EGCG氧化产物制备新技术及结构鉴定

采用分级萃取与柱层析相结合的方法制备EGCG氧化产物。将萃取制备的级分Fra.A经D101大孔吸附树脂脱盐后,用80%乙醇洗脱。收集洗脱液,经浓缩及乙酸乙酯萃取后得到橙红色粉末的EGCG氧化产物1。经UV-VIS、HPLC-ESI-MS及NMR等分析与鉴定,产物1可能为dehydrotheasinensin A(m/z 929),为EGCG脱氢二聚体。     

绿茶多酚化合物的精制和抗氧化试验

应用高压液相色谱法和葡聚糖凝胶柱层析技术 ,从绿茶多酚化合物中分离纯化精制EGCG(表没食子儿茶素没食子酸酯 ) ,EGC(表没食子儿茶素 )和ECG(表儿茶素没食子酸酯 )等单体化合物 ,并用油脂氧化稳定测定仪 (Rancimat)对其抗氧化性能进行了试验。结果表明 ,抗氧化性能依次排列为 :EGCG >EGC >ECG >BHT(BHT为商品油脂抗氧化剂 )     

高活性EGCG氧化产物制备条件的优化

EGCG为儿荼素中最主要的活性物质.以抗自由基(·OH)活性大小为指标,研究高活性EGCG化学氧化产物制备的最佳条件.并采用HPLC-MS法分析鉴定氧化产物.结果表明,EGCG体外最佳化学氧化条件为温度25℃、时间15 min、反应体系pH 7.0、氧化剂与EGCG的质量比为1.5:1.在此条件下制备的氧化产物以二聚体为主,产物1、产物3为EGCG脱氢二聚体,产物2为EGCG醌式二聚体.     

葡聚糖凝胶LH-20分离制备生物碱、无咖啡碱茶多酚和茶色素工艺研究

本研究建立了一种环保高效同时分离制备生物碱、无咖啡碱茶多酚和茶色素的葡聚糖凝胶LH-20柱层析方法.第一步使用蒸馏水分离茶色素和生物碱;第二步采用60％(v/v)乙醇溶液反向洗脱得到无咖啡碱茶多酚产品.经定量分析,生物碱得率3.14％,其中含93.87％咖啡碱和6.08％可可碱.茶多酚的得率为12.27％,纯度为98.13％,其中儿茶素含量高达90.28％,抗氧化活性最强的EGCG含量达61.17％,咖啡碱未检出.柱层析对生物碱和茶多酚的回收率分别为98.14％和86.36％.副产的茶色素主要含有一些多酚氧化物以及黄酮苷类混合物,可作为天然色素利用.     

酶法制备乙酰化EGCG在油脂中的抗氧化性能研究

通过非水相脂肪酶催化作用,表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与乙酸乙烯酯反应制备得到乙酰化EGCG.研究了乙酰化EGCG在不同温度下油脂中的溶解性能,采用测色色差计比较不同添加量乙酰化EGCG对植物油色泽和亮度的影响.采用过氧化值法(POV)和Rancimat仪方法考察并比较了乙酰化EGCG、未改性EGCG、2,6-二特丁基对甲酚(BHT)、叔丁基对苯二酚(TBHQ)在不同油脂油中的抗氧化性能.结果表明,乙酰化EGCG在油脂中具有良好的溶解性,在添加量同为200mg/kg时,乙酰化EGCG在油脂中的抗氧化活性要高于未改性EGCG、BHT,略低于TBHQ.     

儿茶素单体分离制备方法

茶叶中含有丰富的儿茶素类物质,占茶叶干重12%～24%,是茶叶中最具生理活性和保健功效的物质。文中对目前国内外纯化制备儿茶素的常见方法进行了综述。常见的儿茶素制备方法包括纤维素柱层析、葡聚糖凝胶(Sephadex LH—20)、硅胶柱层析、吸附树脂柱层析和高速逆流色谱等方法。通过这些方法制备的儿茶素单体纯度不高,仍需结合结晶、制备型液相色谱技术或膜分离技术进行进一步纯化,从而才能获得高纯度的儿茶素单体。在儿茶素单体的制备方法中,每种方法都有相应的优缺点。Sephadex LH—20柱层析分离的量较大,但是分离时间较长,而且Sephadex LH—20柱填料昂贵;高速逆流色谱分离效果较好,得到的儿茶素单体的纯度较高,分离时间相对要短,但是目前市场上只有分析型,分离的量相对少;硅胶材料廉价,但是分离的效果不佳,且分离过程相对繁琐,单体制备量较小;吸附树脂柱层析分离已实现EGCG单体的工业化生产,但在其他儿茶素单体的分离制备上尚不成熟。     

EGCG磷脂复合物抗氧化活性的研究

本文研究了表没食子儿茶素没食子酸酯磷脂复合物的体外抗氧化活性。将EGCG和大豆卵磷脂溶于无水乙醇,制备得到EGCG磷脂复合物。通过高效液相色谱(HPLC)测定,发现制备得到的EGCG磷脂复合物中EGCG的复合率大于99%,并利用紫外扫描、红外光谱、X射线衍射等方法对其结构进行表征,说明通过本实验方法制备得到了目标复合物。通过DPPH、FRAP、TEAC等方法测定EGCG磷脂复合物的体外抗氧化活性,结果表明EGCG磷脂复合物的体外抗氧化能力显著高于VE(P0.05)。同时测定添加EGCG磷脂复合物后,不同贮藏时间(3、6、9、12和15 d)反映大豆油氧化的指标。结果表明EGCG磷脂复合物对于大豆油的氧化具有抑制作用且呈现剂量依赖关系,并且在贮藏15 d时,抗氧化效果显著好于BHT(P0.05)。研究表明,制备得到的EGCG磷脂复合物具有显著的抗氧化活性,并且可以有效抑制大豆油的氧化。     

绿茶下脚料中EGCG的分离与体外抗氧化性能研究

以95%乙醇为溶剂,80℃超声提取,旋转蒸发浓缩,聚酰胺树脂柱层析纯化,得EGCG单体,用TLC和HPLC等方法跟踪和检测,其纯度大于97%,收率为12%。采用紫外可见分光光度法研究EGCG清除二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O-2·)活性。结果表明,与抗坏血酸比较,EGCG有较强清除自由基作用,对DPPH·和O-2·的清除能力大小均为:茶多酚EGCGVC。其IC50值分别为12μg/mL和5.9μg/mL。因而EGCG是一种较好的天然抗氧化剂。     

表没食子儿茶素没食子酸酯与燕麦β-葡聚糖复合物的形成及表征

多酚与膳食纤维间可通过相互作用形成复合物,为了探究多酚与膳食纤维间的相互作用机制及其所形成复合物的结构和形态,本文选用表没食子酸儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)和燕麦β-葡聚糖为原料制备复合物并对其结构进行表征.结果表明:EGCG与燕麦β-葡聚糖复合物的形成与EGCG浓度和...     

中低压C18柱层析分离儿茶素单体的研究

本文采用中低压柱层析制备色谱仪,研究了AB-8大孔吸附树脂、C18、聚酰胺树脂、硅胶4种不同柱层析吸附材料对茶多酚的分离效果,最终选择C18作为最佳层析材料,考察了不同的茶多酚进样量、流速对儿茶素分离效率的影响。结果表明以C18作为柱层析材料,甲醇水溶液进行梯度洗脱,可得到EGCG、GCG、ECG、CG四种儿茶素,其最高总得率为68.44%,且确定最佳工艺条件:350mg茶多酚进样量在20mL/min流速下进行甲醇水溶液梯度洗脱,可获到EGCG,GCG,ECG,CG四种儿茶素,其得率分别为36.19%±0.11%、7.42%±0.14%、12.93%±0.18%、2.40%±0.22%,而其纯度分别为88.85%±0.17%、83.74%±0.09%、96.01%±0.13%、70.67%±0.11%。该工艺操作简单,纯化分离效果较好;可为进行规模化、工业化生产提供参考。     

茉莉花茶中茶多酚的提取分离纯化及其抗氧化性能研究

本实验采用溶剂法浸提茉莉花茶中茶多酚,研究发现,相对最优的工艺条件为:温度70℃,乙醇溶液浓度60%,提取次数1次,提取时间60min。在此浸提工艺下提取到茶多酚粗提物后用石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯相过聚酰胺柱分离纯化,将得到的不同洗脱组分过高效液相色谱检测发现:30%乙醇洗脱组分含表儿茶素没食子酸酯(ECG)最高,60%乙醇洗脱组分中含有表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),95%乙醇洗脱组分主要是儿茶素没食子酸酯(CG)。继而对不同组分进行抗氧化活性研究得出:60%洗脱组分对油脂的抗氧化活性最高;30%洗脱组分与60%洗脱组分对DPPH自由基50%清除率的浓度分别为0.1723mg/ml、0.1693mg/ml。     

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的分离与制备

采用高效液相色谱技术，分离制备茶多酚中表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）。制备工艺：茶多酚原料（EGCG，30％，HPLC）经乙酸乙酯萃取富集，得儿茶素粗提液（EGCG，60％，HPLC），粗提液经层析纯化得EGcG高纯度溶液，溶液经旋转蒸发浓缩，冷冻干燥，得白色粉末（EGCG，99％，HPLC）。     

常熟“沙家浜”绿茶多糖的纯化

以"沙家浜"粗绿茶为原料制取茶多糖,并对茶多糖进行脱蛋白和脱色纯化研究。结果表明:聚酰胺吸附柱层析法作为茶多糖纯化(脱蛋白、脱色)的最佳方法,其脱色的适宜工艺条件为,聚酰胺用量为粗多糖质量的6倍,聚酰胺柱用1.5倍柱体积的去离子水以1.5mL/min的流速进行洗脱,在此工艺条件下,蛋白质脱除率达到95.8%。     

茶树花多酚儿茶素单体分离纯化研究

茶树花多酚样品先经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析预分离,脱除咖啡碱等杂质,并将儿茶素分为八个流分,再用硅胶柱分离纯化,得到四种儿茶素的单体化合物。HPLC测定四种单体儿茶素化合物的纯度,EC纯度98.9%、ECG纯度96.8%、EGCG纯度98.6%、GCG纯度97.1%。     

蛋黄卵磷脂的提取方法研究

为探讨从蛋黄中提取蛋黄卵磷脂的方法。试验以蛋黄为原料,采用有机溶剂和酶解法从蛋黄中提取卵磷脂粗品,然后分别经柱硅胶层析和金属离子沉淀法纯化获得卵磷脂精品,通过测定卵磷脂的含磷量,判断其纯度高低。结果显示:采用有机溶剂法获得蛋黄卵磷脂粗品,然后经柱硅胶层析纯化可获得高纯度蛋黄卵磷脂精品,总得率为8.38%,卵磷脂的含磷量为15.33%。是一种高效、经济的蛋黄卵磷脂提取方法。     

大孔树脂HPD400分离茶皂素的研究

研究了大孔树脂HPD400分离茶皂素的方法。以硅胶柱色谱方法制备得到了茶皂素对照样品,在此基础上建立了比色法测定茶皂素含量的方法。以静态吸附与洗脱方法初步筛选HPD系列大孔树脂,进一步以动态吸附与乙醇梯度洗脱的方法研究了HPD400树脂分离纯化茶皂素的条件。实验结果表明:HPD400大孔树脂的动态饱和吸附容量为109.3 mg/g树脂,30%乙醇洗脱物茶皂素的含量为93.1%,50%乙醇洗脱物茶皂素的含量为87.1%;乙醇的总洗脱率达到80.3%。茶皂素主要由30%的乙醇洗脱,所得样品中茶皂素含量高,HPD400大孔树脂适合茶皂素的分离纯化。     

茶多酚和EGCG对风干金鲳鱼品质相关理化指标的改善效果比较

为比较分析茶多酚及茶多酚的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate,EGCG）对风干金鲳鱼加工过程中品质相关的理化性质的改善作用,在腌制液（8%的食盐溶液）中分别添加0.05%茶多酚、0.05%EGCG和0.02%EGCG,对腌制和风干过程中鱼肉的盐含量、持水率、水分迁移、硫代巴比妥酸反应物（thiobarbituric acid reactive substances,TBARS）值和挥发性盐基氮（total volatile basic nitrogen,TVB-N）值进行检测,并通过气相色谱-离子迁移谱分析风干金鲳鱼加工过程中挥发性风味物质的变化规律。结果显示,添加茶多酚和EGCG均可有效抑制鱼背肉和鱼腹肉腌制和风干过程中TVB-N值和TBARS值升高（P<0.05）,通过减少不易流动水的损失提升鱼肉的持水性,其中0.05%茶多酚改善效果最佳,其次是0.05%EGCG,最后是0.02%EGCG。风干金鲳鱼加工过程中共鉴定出63种挥发性成分,其中醛类、酮类及酯类物质随着腌制风干工艺的进行呈上升趋势,形成风干金鲳鱼独特的风味。添加茶多酚...     

Column-chromatographic extraction and separation of polyphenols, caffeine and theanine from green tea

A highly efficient column-chromatographic extraction (CCE) followed by sequential adsorption to extract and separate bioactive compounds from green tea was developed. Tea powder was loaded into columns with 4-fold solvents and eluted through a cyclic CCE. High-quality tea extracts with greater than 90% extraction efficiencies of polyphenols, epigallocatechin-3-gallate, caffeine, theanine and polysaccharides were obtained with 4-fold water circulated five times among different columns at 70 °C. Similar results, except for low polysaccharide extraction (35.5%), were obtained with 4-fold 30% ethanol circulated three times at room temperature. The highly concentrated water extraction was directly passed through columns of polyamide, DM130 macroporous and 732 ion exchange resins, resulting in high-purity polyphenols (99%), caffeine (98%) and theanine (98%) after simple purification of the eluates from each column. This method uses simple equipment, minimum solvents and can be used for both quantitative analysis and continuous preparation of high-quality tea extracts and bioactive compounds.     

SEPARATION OF INDIVIDUAL CATECHINS FROM GREEN TEA USING SILICA GEL COLUMN CHROMATOGRAPHY AND HPLC

Crude catechin mixtures from green tea were separated into six fractions using a silica gel column chromatography and a chloroform-methanol-water (65:35:10, v/v/v, lower phase) solvent system. Fraction I was free of catechins, fraction II contained epicatechin (EC), fraction III had epicatechin and epigallocatechin (EGC), fraction IV possessed EGC, fraction V contained EGC, epicatechin gallate (ECG) and epigallocatechin gallate (EGCG), and fraction VI had EGCG. EC and EGC were separated from fractions II, III and IV using HPLC with a RP-18 semipreparative column and a water-dimethylformamide-methanol-acetic acid (157:40:2:1, v/v/v/v) solvent system. For isolation of EGC, ECG and EGCG from fractions V and VI a water-acetonitrile-methanol-acetic acid (159:36:4:1, v/v/v/v) solvent system was employed. Chemical structures of purified catechins were further confirmed by ESI-MS.