人T细胞白血病裸鼠异种移植瘤生长过程的病理形态学的动态观察

本文采用裸鼠皮下多点移植的方法,动态地观察了人T细胞白血病裸鼠异种移植瘤在体内的生长过程,发现在潜伏期内移植的瘤块大部分坏死,由残留周边部的瘤细胞开始增殖。在瘤细胞增生旺盛期,少数瘤细胞出现凋落和瘤细胞吞噬凋落体现象。晚期瘤块中心出现坏死。这些观察为正确地判定抗癌药物的疗效有重要意义。     

树突状细胞诱导抗裸鼠人肝癌移植瘤免疫

[目的]讨究树突状细胞（DC）体外诱导的抗肝癌细胞免疫能否预防裸鼠人肝癌移植癌发生及抑制课鼠人肝癌移植瘤生长。[方法]联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（GM－CSF）及白介素－4（IL－4）直接从肝癌患者外周血中培养DC：以人肝癌细胞系HepG2肿瘤细胞的肿瘤抗原粗提物刺激DC；DC激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞（CYL）；以DC激活的CIL预防性接种于探鼠皮下观察其后接种的人肝癌细胞系HepG2移植瘤发生率；并观察该CTL对已接种裸鼠的人肝癌细胞系HepG2移植瘤生长的影响。[结果]DC诱导的工体外对HepG2肿瘤细胞具有高效而特异杀伤作用，在裸鼠体内不能预防探鼠人肝癌细胞系HepG2移植瘤发生，而且能抑制该移植瘤生长。[结论]经肝癌肿瘤相关抗原激活的肝癌患者外用血DC体外诱导的抗肿瘤细胞免疫在体内外均具有良好的抗肿瘤作用。提示DC作为一新概念上的抗肿瘤疫苗有可能在人肝癌的预防及治疗中发挥重要作用。     

γδT细胞在细胞免疫治疗骨肉瘤中的潜在作用

γδT细胞是T淋巴细胞中一类数量比较少的细胞,不受MHC I、Ⅱ类分子以及相关抗原肽配体限制,可直接识别抗原,分泌细胞因子溶解靶细胞,具有广泛的抗肿瘤活性.在骨肉瘤患者中,γδT细胞可通过识别骨肉瘤细胞表面相关抗原,溶解杀灭肿瘤细胞.未来以γδT细胞为基础的细胞免疫疗法联合手术、化疗等方法可在较大程度上提高骨肉瘤患者生存率.     

树突状细胞诱导的抗大肠癌免疫预防裸鼠移植瘤发生并抑制其生长

目的　研究大肠癌患者外周血树突状细胞（ Ｄ Ｃ）体外诱导抗肿瘤免疫反应能否预防裸鼠移植瘤发生及抑制裸鼠移植瘤生长。方法　联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ）及白介素４（ Ｉ Ｌ４）从大肠癌患者外周血中培养出 Ｄ Ｃ;人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 细胞的肿瘤抗原粗提物刺激 Ｄ Ｃ; Ｄ Ｃ激活同源的 Ｔ 淋巴细胞; Ｄ Ｃ激活的 Ｔ 淋巴细胞预防性接种于裸鼠皮下,观察随后接种的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生率;观察 Ｄ Ｃ 激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制已接种于裸鼠的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤生长。结果　 Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞明显能预防裸鼠人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生（预防组 １０％ , 对照组 １００％ , Ｐ＜ ０００１）; Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制该移植瘤生长〔对照组、治疗组 及加强 治疗组 肿瘤 大小分 别为 ８７３ｍ ｍ ２ ±１９ｍ ｍ ２ 、５６９ｍ ｍ ２ ±１７ｍ ｍ ２ 、３６１ｍ ｍ ２ ±２６ｍ ｍ ２ , Ｐ＜ ００５ 及 Ｐ＜ ００１〕。结论　大肠癌患者外周血 Ｄ Ｃ体外诱导的抗肿瘤细胞免疫反应不仅能预防人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 裸鼠移植瘤发生,而且能抑制该移植瘤生长     

2023年γδT细胞肿瘤治疗领域重大进展

γδT细胞是一类表达γδTCR异源二聚体的特殊固有免疫T细胞。过去,缺乏对其全面系统的基础研究,在其发育、分化、增殖、活化、效应和耗竭等所有环节仍有很多问题尚不清楚。然而,因为成熟的γδT细胞优势定植于皮肤、消化道、呼吸道、生殖道等肿瘤高发的黏膜组织,能以MHC非限制性的方式直接识别和杀伤多种肿瘤细胞,在肿瘤免疫治疗领域具有不可替代的优势,近年来其应用异军突起,发展迅速,也因此反过来促进了基础研究的深入,取得了一些亮眼的进展。本文对2023年γδT细胞在肿瘤免疫治疗领域的重大进展进行述评,主要集中在γδT细胞肿瘤抗原识别机制、肿瘤微环境中γδT细胞的功能调控、γδT细胞抗肿瘤细胞毒活性的机制、新型基于γδT细胞的肿瘤免疫治疗协同增效策略四个方面,以期推动γδT细胞在肿瘤免疫治疗领域的进一步发展,为临床γδT细胞应用协同增效的策略提供新的思路。     

HIF-1α基因沉默对裸鼠人肺癌移植瘤放射敏感性影响的观察

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因沉默对裸鼠肺癌移植瘤放射敏感性的影响。方法:采用A549和A549/HIF-1α(-)细胞株建立人肺癌移植瘤模型,分别给予5、10、15和20Gy单次剂量X射线照射,观察放射治疗对肿瘤的抑制作用,根据肿瘤生长延缓和照射剂量分析肿瘤剂量效应及HIF-1α基因沉默对在体肿瘤放射敏感性的影响。结果:放射治疗能明显抑制肿瘤生长,并观察到随照射剂量的增加肿瘤生长延缓愈显著,接受等剂量照射HIF-1α基因沉默肿瘤生长延缓更明显,根据肿瘤剂量效应曲线计算放射增敏比分别为1.40、1.34和1.31。结论:放射治疗能显著抑制A549和A549/HIF-1α(-)肿瘤生长,A549/HIF-1α(-)肿瘤对放射治疗更敏感。     

γδT细胞识别机制研究进展

γδT细胞在肿瘤免疫治疗中具有重要潜力,其识别抗原的特异性和MHC非依赖性使其成为治疗的有力工具。然而,γδT细胞在肿瘤发生发展过程中发挥着复杂多样的双向作用,包括产生促进肿瘤生长的IL-17。近期的研究进一步揭示了γδT细胞的识别机制,包括Vγ9Vδ1 TCR对EphA2的识别机制、Vγ9Vδ2 T细胞激活依赖于磷酸抗原（pAg）介导的BTN2A1-BTN3A1蛋白相互作用,以及TCR链介导的Vδ3亚群识别机制。这些发现为肿瘤免疫治疗提供了新思路,例如通过促进EphA2的表达来增强Vδ1T细胞的杀伤作用,通过干预BTN3A1-BTN2A1相互作用来控制Vγ9Vδ2 T细胞的异常活化等。随着对γδT细胞识别机制研究的不断深入,将为深入理解它们在免疫监视中的角色、优化肿瘤免疫治疗策略提供了新视角和有力支持。     

肺癌患者外周血γδT细胞的检测及意义

 目的　探讨肺癌患者群体的γδT细胞的功能状态。方法　应用流式细胞术检测124例手术前肺癌患者（肺癌组）和56名健康职工（健康对照组）外周血γδT细胞。结果　γδT细胞健康对照组为（6.54±2.90）%,患者组为（3.76±2.81）%（t＝3.568,P＜0.001）。肺癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于健康人（P＝0.000 ）;肺癌组织学分类、T 分期、N分期、M分期、临床分期、大体分型、病变部位各组与健康对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;肺癌患者中不同年龄、性别各组患者外周血中γδT细胞比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　γδT细胞减少对肺癌的发生有重要影响。     

裸鼠人胃腺癌SGC-7901原位移植模型的构建及其生物学特性

目的 :建立裸鼠人胃癌原位移植模型。方法 :以反复接种传代于裸鼠皮下的SGC 790 1人胃癌细胞株建立的移植瘤组织块为材料 ,将其原位移植于裸鼠胃壁 ,观察移植肿瘤的生长情况、移植成功率和自发转移的发生率。结果 :原位移植成功率及局部浸润率为 8 8,局部淋巴结转移率为 8 8,肺转移发生率为 5 8,肝转移发生率为 7 8,腹膜转移发生率为 7 8。结论 :裸鼠人胃癌原位移植模型的生物学行为与人胃癌自然生长和转移过程相似 ,可作为肿瘤转移机制及其抗转移治疗实验研究的理想模型     

人卵巢小细胞癌裸小鼠移植瘤细胞超微结构研究

对我所建立的人体卵巢小细胞癌裸小鼠移植瘤模型的各代移植瘤组织进行超微结构观察。发现除光镜原已看到的大、小细胞外,尚有第三种细胞。后者有核畸变,呈多形性等特征,一般大小介于大、小细胞之间,故名中间细胞。分析了三种细胞在超微结构上之异同,并讨论它们之间可能存在的关系。     

透明质酸对鼻咽癌细胞增殖及裸鼠移植瘤生长特性的影响

研究透明质酸对鼻咽癌细胞体内外增殖特性的影响。方法以鼻咽吕ＣＮＥ－２Ｚ细胞为对象,采用增殖实验,裸鼠内成瘤实验,图像分析及免疫组化等方法,观察ＨＡ对癌细胞体内外增殖力的影响。结论ＨＡ对鼻咽癌细胞体外增殖及裸移植瘤的生长有明显促进作用,有助于进一步研究鼻咽癌的侵袭和转移机理。     

γδT细胞的细胞毒活性研究

目的 探讨选择性扩增人γδT细胞的方法及其细胞毒活性。方法 用耐热性结核杆菌分子多肽抗原（Mtb)刺激正常人PBMC，并用磁珠阳性分选法获得高纯度的γδT细胞，通过MTT试验观察γδ细胞对人红白细胞白血病细胞K562的细胞毒活性。结果 Mtb刺激及磁珠分选后的γδT细胞可达73％和98．05％，效靶细胞比例为10：1时其对K562细胞的杀伤率分别为59％和78．5％。结论 Mtb刺激及磁珠分选所获得的高纯度γδT细胞可介导对K562细胞的高效细胞毒活性。     

瘤内注射pSTbAT-脂质体复合物对裸鼠移植瘤抑制效应的实验研究

目的：构建血管生成抑制因子arresten基因的真核表达载体，并观察瘤内注射质粒DNA-脂质体复合物对裸鼠移植瘤生长的影响。方法：利用PCR方法，由重组质粒pGEM-Arr中扩增出基因；将该基因定向克隆于真核表达载体中。20只裸鼠皮下注射Hepp2细胞，成瘤后以成功构建的质粒DNA-脂质体复合物瘤内注射，治疗后采用免疫组化方法检测肿瘤血管密度，并利用arresten基因瘤内注射的方法对抑制肿瘤的效果进行分析。结果：我们成功构建arresten基因真核表达载体(psTbAT)。实验组肿瘤生长速度较对照组慢(实验组平均15．3个阳性血管／10个视野，对照组平均112．5个阳性血管／10个视野)。结论：瘤内注射arresten基因质粒-DNA复合物能抑制裸鼠移植瘤的血管生成，并能抑制移植瘤的生长。     

人外周血γδT细胞选择性增殖及其体内抗肿瘤的特性研究

观察人外周血γδＴ细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应。方法用ＭＥＰ和ＩＬ┐２共刺激培养方法,扩增人外周血γδＴ细胞,与人肠癌细胞系（ＬｏＶｏ）细胞混合接种于裸鼠体皮下。结果经共刺激培养１０天后,细胞总数可增加１００～３００倍,γδＴ细胞的比率上升到７０％以上。给裸鼠接种１×１０６ＬｏＶｏ细胞１个月后,不接种γδＴ细胞的对照组裸鼠皮下瘤块重量为０．４ｇ～０．９ｇ,瘤块病理切片显示有明显肿瘤细胞堆积;而同时接种１×１０７γδＴ细胞的实验组裸鼠瘤块重量仅为０～０．００５ｇ,瘤块病理切片显示其中除肿瘤细胞外,还伴有增生性淋巴细胞。结论人外周血γδＴ细胞能有效地抑制人肠癌细胞ＬｏＶｏ在裸鼠体内的生长。     

食管鳞状细胞癌患者γδT细胞研究

 目的 探讨食管癌患者机体γδT细胞水平及与临床的关系，为γδT细胞在食管癌综合治疗中的应用提供依据。方法 采用流式细胞术测定食管癌患者外周血中和癌组织中γδT细胞水平，分析其与临床的关系。结果 癌组织中浸润γδT细胞水平显著高于癌旁组织（P = 0.045）；食管癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于正常人（P = 0.011）；食管癌术后患者外周血中γδT细胞水平显著高于术前患者（P = 0.037）。食管癌T分期、N分期、M分期、大体分型、病变部位、病变长度（3 ~ 5 cm组和5 cm组）、组织学分级各组与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。食管癌患者外周血中总T细胞，各组与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；外周血中γδT细胞年龄、性别、病变长度（＜3 cm），各组与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 γδT细胞在机体抗食管癌中发挥重要作用，手术切除肿瘤后可使患者γδT细胞恢复正常水平。     

人γδT细胞、CD3AK细胞、CIK细胞和树突状细胞对已建立胃癌裸鼠的治疗作用

目的 探讨胃癌患者外周血γδT细胞、CD3AK细胞、CIK细胞和树突状细胞(DC)对已建立的胃癌裸鼠的免疫治疗作用.方法 用人胃癌细胞株(SGC-7901)接种BALC/c裸鼠皮下,建立胃癌裸鼠模型.将已建立胃癌的裸鼠随饥分为4组,每组5只,A组:用RPMI-1640培养液治疗作为对照组;B组:DC+CIK细胞治疗组,C组:γδT细胞治疗组;D组:DC+CD3AK细胞+γδT细胞治疗组,治疗组每次治疗同时给予IL-26000单位,肿瘤细胞接种第4天开始治疗,以后每3 d进行一次治疗,共3次,从接种肿瘤细胞后第55天结束实验.结果 裸鼠接种5 × 106胃癌细胞后第4天,存接种部位均有肿瘤形成,直径为2～3 mm,成瘤率为100%.荷瘤小鼠经第一次细胞免疫治疗3 d后B、C、D组肿瘤消退裸鼠分别为1、2、1只,第2次细胞免疫治疗后肿瘤消退的裸鼠的数目分别为2、2、2只,末消退的肿瘤体积均有减少,而对照组肿瘤体积不断增大.在第一次治疗后20 d时测A、B、C、D组平均肿瘤体积分别为87、40、45和38 mm3,各治疗组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).治疗组存活天数较对照组存活天数长,其中C组与D组存活天数比较差异有统计学意义(P<0.01),D组长于C组.结论 用胃癌患者的DC+CIK细胞、γδT细胞、DC+CD3AK细胞+γδT细胞治疗胃癌裸鼠能不同程度消退裸鼠已建立的胃癌和延缓其生长.细胞免疫治疗能延长荷瘤裸鼠生存期,其中 D组免疫治疗后小鼠存活天数大于C组.     

人γδT细胞、CD3AK细胞、CIK和DCs对荷胃癌裸鼠的疗效

Rosenberg等将LAK细胞应用于临床以来,人们对肿瘤的细胞免疫治疗进行了深入的研究.由于肿瘤细胞分泌的免疫抑制因子和肿瘤微环境,以及荷瘤机体抗肿瘤免疫效应细胞不同程度地存在数量和质量上的异常,因此,在肿瘤细胞免疫治疗上必须用固有免疫细胞联合适应性免疫细胞进行治疗,才能有效地清除肿瘤细胞或抑制肿瘤生长.本研究应用术后2年末复发胃癌患者的树突状细胞(dendritics cells,DCs)、CIK细胞、CD3AK细胞和γδT细胞对已建立的人胃癌(SGC-7901细胞株)模型裸鼠进行单独或联合治疗,以观察这些细胞单用和联用的治疗效果.     

γδT细胞与疾病的关系

γδT细胞已是当今细胞治疗研究的热点,活化的γδT细胞具有较强的杀伤活性,具有抗感染、抗肿瘤作用;γδT细胞还可以维持免疫耐受,调节免疫应答,其异常可导致自身免疫性疾病的发生,本文就γδT细胞在这几方面的作用作一综述。