黑曲霉发酵产柚苷酶的工艺优化及热激对提高酶活的影响

对多种产柚苷酶菌株进行筛选,确定黑曲霉FFCC uv-11为发酵菌株,并进行发酵工艺优化,得到最佳条件为发酵时间120 h,接种量10%,培养基初始pH 6.0,碳源种类为柚皮苷,此条件下发酵酶活达到765.85 U/mL。研究热激对黑曲霉发酵产柚苷酶过程的影响,确定热激温度为35℃,热激时机为接种后30 h,热激时长为30 min,此条件下柚苷酶酶活可达970.90 U/mL,是未进行热激处理的1.27倍。     

微生物柚苷酶的研究进展

柚苷酶是一种具有α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶两种酶学活性的酶,在柑橘类产品脱苦、鼠李糖和普鲁宁制备及类固醇的生物转化等方面具有广泛的应用前景。柚苷酶来源广泛,其主要来源为微生物。不同来源柚苷酶的酶学性质往往会存在差异,从而影响其应用领域。系统地从柚苷酶来源、微生物产酶、活力测定、分离纯化与性质、克隆表达、结构、固定化及应用等方面对柚苷酶进行了综述,有助于指导其更好地科学研究和工业化应用。     

响应面法优化超声波辅助提取柚叶多酚的工艺研究

以柚叶为原料,采用响应面法优化超声波辅助提取柚叶多酚的工艺,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken试验设计,对影响柚叶多酚提取率的提取温度、超声功率、液料比、超声时间等工艺条件进行优化,建立了提取各因素与柚叶多酚提取率的二次多项式模型。结果表明,超声波辅助提取柚叶多酚的最佳工艺条件为:提取温度63℃、超声功率245 W、液料比(m L/g)25、超声时间28 min,柚叶多酚提取率为29.14 mg/g,与模型预测值(29.42 mg/g)相比,其相对误差为0.95%,验证了该模型的有效性。     

超声波法提取山杏仁中苦杏仁苷的单因素试验研究

以产自平顶山市鲁山县的山杏仁为原料,采用紫外分光光度法,以苦杏仁苷的得率为指标,研究超声波提取法中固液比、乙醇浓度、提取温度、提取时间及超声功率对苦杏仁苷提取效果的影响。单因素试验结果表明,超声波法提取苦杏仁苷的最佳单因素工艺参数为固液比1∶5、乙醇浓度80%、提取温度70℃、提取时间40 min、超声功率64 W。单因素方差分析的结果表明,固液比、乙醇浓度、提取温度、超声功率四个因素对苦杏仁苷得率的影响都极其显著,而提取时间对苦杏仁苷得率的影响是不显著的。Fisher LSD多重比较结果显示,各因素不同水平之间对苦杏仁苷得率影响的差异显著性也有所不同。     

RSD法优化紫葡萄皮花色苷超声辅助萃取工艺研究

紫葡萄皮糖苷是一种水溶性色素,以紫葡萄皮为材料。采用超声工艺提取,以超声功率、超声温度、超声频率、超声时间为主要因素,通过测定花色苷的吸光值,采用pH示差法以确定其含量,应用响应面设计进行优化。试验结果表明,紫葡萄皮糖苷超声提取最优提取条件为：超声功率286 W,超声温度为45.2℃,超声频率为48.8kHz,超声时间为45min。此时花色苷得率为0.235g/100g。     

高产柚苷酶菌株的筛选研究

以桔皮粉为诱导底物,采用富集培养的方式从堆积腐烂桔皮的泥土中筛选出一株高产柚苷酶（Nnring—inase）的生产菌株WP-108,其摇瓶发酵培养测定其酶活力达910．1U／mL,同时其继代培养稳定性良好．通过对菌株的培养特征,形态特征的观察,初步鉴定该菌株为黑曲霉（Aspergillusniger）．     

纤维素酶提取漳州血柚皮总黄酮的工艺研究

以漳州血柚皮为原料,利用纤维素酶对血柚皮总黄酮进行提取,并以硝酸铝显色法测定总黄酮提取率.分别对酶用量、pH值、酶解温度、酶解时间进行单因素实验和正交试验,并通过极差、方差分析对提取过程显著影响提取率的因素进行统计分析.结果表明,纤维素酶提取血柚皮中的总黄酮的优选工艺条件为：酶用量5.5%,pH 5.2,酶解温度52℃,酶解时间为50 min,该工艺条件下血柚皮总黄酮的提取率可达1.52%.     

生物转化法水解牛蒡子苷制备苷元

采用黑曲霉CGMCC No.2594发酵产生的β-萄糖苷酶酶液水解牛蒡子苷制备牛蒡子苷元.黑曲霉CGMCC No.2594发酵生产β-葡萄糖苷酶的最佳产酶时间为7 d.水解时添加200mmol/L的硫酸镁有利于提高牛蒡子苷元产率.β-萄糖苷酶酶液放置于4℃冰箱中冷藏15 d仍然具有较高的酶活.当牛蒡子苷初始浓度为0.3 mmol/L,添加200 mmol/L硫酸镁,最佳初始pH值为6.0,最佳温度为30℃,摇床转速为150 r/min时,β-葡萄糖苷酶酶液水解牛蒡子苷36 h牛蒡子苷元的产率可以达到94.7%.在36 h内黑曲霉CGMCC No.2594发酵产生的β-葡萄糖苷酶酶液水解牛蒡子苷的过程符合Monod方程,动力学常数Vm=1.7×10-2 mmol/(L·d),Km=2.2×10-1 mmol/L,实验数据与模型数据能够很好地吻合.     

一种脂肪酶催化柚皮苷酯化反应的研究

为了增加柚皮苷的脂溶性从而使其具有更好的生物利用度,首次用脂肪酶lipase TL IM(Thermomyceslanuginosus)催化,以乙酸乙烯酯、月桂酸乙烯酯和棕榈酸乙烯酯等乙烯酯类为酰基供体,对柚皮苷进行选择性酯化.系统地研究了有机介质中固定化脂肪酶催化合成柚皮苷脂肪酸酯的影响因素,实验先对有机溶剂的体积比和底物的摩尔比进行探讨,再对反应温度和反应时间进行研究.结果表明:溶剂、底物摩尔比、温度及反应时间等方面对柚皮苷酯化反应有不同程度上的影响,在最佳条件下,酯化产物产率可高达85%.     

超声辅助酶解谷朊粉制备ACE抑制肽工艺优化

以谷朊粉为原料,采用超声辅助碱性蛋白酶酶解制备ACE抑制肽,并对碱性蛋白酶酶解条件进行单因素分析及正交试验设计,确定最优的水解工艺条件.研究结果表明:超声波作用能够提高酶解的水解度和抑制率,同时能够缩短酶解的反应时间.各因素对水解度的影响顺序为:超声功率>酶浓度>温度>时间;最佳酶解工艺条件为:酶浓度为30 mg/g、功率为250 W、时间为60min、温度为50℃,此时水解度为14.64%,抑制率为80.37%.