胰岛素免疫放射分析方法的建立

摘要：采用两株抗胰岛素单克隆抗体，一株包被聚苯乙烯试管作为固相抗体、另一株标记125I，建立了胰岛素测定的双抗体夹心免疫放射分析方法。其方法学灵敏度为2.8mIU/L；曲线范围5～160mIU/L；批内、批间变异系数分别小于5%、10%；回收率92.3％～112.6％；高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数0.996；39例健康人血清样品测定值为4.7～14.3mIU/L，该方法与胰岛素放射免疫分析法的相关性良好（r=0.981）。     

人胰岛素酶联免疫分析法的建立

采用两株抗胰岛素单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯板、另一株标记辣根过氧化物酶,建立了测定人胰岛素的双抗体夹心酶联免疫分析法。方法学研究表明,本方法的灵敏度为1.7mIU/L,曲线范围5~160mIU/L,批内、批间变异系数分别小于11%、15%,回收率96.4%~111.1%;高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.998;38例健康人血清样品测定值为3.6~10.8mIU/L。该方法与人胰岛素放射免疫分析法测定结果的相关性良好,r=0.97。     

催乳素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用两株催乳素(PRL)单克隆抗体,一株包被化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,研制了测定人血清PRL浓度的酶促化学发光免疫分析试剂盒。本试剂盒测定范围50~4 000 mIU/L,灵敏度4.26 mIU/L,批内、批间变异系数分别小于10%、15%,回收率90.3%~100.8%;血清样品倍比稀释后的测定值和稀释度的相关系数为1;本试剂盒正常参考值范围:女性43.2~513.1 mIU/L(n=52),男性54.8~334.3 mIU/L(n=68)。     

人促甲状腺激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心法建立了定量检测人血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗TSH抗体包被96孔微孔板,另1株与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物,鲁米诺-过氧化氢作为发光底物。该方法测量范围为0.1～100 mIU/L,分析灵敏度为0.04 mIU/L,批内、批间变异系数分别为3.98%～6.48%和4.61%～13.1%,回收率为95.8%～117.4%,高浓度TSH样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数大于0.99。与LH的交叉率＜1.62%,与FSH和HCG的交叉率分别＜0.05%和＜0.02%。与罗氏化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y＝1.10x-0.207,相关系数r＝0.969。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y＝1.00x+0.191,相关系数r＝0.965。本方法操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

人血清CA15-3免疫放射分析法的建立

一株CA15-3单克隆抗体用于^125I标记，另一株CA15-3单克隆抗体包被试管作为固相抗体，建立了双位点夹心肿瘤标志物CA15-3免疫放射分析法。CA15-3标准品以CIS公司免疫放射分析药盒标准品校正。最小检测限为0.4U／mL；批内、批间变异系数分别为6．0％～6．2％和4．1％～5．9％；样品中加入已知量CA15-3测定，回收率为86．8％～118．6％；高浓度CA15-3的血清样品系列倍比稀释后测定，实测值和计算值呈线性相关，相关系数大于0.99；38例健康女性血清样品测定值为5．7～23．7U／mL。     

肿瘤标志物CA125免疫放射分析试剂盒的研制

采用两株CA125单克隆抗体,一株用于125I标记,另一株包被于试管作为固相抗体,稀释卵巢癌患者腹水制备标准品,建立了双位点夹心法人血清肿瘤标志物CA125免疫放射分析法.标准曲线的最大标准点免疫结合与零标准非特异结合之比大于100;最小检测限为1.0 U/mL;批内、批间变异系数分别为 4.4%～5.8 %和8.4%～9.9 %;样品中加入已知量CA125测定,回收率为96.8%～112.5%;对含高浓度CA125的血清样品稀释测定,结果表明方法的健全性良好.38例健康女性血清样品测定值范围为2.9～24.1 U/mL;±2s为9.6±9.6 U/mL.     

β2-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒的研制

以β₂-微球蛋白（β₂-MG）抗体包被微孔板，四甲基联苯胺（TMB）为底物，用辣根过氧化物酶标记β₂-MG，建立了β₂-微球蛋白酶联免疫分析试剂盒，并对该方法进行了方法学分析。结果显示：本方法分析灵敏度为0.15 mg/L，批内、批间变异系数分别为4.1％～11.2%和14.1％～16.0％，回收率为93.3%～115.9%，高浓度β₂-MG样品系列倍比稀释后，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数为r=0.997 4。特异性结果显示：本试剂盒与铁蛋白基本无交叉反应，与白蛋白及甲胎蛋白在浓度分别低于10 mg/L及5 mg/L时有交叉反应，但反应很小。与放射免疫分析法（RIA）同时测定人血清样品，方法间有良好的相关性，相关方程为y_ELIA=1.006x_RIA+0.406，r=0.900(n=59)。以上参数均符合临床免疫分析的要求。本试剂盒操作简便、快速，适用于临床检测和科研应用。     

固相抗体包被管法TSH免疫放射分析

采用TSH单克隆抗体包被聚苯乙烯试管，并对抗体包被条件进行了研究，建立了TSH免疫放射分析法。结果表明：在2～8℃下过夜包被，抗体浓度为2.1mg/L时，制备的包被管用于TSH免疫放射分析，结合达到最大；不同浓度下包被，包被温度和时间对制备的包被管的影响不同。TSH免疫放射性分析最小检测限为0.05mIU/L；回收率为88.4%～100.0%；批内、批间变异系数分别为7.4%～10.9%和8.7%～10.7%。46例健康人血样测定值为0.3～6.2mIU/L。     

人促甲状腺激素酶联免疫吸附分析试剂盒的研制

TSH多抗用于固相包被，一株TSH单抗与辣根过氧化物酶偶联制备TSH标记物，以四甲基联苯胺（TMB）为底物，采用二步法，建立了TSH酶联免疫吸附分析法（ELISA）。本方法灵敏度为0.06mIU/L，批内CV≤5.9%(n=8)，批间CV≤9.1%(n=7)。回收率为（98．4－101．4）％。77例正常人血清的TSH均值为1.96mIU/L，用本法与IRMA法同时23例病人血样，两者相关方程为Y＝1．01X－0．47，相关系数r=0.992。本方法具有简便，快速和准确的特点，适于临床检测和科研应用。     

糖类抗原CA19-9免疫放射分析法的建立

采用两株CA19-9单克隆抗体,一株用于125I标记、另一株包被于试管作为固相抗体,用血清稀释CA19-9抗原,制备标准品,建立了CA19-9双位点夹心免疫放射分析方法（IRMA）。分析采用两步法,本方法最小检测限为2.0 U/mL,批内、批间变异系数分别为 6.4%~9.5%和6.0%~12.6%,样品添加实验结果显示,回收率为88.1%~106.1%,血清样品倍比稀释后测定,测定值和稀释度的相关系数为0.990。CA19-9浓度至11800 U/mL时测定未见“弯钩”效应。69例健康人血清样品测定值为0.3~29.6 U/mL（ ±s 为7.4±5.8 U/mL）,和法国CIS公司的CA19-9免疫放射分析药盒同时测定84例人血清样品,二者测定值相关方程为y=1.32x-17.6,相关系数r=0.896。相似文献   

高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH) 酶联免疫分析试剂盒

以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %～ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3～ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA 0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 ,适用于临床检测和科研应用     

促卵泡激素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用双抗体夹心法建立了测定人血清FSH酶促化学发光免疫分析方法。本方法的测量范围为1．5～100IU／L,灵敏度为0．36IU／L,批内变异系数为1．0％～1．6％,批间变异系数为4．0％～4．6%,回收率为90．6％～117．8％,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0．990。与TSH的交叉率〈0．23％,与LH和HCG的交叉率分别〈0．16％和〈0．27％。与贝克曼化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y=0．85x—0．03,相关系数r=0．954。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y=0．97x＋5．29,相关系数r=0．965,与放射免疫分析试剂盒,进行比较,相关性方程为y=0．95z-3．82,相关系数r=0．954。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

前列腺抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1.5～80μg/L,灵敏度为0.12μg/L,批内变异＜5%,批间变异＜15%。回收率为83.8%～118.7%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.999。本方法与免疫放射分析方法的相关方程y=1.07x+0.68,相关系数r=0.97。     

ICP-OES测定环境水样中的钾-40

建立了利用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)测定环境水样中钾-40的方法。此方法标准工作曲线线性关系良好,检出限为0.001 Bq/L,相对标准偏差小于1.5%,相对误差小于4.0%,加标回收率在94.1%~105.5%之间,具有前处理简单、检出限低、精密度和准确度高、干扰小等优点,值得推广应用。     

Conceptual design and heat transfer performance of a flat-tile water-cooled divertor target

The divertor target components for the Chinese fusion engineering test reactor (CFETR) and the future experimental advanced superconducting tokamak (EAST) need to remove a heat flux of up to ～20 MW m-2.In view of such a high heat flux removal requirement,this study proposes a conceptual design for a flat-tile divertor target based on explosive welding and brazing technology.Rectangular water-cooled channels with a special thermal transfer structure (TTS)are designed in the heat sink to improve the flat-tile divertor target's heat transfer performance(HTP).The parametric design and optimization methods are applied to study the influence of the TTS variation parameters,including height (H),width (W*),thickness (T),and spacing (L),on the HTP.The research results show that the flat-tile divertor target's HTP is sensitive to the TTS parameter changes,and the sensitivity is T ＞ L ＞ W* ＞ H.The HTP first increases and then decreases with the increase of T,L,and W* and gradually increases with the increase of H.The optimal design parameters are as follows:H =5.5 mm,W* =25.8 mm,T =2.2 mm,and L =9.7 mm.The HTP of the optimized flat-tile divertor target at different flow speeds and tungsten tile thicknesses is studied using the numerical simulation method.A flat-tile divertor mock-up is developed according to the optimized parameters.In addition,high heat flux (HHF)tests are performed on an electron beam facility to further investigate the mock-up HTP.The numerical simulation calculation results show that the optimized flat-tile divertor target has great potential for handling the steady-state heat load of 20 MW m-2 under the tungsten tile thickness＜5 mm and the flow speed ≥7 m s-1.The heat transfer efficiency of the flat-tile divertor target with rectangular cooling channels improves by ～ 13％ and ～30％ compared to that of the flat-tile divertor target with circular cooling channels and the ITER-like monoblock,respectively.The HHF tests indicate that the flat-tile divertor mock-up can successfully withstand 1000 cycles of 20 MW m-2 of heat load without visible deformation,damage,and HTP degradation.The surface temperature of the flat-tile divertor mock-up at the 1000th cycle is only ～930 ℃.The fiat-tile divertor target's HTP is greatly improved by the parametric design and optimization method,and is better than the ITER-like monoblock and the fiat-tile mock-up for the WEST divertor.This conceptual design is currently being applied to the engineering design of the CFETR and EAST flat-tile divertors.     

海绵锆中钨的分析测定——二硫酚锌盐—氯仿萃取分光光度法

用二硫酚锌盐显色,氯仿萃取分光光度法测定海绵锆中钨。探讨了显色剂二硫酚锌盐的制备方法,研究了最佳测定条件。试样经盐酸、氢氟酸溶解,在盐酸介质中,用三氯化钛还原钨,在 (95± 2)℃水浴中与二硫酚锌盐生成蓝绿色络合物,进行比色测定,回收率为 98％～ 100％,相对标准偏差优于 10％,测定范围 0.5～ 200μ g/g。