重庆地区草地贪夜蛾肠道细菌的分离鉴定

为了解入侵重庆地区草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)肠道所携带的细菌组成,以采集自巫溪、巫山地区玉米地里的草地贪夜蛾为材料,运用传统培养方法分离了其肠道优势细菌,并基于16S rDNA测序开展了优势菌的属水平鉴定,共获得了30个细菌分离株,经16S rDNA序列同源性分析,可归于5个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、不动杆菌属(Acinetobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)以及气单胞菌属(Aeromonas);其中,克雷伯氏菌属(Klebsiella)的丰度最高,占所有分离菌株的63%;假单胞属(Pseudomonas)和肠杆菌属(Enterobacter)菌株仅在巫山地区分离得到,气单胞菌属(Aeromonas)仅在巫溪地区分离得到.实验确定了入侵重庆地区草地贪夜蛾肠道优势细菌的种类及丰度,为后续研究草地贪夜蛾肠道微生物对宿主的生长发育以及迁飞等重要问题奠定了基础.     

重庆地区取食高粱的草地贪夜蛾与玉米粘虫肠道细菌比较

草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)于2019年5月被发现已经入侵至重庆地区, 6月底在江津地区的高粱地中也发现了少量的草地贪夜蛾,同时还发现了大量玉米黏虫(Mythimna seperata).通过分离培养同一生境内的草地贪夜蛾和玉米黏虫的肠道细菌,结合16S rDNA测序完成了这两种害虫肠道优势菌属水平的鉴定,共分离得到了19个细菌分离株,其中分离自草地贪夜蛾肠道细菌归为5个属,分别为欧文氏菌属(Erwinia),不动杆菌属(Acinetobacter),肠杆菌属(Enterobacter),肠球菌属(Enterococcus),假单胞菌属(Pseudomonas).分离自玉米黏虫肠道细菌归为6个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella),不动杆菌属(Acinetobacter),寡养单胞菌属(Stenotrophomonas),肠球菌属(Enterococcus),金黄杆菌属(Chryseobacterium),芽孢杆菌属(Bacillus).同时我们也对采自玉米地和高粱地的草地贪夜蛾肠道微生物优势菌进行了比较分析,在江津高粱地中的草地贪夜蛾中没有发现克雷伯氏菌,但该菌在巫山、巫溪玉米地的草地贪夜蛾中大量存在.结论为进一步研究草地贪夜蛾幼虫肠道核心微生物群奠定了基础.     

云南地区草地贪夜蛾肠道细菌的分离及鉴定

草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)自2019年1月入侵中国以来,现已蔓延至全国25个省份.为了解草地贪夜蛾的肠道微生物的组成,近期该课题组在云南蒙自地区的玉米地采集了草地贪夜蛾幼虫及成虫,通过分离培养结合16S rDNA测序鉴定其肠道细菌分离株的种属.在幼虫肠道中分离到32个细菌分离株,通过16S rDNA序列同源聚类可归为4个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、肠球菌属(Enterococcus)、沙雷氏菌属(Serratia)和摩根菌属(Morganella),其中克雷伯氏菌属(Klebsiella)丰度最高,为53.1%;在成虫肠道中分离到16个细菌分离株归为5个属,分别为不动杆菌属(Acinetobacter)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、微球菌属(Micrococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)和肠杆菌属(Enterobacter),其中不动杆菌丰度最高,为56.0%.该研究首次对入侵中国的草地贪夜蛾成虫肠道细菌进行分离鉴定,为后续研究草地贪夜蛾生物学适应性等重要问题奠定了基础.     

重庆地区取食高粱的草地贪夜蛾肠道细菌新分离株的鉴定

为充分认识入侵重庆地区草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)的肠道微生物, 2019年7月该课题组再次在重庆江津地区高粱地采集了草地贪夜蛾幼虫,通过分离培养结合16S rDNA测序鉴定,从江津草地贪夜蛾幼虫肠道中共分离得到38个细菌分离株,归为9个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、肠球菌属(Enterococcus)、微球菌属(Micrococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)和鞘脂杆菌属(Sphingobacterium).在课题组前期研究的基础上,新分离到了6个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、微球菌属(Micrococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)和鞘脂杆菌属(Sphingobacterium).同时还对入侵重庆地区采食高粱和玉米的草地贪夜蛾幼虫肠道细菌分离株进行了比较分析,只在采食高粱的草地贪夜蛾幼虫肠道中发现了欧文氏菌属(Erwinia)、微球菌属(Micrococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)和寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)的菌株,而气单胞菌属(Aeromonas)、短波单胞菌属(Brevundimonas)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)和类香味菌属(Myroides)则只在采食玉米的草地贪夜蛾幼虫肠道中分离得到.通过对同一片江津高粱地的草地贪夜蛾和玉米黏虫(Mythimna separata)的肠道细菌分离株进行比较分析,只在草地贪夜蛾肠道中发现了微球菌属(Micrococcus)、欧文氏菌属(Erwinia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、葡萄球菌属(Staphylococcus)和鞘脂杆菌属(Sphingobacterium),而金黄杆菌属(Chryseobacterium)只发现于玉米黏虫肠道中.     

草地贪夜蛾肠道细菌分离鉴定与功能初探

【目的】明确草地贪夜蛾幼虫肠道细菌的种类和功能,以诠释肠道细菌对草地贪夜蛾寄主植物适应性的影响,为揭示草地贪夜蛾的寄主适应机制及进一步预测其寄主谱扩张趋势提供依据。【方法】采用传统的微生物分离纯化方法对草地贪夜蛾肠道细菌进行分离纯化,对分离获得的细菌菌株进行16S rRNA序列同源性分析鉴定;利用筛选培养基对产生纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶及对苯酚有代谢能力的菌株进行初筛,并进一步用DNS法测定相关菌株产纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶的酶活性,用含苯酚的无机盐培养基培养菌株,检测菌株的苯酚降解效率。【结果】共分离获得45株细菌菌株,经同源序列比对分析,45株细菌菌株分属于3门5属8种,分别是厚壁菌门（Firmicutes）的葡萄球菌属（Staphylococcus）和芽孢杆菌属（Bacillus）,变形菌门（Proteobacteria）的克雷伯氏菌属（Klebsiella）和不动杆菌属（Acinetobacter）,放线菌门（Acinobacteria）的短杆菌属（Curtobacterium）,其中克雷伯氏菌属的丰度最高。45株菌株中有产纤维素酶菌株11株,酶活力最高的是变栖克雷伯氏菌菌株K3,为0.105±0.007 U/mL;产木聚糖酶菌株10株,酶活力最高的是枯草芽孢杆菌菌株B9,为1.090±0.468 U/mL;产果胶酶菌株5株,酶活力最高的是变栖克雷伯氏菌菌株K27,为0.193±0.047 U/mL;降解苯酚的菌株9株,降解速率最高的是沙福芽孢杆菌菌株B8,为（0.347±0.042）%。【结论】草地贪夜蛾幼虫肠道细菌的产酶菌株多样性较高,推测这是导致草地贪夜蛾寄主谱广,对寄主为害严重的原因之一。     

重庆巫山地区采食玉米的草地贪夜蛾肠道细菌的分离鉴定补遗

为充分认识入侵重庆地区草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)肠道所携带的细菌组成,以采集自巫山地区玉米地的草地贪夜蛾为材料,在课题组前期研究基础上进一步分离培养并通过16S rDNA测序鉴定了3个未报道的分离株,分别归为短波单胞菌属(Brevundimonas)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)以及肠球菌属(Enterococcus).结论进一步丰富了入侵重庆巫山地区草地贪夜蛾肠道优势细菌的种类,为后续研究草地贪夜蛾肠道微生物对宿主的生长发育以及迁飞等重要问题奠定了基础.     

兴义市草地贪夜蛾监测及分子鉴定

通过对草地贪夜蛾进行监测并对PCR扩增到的磷酸甘油醛异构酶(Tpi)基因片段进行序列分析,结果表明,兴义市8个疑似草地贪夜蛾样品经分子鉴定均为草地贪夜蛾,通过与玉米型和水稻型Tpi基因序列的特异位点比较分析,兴义市草地贪夜蛾亚型均为玉米型,具体亚型的确定对研究兴义市草地贪夜蛾发生规律及监测防控具有重要意义.     

上海地区草地贪夜蛾种群的分子鉴定

利用两个物种标记基因——细胞色素C氧化酶第I亚基(COI)和磷酸甘油醛异构酶(Tpi)基因序列设计分子标记对2019年和2020年采自上海地区玉米植株上的48个害虫样本进行种群鉴定和遗传分析。结果显示:相比“玉米型”草地贪夜蛾,样本的COI基因与“水稻型”草地贪夜蛾COI基因序列一致性更高,达97.9%—100%,系统进化分析也表明样本与草地贪夜蛾为一支。而样本Tpi基因与“玉米型”草地贪夜蛾的Tpi基因序列一致性为100%,而与“水稻型”草地贪夜蛾的Tpi基因序列存在9个碱基的差异。结合两个物种标记基因的特点和样本的实际寄主,认为上海地区2019年和2020年采集的48个害虫样本均为草地贪夜蛾,且草地贪夜蛾亚型为“玉米型”。     

重庆地区草地贪夜蛾幼虫肠道真菌的分离鉴定

草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)是一种洲际迁飞性农业害虫,食谱广泛. 2019年5月已迁飞至重庆地区,对农作物造成严重危害.为了解入侵重庆地区草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)肠道真菌菌群的组成,本研究以采集自重庆巫山玉米田及重庆江津高粱田中的草地贪夜蛾幼虫为材料,运用传统培养方法分离其粪便中的肠道优势真菌,并对其进行形态学观察和分子生物学鉴定.实验通过分离培养不同地区、不同食物的草地贪夜蛾肠道真菌,结合形态学观察及rDNA ITS测序完成了属水平的鉴定,共分离得到了5个属10个真菌分离株,其中分离自重庆巫山玉米田的草地贪夜蛾肠道真菌归为3个属,分别为念珠菌属(Candida)、掷孢酵母属(Sporobolomyces)和帚枝霉属(Sarocladium);分离自重庆江津高粱田的草地贪夜蛾肠道真菌归为3个属,分别为念珠菌属(Candida)、莫氏黑粉菌属(Moesziomyces)和毛霉属(Mucor).初步分离获得入侵重庆地区的草地贪夜蛾肠道真菌,丰富了对入侵草地贪夜蛾肠道微生物的认识.     

不同寄主饲养草地贪夜蛾的遗传分析

【目的】鉴定入侵四川省草地贪夜蛾的亚型,使用不同寄主饲养,初步探索其遗传特征。【方法】利用线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因（cytochrome coxidase subunitⅠ,COⅠ）,以及位于Z染色体上的磷酸甘油醛异构酶基因（triose-phosphate isomerase,Tpi）2个分子标记对采集自中国四川省的草地贪夜蛾进行遗传分析。【结果】基于COⅠ基因的鉴定结果显示50份采集自四川的草地贪夜蛾样品均为“玉米型”;后续使用人工饲料、玉米和水稻幼苗3种寄主植物分别连续喂养至第三代发现,人工饲料和玉米幼苗喂养的草地贪夜蛾均为“玉米型”,取自水稻幼苗的草地贪夜蛾样品则部分出现“水稻型”;而基于Tpi基因的分析表明所有样品均为“玉米型”。第6代样品鉴定结果显示,水稻幼苗的草地贪夜蛾样品中基于COⅠ基因鉴定出的“水稻型”增多,并且部分样品的Tpi基因鉴定为“水稻型”,而取自人工饲料和玉米幼苗的草地贪夜蛾样品均为“玉米型”。【结论】采集的入侵四川省的草地贪夜蛾可能并不是单一的亚型,部分存在“杂合型”。草地贪夜蛾的主要寄主植物玉米、水稻等在四川省均有种植,厘清该虫的遗传特征,可为农...     

不同农药对草地贪夜蛾的防治效果试验

通过使用不同农药来防治草地贪夜蛾,研究不同农药对草地贪夜蛾的防治效果,为防治草地贪夜蛾提供科学依据,试验调查采用随机调查。结果表明,6%阿维氯苯酰悬浮剂的持效性较短,5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂和52.25%高氯毒死蜱乳油均对草地贪夜蛾有防治效果,但二者差异不明显,23%高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂在持效性上较为显著。     

新害虫草地贪夜蛾及其防治新技术

草地贪夜蛾是新传入我国的农业害虫,其是一种起源于美洲的农业害虫,曾于2017年被列入世界十大害虫“黑名单”,也是2018年联合国粮农组织全球预警的重大迁飞性害虫,目前其在我国南方发生危害严重,进入春末夏初,本地春玉米进入生长期,其成虫还将进一步迁飞蔓延至长江中下游、黄淮、东北和西北等地危害,要提前谋划、周密安排部署,抓好相关措施落实.     

会泽县大棚内草地贪夜蛾越冬情况初探

为掌握草地贪夜蛾在会泽县的越冬情况,于2020年10月至2021年4月在会泽县植保站病虫观测圃内,采用在塑料大棚玉米地定量放置草地贪夜蛾蛹自然羽化,进行了一个世代的饲养观察,调查其羽化、产卵、越冬虫态、越冬极限温度等情况。结果表明,11月进入冬季以后,在会泽县大棚环境下,只有极少量的草地贪夜蛾可以过冬,鉴于大棚内外平均温差5.5～19.4℃,月最低气温相差3.1～7.9℃,由此可以推断,在自然条件下可以顺利越冬的草地贪夜蛾数量更少甚至没有,因此会泽草地贪夜蛾的虫源主要是外地迁入。这一结论为草地贪夜蛾的测报及防治提供了参考。     

草地贪夜蛾对玉米的危害及防治

草地贪夜蛾具有非常强的扩散能力,繁殖速度快、暴食破坏性大、防控难度大,采取综合性的防控措施是控制此虫害发展的最好选择.本文对草地贪夜蛾给玉米造成的危害进行分析,提出了化学防治、物理防治、农业防治等3个方面的措施,为今后的科学防控、降低对玉米危害提供了技术指导.     

草地贪夜蛾对不同玉米品种危害性田间评价

通过调查玉米5叶1心期、8-9叶期、大喇叭口期草地贪夜蛾数量、天敌种类数量及玉米危害等级、产量测定,有效评价草地贪夜蛾对不同玉米品种取食危害和产量等方面的差异性。试验表明,供试玉米品种在不施药情况下受草地贪夜蛾危害较重,各品种对草地贪夜蛾田间抗性差异不明显。在草地贪夜蛾发生较重情况下,不用药物防治最高产量损失可达94.5%。     

浅谈草地贪夜蛾及其防控措施

本文结合湖南涟源市防控草地贪夜蛾的具体情况,对草地贪夜蛾发生规律以及生物学相关内容进行探讨,分析草地贪夜蛾对我国农作物的危害,结合以往防治重大农业害虫的经验,提出有效防控草地贪夜蛾的措施。     

辽宁省发现入侵性草地贪夜蛾

草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)是一种原产于美洲的重大入侵性害虫,主要为害玉米等粮食作物.辽宁省是我国东北玉米主产区之一,开展对草地贪夜蛾的监测预警事关东北地区秋粮生产安全.通过形态和分子鉴定发现2020年有扩散至辽宁省的草地贪夜蛾成虫.Tpi基因序列比对结果显示此次在辽宁省发现的草地贪夜蛾为玉...     

多种药剂对草地贪夜蛾田间防治效果评价

[目的]草地贪夜蛾是2019年迁入我国危害玉米等作物的重大害虫,为筛选对草地贪夜蛾防治效果较好的杀虫剂,开展了14种药剂共19个处理对玉米草地贪夜蛾田间药效防治试验。[方法]在玉米喇叭口期,采用药剂对水全株喷雾施药1次,药后1、3、5、7d(生物制剂增加第14d)评价防治效果。[结果]药后第1d,10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+150g/L茚虫威乳油、20%甲氰菊酯乳油、10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+10%虫螨腈悬浮剂处理速效性防效好,分别为94.13%、93.60%、92.96%。药后第3d,200g/L氯虫笨甲酰胺悬浮剂+10%氟啶尿乳油、10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+150g/L茚虫威乳油、5%高效氯氟氰菊酯微乳剂+10%四氯虫酰胺悬浮剂、10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+10%虫螨腈悬浮剂、10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+10%虱螨脲悬浮剂、20%甲氰菊酯乳油和10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂防效均在90%以上。药后第7d,10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+150g/L茚虫威乳油、10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+10%虫螨腈悬浮剂、10.07%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐微乳剂+10%虱螨脲悬浮剂、5%高效氯氟氰菊酯微乳剂+10%四氯虫酰胺悬浮剂、10%虱螨脲悬浮剂防效为87.48%、85.51%、83.91%、83.91%、81.61%,表现出持效性较好的防治效果。上述药剂处理对草地贪夜蛾具有很好防治效果,具有应用价值。     

国内关于草地贪夜蛾寄主的相关研究

草地贪夜蛾从东南亚侵入我国后,在全国范围内迅速扩散,已在玉米、小麦、高粱、甘蔗等十几种作物上大面积见虫为害。笔者从草地贪夜蛾为害行为的重要因子"寄主"入手,查阅了一年来在国内关于草地贪夜寄主植物及与适生寄主相关的遗传分化类型的研究报道,梳理了目前为止草地贪夜蛾在国内的14种适生寄主上的为害行为、为害特点;指出了草地贪夜蛾对不同寄主在取食趋性、适生性强弱上存在着差异;明确了目前我国发生的草地贪夜蛾群体在遗传分化上以玉米型亚群为主并可能伴有少量的水稻型个体。     

草地贪夜蛾在南充市发生情况及原因分析

草地贪夜蛾是一种原于美洲的杂食性害虫,此前所未有的外来物种今年初首次在我国云南被发现。5月19日,南充市顺庆区潆溪镇首次发现有草地贪夜蛾为害,该研究经过对南充市周边县(市、区)草地贪夜蛾迁飞轨迹、降落地形和为害玉米生育期展开调查。草地贪夜蛾前期在南充主要沿嘉陵江从下游往上游迁飞,而周边远离江边的乡镇为害较轻;草地贪夜蛾在同个乡镇的不同地势的地块分布各有差异,平坦、通风口地形有利于草地贪夜蛾降落为害;在不同生育期中草地贪夜蛾更倾向于在玉米小喇叭口期取食为害。