可能作用机制。方法:采用冠状动脉左前降支结扎造模方法成功复制大鼠心肌梗死模型后,随机将大鼠分为模型组、黄芪提取物低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1·d^-1),另设假手术组,各组大鼠数量均为8只。黄芪提取物各治疗组给予上述对应的各药物剂量ig给药,模型组及假手术组大鼠ig给予20 mL·kg^-1·d^-1的生理盐水,连续饲养4周后采用苏木精-伊红(HE)染色,Masson染色,电镜法分析心肌梗死大鼠左心室心肌组织和血管病理学变化,免疫组化染色分析心肌组织中血管内皮生长因子(VEGF)及CD34蛋白的表达变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织结构紊乱,心肌细胞坏死严重,完整的微血管数量明显减少(P<0.05),胶原含量显著增加(P<0.01),内皮细胞缺失明显(P<0.05)。与模型组比较,黄芪提取物各组大鼠心肌组织结构相对规整,胶原含量明显下降(P<0.05),新生的血管数量明显增多(P<0.05),内皮细胞形态相对完整,数量也明显增多(P<0.05),VEGF及CD34蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:黄芪提取物可明显改善大鼠心肌梗死后心肌组织的紊乱状态,促进受损心肌组织中新生血管数量的增加。     

复方芪红颗粒的提取工艺研究及对促血管新生作用的研究

目的:确定复方芪红颗粒的最佳提取工艺条件并验证其对促血管新生的作用.方法:以黄芪甲苷、红景天苷的含量作为提取工艺的考察指标,采用L9(34)正交设计优选提取工艺;通过CAM研究,考察复方芪红颗粒对血管新生治疗的作用.结果:最佳提取工艺条件为提取时间2h,加12倍量的水,提取2次;BXW组CAM上血管数比生理盐水组明显增加.结论:该提取工艺稳定、可行,且BXW能促进CAM的血管生成.     

复方芪红颗粒的提取工艺研究及对促血管新生作用的研究

目的：确定复方芪红颗粒的最佳提取工艺条件并验证其对促血管新生的作用。方法：以黄芪甲苷、红景天苷的含量作为提取工艺的考察指标,采用L9（34）正交设计优选提取工艺;通过CAM研究,考察复方芪红颗粒对血管新生治疗的作用。结果：最佳提取工艺条件为提取时间2h,加12倍量的水,提取2次;BXW组CAM上血管数比生理盐水组明显增加。结论：该提取工艺稳定、可行,且BXW能促进CAM的血管生成。     

速效救心丸对大鼠心肌梗死模型血管新生作用的影响

目的:研究速效救心丸对实验性心肌梗死大鼠心脏的促血管新生作用.方法:利用sD大鼠冠状动脉结扎法结造成急性心梗(AMI)模型,观察速效救心丸对AMI大鼠心梗面积及梗死边缘区心肌微血管密度的变化.结果:速效救心丸高、低剂量组与模型组梗死面积比较,均有极显著性差异(P＜0.01),且有一定的剂量依赖性,与阳性对照组作用相似;速效救心丸高、低剂量组与假手术组相比较,其心肌梗死边缘区的平均血管面密度(MVD)均明显增多(P＜0.05),速效救心丸高剂量组与阳性对照组作用相似,但速效救心丸高、低剂量组比较无统计学意义上的差异(P＜0.05).结论:速效救心丸对实验性心肌梗死大鼠的心脏有明显的促血管新生作用.     

缺氧对血府逐瘀胶囊促血管新生影响的研究

目的研究血府逐瘀胶囊在缺氧条件下对血管新生的影响。方法通过观察血府逐瘀胶囊含药血清在缺氧条件下对HMEC-1细胞的活力、增殖能力、黏附能力、迁移能力和体外成血管能力的影响,明确缺氧条件对药物促血管新生作用的影响。结果缺氧条件下含药血清在低浓度早、中期增加HMEC-1细胞活力,提高迁移及黏附能力;中、高浓度含药血清早期促进血管管腔形成,随后促管腔形成作用消失。结论缺氧条件下血府逐瘀胶囊通过影响HMEC-1细胞活力、迁移、黏附能力等环节来保护血管内皮细胞,促进血管新生。     

脑脉利颗粒对斑马鱼血管新生的促进及对血小板聚集性血栓形成的预防作用研究

目的初步研究脑脉利颗粒对斑马鱼血管新生的促进作用与机制,及其对血小板聚集性血栓形成的预防作用,为临床用药提供更有价值的理论支持。方法通过对斑马鱼肠下血管面积、肠下血管出芽数、总RNA浓度和纯度、心脏红细胞染色强度等指标,评价脑脉利颗粒对斑马鱼血管新生的促进作用和血小板聚集性血栓形成的预防作用。结果脑脉利颗粒在250和500μg/ml浓度时有显著的血管新生促进作用,且在500μg/ml浓度时能明显上调VEGFR1基因表达(P0.01),在1 000μg/ml浓度时有显著的血栓形成预防作用(P0.01)。结论脑脉利颗粒具有显著的血管新生促进作用,机制可能与上调VEGFR1的表达有关,且对血栓形成有显著的预防作用。     

安心颗粒对大鼠心肌梗塞模型血管新生作用的影响

目的:研究安心颗粒对实验性心肌梗塞大鼠心脏的促血管新生作用。方法:60只SD大鼠冠状动脉左前降支结扎法造成急性心梗(AMI)模型,并随机分为假手术组(A组)、生理盐水组(B组)、麝香保心丸组(C组)、安心颗粒低、中、高剂量组(D1、D2、D3),灌胃4周后,观察安心颗粒对AMI大鼠心梗面积及梗塞边缘区心肌微血管密度的变化。结果:安心颗粒各组与B组梗塞面积比较,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01),与C组作用相似;安心颗粒各组间与对照组相比较,其心肌梗塞边缘区的平均血管面密度(MVD)均明显增多(P<0.05或P<0.01)。结论:安心颗粒对实验性心肌梗塞大鼠的心脏有明显的促血管新生作用     

蛤蚧水煎液对斑马鱼血管生长的作用

目的:观察蛤蚧水煎液对斑马鱼血管生长的作用。方法:选用转基因斑马鱼Tg(fli-1:EGFP),建立正常血管生长模型和内皮细胞生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(VRI)诱导的血管损伤模型,将蛤蚧分为蛤蚧身、蛤蚧尾和蛤蚧全体并使用不同浓度的水煎液进行干预,观察斑马鱼肠下静脉(SIVs)和节间血管(ISVs)的情况。结果:斑马鱼正常血管生长模型中,蛤蚧身、蛤蚧尾和蛤蚧全体水煎液各浓度组与对照组的肠下静脉平均出芽数、平均交叉数和血管直径无明显差异(P0.05)。斑马鱼血管损伤模型中,与正常组比较,VRI组及蛤蚧身、蛤蚧尾水煎液各浓度组的完整型血管明显减少,缺陷型血管增多,差异具有统计学意义(P0.01);与VRI组比较,蛤蚧身水煎液1 mg·L~(-1)、10 mg·L~(-1)、30 mg·L~(-1)、100 mg·L~(-1)各浓度组的完整型血管明显增多,差异具有统计学意义(P0.01);与VRI组比较,蛤蚧尾水煎液各浓度组的完整型血管明显增多,差异具有统计学意义(P0.01)。蛤蚧身、尾水煎液各组缺陷型血管与VRI组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:蛤蚧水煎液不能促进斑马鱼正常血管生长,但对VRI诱导的斑马鱼血管损伤有保护作用,且蛤蚧尾效果更好。     

斑马鱼心脏损伤模型的建立及桔梗提取物对其心脏损伤的干预作用研究

目的:建立阿霉素诱导的斑马鱼心脏损伤模型,观察桔梗提取物对其心脏损伤的干预作用。方法:选取受精后48 h心脏特异表达绿色荧光转基因Tg(cmlc2:EGFP)斑马鱼,随机分为正常组和阿霉素低、中、高剂量组。干预24 h后,观察各组斑马鱼生存情况,计算生存率。荧光显微镜下观察各组斑马鱼心脏相关指标,包括心脏形态、心率,测量并记录静脉窦和动脉球(SV-BA)距离。确定建立斑马鱼心脏损伤模型的阿霉素用量。另取斑马鱼随机分为正常组、模型组(阿霉素10 μmol/L)和桔梗提取物低、中、高剂量(阿霉素10 μmol/L联合20、40、80μg/mL桔梗提取物)组,分别干预24 h后,观察各组斑马鱼生存情况,计算生存率。荧光显微镜下观察各组斑马鱼心脏收缩和舒张形态,测量并计算各项心脏功能指标,包括心率、SV-BA距离、每搏输出量、心输出量。结果:阿霉素各剂量组斑马鱼生存率均为100%;与正常组比较,10 μmol/L、20 μmol/L阿霉素诱导后斑马鱼活动能力受到限制,心包出现水肿,心率下降(P0.05),SV-BA距离增加(P0.05)。选取10 μmol/L阿霉素建立斑马鱼心脏损伤模型。与模型组比较,中、高剂量桔梗提取物能够缓解斑马鱼心包水肿,提高心率(P0.05),缩短SV-BA距离(P0.05),提高每搏输出量及心输出量(P0.05)。结论:阿霉素10 μmol/L处理24 h可成功并安全建立斑马鱼心脏损伤模型,桔梗提取物对心脏损伤斑马鱼的心脏功能具有一定的保护作用。     

三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞的促血管新生作用

目的:研究三七总皂苷(PNS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖作用。方法:采用体外培养HUVEC的方法,通过XTT法以及细胞计数法观察对细胞的增殖作用;细胞侵入实验观察细胞迁移的能力。结果:PNS对HUVEC有促增殖作用,XTT实验中100μg/ml浓度增殖率为(33.58±2.41)%;在细胞计数实验100μg/ml浓度增殖率为(94.15±10.96)%;在细胞侵入实验中100μg/ml浓度侵入率为(42.64±9.50)%。结论:PNS能够促进HUVEC的增殖与侵入。