丝氨酸蛋白酶抑制剂和血管内皮生长因子基因在口腔鳞癌中的表达

丝氨酸蛋白酶抑制剂 (headandneckserineproteinaseinhibitor,Headpin)是一种新发现的肿瘤抑制基因。我们应用逆转录PCR技术检测口腔鳞癌患者的癌、癌旁及相应正常口腔黏膜中Headpin和血管内皮生长因子 ( ,VEGF)mRNA的表达 ,探讨其在口腔鳞癌癌变中的意义。1.材料和方法 :( 1)研究对象 :18例口腔鳞癌患者 ,每例取癌组织、癌旁(距肿瘤临床边界 1cm)及相应正常口腔黏膜 3份标本 ,液氮保存。( 2 )实验方法 :提取总RNA ,逆转录合成cDNA ,PCR扩增Headpin、VEGF和内参照GAPDH基因。( 3)统计分析 :Bandscan凝胶图像分析系统处理 ,二基…     

头颈部丝氨酸蛋白酶抑制剂基因、血管内皮生长因子在口腔疣状癌中的表达及意义

目的研究头颈部丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(Headpin)、血管内皮生长因子(VEGF)在口腔疣状癌中的表达及其相关性。方法应用反转录(RT-PCR)方法分别对6例口腔疣状癌和18例口腔鳞癌的癌组织、癌旁组织及相应正常组织标本行Headpin和VEGF mRNA含量测定。结果Headpin mRNA在口腔疣状癌的癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达逐渐增加(P<0.01),但癌组织与癌旁组织、癌旁组织与正常组织之间差异无显著性(P>0.05);Headpin mRNA在口腔鳞癌的癌组织、癌旁组织和正常组织三者中表达逐渐增加(P<0.01),且癌组织与正常组织、癌旁组织与正常组织之间差异有显著性(P<0.05);疣状癌和鳞癌中Headpin基因表达水平差异无显著性(P>0.05);疣状癌中Headpin和VEGF mRNA表达呈负相关(P<0.05)。结论Headpin基因在口腔疣状癌的发生发展过程中可能起重要的抑癌作用;Headpin可能通过下调VEGF发挥抑癌作用。     

口腔鳞癌中RHAMM Mrna的表达研究

目的:探讨细胞内透明质酸结合受体(RHAMM )基因在口腔鳞癌中的表达及其意义。方法:选取14例口腔高分化鳞癌和4例口腔中分化鳞癌,并取自身的癌旁黏膜和正常口腔黏膜作对照。采用逆转录多聚酶链式反应(RT PCR)技术分别检测上述标本RHAMM的mRNA相对含量。结果:RHAMM基因在口腔高分化鳞癌的癌组织、癌旁黏膜及正常黏膜中都有不同程度的表达,其中癌组织表达量高于正常黏膜和癌旁黏膜(P <0 .0 5 ) ,正常黏膜和癌旁黏膜比较,无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论:RHAMM基因可能参与了口腔鳞癌的形成、进展和转移。     

STK15基因在口腔疣状癌和鳞癌的表达研究

目的：研究丝氨酸／苏氨酸激酶15基因（Serine／Threonine kinase15,STK15）在口腔疣状癌和口腔鳞状细胞癌的表达,探讨其在疣状癌发生发展中的作用。方法：取20例口腔鳞状细胞癌和10例口腔疣状癌患者的肿瘤组织及其相应正常口腔黏膜组织标本,应用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）方法检测上述标本STK15基因mRNA的相对含量。结果：口腔疣状癌组织STKl5基因mRNA的表达水平高于对应正常组织,其差异显著（t=2．333,P〈0．05）;口腔鳞癌组织STK15基因mRNA的表达水平高于对应正常组织,其差异显著（t=2．498,P〈0．05）;STK15基因mRNA在口腔疣状癌中的表达显著低于口腔鳞癌（t=2．199,P〈0．05）。结论：STK15基因可能在口腔疣状癌和口腔鳞癌的发生发展中起作用,STK15基因在疣状癌的发生发展过程中作用较在口腔鳞癌中小。     

口腔鳞癌NOS和VEGF的表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的　研究Ⅱ、Ⅲ型一氧化氮合酶 (iNOS、eNOS)和血管内皮生长因子 (VEGF)在口腔鳞癌中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法　应用免疫组化检测 40例口腔鳞癌患者手术切除标本的iNOS、eNOS、VEGF的表达。抗CD34单克隆抗体显示血管内皮细胞。根据CD34阳性的血管内皮细胞来测定肿瘤微血管密度(MVD)。结果　iNOS、eNOS分别在 82 .9%、84.3%的口腔鳞癌中阳性表达 ,而正常口腔粘膜组织不表达。iNOS阳性的口腔鳞癌组织 33例MVD为 34 .3± 1.5 /高倍视野。iNOS阴性的组织为 30 .2± 2 .1/高倍视野 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1) ;VEGF阳性口腔鳞癌组织 2 4例MVD为 38.6± 2 .8/高倍视野 ,VEGF阴性组织为 2 4.2± 1.6 /高倍视野 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 1) ,iNOS、eNOS的表达与VEGF的表达无相关性 (P >0 .0 5 )。结论　iNOS和VEGF可促进口腔鳞癌肿瘤血管形成 ,NOS和VEGF可能在口腔鳞癌的发生发展过程中起重要作用。     

口腔鳞癌中VEGF和MMP-2的表达及其相关性

目的：探讨MMP-2、VEGF在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达、两者相关性及其作用。方法：采用免疫组化法检测MMP-2和VEGF在86例OSCC和20例正常非肿瘤组织中的表达情况及两者的相关性。结果：MMP-2和VEGF在OSCC中的阳性表达率分别为85．9％和88．4％，均高于正常组织的10．0％，15．0％；差异均有显著性差异如〈0．01）：MMP-2和VEGF在OSCC中的表达呈正相关（CAMMA值0．476，p=0．007）。结论：MMP-2和VEGF在OSCC中呈过表达，二者之间的相互作用与OSCC增殖、侵袭和转移密切相关。     

口腔疣状癌与口腔鳞癌中PTTG1 mRNA表达的对比研究

目的：研究垂体肿瘤转化基因-1（Pituitary tumor transforming gene 1,PTTG1）在口腔疣状癌中的表达,并与口腔鳞癌（OSCC）作比较,探讨其在口腔疣状癌及OSCC中发生发展中的作用。方法采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）技术分别检测口腔疣状癌和OSCC中PTTG1 mRNA相对含量,并取自身的癌旁黏膜和正常口腔黏膜作比较。结果：PTTG1在疣状癌和无淋巴结转移的高分化SCC的癌组织、正常黏膜和癌旁黏膜中均有不同程度的表达,但这种表达无显著差异（P〉0.05）;在有淋巴结转移的高分化SCC中,PTTG1的表达在癌组织和癌旁黏膜比正常黏膜有增高的趋势,中分化SCC中这种增高趋势更为明显,但统计学上均无显著意义（P〉0.05）。PTTG1在口腔疣状癌、无淋巴结转移的高分化SCC、有淋巴结转移的高分化SCC及中分化SCC四组癌组织中的表达呈现依次增加的趋势,其中口腔疣状癌的表达低于中分化SCC（P〈0.05）,而与高分化SCC无差别（P〉0.05）。结论：在口腔疣状癌,PTTG1的表达与高分化SCC一致,但低于中分化SCC,从总体上说明口腔疣状癌的生物学行为比中分化SCC好,而与高分化SCC一致;PTTG1与口腔疣状癌的发生可能无关,但可能参与了SCC的发生发展过程。     

口腔鳞癌中血管内皮生长因子和明胶酶-A的表达及低氧调节

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)和明胶酶 -A(matrixmetalloproteinase -2 ,MMP -2 )的表达与口腔鳞癌血管形成和临床的关系 ,以及低氧对其调节作用。方法　应用SABC免疫组化染色的方法检测 40例口腔鳞癌手术标本中VEGF、MMP -2的表达和微血管密度 (MVD) ,用酶联免疫吸附实验 (ELISA )的方法定量测定了低氧对口腔鳞癌TSCCa细胞系和颈淋巴转移癌GNM细胞系中VEGF和MMP -2活性的影响。结果　口腔鳞癌中VEGF、MMP -2的表达显著高于正常口腔黏膜组织 ,与肿瘤内MVD密切正相关 (P <0 .0 5 ) ,VEGF、MMP-2表达和口腔鳞癌中的MVD计数与口腔鳞癌病理分级和临床分期无关 ,与口腔鳞癌颈淋巴结转移密切相关 (P<0 .0 5 )。低氧可以显著增加口腔鳞癌细胞TSCCa细胞系和颈淋巴转移癌GNM系中VEGF和MMP -2的活性。结论　VEGF和MMP -2的表达可能在口腔鳞癌血管形成和转移中起重要作用 ,并受低氧调节 ,VEGF与MMP -2可能具有某种内在联系 ,有可能作为反映口腔鳞癌侵袭转移的生物学指标和抗血管治疗的靶点。     

口腔鳞癌及癌前病变组织中Cox-2、VEGF的表达及意义

目的:探讨环氧合酶-2(Cox-2)在口腔鳞癌及癌前病变组织中的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法:应用免疫组织化学染色方法,研究48例口腔鳞癌(高分化20例,中分化16例,低分化12例),35例口腔黏膜白斑(均伴有上皮异常增生),20例正常口腔黏膜中Cox-2和VEGF的表达,并采用形态定量法计算其染色强度,结果采用SAS软件进行方差分析和直线相关分析。结果:Cox-2及VEGF的表达从正常口腔黏膜到口腔白斑以至口腔鳞癌演变过程中不断增高,Cox-2在高分化鳞癌中表达量最高(0.167±0.004),随癌的分化程度降低而减少;VEGF在高分化鳞癌中表达量最高(0.143±0.014),两者的表达在口腔鳞癌中呈显著正相关(r=0.649,P<0.001)。结论:Cox-2和VEGF在口腔黏膜早期癌变进程中表达异常增高,并有明显的协同作用;两者在口腔鳞癌的发生、发展过程中发挥一定作用。     

口腔鳞癌中VEGF-C的表达及与颈淋巴转移的关系

目的：检测口腔鳞癌（OSCC）中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达,以探讨VEGF-C与OSCC淋巴转移的关系及其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色（S-P法）检测40例OSCC组织及14例正常口腔黏膜组织中VEGF-C的表达情况。结果：45.0%的OSCC组织中可见VEGF-C表达,在正常口腔黏膜中无表达;22例伴淋巴结转移的OSCC组织中,68.2%有VEGF-C表达,18例不伴有淋巴结转移者,16.7%有VEGF-C表达,两组之间差异有统计学意义（P〈0.01）;16.7%的Ⅰ～Ⅱ期OSCC有VEGF-C表达,57.1%的Ⅲ～Ⅳ期OSCC有VEGF-C表达,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）;与肿瘤的部位、年龄及性别无关（P〉0.05）。结论：VEGF-C在OSCC组织中表达明显上调,并与淋巴管生成、颈淋巴结转移及TNM分期等临床病理生物学行为有关,提示VEGF-C可能在OSCC的生长及转移中起重要作用。     

肿瘤抑制蛋白Maspin在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨Maspin蛋白在口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生发展过程中的作用,为临床应用提供理论依据。方法采用鼠抗人Maspin单克隆抗体及SP免疫组化法检测45例OSCC、33例癌旁组织及15例正常口腔组织中Maspin蛋白的表达水平,用半定量积分法判断结果。结果在正常口腔组织、癌旁组织和OSCC组织中Maspin蛋白表达阳性率分别为86.67％（13/15）、72.73%（24/33）和37.78%（17/45）。Maspin蛋白在OSCC组织、癌旁组织和正常口腔组织中表达逐渐增高,其中OSCC组织和正常口腔组织、OSCC组织和癌旁组织、癌旁组织和正常口腔组织之间表达差异有统计学意义（P<0.05）。Maspin蛋白的表达与OSCC淋巴结转移和组织学分级有关（P＜0.05）,与TNM分期无关（P＞0.05）。结论Maspin蛋白在OSCC的发生发展过程中可能起着重要作用,检测OSCC组织中Maspin蛋白的表达水平可能有助于对淋巴结转移潜能的预测。     

PTEN和VEGF在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的表达及意义

目的　探讨抑癌基因PTEN和血管内皮生长因子 (VEGF)在口腔鳞状细胞癌 (oralsquamouscellcancer,OSCC)发生发展不同阶段中的蛋白表达及意义。方法　应用免疫组化S -P法检测 10例正常口腔粘膜、10例上皮单纯增生、15例上皮异常增生及 32例口腔鳞状细胞癌组织中PTEN和VEGF的蛋白表达情况 ,比较这两种蛋白表达之间的关系。结果　PTEN蛋白在正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生、和口腔鳞状细胞癌组织中阳性表达率分别为 10 0 % (10 / 10 )、10 0 % (10 / 10 )、93.3% (14 / 15 )和 71.9% (2 3/ 32 ) ;口腔鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率显著低于正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生组织 (P <0 .0 5 ) ;高、中、低分化口腔鳞状细胞癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率分别为 85 .7%、75 %和 33.3% ,统计学分析表明PTEN在OSCC组织中的蛋白表达与组织分化程度明显相关 (P <0 .0 5 )。PTEN蛋白与VEGF蛋白表达呈负相关趋势 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　PTEN蛋白在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中的表达呈进行性下调或缺失 ,可能是通过降低细胞粘附、促进血管形成等途径参与口腔鳞状细胞癌的发生和演进过程     

肿瘤抑制蛋Maspin在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨Maspin蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发生发展过程中的作用,为临床应用提供理论依据.方法 采用鼠抗人Maspin单克隆抗体及SP免疫组化法检测45例OSCC、33例癌旁组织及15例正常口腔组织中Maspin蛋白的表达水平,用半定量积分法判断结果.结果 在正常口腔组织、癌旁组织和OSCC组织中Maspin蛋白表达阳性率分别为86.67%(13/15)、72.73%(24/33)和37.78%(17/45).Maspin蛋白在OSCC组织、癌旁组织和正常口腔组织中表达逐渐增高,其中OSCC组织和正常口腔组织、OSCC组织和癌旁组织、癌旁组织和正常口腔组织之间表达差异有统计学意义(P<0.05).Maspin蛋白的表达与OSCC淋巴结转移和组织学分级有关(P<0.05),与TNM分期无关(P>0.05).结论 Maspin蛋白在OSCC的发生发展过程中可能起着重要作用,检测OSCC组织中Maspin蛋白的表达水平可能有助于对淋巴结转移潜能的预测.     

HGF/c-Met、VEGF和uPA在口腔鳞癌组织中的表达及意义

目的：探讨口腔鳞癌中HGF/c-Met、VEGF和uPA的表达及其相关性。方法：应用免疫组织化学SP法检测63例口腔癌、20例正常口腔黏膜的HGF/c-Met、VEGF和uPA蛋白表达。结果：①HGF/c-Met、VEGF和uPA阳性表达率：口腔鳞癌中分别为98.41%、100%、92.06%、88.89%,均显著高于正常口腔黏膜中表达率（5.00%、10.00%、20.00%、15.00%）,P〈0.05;有淋巴结转移的口腔癌组强阳性表达率分别为72.73%、77.27%、72.73%、68.82%,高于无转移组（53.66%、46.34%、46.34%、43.90%）。T3、T4期HGF/c-Met、VEGF和uPA的强阳性表达（93.10%、82.76%、72.41%、79.31%）高于T1、T2期（32.35%、35.29%、41.18%、29.41%）,P〈0.05。②口腔鳞癌中HGF/c-Met、VEGF和uPA表达呈正相关。结论：HGF/c-Met、VEGF和uPA表达与口腔癌的发生、发展相关,对口腔鳞癌的浸润、转移起促进作用且相互协同,是口腔鳞癌侵袭的重要标志物。     

Maspin基因甲基化对口腔黏膜鳞癌细胞的调控作用

目的：分析口腔黏膜鳞癌细胞增殖过程中Maspin基因甲基化的调控作用机制,为相关研究及临床治疗提供借鉴。方法：鳞状细胞癌HIOEC-B(a)P细胞系随机分为4组：5-氮-2-脱氧胞苷+曲古抑菌素A(ADC+TSA)阴性组、低(0.1 μmol/L +0.05 μmol/L)、中(1 μmol/L+0.5 μmol/L)和高剂量组(10 μmol/L+5 μmol/L)。以正常口腔黏膜上皮细胞作为对照组。实时定量PCR检测各组细胞Maspin基因的甲基化程度,MTT法检测各组细胞的增殖情况,4',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色检测细胞凋亡。采用SPSS20.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果：与对照组相比,癌细胞的Maspin基因甲基化程度显著增强（P<0.01）,与阴性组相比,中剂量和高剂量组Maspin基因甲基化程度显著减弱（P<0.05,P<0.01）,低、中、高剂量组的细胞增殖抑制率显著高于阴性组（P<0.05,P<0.01）。随着药物剂量的提高,细胞凋亡程度逐渐增加（P<0.05）。结论：Maspin基因甲基化可能参与口腔黏膜鳞癌细胞的增殖过程。     

Maspin expression in oral squamous cell carcinoma

Maspin (mammary serine protease inhibitor) is a member of the serpin superfamily of protease inhibitors and it has a role as a tumor suppressor. Maspin has been reported to be important in processes relevant to tumor growth and metastasis such as cell invasion, angiogenesis, and apoptosis. A high expression of maspin was correlated with better rates of survival and absence of nodal metastases in head and neck squamous cell carcinoma. In contrast, some studies have shown that maspin overexpression is correlated with a poor prognosis in pancreatic and ovarian cancers and in lung adenocarcinoma. The aim of this study was an immunohistochemical evaluation of the maspin expression in oral squamous cell carcinoma and thus 89 patients were evaluated. Maspin expression in oral squamous cell carcinoma was significantly associated with the tumor differentiation grade (chi test: P = 0.0318) and the lymph node status (chi test: P < 0.005), but not with the tumor stage (chi test: P = 0.666). Metastatic involvement of lymph nodes was observed more frequently in maspin-negative cases than in tumors with more than 5% of positive cells (P = 0.0024). The present results confirm that maspin expression predicts a better prognosis in oral squamous cell carcinoma and that maspin probably plays a role in tumor progression.