高黏液表型与基因型预测肺炎克雷伯菌毒力的比较

 目的 评价高黏液表型、毒力基因预测高毒力肺炎克雷伯菌（hvKp）的应用价值。方法 收集2016年11月—2018年4月广东省4所医院分离的肺炎克雷伯菌,通过拉丝试验判断菌株黏液表型,检测毒力基因和血清型情况,采用蜡螟模型计算菌株的半数致死率（LD₅₀）,比较不同高黏液（hm）表型和毒力基因型菌株LD₅₀。结果 共收集194株肺炎克雷伯菌,拉丝试验阳性菌株占40.2%（78株）。蜡螟试验结果显示,仅毒力基因iucA、iroB、fimH阳性菌株LD₅₀低于相应的阴性菌株（P<0.05）。iucA+iroB+fimH+hm全阳性组（n=58）、iucA阳性+iroB阳性+fimH阳性+hm阴性组（n=23）、iucA+iroB+fimH+hm全阴性组（n=28）3组LD₅₀分别为（5.39±0.71）、（5.44±0.62）、（5.83±0.64） log10 CFU/mL,前两组比较差异无统计学意义（P=0.786）,但前两组分别与第3组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。在高黏液表型菌株中血清型K1、K2、K57检出率高于非高黏液表型菌株,差异均有统计学意义（均P<0.001）。结论 仅依据高黏液表型预测hvKp准确性较低,与高黏液表型相比,毒力基因iucA+、iroB+、fimH+预测hvKp更准确。     

粪便中分离肺炎克雷伯菌的血清型与毒力基因检测

目的了解粪便标本分离肺炎克雷伯菌（KPN）的血清型与毒力基因分布,为临床治疗提供依据。方法收集2013年11月—2014年6月某院健康体检者及住院非腹泻患者粪便标本分离KPN,检测其黏液表型、 6种荚膜血清型（K1、K2、K3、K5、K54和K57)及6种毒力基因（rmpA、fimH、Aero、mrkA、wabG和ironB）,分析不同黏液表型、不同人群来源菌株荚膜血清型与毒力基因分布情况。结果收集粪便标本510份,其中健康体检者92份,住院非腹泻患者418份,分离KPN 107株（健康体检者19株,住院非腹泻患者88株）,粪便标本KPN总分离率为20.98%,其中高黏液表型菌24株,非高黏液表型菌83株。分离的KPN中6种血清型和6种毒力基因均有检出,以K1、K2、K57、K54血清型为主(48.60%);毒力基因mrkA和wabG检出率最高（分别为90.65%、83.18%）,rmpA+fimH+Aero +mrkA +wabG基因同时检出最常见（30.84%）,主要分布于K1、K2、K57、K54血清型中。rmpA和Aero毒力基因主要在K1、K2、K57、K54血清型中检出。健康体检者KPN血清型以K1型为主（26.32%）,未检测到K3和K57型;住院非腹泻患者6种血清型均有检出,以K1、K2、K57、K54为主。高黏液表型菌同时携带4种毒力基因以上者占83.33%（20/24）,高于非高黏液表型菌的32.53%（27/83）（χ2=19.51,P＜0.01）。高黏液表型菌中K1、K2、K57、K54血清型总检出率为91.67%（22/24）,高于非高黏液表型菌的36.14%（30/83）; rmpA、Aero毒力基因的检出率均为95.83%,均高于非高黏液表型菌组（分别为31.32%、30.12%）（均P＜0.05）。结论粪便中分离的KPN均检测到强毒力荚膜血清型和多种毒力基因,尤其在高黏液表型菌和住院患者分离菌中,应引起临床重视。     

高毒力肺炎克雷伯菌的耐药基因及耐药性分析

目的分析高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)的临床分布、耐药基因及耐药性,以指导临床合理使用抗菌药物。方法 2014年6月—2018年9月,收集长沙医学院第一附属医院医院或社区连续分离的非重复性肺炎克雷伯菌(cKP),拉丝试验及气杆菌素基因检测以确认hvKP。VITEK-2全自动微生物分析仪对hvKP及cKP进行鉴定及药敏试验。PCR法检测产超广谱β-内酰胺(ESBLs)基因,产物测序,并进行比对分析。结果 2014年6月—2018年9月共收集到328株hvKP,其中痰标本构成比最高为48.8%,同时发现每年hvKP标本数呈递减趋势。hvKP菌株对常用抗菌药物具有较高敏感性,敏感率为89.3%～100.0%,头孢类的耐药率为5.5%～10.4%,未发现碳青霉烯类抗生素耐药的菌株。在被检测的抗菌药物中,hvKP较cKP具有更高的敏感性,差异有统计学意义(P0.01),仅有氨苄西林/舒巴坦药敏结果中中介值时差异无统计学意义(P0.05)。在328株hvKP菌株中blaTEM、blaSHV、blaCTX-M检出率分别为97.9%、86.0%和33.8%,其中hvKP中基因检出率最高的是blaTEM,712株cKP检出率分别为75.0%、70.1%和90.0%,且cKP检出率最高的是blaCTX-M。同时在发现hvKP中blaSHV+blaCTX-M+blaTEM为9株,占2.7%,而在cKP中未检测出有此种基因型的菌株。hvKP中的3种基因型blaTEM、blaSHV、blaCTX-M对第三代头孢类、第四代头孢类、喹诺酮类及氨基糖苷类耐药率都很低,且在cKP的耐药率相对于hvKP高出很多,差异均有统计学意义(均P0.01)。结论尽管hvKP菌株对目前常用抗菌药物具有较高的敏感性,但是高产ESBLs菌株的出现应该引起临床高度重视。     

肺炎克雷伯菌临床分离株毒力与耐药表型的关系

目的 探究本地区肺炎克雷伯菌(KP)临床分离株的毒力特征及其与耐药表型的关系。方法 菌株来源于2018年8月-2020年4月四川大学华西医院收治的临床诊断为KP相关感染病例送检样本中分离出的KP菌株,根据菌株对碳青霉烯类药物的敏感性,分为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)组和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)组,两组各随机选择30株,采用基质辅助激光解吸电离质谱进行菌株鉴定,Vitek2 Compact全自动微生物系统进行药物敏感性分析,拉丝试验检测高黏表型,多重聚合酶链反应(PCR)检测毒力基因rmpA、entB、iutA、allS、aerobactin、fimH、ureA和wabG。结果 CSKP组和CRKP组对常见抗菌药物的耐药率差异均具有统计学意义(P<0.05);CSKP分离株中高黏液表型占63.30%(19/30),CRKP分离株中高黏液表型占6.70%(2/30),差异具有统计学意义(P<0.05);CSKP组的毒力基因检出率高于CRKP组(iutA除外),但rmpA、wabG、aerobactin、entB、fimH和ureA基因检出率CSKP组和C...     

高毒力高耐药肺炎克雷伯菌的研究进展

 高毒力肺炎克雷伯菌（hvKP）已成为全球关注的病原菌,其毒力强,更易引起社区感染,患者感染hvKP后预后差、病死率高。令人担忧的是,高耐药的hvKP已经出现,对临床抗感染治疗提出了新的挑战。本文综述了hvKP的临床鉴定和主要的毒力因子,以及耐药菌株和高毒力菌株的重叠表现。     

呼吸系统感染高毒力肺炎克雷伯菌的分子基因特点

目的探究呼吸系统感染高毒力肺炎克雷伯菌的分子基因分布特点和患者临床特征。方法选取2017年9月-2018年10月于焦作市人民医院接受治疗的524例肺炎克雷伯菌呼吸系统感染患者为研究对象,其中148例高毒力肺炎克雷伯菌感染患者为观察组,376例普通肺炎克雷伯菌感染患者为对照组。分析两组患者年龄、性别、基础疾病等临床特征;比较两组毒力质粒pLVPK基因中质粒特有序列(rep)、促荚膜合成因子(rmpA)以及铁载体Aerobactin(iuc)等分子基因的分布特征;比较两组患者生活质量评分;比较高毒力肺炎克雷伯菌和普通肺炎克雷伯菌对不同抗菌药物的耐药性。结果两组患者年龄、性别、临床来源、基础疾病、住院天数、痰培养混合菌比较无差异;两组患者最高体温以及胸部CT检查结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。分子基因分布特点比较发现,观察组患者rep、rmpA以及iuc阳性率分别为89.86%(133)、79.73%(118)、91.89%(136),均高于对照组(P<0.05)。观察组患者生活质量总分(83.24±12.27)分,低于对照组患者的(115.59±27.04)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。高毒力肺炎克雷伯菌和普通肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药性最高,分别为90.54%和97.60%。结论高毒力肺炎克雷伯菌呼吸系统感染患者生活质量水平较低,高毒力肺炎克雷伯菌毒力质粒pLVPK基因阳性率高于普通肺炎克雷伯菌。     

1株高毒力型肺炎克雷伯菌临床分离株毒力及耐药性分析

目的　对1株临床分离的高毒力型肺炎克雷伯菌菌株进行毒力基因及耐药基因分析,为临床复杂肺炎克雷伯菌感染的诊断及抗生素使用提供参考。方法　首先使用PCR方法对该菌株进行血清学分型、毒力基因和耐药基因检测,然后利用二代和三代高通量测序平台对该菌株进行全基因组测序和序列拼接,应用生物信息学方法全面分析该菌株毒力基因及耐药基因。结果　该菌株血清型为K1型,采用PCR方法发现该菌株携带wabG、uge、kfuBC、aerobactin、rmpA、magA和 fimH 7个毒力基因及超广谱β-内酰胺酶耐药基因（基因型为SHV型）。高通量测序进一步发现该菌株的基因组还携带clbB、iroC和rffG 3个毒力基因。结论　该肺炎克雷伯菌临床分离株血清型为K1,除了携带喹诺酮类和β-内酰胺类耐药基因外,还含有多种毒力基因,增加了治疗难度。全面分析感染菌株携带的毒力基因和耐药基因,有针对性地选择抗生素,可提高抗感染治疗的效率,减少并发症的发生。     

高毒力肺炎克雷伯菌毒力和耐药机制研究进展

自20世纪80年代中期以来,高毒力肺炎克雷伯菌(hvKp)感染率逐年增加,已引起全球的关注.hvKp较普通型肺炎克雷伯菌(cKp)更具致病性,在健康人群中即可引发侵袭性感染,不仅病死率高(3％～31％),而且常伴随严重的后遗症,如眼盲或神经系统疾病.更令人担忧的是,近年来对第三代头孢菌素、碳青霉烯类抗生素和粘菌素耐药的...     

高毒力肺炎克雷伯菌毒力和耐药机制研究进展

自20世纪80年代中期以来,高毒力肺炎克雷伯菌（hvKp）感染率逐年增加,已引起全球的关注。hvKp较普通型肺炎克雷伯菌（cKp）更具致病性,在健康人群中即可引发侵袭性感染,不仅病死率高（3%~31%）,而且常伴随严重的后遗症,如眼盲或神经系统疾病。更令人担忧的是,近年来对第三代头孢菌素、碳青霉烯类抗生素和粘菌素耐药的hvKp菌株相继出现,给临床治疗和管理工作带来巨大挑战。因此,了解hvKp毒力及耐药机制尤为重要,此文就其最新研究进展进行综述。     

高毒力肺炎克雷伯菌流行病学特征及其致病性毒力因子

肺炎克雷伯菌是院内感染的常见条件致病菌。近年来,随着肺炎克雷伯菌所致肝脓肿患者的发病数不断增加,高毒力肺炎克雷伯菌引起广泛关注。高毒力肺炎克雷伯菌具有高黏液表型和高毒力的特征,可引起免疫力正常的患者发生重症社区获得性感染,如肝脓肿、肺炎、化脓性眼内炎及化脓性脑膜炎等。本文对高毒力肺炎克雷伯菌的流行病学及毒力因子的研究进...     

2011-2018年临床分离高黏液表型肺炎克雷伯菌临床分布与耐药率研究

目的了解高黏液表型肺炎克雷伯菌分布特点与耐药率变化趋势,为临床提供指导。方法收集2011年1月-2018年12月贵州医科大学第三附属医院临床分离的高黏液表型肺炎克雷伯菌617株,三维试验法检测头孢菌素酶(AmpC),双纸片协同扩散法检测超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs),细菌学鉴定与最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)测定采用Phoenix-100全自动细菌鉴定药敏系统,按照美国临床与实验室标准化协会(CLSI)标准判断结果,并进行统计分析。结果高黏液表型肺炎克雷伯菌占肺炎克雷伯菌12.17%,占肠杆菌科细菌2.76%;对头孢唑林、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸等耐药率均≥20%;其他抗菌药物均<10%;对庆大霉素、环丙沙星、阿米卡星、氧氟沙星、氨苄西林、左氧氟沙星、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮、头孢吡肟、头孢他啶、妥布霉素、氨曲南、米诺环素等耐药率呈逐年上升趋势(P<0.05); ESBLs酶与AmpC酶检出率也逐年上升(P<0.05)。结论高黏液表型肺炎克雷伯菌的ESBLs酶与AmpC酶检出率与耐药率逐年上升,应高度重视产酶菌的监测和控制。     

多药耐药肺炎克雷伯菌毒力基因研究

目的了解多药耐药肺炎克雷伯菌(MDRKP)中5种毒力基因存在情况,为临床治疗提供参考依据。方法收集2008年8月-2010年5月杭州市和湖州市6所医院共47株MDRKP,采用PCR及序列分析方法检测5种毒力基因(arr、magA、rmpA、hofA和ompT)。结果 47株MDRKP中检测到arr和magA两种毒力基因,检出率分别为29.8%和17.0%;6所医院A、B、C、D、E、F的MDRKP分离株中毒力基因arr的检出阳性率分别为26.7%、81.8%、0、14.3%、0、0,6所医院A、B、C、D、E、F的MDRKP分离株中毒力基因magA的检出阳性率分别为0、0、0、0、0、88.9%。结论 MDRKP中毒力基因arr和magA具有一定的携带率,在MDRKP中检出毒力基因arr和magA为国内首次报道。     

黏液型肺炎克雷伯菌耐药性

目的了解黏液型肺炎克雷伯菌的科室分布和耐药性,为临床治疗选药和医院感染控制提供依据。方法收集某院2013年1—12月临床分离的180株肺炎克雷伯菌株,筛选黏液型菌株,采用VITEK2 Compact鉴定系统进行菌株鉴定及药敏测定。结果共获得28株黏液型肺炎克雷伯菌,主要标本来源为呼吸道,主要科室分布为神经外科。肺炎克雷伯菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、环丙沙星、阿米卡星体外敏感率,黏液型分别为96.43%、96.43%、89.29%、92.86%、96.43%,非黏液型分别为78.29%、78.29%、69.08%、72.37%和78.29%。结论肺炎克雷伯菌的体外敏感率黏液型高于非黏液型,但临床治疗时应考虑其生物膜的存在,选择合适的药物进行治疗。     

肺炎克雷伯菌所致肝脓肿患者的临床特征及毒力基因检测

目的 分析肺炎克雷伯菌肝脓肿(KPLA)患者的临床特征,了解肺炎克雷伯菌毒力基因携带情况,为临床早期诊断和合理治疗提供参考.方法 回顾性分析江苏大学附属医院2017年7月—2019年8月收治的34例脓液培养阳性的细菌性肝脓肿患者的临床资料,分为KPLA组和非肺炎克雷伯菌肝脓肿(NKPLA)组.采用VITEK 2 Com...     

高毒力肺炎克雷伯菌血流感染的临床特点

目的了解高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)血流感染(BSI)的微生物学和临床特点。方法收集2013年4月—2016年3月大连医科大学第二临床学院159例肺炎克雷伯菌BSI患者的菌株和临床资料。应用SPSS 19.0统计软件进行分析。结果 hvKP BSI在159例肺炎克雷伯菌BSI患者中占35.22%(56/159),其中K1和K2型分别占51.79%和26.79%。hvKP BSI感染来源主要为肝脓肿(26株,46.43%),经典型肺炎克雷伯菌(cKP)BSI主要是原发性菌血症(41株,39.81%)。两组患者不同感染类型比较,差异有统计学意义(χ2=57.782,P0.001),hvKP BSI患者以社区获得性为主(89.29%),cKP BSI患者以医院获得性为主(73.79%)。两组患者不同基础疾病构成比较,差异有统计学意义(χ2=36.532,P0.001),hvKP BSI患者主要为糖尿病(50.00%),cKP BSI患者主要为恶性肿瘤(45.63%)。hvKP BSI患者感染性休克发生率高于cKP BSI患者(32.14%vs 8.74%),差异有统计学意义(χ2=14.096,P0.001)。hvKP产ESBLs的比率为5.36%(3/56),cKP产ESBLs的比率为47.57%(49/103),二者差异有统计学意义(χ2=29.375,P0.001)。未发现产KPC的hvKP。hvKP对头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、左氧氟沙星及复方磺胺甲口恶唑的耐药率均低于cKP,差异有统计学意义(均P0.05)。结论 hvKP BSI多见于社区感染,感染来源和基础疾病不同于cKP BSI,易产生感染性休克。实验室和临床医生都应重视hvKP感染并密切关注其耐药趋势的演变。     

婴幼儿配方粉中肺炎克雷伯菌分离菌株毒力

目的 了解婴幼儿配方粉中肺炎克雷伯菌的毒力强弱及其感染所致病理变化。方法 将5株从婴幼儿配方粉中分离得到的肺炎克雷伯菌和1株标准菌制成不同浓度菌悬液,腹腔注射实验小鼠,计算其半数致死量(LD₅₀);观察染毒小鼠临床症状,解剖死亡小鼠,取其内脏制作病理切片观察病理变化。结果 各分离菌株和标准菌株的LD₅₀分别为3.031、2.638、1.516、2.638、1.516和1.516 McF/kg BW,染毒小鼠体内多器官发生明显病理变化,尤以肺脏和肝脏病变最为明显。结论 婴幼儿配方粉中污染的肺炎克雷伯菌具有较强的毒力并会对婴幼儿健康构成潜在危害。     

肺炎克雷伯菌临床分离株获得性耐药基因检测及指标聚类分析

目的调查肺炎克雷伯菌临床分离株中36种获得性耐药基因和3种整合子遗传标记的存在状况,以及获得性耐药基因和整合子遗传标记的相关性。方法收集江苏某市级医院2005年8月-2006年2月住院患者痰液标本中分离的肺炎克雷伯菌共20株,采用聚合酶链反应的方法分析21种β-内酰胺类获得性耐药基因、15种氨基糖苷类获得性耐药基因以及3种整合子遗传标记,并用指标聚类分析分析β-内酰胺类、氨基糖苷类获得性耐药基因与整合子遗传标记的相关性。结果 20株肺炎克雷伯菌共检测到7种β-内酰胺类获得性耐药基因、5种氨基糖苷类获得性耐药基因和1种整合子遗传标记基因,其余26种基因均未检测到。结论β-内酰胺类耐药基因比氨基糖苷类耐药基因检出率高,与表型相符;指标聚类分析显示,TEM、LEN、DHA、OXA-1、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、rmtB基因与Ⅰ类整合子遗传标记intⅠ1相关联,提示这些基因可能位于Ⅰ类整合子上。     

多药耐药肺炎克雷伯菌尿液分离株检出gyrA基因新亚型

目的了解1株多药耐药肺炎克雷伯菌的遗传学背景。方法采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1株多药耐药肺炎克雷伯菌可能存在的65种耐药相关基因:包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因及可移动的遗传元件(整合子、转座子、接合性质粒)遗传标记、抗菌制剂外排泵基因。结果该株多药耐药肺炎克雷伯菌耐β-内酰胺类药物基因检出blaTEM,耐氨基糖苷类药物基因检出aph(3′)-Ⅰ,耐喹诺酮类药物基因检出gyrA,Ⅰ类整合子遗传标记检出intⅠ1,转座子遗传标记检出tnp513,接合性质粒遗传标记检出trbC;抗菌制剂外排泵基因检出qacE△1-sul1,gyrA基因是新亚型(GenBank登录号:JN232083),83位密码子突变方式为TCG→TTC,导致氨基酸从丝氨酸(S)→苯丙氨酸(F);87位密码子突变方式为GAC→GCC,导致氨基酸从天冬氨酸(D)→丙氨酸(A)。结论携带多药耐药基因和抗菌制剂外排泵基因是这株肺炎克雷伯菌呈多药耐药的主要原因,携带多种可移动遗传元件使细菌的耐药性在同种细菌菌株之间,甚至不同种细菌菌株之间得以快速传播。     

K1型肺炎克雷伯菌毒力基因及分子分型研究

目的研究荚膜多糖分型K1型肺炎克雷伯菌的毒力基因及其分子分型情况。方法收集2013年3—12月期间浙江大学医学院附属第二医院健康体检中心429份健康体检者粪便标本,按不同年龄组计算肺炎克雷伯菌肠道分离率;拉丝试验检测高产黏液菌株;聚合酶链反应(PCR)扩增K1、K2、K5、K20、K54、K57、rmp A、mag A和wca G;K-B纸片法检测K1型菌株药物敏感性;采用多位点序列分型(MLST)对K1型肺炎克雷伯菌进行分型。结果粪便标本肺炎克雷伯菌分离率为22.61%。97株肺炎克雷伯菌中拉丝阳性率为39.18%。共检测到11株携带K1毒力基因的肺炎克雷伯菌,4株同时携带mag A、wca G和rmp A,9株同时携带wca G和rmp A。12岁组中未发现毒力基因存在。药敏结果显示K1型菌株除对氨苄西林耐药以外,对碳青霉烯类、喹诺酮类和头孢菌素类等抗生素均敏感。11株K1型菌株中有7株拉丝试验阳性。K1型菌株MLST分型结果,除1株为ST600外,其他均为ST23。结论粪便中分离的K1型肺炎克雷伯菌往往同时携带毒力基因rmp A、mag A和wca G,对临床常用抗菌药物敏感,ST23为其主要的临床流行株。     

高毒力肺炎克雷伯菌临床感染特征及质谱同源性分析

目的:从敏感和多重耐药的肺炎克雷伯菌中筛选出hvKP表型株,对比探讨其临床感染特征的分布和同源性。方法:回顾性收集2014至2018年中山大学附属第三医院临床感染标本所分离的敏感和多重耐药的肺炎克雷伯菌共158株,通过黏液拉丝试验（string test,ST）初筛hvKP感染情况,共筛选到65例患者,男性51例,女性...