β-细辛醚对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的探讨β-细辛醚对Aβ25-35所致PC12细胞凋亡的抑制作用。方法以Aβ25-35建造体外PC12细胞损伤模型,观察β-细辛醚对其细胞存活率、细胞形态、乳酸脱氢酶(LDH)的含量和Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达的影响。结果 10μmol/L的Aβ25-35与PC12细胞共培养24 h出现明显损伤,细胞活力下降,培养液中LDH含量增多,Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达水平增高。15 mg/L、30 mg/L、60 mg/Lβ-细辛醚可有效改善Aβ25-35引起的PC12细胞形态改变,提高细胞存活力,减少LDH渗漏,明显降低Aβ25-35引起的PC12细胞Caspase-3、Caspase-6、Caspase-9 mRNA表达水平。结论β-细辛醚对Aβ25-35所致PC12细胞损伤有保护作用。     

锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导损伤PC12细胞的影响

目的:探讨锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的影响。方法:将48只大鼠随机分为空白组、锁阳乙酸乙酯提取物83mg/kg、8. 3mg/kg、0. 83mg/kg剂量组,采血制备空白血清和含药血清;以Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤造模,锁阳乙酸乙酯提取物含药血清处理PC12细胞后,通过MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342染色、流式细胞术检测PC12细胞凋亡情况,用相应的试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)的活性及含量。结果:与空白血清组相比,锁阳乙酸乙酯提取物各组10%血清显著提高细胞存活率,使细胞凋亡率明显下降,显著提高了SOD活性,显著降低了MDA、NOS、NO含量。结论:锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)致PC12细胞损伤具有保护作用,其保护机制与其增强SOD活性,降低MDA含量,降低NOS活性,减少NO生成,减轻氧化应激对细胞的损伤有关。     

哈巴苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞毒性的保护作用

目的探讨哈巴苷对β淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞毒性的影响。方法 PC12细胞以哈巴苷(20、40、80μmol/L)预孵育3 h后以Aβ25-35(30μmol/L)损伤24 h;MTT法检测细胞增殖;检测细胞上清液中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;采用Annexin-V-FITC双染法检测细胞凋亡率;检测活性氧(ROS)的生成;Western blotting法检测Akt、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与对照组比较,Aβ25-35使PC12细胞的存活率显著降低(P0.01),细胞上清液中MDA水平显著升高(P0.01)、GSH和SOD水平显著降低(P0.01),细胞内ROS水平显著升高(P0.01),细胞凋亡率显著增加(P0.01),细胞内p-Akt、Bcl-2蛋白表达下调(P0.01),Bax蛋白表达显著上调(P0.01);哈巴苷预孵育PC12细胞3 h,使细胞上清液中的MDA水平降低,GSH和SOD水平显著升高(P0.05、0.01);明显剂量依赖性抑制细胞凋亡;上调p-Akt和Bcl-2蛋白表达(P0.05、0.01),并下调Bax蛋白表达(P0.05、0.01)。结论哈巴苷改善Aβ25-35诱导的PC12细胞毒性,可能通过激活PI3K/Akt信号通路和上调细胞内SOD水平发挥作用。     

当归含药血清对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用研究

目的:观察当归含药血清对由Aβ25-35片段毒性诱导的PC12细胞阿尔茨海默病(AD)模型凋亡的影响。方法:利用细胞计数、MTT及流式细胞术测定观察当归含药血清处理由Aβ25-35片段诱导的PC12细胞活力、形态学及细胞凋亡的改变。结果:当归含药血清能增加PC12细胞的活力,降低LDH释放,流式细胞术分析显示,当归含药血清能降低细胞凋亡率。结论:当归含药血清能升高PC12细胞的活力,降低LDH释放,对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡有明显的保护作用。     

锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导损伤PC12细胞的影响北大核心CSCD

目的:探讨锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的影响。方法:将48只大鼠随机分为空白组、锁阳乙酸乙酯提取物83mg/kg、8. 3mg/kg、0. 83mg/kg剂量组,采血制备空白血清和含药血清;以Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤造模,锁阳乙酸乙酯提取物含药血清处理PC12细胞后,通过MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342染色、流式细胞术检测PC12细胞凋亡情况,用相应的试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)的活性及含量。结果:与空白血清组相比,锁阳乙酸乙酯提取物各组10%血清显著提高细胞存活率,使细胞凋亡率明显下降,显著提高了SOD活性,显著降低了MDA、NOS、NO含量。结论:锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)致PC12细胞损伤具有保护作用,其保护机制与其增强SOD活性,降低MDA含量,降低NOS活性,减少NO生成,减轻氧化应激对细胞的损伤有关。     

复方益智颗粒对Aβ_(25-35)致PC12细胞损伤的神经保护作用研究

目的:探讨复方益智颗粒对Aβ_(25-35)导致PC12细胞损伤的保护作用,为进一步研究该产品改善阿尔茨海默症记忆功能障碍的作用机制奠定基础。方法:取经不同处理的PC12细胞分为正常对照组、Aβ_(25-35)模型组、Aβ_(25-35)+正常血清组、Aβ_(25-35)+CYZG含药血清组(不同浓度)。正常对照组:DMEM培养基培养48 h,Aβ_(25-35)模型组:DMEM培养基培养24 h后换含20μM Aβ_(25-35)的DMEM培养基继续培养24 h,Aβ_(25-35)+正常血清组:正常血清预处理24 h后加入20μM Aβ_(25-35)的DMEM培养基继续培养24 h,Aβ_(25-35)+CYZG含药血清组:不同浓度CYZG含药血清预处理24 h后,加入20μM Aβ_(25-35)的DMEM培养基继续培养24 h。分别采用MTT法检测细胞增殖情况、流式细胞仪检测PC12神经细胞凋亡情况。结果:Aβ_(25-35)时间依赖性地抑制PC12细胞的生长,不同浓度CYZG含药血清对其造成的细胞损伤有保护作用,随着含药血清剂量的增加,细胞的存活率增加,生长抑制率减少。Aβ_(25-35)能显著引起PC12细胞凋亡,不同浓度CYZG含药血清对其造成的细胞凋亡有抑制作用。结论:复方益智颗粒对Aβ_(25-35)引起的PC12细胞损伤具有一定的保护作用,其神经保护作用可能与抑制Aβ_(25-35)引起的PC12细胞凋亡有关。     

茶藨子木层孔菌多糖对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的研究茶藨子木层孔菌多糖(PRG)在阿尔兹海默症病理损伤中的保护作用。方法利用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤作为细胞模型,观察PRG的预保护、修复损伤及抑制凋亡作用,MTT法检测细胞存活率,Annexin-V-FITC双染法检测细胞凋亡率。结果不同浓度PRG对Aβ_(25-35)诱导的神经细胞损伤具有预保护作用,提高存活率,分别为74%(10μg/ml)、81%(50μg/ml)、88%(150μg/ml);不同浓度PRG均能修复细胞损伤,提高存活率,分别为53%(10μg/ml)、55%(50μg/ml)、59%(150μg/ml);不同浓度PRG均能降低Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡,降低凋亡率,分别为28.6%(10μg/ml)、19.3%(50μg/ml)、14.1%(150μg/ml)。结论茶藨子木层孔菌多糖PRG对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。     

琐琐葡萄总黄酮对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞Bax表达的影响

目的研究琐琐葡萄总黄酮(Flavones from Vitis viniferal L,VTF)对Aβ25-35诱导PC12细胞Bax表达的影响。方法体外培养PC12细胞,分为5组,对照组正常培养,模型组加入20μmol·L-1Aβ25-35作用24h建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)细胞模型,实验组分别加入20,40,80mg·L-1浓度VTF干预24h,通过检测细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)释放,观察细胞损伤情况,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测Bax mRNA表达,Western bolt检测Bax蛋白表达。结果模型组较对照组细胞活性降低,LDH释放增加(P0.01),Aβ25-35诱导PC12细胞明显损伤,VTF实验组与模型组比较,细胞活性增加,LDH释放减少,有显著差异(P0.05);与模型组比较,给药组Bax表达下降(P0.01)。结论 VTF通过调节Bax表达,对Aβ25-35诱导的细胞损伤有保护作用。     

回神颗粒含药脑脊液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞损伤保护作用的研究

目的:观察回神颗粒含药脑脊液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞损伤的保护作用。方法:采用PC12细胞建立24 h Aβ_(25-35)所致损伤模型。实验分成6组,即正常组,模型组,回神颗粒含药脑脊液高、中、低剂量组(20%、15%、5%),空白脑脊液组。将各剂量回神颗粒含药脑脊液与20μmol/L Aβ_(25-35)同时加入PC12细胞中培养24 h后,MTT法检测细胞活力。结果:回神颗粒含药脑脊液各剂量组均能显著提高Aβ_(25-35)所致受损PC12细胞的生存率,与模型组比较,差异均有显著意义(P0.05)。结论:回神颗粒含药脑脊液能减轻Aβ_(25-35)所致的PC12细胞损伤,具有细胞保护作用。     

木犀草素对Aβ25-35损伤PC12细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响

目的 探讨木犀草素对Aβ25-35损伤PC12细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响及其与PI3K/Akt信号通路的关系.方法 实验分为空白组、Aβ25-35组、木犀草素+Aβ25-35组、木犀草素+Aβ25-35+LY294002(PI3K/Akt阻断剂)组.MTT法检测细胞增殖率,DCFH-DA为荧光探针检测细胞总R...     

柴胡皂苷D抑制Aβ_(25-35)诱导PC12细胞tau蛋白过度磷酸化

目的:探究柴胡皂苷D(SSD)对Aβ诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)tau蛋白磷酸化水平的影响。方法:将PC12细胞分为3组:对照组,用DMEM培养基常规培养;Aβ组,用含有10μmol/L Aβ25-35的DMEM培养基培养PC12细胞;SSD组,选择含有4μg/m L SSD+10μmol/L Aβ25-35的DMEM培养基共同培养PC12细胞,24 h后收集各组细胞;利用Western blot技术,检测对照组、Aβ组和SSD组PC12细胞中tau mRNA表达及蛋白表达水平的变化。结果:与对照组细胞相比,Aβ处理组tau蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05);而SSD组细胞tau蛋白磷酸化水平无明显改变(P>0.05);同时,与对照组相比较,Aβ处理组和SSD处理组细胞tau mRNA表达水平无明显变化(P>0.05),tau总蛋白水平无明显变化(P>0.05)。结论:在PC12细胞中,SSD可抑制Aβ25-35诱导PC12细胞tau蛋白的过度磷酸化。     

覆盆子黄酮对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制研究

目的观察覆盆子黄酮对Aβ_(25-35)所致的PC12细胞AD模型的保护作用;探讨覆盆子黄酮对Aβ_(25-35)所致的PC12细胞AD模型的保护作机制,为进一步探索覆盆子防治AD提供实验依据。方法采用不同浓度的Aβ_(25-35)处理分化后的PC12细胞,同时应用覆盆子黄酮进行干预,Annexin V-FITC/Hoechst33342法检测凋亡率,Western blot方法检测相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3表达量及其对PI3K/AKT通路的影响。结果覆盆子黄酮可明显降低细胞的死亡率和凋亡率。与模型组相比较,覆盆子黄酮能降低促凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达,增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。覆盆子黄酮对总PI3K和总AKT的表达无明显差别,但p-PI3K和p-AKT显著升高。结论覆盆子黄酮具有抗AD作用,可能与激活PI3K/AKT通路,降低促凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达,增高抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,从而减少细胞凋亡有关。     

葛根素对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的影响

目的：应用Aβ25-35孵育PC12细胞株制作细胞损伤模型,以研究葛根素对模型细胞凋亡的影响。方法：用Aβ25-35和葛根素对PC12细胞进行处理,MTT法检测干预后不同时间点的细胞活性,电镜观察细胞形态的改变,异硫氰酸荧光素（FITC）标记的AnnexinⅤ及碘化丙锭（PI）双染流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率,以确认药物的保护作用。结果：PC12细胞经过Aβ25-35处理后,细胞生存率下降,且呈现时间依赖性。电镜观察显示Aβ25-35可导致PC12细胞凋亡,使用葛根素后,模型细胞凋亡情况明显改善。流式细胞技术显示Aβ25-35损伤模型组凋亡率明显升高,使用葛根素后,细胞凋亡率下降,具有显著性差异（P〈0.05）。结论：葛根素可拮抗Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡,具有一定的神经细胞保护功能。     

阿魏酸对Aβ25-35诱导PC12细胞的保护机制研究

目的:观察阿魏酸对β-淀粉样蛋白25-35(βamyloid peptide25-35,Aβ25-35)诱导的阿尔兹海默病(Alzheimer disease,AD)模型细胞的抗氧化能力的影响,探讨当归防治AD的作用及机制。方法:用Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡,以不同浓度阿魏酸对抗干预,以MTT比色法观测阿魏酸对AD模型细胞增殖的保护作用,以比色法检测阿魏酸对AD模型细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的影响。用RT-PCR法检测Apbb1,乙酰胆碱酯酶(Ache)基因的表达。结果:阿魏酸对损伤的PC12细胞的存活率有提高作用,阿魏酸在2 mmol/L时可明显降低模型细胞培养液中MDA、LDH含量,提高SOD活力,差异有统计学意义(P<0.01)。阿魏酸可下调Apbb1和Ache的mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:阿魏酸对Aβ25-35损伤的PC12细胞有保护作用,机制可能与提高细胞抗氧化能力相关,与下调Apbb1、Ache的mRNA表达量相关。     

补肾益智方含药血清保护Aβ_(25-35)-3损伤PC12细胞的实验研究

目的:探讨补肾益智方含药血清对由Aβ25-35-3诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)老年性痴呆(AD)细胞模型的保护作用。方法:建立PC12细胞培养方法,用倒置显微镜进行形态学观察,利用WST-8法检测细胞活力以及荧光酶标仪检测细胞线粒体膜电位等方法,观察补肾益智方含药血清对AD细胞模型的影响。结果:补肾益智方5%含药血清对AD细胞模型的保护作用优于5%正常血清,差异均有显著性意义(P0.05)。结论:补肾益智方含药血清能在一定程度上减少Aβ25-35-3对PC12细胞的神经毒性作用。     

引火汤含药血清对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的抑制作用

目的：观察引火汤含药血清对Aβ25-35诱导PCI2细胞损伤的抑制作用,并探讨其对抗Aβ毒性的机制。方法：添加Aβ于培养基以诱导PCI2细胞损伤,采集去势及非去势雌性大鼠灌服引火汤后的含药血清添加于PCI2细胞培养液中,MTT法检测引火汤含药血清对Aβ25-35州诱导PCI2细胞损伤的影响。结果：Aβ25-35,埘呈浓度依赖性的引起PCI2细胞活力下降,大鼠引火汤含药血清能抑制Aβ25-35诱导的PCI2细胞损伤,这种抑制Aβ毒性的效果在大鼠卵巢摘除后部分降低,但并未消失。结论：Aβ25-35可引起培养PCI2细胞损伤,引火汤含药血清可抑制Aβ的毒性作用,其部分机制是通过刺激卵巢增加雌激素的产生,可能是提高靶细胞的雌激素敏感性或是血行移行成分的直接作用。     

β-细辛醚对Aβ_(1-42)诱导星形胶质细胞活化所致PC12细胞损伤的保护作用研究

该文探讨β-细辛醚对Aβ1-42诱导星形胶质细胞活化所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制,为β-细辛醚在阿尔兹海默病(Alzheimer’s diease,AD)防治中的应用提供实验依据。首先,采用实时无标记动态细胞分析技术(Real time cell analysis,RTCA)构建RA-h/PC12共培养体系,实时动态观察Aβ1-42诱导星形胶质细胞损伤后对共培养体系中PC12细胞存活率的影响,根据系统自动生成的存活率曲线和参数选出最佳的药物干预时间,采用不同浓度的β-细辛醚对星形胶质细胞进行干预,观察共培养体系中PC12细胞存活率的改变;其次,采用MTT法检测Aβ1-42作用于RA-h对PC12细胞存活率的影响以及β-细辛醚的干预效应,验证RTCA的检测结果;进一步采用ELISA法检测下室培养液中IL-1β,TNF-α,BDNF的水平;Western blot法检测PC12细胞NF-κB的活性和ERK,p38,JNK磷酸化水平。结果显示,β-细辛醚(55.5 mg·L-1)能显著减缓Aβ1-42诱导的RA-h活化引起的PC12细胞存活率下降(P0.01),显著降低下室培养液中IL-1β,TNF-α的水平和PC12细胞ERK,p38,JNK磷酸化水平(P0.01);β-细辛醚(166.7 mg·L-1)能促进下室培养液中BDNF的释放(P0.05)。以上结果表明,Aβ1-42诱导RA-h活化并释放IL-1β,TNF-α等炎症因子加剧PC12细胞的损伤;β-细辛醚能降低IL-1β,TNF-α和促进BDNF的释放,抑制PC12细胞NF-κB的活性和ERK,p38,JNK磷酸化水平。     

银杏叶聚戊烯醇抗Aβ_(25-35)介导dPC12细胞损伤的保护机制

目的:研究银杏叶聚戊烯醇(GP)抗Aβ_(25-35)诱导dPC12细胞损伤的保护机制。方法:以鼠肾上腺嗜铬细胞瘤单克隆细胞系(PC12细胞)为研究对象,通过LDH比色法检测GP对Aβ_(25-35)处理后dPC12细胞存活率的影响;流式细胞术检测不同浓度GP对dPC12细胞凋亡的影响;应用活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)试剂盒检测Aβ_(25-35)对dPC12细胞的氧化损伤,并研究GP的抗氧化作用及其机制;RT-PCR法检测Bax、Bcl-2和Caspase-3在mRNA水平的表达,并采用Western blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3及Cleaved Caspase-3等凋亡相关因子在蛋白水平的表达。结果:GP可显著降低LDH漏出率以及细胞内ROS水平和MDA含量,对dPC12细胞有显著的抗氧化作用,具有显著的量效关系;GP对Aβ_(25-35)引起的dPC12细胞凋亡有一定的抑制作用,以高剂量组作用显著;GP能显著下调Aβ_(25-35)诱导损伤dPC12细胞内Caspase-3、Bax mRNA水平,并上调Bcl-2 mRNA水平,Bax/Bcl-2 mRNA比值降低,抑制细胞凋亡;GP能降低Aβ_(25-35)诱导损伤dPC12细胞内Caspase-3、Bax蛋白表达,升高Bcl-2蛋白表达,降低Bax/Bcl-2比值,抑制凋亡执行因子Caspase-3活化,从而抑制细胞凋亡。结论:GP可减少Aβ_(25-35)致损伤dPC12细胞的凋亡,其作用可能与其抗氧化作用和抑制细胞凋亡途径激活有关。     

牛蒡苷元干预CREB/BDNF信号通路保护Aβ_(25-35)损伤神经元的研究

目的:探讨牛蒡苷元对β淀粉样肽(β–amyloid,Aβ)所致小鼠神经元损伤的保护作用。方法:从乳鼠大脑皮层分离、纯化神经元,制备Aβ25-35损伤神经元模型,采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测牛蒡苷元(0、0.1、1、10、25、50μmol·L-1)对受损神经元存活率的影响,用免疫荧光细胞化学法检测牛蒡苷元最佳浓度对受损神经元磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)水平和脑源性神经营养因子(BDNF)表达量的影响。结果:1μmol·L-1牛蒡苷元能显著提高Aβ25-35损伤神经元的存活率,并使神经元的p-CREB和BDNF表达水平显著提高。结论:牛蒡苷元能够有效对抗Aβ诱导的神经元损伤,此作用可能与牛蒡苷元激活p-CREB/BDNF信号通路有关。     

地骨皮甲素对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的 考察地骨皮甲素（kukoamine A,KuA）对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用并对其作用机制进行初步研究,为发现具有抗帕金森病的活性先导化合物提供依据。方法 通过体外建立鱼藤酮诱导的帕金森模型,运用MTT、LDH、Hoechst33342染色等方法对KuA体外抗鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤进行初步确认。利用比色法和荧光染色分别考察KuA对超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）及活性氧（ROS）含量、线粒体膜电位（MMP）的影响。采用Western blotting探讨KuA体外抗鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的作用机制。结果 0.5 μmol/L鱼藤酮可降低PC12细胞存活率,不同浓度KuA可减轻鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤。与模型组相比,KuA可降低细胞内ROS及MDA含量,并提高SOD活性。此外,KuA可提高基质金属蛋白酶（MMP）水平,下调Bax/Bcl-2值、抑制细胞色素C释放以及下调Caspase-3、Caspase-9、α-synuclein的蛋白表达。结论 KuA对鱼藤酮诱导的PC12细胞帕金森病模型具有保护作用,其可能的机制与抑制ROS生成、保护MMP、调控线粒体凋亡途径相关蛋白表达和降低α-synuclein蛋白表达有关。