5种氟喹诺酮类药物对大肠埃希菌防耐药变异选择浓度测定

目的研究5种氟喹诺酮类药物对大肠埃希菌耐药突变株的选择能力,比较其防耐药变异能力. 方法肉汤法富集1010CFU/ml大肠埃希菌(ATCC25922)和25株临床分离菌,采用平板稀释法测定莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星、左氧沙星和环丙沙星对大肠埃希菌的MIC99、暂定防变异浓度(MPCpr)及MPC. 结果莫西沙星、加替沙星、左氧沙星、帕珠沙星、环丙沙星对大肠埃希菌(ATCC25922)的MPC分别为0.072、0.048、0.09、0.09、0.06μg/ml.细菌耐药选择指数(MPC/MIC99)分别为4、6.8、6.9、9、12.环丙沙星、加替沙星、帕珠沙星、莫西沙星对25株大肠埃希菌临床分离菌MPCpr90值分别为2、1、2、1μg/ml, 选择指数(MPCpr90/MIC90)分别为16、4、16、2. 结论莫西沙星和加替沙星限制大肠埃希菌耐药突变菌株的选择能力强于环丙沙星和帕珠沙星.     

氟喹诺酮类药物对临床分离金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度

目的测定氟喹诺酮类(FQ)药物对金黄色葡萄球菌临床分离菌的防耐药变异浓度(mutant prevention concentration,MPC). 方法肉汤法富集1010CFU/ml金黄色葡萄球菌临床分离菌54株,采用琼脂平板稀释法分别测定莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌的MIC及MPC,并计算MIC90、MPC90. 结果莫西沙星、加替沙星、帕珠沙星和环丙沙星对42株环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌临床分离菌的MPC90值,分别为0.5 μg/ml、0.5 μg/ml、4 μg/ml 和8 μg/ml,细菌耐药选择指数(MPC90/MIC90比值)分别为4、4、16和16;对12株环丙沙星耐药而莫西沙星和加替沙星敏感的金黄色葡萄球菌临床分离菌,莫西沙星和加替沙星的MPC90值均为16 μg/ml,MPC90/MIC90比值均为8. 结论对环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌,莫西沙星和加替沙星限制耐药突变株选择的能力优于帕珠沙星和环丙沙星;结合药代动力学参数,莫西沙星和加替沙星单药能有效限制耐药突变株的选择,而环丙沙星则容易选择出耐药突变株;而对环丙沙星耐药但莫西沙星和加替沙星敏感的金黄色葡萄球菌,莫西沙星和加替沙星单药则不能限制耐药突变株的选择.     

解脲脲原体临床株对氟喹诺酮类药物的敏感性研究

目的 检测自衡阳地区分离的解脲脲原体(Uu)临床株对氟喹诺酮类药物的敏感性，为临床治疗提供参考依据。方法 应用微量肉汤稀释法检测了86株Uu对临床应用的六种氟喹诺酮类药物的敏感性。结果 在六种药物中司帕沙星和加替沙星抗Uu活性最强，MIC50分别为0．25μg/mL和0．5μg/mL，MIC50均为4μg/mL。其次为左氧氟沙星和氧氟沙星，MIC50分别为1μg/mL和2μg/mL，MIC90分别为4μg/mL和8μg/mL。诺氟沙星和环丙沙星的抗Uu活性较差。结论 氟喹诺酮类药物司帕沙星、左氧氟沙星和加替沙星的抗Uu活性较老一代药物更强，而Uu对老一代氟喹诺酮类药物存在不同程度的耐药现象。     

鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性分析

目的 分析临床分离的鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药特点及耐药机制.方法 采用K-B纸片法测定33株鲍氏不动杆菌对喹诺酮类等21种抗菌药物的耐药性;用PCR技术扩增33株鲍氏不动杆菌的gyrA基因的耐药决定区,PCR产物经纯化后测序与GenBank中的标准序列比较,分析其突变情况.结果 33株鲍氏不动杆菌中,8株对环丙沙星耐药,占24.2％,4株对左氧氟沙星耐药占12.1％;对环丙沙星耐药的8个菌株均有gyrA基因突变,导致氨基酸变异为Ser-83→Leu,其中包括对左氧氟沙星耐药的4个菌株;所有对环丙沙星敏感的菌株未出现gyrA基因突变.结论 gyrA基因突变决定鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药.     

左氧氟沙星联用利福平降低对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度的研究

目的在体外研究左氧氟沙星联用利福平对金黄色葡萄球菌防耐药突变浓度(MPC)的影响,为临床合理联用抗菌药物,防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法富集浓度为1010CFU/ml金黄色葡萄球菌ATCC25923菌株,采用琼脂平板二倍稀释法测定左氧氟沙星、利福平单药以及两药以不同浓度联用时对金黄色葡萄球菌ATCC 25923的防耐药突变浓度和耐药突变选择窗(MSW)。结果左氧氟沙星、利福平单药对金黄色葡萄球菌ATCC 25923的MPC分别为1.0μg/ml和480μg/ml,MSW分别为10和30000;在联用利福平浓度由0.008~16.38μg/ml时,左氧氟沙星对ATCC25923的MPC由1.0μg/ml降至0.25μg/ml;在联用左氧氟沙星浓度由0.25~0.80μg/ml时,利福平对ATCC 25923的MPC由4.096μg/ml降至0.016μg/ml。结论利福平和左氧氟沙星联合用药可降低各自单药对金黄色葡萄球菌ATCC 25923的MPC,缩小MSW。     

万古霉素分别联合三种抗菌药物对异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的影响

目的体外探讨万古霉素联合利福平、左氧氟沙星、夫西地酸三种抗菌药物后,对异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)耐药突变选择窗的影响。方法应用菌群分析曲线法,从临床115株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中筛选出6株hVISA,体外E-test法测定6株hVISA及标准菌株Mu3对万古霉素的最低抑菌浓度(MIC),琼脂平板稀释法测定上述菌株对万古霉素单药及联合利福平、左氧氟沙星、夫西地酸三种抗菌药物后防耐药突变浓度(MPC),分别计算联合前后的选择指数(SI),根据选择指数的变化,观察万古霉素与其它抗菌药物联合后对hVISA耐药突变选择窗的影响。结果万古霉素单独使用对6株hVISA和Mu3标准株的MPC值范围为64~256μg/ml,SI分别为64~256;万古霉素分别联合利福平、左氧氟沙星及夫西地酸对6株hVISA及Mu3标准菌株的MPC值范围分别为32~64μg/ml,32~64μg/ml和8~16μg/ml,SI范围分别为:16~64,16~64,8~16,SI较万古霉素单独使用时分别下降了2~8倍、2~4倍、8~16倍。结论万古霉素单药对hVISA的MPC较高,突变选择窗较宽,容易筛选出耐药突变菌株,万古霉素联合其他抗菌药物可有效降低其对hVISA的MPC及SI,缩小耐药突变选择窗,减少耐药突变体的产生,以联合夫西地酸效果更明显。     

耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对氟喹诺酮类药物的耐药性分析

目的 了解临床耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌分离株对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药性,以合理使用氟喹诺酮类抗菌药物,采取有效措施控制耐药株的出现.方法 采用K-B和MIC法测定耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对8种常见氟喹诺酮类抗菌药物的敏感性.结果 共分离出耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌276株,对加替沙星、莫西沙星、吉米沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、帕珠沙星、司帕沙星的耐药率分别为46.38％、43.48％、42.72％、55.43％、65.22％、61.96％、52.54％、53.62％,且均明显高于头孢他啶敏感株(P＜0.05);呼吸道、非呼吸道标本的耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌分离株对加替沙星、莫西沙星、氧氟沙星、司帕沙星的耐药率不同,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 耐头孢他啶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌分离株对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率较高,呼吸道、非呼吸道标本分离株对多种常见氟喹诺酮抗菌药物的耐药率不同.     

左氧氟沙星、环丙沙星单用和联合其他抗菌药物对铜绿假单胞菌防突变浓度的研究

目的了解左氧氟沙星、环丙沙星单用及其与头孢他啶、美罗培南、阿米卡星联合使用，对铜绿假单胞菌防突变浓度（MPC）的变化。方法采用琼脂稀释法测定上述抗菌药物单用及联合使用对8株左氧氟沙星、环丙沙星敏感铜绿假单胞菌的MPC，并计算耐药频率。结果左氧氟沙星、环丙沙星单用对上述8株铜绿假单胞菌MPC／MIC分别为8～32、8～16；两药分别与头孢他啶、美罗培南和阿米卡星联合使用，MPC／MIC则降为2～8、2～4、1～2、1～2、4～8和1～8，联合用药较单独用药MPC／MIC下降2～16倍，且其耐药频率也大幅下降。结论联合用药能使耐药突变选择窗变窄，使MPC／MIC降低，减少耐药菌产生。     

万古霉素和利奈唑胺对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌防耐药变异浓度的测定

目的检测万古霉素和利奈唑胺对MRSA的抗菌活性及两种药物对其耐药突变株的选择能力。方法按照美国临床实验室标准研究院推荐的琼脂平板二倍稀释法测定万古霉素和利奈唑胺对临床分离的122株MRSA的最低抑菌浓度（MIC）;平板稀释法测定二者对MRSA的防耐药变异浓度（MPC）。结果万古霉素对122株MRSA的MICrang为0.5～4.0μg/ml,MIC50为1.0μg/ml,MIC90为2.0μg/ml,MPC90为22.4μg/ml,选择指数为11.2;利奈唑胺对122株MRSA的MICrang为1.0～4.0μg/ml,MIC50和MIC90均为2.0μg/ml,MPC90为5.6μg/ml;选择指数为2.8。结论万古霉素和利奈唑胺对MRSA的抗菌活性均较好,作用于MRSA均不容易筛选出耐药突变株;利奈唑胺限制MRSA耐药突变菌株的选择能力强于万古霉素,较万古霉素更不容易筛选出耐药突变株。     

血液病患者医院感染鲍氏不动杆菌耐药性分析

目的了解血液病患者医院感染鲍氏不动杆菌耐药性,为临床预防治疗鲍氏不动杆菌感染与合理用药提供依据。方法收集2009年1月-2012年12月鲍氏不动杆菌临床分离株进行鉴定药敏,采用WHONT5.6软件进行统计分析。结果 4年中共分离鲍氏不动杆菌2 442株,其中2009年分离出770株占31.5%、2010年602株占24.7%、2011年413株占16.9%、2012年657株占26.9%;4年鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物总耐药率,哌拉西林/他唑巴坦为10.7%、头孢他啶为14.0%、美罗培南为21.9%、头孢吡肟为21.9%、氨苄西林/舒巴坦为22.1%、亚胺培南为25.4%、哌拉西林为26.3%,对其他类抗菌药物的总耐药率以左氧氟沙星最低为3.0%,其次为环丙沙星8.8%、阿米卡星12.5%和妥布霉素16.3%。结论血液病患者医院感染分离菌中鲍氏不动杆菌占据重要地位,针对鲍氏不动杆菌耐药率,建议选择β-内酰胺类药物时可选用含酶抑制剂的β-内酰胺类抗菌药物的复合制剂,选择其他类抗菌药物时可选用左氧氟沙星。     

外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用

目的探讨外排泵adeB基因高表达在鲍氏不动杆菌临床分离株产生泛耐药中的作用。方法 M-H琼脂稀释法检测临床分离的泛耐药鲍氏不动杆菌(PRABA)对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)及羰氰氯苯腙(CCCP)处理前后MIC值的变化情况,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光RT-PCR检测泛耐药株adeB基因及adeBmRNA量。结果 PRABA对环丙沙星、四环素、头孢噻肟较CCCP处理前其MIC下降两个折点;头孢西丁下降4个折点,1号与5号菌株庆大霉素下降6个折点,为原MIC值的1/64;10株PRABAadeB基因阳性,2株全敏感鲍氏不动杆菌(PSABA)未检测到adeB基因,PRABAadeB基因mRNA的表达量平均为(0.84E+3)拷贝。结论主动外排泵adeB基因高表达与鲍氏不动杆菌产生泛耐药相关。     

多药耐药鲍氏不动杆菌外排泵基因表达的研究

目的探讨鲍氏不动杆菌对常用抗菌药物的耐药性及与外排泵adeA基因表达水平之间的关系。方法琼脂两倍稀释法检测鲍氏不动杆菌对17种常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);PCR法扩增外排泵编码基因adeA;实时荧光定量RT-PCR法检测adeA基因的mRNA表达水平。结果药敏结果显示,耐药率最高的是亚胺培南,其次是头孢哌酮/舒巴坦,耐药率分别为92.9%、78.8%,临床常用的氨苄西林/舒巴坦、头孢吡肟、阿米卡星、氧氟沙星及环丙沙星耐药率均>50.0%;氨曲南、哌拉西林、头孢噻肟、头孢曲松等抗菌药耐药率相对较低;85株鲍氏不动杆菌中有多药耐药株52株,占61.2%;adeA基因的检出阳性率为81.2%,实时定量RT-PCR结果显示,多药耐药菌株adeA基因的mRNA相对表达量均高于敏感菌株,其中3株相对表达量为敏感菌株平均表达水平>20倍。结论临床分离的鲍氏不动杆菌株耐药情况严重,其主动外排系统adeA基因表达增强在多药耐药性形成中起重要作用。     

Influence of some antibiotics on lipase and hydrophobicity of Acinetobacter baumannii

Effect of four antibiotics (cefotaxime, ceftazidime, cefepime and ofloxacin) at subinhibitory concentrations (sub-MICs) (1/4, 1/8 or 1/16 of the MICs) on lipase and cell surface hydrophobicity of a clinical isolate of Acinetobacter baumannii 16265 was studied. Lipase activity in the majority of the cases was not significantly changed. Small alterations were drug and concentration dependent. The most efficient ceftazidime at 1/4 of the MIC reduced lipolytic activity to 78.7% of the control value. On the other hand, all beta-lactam antibiotics mainly at the highest concentration (1/4 of the MICs) most effectively decreased surface hydrophobicity of the studied strain. Hydrophobicity of treated bacteria evaluated by their adherence to xylene was in the range of 11.2 to 29.9% of the control values. The most efficient was cefepime. Whether the modifications in potential virulence factors of the bacteria tested observed in in-vitro experiments would have the clinical importance, remains to be evaluated.     

Antibiotic resistance as an indicator of bacterial chlorhexidine susceptibility

The antibiotic and chlorhexidine (CHX) susceptibility of 70 distinct clinical isolates: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, Staphylococcus aureus (not MRSA), Streptococcus pyogenes and Enterococcus faecalis (10 of each) were tested using minimal bactericidal (MBC) and/or minimal inhibitory (MIC) concentrations. Non-fermentative bacteria tolerated CHX at high concentrations; Gram-positive cocci, especially S. pyogenes, were the most susceptible. We found a good correlation between CHX and antibiotic susceptibility in both MIC and MBC among Gram-negative bacteria, and mainly in MBC among Gram-positive bacteria. Resistance to ciprofloxacin, imipenem, cefotaxime, ceftazidime, gentamicin and aztreonam appeared to indicate increased CHX resistance among Gram-negative bacteria. This finding gives clinicians the ability to predict CHX susceptibility according to routine antibiotic resistance testing.     

耐碳青酶烯类鲍氏不动杆菌blaOXA基因型检测及同源性分析

目的了解碳青酶烯类耐药鲍氏不动杆菌的耐药性、blaOXA基因型及同源性。方法琼脂稀释法测定鲍氏不动杆菌对14种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),PCR扩增ISAba1、blaOXA23和bla OXA-66/OXA-51基因,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析基因同源性。结果20株鲍氏不动杆菌对亚胺培南和美罗培南均耐药,其中19株为多药耐药株,1株ISAba1和blaOXA-23阳性,2株blaOXA-66阳性,16株ISAba1、blaOXA-23和blaOXA-66均阳性,1株以上3种基因全部阴性;PFGE分析结果显示,A型(12株)、B型(2株)、C型(2株)、D型(3株)、E型(1株)。结论医院感染的鲍氏不动杆菌对碳青酶烯类耐药可能与产OXA-23酶有关,并存在院内的克隆传播。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的分子流行特征分析

目的 研究不同医院分离的鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶的基因型和分子流行特征.方法 采用琼脂稀释法检测64株多重耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC);PCR检测碳青霉烯酶基因、整合酶基因及per基因,选取不同的耐药克隆菌株进行序列测定;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源关系,确定菌株的分子流行特征.结果 50株菌(78.1%)携带blaOXA-23-like基因,经测序分析确定为OXA-23;1株菌检测出blaOXA-58-like基因;57株菌(89.1%)携带I类整合子;25株菌(39.1%)检测出blaPER-1基因.PFGE图谱显示64株菌分为A、B、C、D、E等13个基因型,三家医院分别以A型、B型和U型为主要流行株.结论 三家医院均发现多耐药鲍曼不动杆菌的播散流行,不同医院间和同一医院不同科室间存在同型别流行;三家医院多耐药鲍曼不动杆菌产生的碳青霉烯酶常携带OXA-23型酶,同时检测出blaOXA-58、I类整合子和balPER基因.     

鲍氏不动杆菌医院感染株耐碳青酶烯类药物的耐药机制研究

目的了解医院内获得性耐碳青酶烯类鲍氏不动杆菌(CRAB)的耐药性、同源性、耐药机制。方法采用VITEK-32细菌鉴定仪配套药敏试剂GNS-448进行抗菌药物敏感性试验;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性;通过改良三维试验、聚合酶链反应(PCR)、基因测序等方法分析耐药机制。结果7株耐碳青酶烯类鲍氏不动杆菌显示出同样的耐药情况,对13种抗菌药物均耐药,仅头孢哌酮/舒巴坦有一定的敏感性;PFGE结果表明,7株CRAB为同一克隆株;均产不能被克拉维酸和氯唑西林所抑制的酶;PCR扩增产酶基因检测结果以blaPER、blaVEB、blaVIM、blaIMP、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58的特异引物扩增均未出现阳性条带,blaOXA-23群阳性,并经测序证实为blaOXA-23。结论鲍氏不动杆菌的耐药性严重,耐碳青酶烯类鲍氏不动杆菌流行是医院感染所致,CRAB均产OXA-23型碳青酶烯酶。     

头孢哌酮/舒巴坦对鲍氏不动杆菌体外抗菌特性的研究

目的 了解鲍氏不动杆菌的耐药现状及其对头孢哌酮/舒巴坦的耐药特性,为抗菌药物的选用提供依据.方法 回顾性调查2007-2011年每年1-5月分离的鲍氏不动杆菌临床分布情况;应用VITEK-60全自动微生物分析仪检测鲍氏不动杆菌对常用抗菌药物的耐药性,琼脂稀释法检测头孢哌酮/舒巴坦的最低抑菌浓度(MIC).结果 603株鲍氏不动杆菌主要来源于呼吸道标本,占90.4％,且主要集中于几个重症监护病区,占70.3％;除头孢哌酮/舒巴坦外,鲍氏不动杆菌对其他临床常用抗菌药物的耐药性率均＞60.0％,而头孢哌酮/舒巴坦非耐药株中,近年来处于中介的比例＞50.0％.结论 鲍氏不动杆菌临床分离株的标本来源和病区分布均有明显集中趋势,其临床常用抗菌药物耐药严重,头孢哌酮/舒巴坦非耐药株的MIC值明显增高,需引起关注.