基质金属蛋白酶及其抑制剂在家兔血管成形术后血管重构中的作用

目的：探讨基质金属蛋白酶及其抑制剂（MMPs/TIMPs）在家兔血管成形术后血管重构中的作用及中药通心络的影响。 方法： （1）家兔65只分4组（对照组5只，拉伤组20只，高脂组20只，通心络组20只）采用高胆固醇（1.5 g·kg-1·d-1）喂养加两次腹主动脉损伤的方法制成动脉粥样硬化和血管成形术模型， X光下行血管成形术。术后分别治疗4周处死，取血管标本进行检测。（2）HE染色计算机图像分析血管形态的变化。（3）MMP2和TIMP1免疫组化分析，RT-PCR方法测定MMP2、TIMP1的mRNA表达量。 结果： （1）HE染色证实有动脉粥样硬化斑块形成，腹主动脉造影显示有管腔狭窄。（2）RT-PCR结果显示通心络组的MMP2和TIMP1 mRNA表达量低于高脂拉伤组P<0.05； MMP2和TIMP1比值更接近1。（3）免疫组化染色通心络组MMP2和TIMP1的阳性细胞吸光度(%)明显低于高脂拉伤组，P<0.05。（4）内膜面积通心络组低于高脂拉伤组P<0.05；而管腔面积高于高脂拉伤组P<0.05；并且管腔面积的增加与内膜面积的减少不相等。 结论： MMP2和TIMP1参与家兔血管成形术后的血管重构，通心络可以调整MMP2和TIMP1的比值。     

血管紧张素Ⅱ对肥厚心肌基质金属蛋白酶及细胞外基质的影响

目的: 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体（AT₁,AT₂）拮抗剂对梗死心脏肥厚心肌组织基质金属蛋白酶(MMPs)及细胞外基质成份的影响。方法: 结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型，术前7 d起分别用安慰剂、AT₁受体拮抗剂撷沙坦（valsartan）（10 mg·kg^-1·d^-1）、AT₂受体拮抗剂PD123319（30 mg·kg^-1·d^-1）。术后1、3、7、14 d分别检测室间隔（IS）MMP-2,3,9及其抑制物-1（TIMP-1）蛋白表达，以及细胞基质纤连蛋白（FN）、肌腱蛋白（TN-C）表达，免疫荧光分析FN、TN-C分布。结果: 心肌梗死14 d, IS呈典型的肥厚心肌病变。 手术组大鼠室间隔MMP-2、3、9及TN-C蛋白表达显著高于假手术组（P<0.01），TIMP-1和FN蛋白表达显著降低（P<0.01）; 手术加valsartan组 MMP-2、3、9 和 TN-C 蛋白表达明显低于手术组及手术加PD123319组, 相反， TIMP-1 和FN 蛋白表达显著高于手术组及手术加PD123319组 (P<0.01); 手术组与手术加PD123319组间MMP-2、3、9、TIMP-1、FN、TN-C蛋白表达差异无显著（P>0.05）。结论: AngⅡ参与心肌梗死心肌组织的重塑，通过AT1起作用调节MMPs降解细胞外基质， AT₁受体拮抗剂的心脏保护作用与其抑制MMPs有关。     

一氧化氮与基质金属蛋白酶介导的血管重构在动脉瘤中的作用

Nitric oxide (NO) and matrix metaUoproteinases (MMPs) are important in vascular remold-ing, especially in abdominal aortic aneurysm. NO may be associated with aneurysms by modulating MMPs expression and activity.     

尾加压素Ⅱ对大鼠损伤血管基质金属蛋白酶的影响

目的 观察外源性尾加压素Ⅱ（UII）及其拮抗剂Urantide对大鼠胸主动脉球囊拉伤模型损伤动脉基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、MMP-2和组织基质金属蛋白酶抑制剂．2（TIMP-2）的影响。 方法构建大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,分为4组：假拉伤组、单纯拉伤组、拉伤术后持续皮下给予UII（1nmol·kg^-1·h^-1）的UII组、拉伤术后持续皮下给予Urantide（10nmol·kg-1·h^-1）的Urantide组。21d后,采用RT-PCR方法检测各组UII受体G蛋白偶联受体-14（GPR-14）的表达,免疫组化和明胶酶谱法检测MMP-1、MMP-2、TIMP-2的表达水平与活性。 结果①单纯拉伤组血管GPR-14mRNA相对表达量（0．66±0．09）明显高于假拉伤组（0．42±0．06）,为其1.6倍（P〈0．05）;②与单纯拉伤组相比,UII组GPR-14mRNA相对表达量增高（0．93±0．06,P〈0．05）,MMP-1表达降低（8.3±1．8VS3．3±0．8,P〈0．05）,MMP-2活性高至其1．25倍（137±24VS172±8,P〈0．05）,TIMP-2表达降低（14．8±2．4VS4．0±0．8,P〈0．05）;③与单纯拉伤组相比,Urantide组GPR-14mRNA相对表达量降低（0．37±0．08,P〈0．05）,MMP-1表达差异无统计学意义,MMP-2活性高至其1．29倍（177±21,P〈0．05）,TIMP-2表达降低（6．6±1．2,P〈0．05）。 结论大鼠胸主动脉损伤后局部GPR-14mRNA水平上调,外源性应用UII后,GPR,14mRNA水平进一步上调,MMP-1表达下降,TIMP-2表达减少,MMP-2活性升高。应用Urantide（10nmol·kg^=1·h^-1）能抑制GPR-14mRNA的水平上调,但对MMP-1的表达无明显影响,未能表现出拮抗胶原沉积的作用,甚至对MMP-2／TIMP-2平衡有类UII的作用,其意义有待进一步研究。     

尾加压素II对大鼠损伤血管基质金属蛋白酶的影响

目的 观察外源性尾加压素 II（UII）及其拮抗剂 Urantide 对大鼠胸主动脉球囊拉伤模型损伤动脉基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、MMP-2 和组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）的影响。 方法 构建大鼠胸主动脉球囊拉伤模型,分为 4 组：假拉伤组、单纯拉伤组、拉伤术后持续皮下给予 UII （1 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）的 UII 组、拉伤术后持续皮下给予 Urantide（10 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）的 Urantide 组。21 d 后,采用 RT-PCR 方法检测各组 UII 受体 G 蛋白偶联受体-14（GPR-14）的表达,免疫组化和明胶酶谱法检测 MMP-1、MMP-2、TIMP-2 的表达水平与活性。 结果 ①单纯拉伤组血管 GPR-14 mRNA 相对表达量（0.66 ± 0.09）明显高于假拉伤组（0.42 ± 0.06）,为其 1.6 倍（P < 0.05）;②与单纯拉伤组相比,UII 组 GPR-14 mRNA 相对表达量增高（0.93 ± 0.06,P < 0.05）,MMP-1 表达降低（8.3 ± 1.8 vs. 3.3 ± 0.8,P < 0.05）,MMP-2 活性高至其 1.25 倍（137 ± 24 vs. 172 ± 8,P < 0.05）,TIMP-2 表达降低（14.8 ± 2.4 vs. 4.0 ± 0.8,P < 0.05）;③与单纯拉伤组相比,Urantide 组 GPR-14 mRNA 相对表达量降低（0.37 ± 0.08,P < 0.05）,MMP-1 表达差异无统计学意义,MMP-2 活性高至其 1.29 倍（177 ± 21,P < 0.05）,TIMP-2 表达降低 （6.6 ± 1.2,P < 0.05）。 结论 大鼠胸主动脉损伤后局部 GPR-14 mRNA 水平上调,外源性应用 UII 后,GPR-14 mRNA 水平进一步上调,MMP-1 表达下降,TIMP-2 表达减少,MMP-2 活性升高。应用 Urantide（10 nmol&#8226;kg-1&#8226;h-1）能抑制 GPR-14 mRNA 的水平上调,但对 MMP-1 的表达无明显影响,未能表现出拮抗胶原沉积的作用,甚至对 MMP-2/TIMP-2 平衡有类 UII 的作用,其意义有待进一步研究。     

活性氧对平滑肌细胞合成基质金属蛋白酶-1, 3及其抑制物的影响

目的:探讨活性氧(ROS)对血管平滑肌细胞合成基质金属蛋白酶-1,3(MMP-1,3)和基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的影响,从而推测其是否促进动脉粥样硬化斑块的破裂。方法:体外培养胎儿主动脉平滑肌细胞,加入含100μmol/L黄嘌呤,5U/L黄嘌呤氧化酶的无血清培养液,孵育24h,收集细胞上清液。用Westernblotting方法检测浓缩后的细胞上清液中MMP-1,3和TIMP-1的含量。结果:黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶组细胞上清液中的MMP-1含量明显少于正常对照组,并且转化成活性形式;MMP-3的含量明显多于正常对照组,并且转化成活性形式;TIMP-1的含量明显少于正常对照组。结论:ROS对MMPs-TIMPs平衡的影响很复杂,可能对动脉粥样硬化斑块的破裂起一定作用。     

基质金属蛋白酶与胎膜早破

胎膜早破（preterm premature of the fetal membranes，PROM）和足月前胎膜早破（P—PROM）是威胁母婴健康的常见并发症。PROM的发生率是10％；P—PROM的发生率是2％-3.5％，30％-40％的早产与此有关，而85％的新生儿发病率和死亡率由早产引起。胎膜破裂后，由于屏障作用消失，将可能引起羊膜腔感染、围产期感染、败血症、新生儿窒息等严重的并发症，如果处理不当可危及母儿安全与健康，因此PROM一直受到产科界的关注。     

大肠癌组织中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的表达

目的：探讨大肠癌组织中基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的表达与临床病理参数之间的关系。方法：应用免疫组织化学S－P法检测87例大肠癌组织中MMP－2和MMP－9的表达情况。结果：87例大肠癌组织中MMP－2和MMP－9的表达阳性率分别为56．3％和55．2％。MMP－2和MMP－9在侵及肌层的阳性表达率明显低于侵及浆膜层，淋巴结转移阳性组高于淋巴结转移阴性组，差异均有显著性（P＜0．05）。Dukes分期中，C、D期中MMP－2和MMP－9的阳性表达率明显高于A、B期（P＜0．05），而与性别、年龄、肿瘤部位、组织学类型和分化程度均无关（P＞0．05）。结论：MMP－2和MMP－9可能在大肠癌浸润转移过程中发挥重要作用。     

血管内皮细胞产生基质金属蛋白酶的作用与机制

基质金属蛋白酶 (MMP)是一类以锌为辅助因子的蛋白酶家族 ,在体内主要降解细胞外基质 ,参与炎症反应、肿瘤扩散转移和缺血缺氧损伤等。内皮细胞在一些细胞因子和体内活性物质刺激下产生MMP。MMP产生的调节主要发生在转录水平 ,在体内其活性受到特异性抑制剂TIMP的调节     

基质金属蛋白酶的结构、功能和调节

基质金属蛋白酶（MMPs)是一个蛋白水解酶大家族，可降解细胞外很多种基质成分。根据体外底物专一性，MMPs可分为胶原酶，明胶酶，基质降解素以及膜型MMPs等，越来越多的研究表明，MMPs在肿瘤侵袭转移中起着重要的作用，而且此作用不仅仅限于它有利于细胞外基质的降解，还对肿瘤微环境的维持和促进肿瘤生长起着重要作用，本文对MMPs的结构，功能及其调节进行综述。     

卡维地洛对大鼠颈动脉损伤后血管重塑的影响

目的:探讨卡维地洛(carvedilol,CAR)对大鼠颈动脉损伤后血管重塑的影响.方法:雄性Wistar大鼠90只,随机分为假手术组、损伤组和CAR组,后两组行颈动脉球囊损伤术.三组均于术后1、3、7、14、28天处死大鼠.光镜下观察血管损伤后内膜增生情况,用免疫组化和RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9和TIMP-1在各组术后不同时间点的表达情况.结果:与损伤组比较,术后14dCAR组内膜面积、内膜与中膜面积比值显著减少,管腔面积显著扩大(P<0.05);与损伤组比较,CAR组术后3-14dMMP-2、MMP-9表达显著减少(P<0.05),而TIMP-1表达无显著变化(P>0.05).结论:卡维地洛有效抑制大鼠颈动脉损伤后MMP-2和MMP-9表达,改善了细胞外基质的合成与降解平衡,抑制血管重塑,减轻再狭窄.     

基质金属蛋白酶在心肌缺血大鼠心室间质重构中的作用

目的:探讨大鼠心肌缺血后心肌间质基质金属蛋白酶(MMPs)活性变化与心室间质重构的关系。方法:用异丙肾上腺素(ISP)复制大鼠心肌缺血模型,用酶谱法测定心肌间质MMPs活性,氯胺T法测定胶原含量,免疫组化法测定I/III胶原比例,电镜观察心肌超微结构。结果:心肌缺血组(M组)MMP-2活性在1、2、4周分别是对照组(C组)的5.8倍、2.3倍(P＜0.01)和1.7倍(P＜0.05),MMP-9活性则分别是对照组的4.9倍、1.9倍(P＜0.01)和1.4倍(P＜0.05)。胶原含量、I/III胶原比例在2周、4周时均显著高于对照组。电镜见缺血组心肌细胞坏死、间质胶原大量增生、结构紊乱。结论:心肌缺血后心肌间质内MMPs活性升高,可能是心室重构的重要原因。     

全反式维甲酸对大鼠腹主动脉球囊损伤后内膜增生和血管重塑的影响

目的：研究全反式维甲酸（ATRA）对球囊损伤大鼠腹主动脉内膜增生和血管重塑的影响。方法：复制球囊损伤的大鼠腹主动脉剥脱模型，12只Wistar大鼠随机分为①对照组：6只腹腔内注射intralipid（1 mL/d）；②ATRA组：6只腹腔内注射溶解于intralipid的ATRA（4 mg·kg^-1·d^-1）。球囊损伤14 d后，损伤区域的血管段用10%甲醛固定，然后染色，进行组织学观察。结果：ATRA组新生内膜面积（IA）明显小于对照组，管腔面积（LA）和外弹力膜包绕面积（EEL）则大于对照组。结论：ATRA具有抑制损伤血管的内膜增生和促进有益的血管重塑的作用。     

雌激素诱导胎儿血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2分泌和活化

目的: 探讨雌激素对胎儿血管平滑肌细胞(HVSMC)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)分泌及其活化的影响。方法: 分别以不同浓度的雌二醇与体外培养的HVSMC作用24h,明胶酶谱法检测细胞培养上清液中明胶酶活性。结果: 随着雌二醇剂量增加,MMP-2的酶原形式(pro-MMP-2)和MMP-2活性形式逐渐增强。0.1 nmol/L、1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L雌二醇组pro-MMP-2分别比对照组高9.4%±8.2%(P>0.05)、73.0%±13.7%(P<0.05)、229.2%±42.2%(P<0.01)、428.4%±72.3%(P<0.01), MMP-2活性形式分别比对照组高39.8%±12.9%(P>0.05)、127.2%±20.4%(P<0.01)、428.4%±37.6%(P<0.01)、683.4%±50.9%(P<0.01)。结论: 雌二醇以剂量依赖性方式促进pro-MMP-2分泌和活化。     

普罗布可抗兔动脉成形术后再狭窄与调节血管重塑的关系

目的:研究普罗布可抗动脉成形术后再狭窄与血管重塑的关系。方法:用3.5F球囊导管构建兔动脉粥样硬化动脉成形术后再狭窄模型, 动脉成形术后2周, 观察普罗布可抗动脉成形术后再狭窄作用;组织形态学观察及计算机图像分析, 了解普罗布可对病理性血管重塑的影响;血脂含量测定。结果:普罗布可抗再狭窄作用显著, 能明显增加血管内外径及管腔面积, 减少新生内膜的形成;能调节血管重塑, 增加动脉成形术后内弹力层包围的面积[IEL, ( 3.50±0.20) mm² υs (1.59±0.23) mm², P<0.01]、外弹力层包围的面积[EEL, (4.61±0.29) mm²υs (2.56±0.28) mm², P<0.01];能调节血脂水平, 降低血清总胆固醇及甘油三酯含量。结论:普罗布可通过调节动脉成形术后血管病理性重塑达到抗再狭窄作用。     

罗格列酮对血流阻断BALB/c小鼠模型血管重构及内皮功能的影响

目的： 在BALB/c小鼠血流阻断模型中观察罗格列酮对结扎侧颈总动脉形态学及黏附分子、亲环素A表达的影响,探索罗格列酮对低切应力导致的血管重构和血管内皮功能变化的作用。方法： 将雄性BALB/c小鼠（12-16周龄,体重30-40 g）60只随机分为低切应力+罗格列酮（LR组）、低切应力+安慰剂组（LP组）、正常切应力+罗格列酮组（NR组）、正常切应力+安慰剂组（NP组）4组,每组15只。低切应力组通过在血管分叉处结扎左侧颈总动脉制作血流阻断模型。术后第8 d至第28 d,各组通过强饲法分别给予罗格列酮或者安慰剂20 mg·kg-1·d-1。病理切片应用HE染色进行血管形态学分析;应用免疫组织化学染色方法分析亲环素A、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及P-选择素（P-selectin）蛋白质的表达;并采用实时定量反转录方法检测ICAM-1与P-选择素mRNA的表达。结果：术后第29 d,与正常切应力组相比,低切应力组发生明显的负性重构,包括血管中层增厚、内膜增殖及管腔狭窄,但各组间亲环素A、ICAM-1、P-选择素的表达未发现明显差异。结论：低切应力导致BALB/c小鼠的颈总动脉发生明显的负性重构;罗格列酮治疗未能改善该低切应力导致的血管负性重构,亦未能改善此模型中的血管内皮功能。     

基质金属蛋白酶及其抑制物在高碳酸血症大鼠肺组织中的表达

目的:观察单纯高碳酸血症大鼠模型的血清中性粒细胞蛋白酶(NE)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)的活性,以及它们在肺组织中的表达,探讨高浓度二氧化碳(CO2)引起肺组织损伤的机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组(A组,20只大鼠)、高碳酸血症组(B组,20只大鼠)。B组大鼠置于高CO2舱中,并向舱中匀速输入6%CO2混合气体(6%CO2,21%O2,73%N2),每天7h,连续4周,完成大鼠高碳酸血症模型的复制。用ELISA法测定大鼠血清MMP-2、MMP-9、TIMP-1活性及NE活性;弹力纤维染色标本进行弹性纤维相对含量的测定;免疫组化方法检测肺组织中MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达及光镜下进行病理学观察。结果:B组大鼠血清MMP-2、MMP-9、TIMP-1活性与A组之间并无显著差异(P0.05);B组大鼠NE活性明显高于A组(P0.01);光镜下可见B组大鼠肺泡壁明显增厚,肺微血管内皮细胞损伤,小静脉扩张,血栓形成;小动脉内皮细胞肿胀,管腔狭窄,血管周围有袖套状水肿区;并可见小灶性肺实质出血;A组大鼠弹力纤维呈束状,连续无断裂;B组大鼠可见弹力纤维断裂降解,且肺组织中弹力纤维的含量较A组明显减少(P0.01);B组大鼠肺组织中MMP-2的表达明显低于A组(P0.01);而肺组织中MMP-9及TIMP-1的表达B组大鼠明显高于A组(P0.01)。结论:通过复制出常压、常氧、单纯高碳酸血症动物模型;单纯的PaCO2增高对肺动脉压无明显影响;高浓度CO2可以使NE活性明显增高,使弹性蛋白的降解增多,肺组织弹性纤维断裂降解,数量减少;在单纯高碳酸血症动物模型中,MMP-2的表达明显降低,MMP-9及TIMP-1在肺组织中表达明显增高,导致肺损伤。     

在高血压动脉重建中microRNA-21对血管平滑肌细胞细胞外基质表达的调控作用

目的探讨在高血压动脉重建中microRNA-21(miR-21)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的调控作用及其机制。方法建立腹主动脉缩窄型大鼠高血压模型,大鼠分为假手术对照组、高血压2周组和高血压4周组;对体外培养的大鼠主动脉VSMCs施加频率为1.25 Hz周期性张应变,加载幅度分别为0%(静态对照组)、5%(正常张应变组)、15%(模拟高血压状态的高张应变组),加载持续时间均为12 h。采用Western blotting和Real time RT-PCR技术,分别检测动脉和细胞样品ECM以及miR-21的表达。用miR-21特异干扰片段抑制培养的VSMCs miR-21表达,然后检测VSMCs的ECM、miR-21和Smad 7表达变化。结果与假手术对照组相比,高血压2周组胸主动脉ECM和miR-21的表达显著上升;高血压4周组胸主动脉的I型胶原、III型胶原和miR-21表达显著上升。与静态对照组和5%张应变组相比,15%张应变组VSMCs的I型胶原表达无显著变化,而III型胶原表达显著升高,Smad 7表达显著下降,周期性张应变增强VSMCs的miR-21表达。干扰miR-21降低周期性张应变状态下VSMCs的miR-21表达以及III型胶原蛋白水平表达,上调VSMCs的Smad 7表达。结论高血压血管重建导致大鼠胸主动脉ECM和miR-21高表达。周期性高张应变可诱导VSMCs的miR-21高表达,再通过其调节Smad 7蛋白,进而调控VSMCs的ECM,尤其是III型胶原的表达,参与高血压血管重建。