芪茵颗粒对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞胰岛素受体底物1及磷脂酰肌醇3激酶的影响研究

目的观察芪茵颗粒对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞胰岛素受体底物1(IRS-1)及磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)m RNA表达的影响,从胰岛素抵抗(IR)途径来阐述芪茵颗粒对NAFLD的治疗作用。方法将72只SD雄性大鼠随机分为6组,即空白组、模型组、硫普罗宁组、芪茵颗粒高剂量组、芪茵颗粒中剂量组及芪茵颗粒低剂量组,每组各12只。空白组大鼠常规饲料喂养,剩余5组行高脂乳剂灌胃至实验第10周后,空白组及模型组大鼠予0.9%氯化钠注射液10 m L/(kg·d)灌胃,硫普罗宁组予硫普罗宁20 mg/(kg·d)灌胃,芪茵颗粒高、中、低剂量组分别予芪茵颗粒水煎剂10、5、2.5 g生药/(kg·d)灌胃,连续灌胃至第20周结束。观察比较6组大鼠甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,计算肝指数,光学显微镜下观察比较肝组织病理形态及非酒精性脂肪性肝病活动度评分(NAS),实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定大鼠肝组织IRS-1、PI-3K m RNA的表达。结果与模型组相比,硫普罗宁组及芪茵颗粒低、中、高剂量组TC、TG、LDL-C及ALT水平降低(P0.05),HDL-C水平升高(P0.05);与硫普罗宁组及芪茵颗粒低剂量组相比,芪茵颗粒高剂量组TC、TG、LDL-C及ALT水平更低(P0.05),HDL-C水平更高(P0.05)。与模型组相比,芪茵颗粒中、高剂量组大鼠体质量均下降(P0.05),硫普罗宁组及芪茵颗粒低、中、高剂量组肝湿质量及肝指数均降低(P0.05)。与模型组相比,硫普罗宁组及芪茵颗粒中、高剂量组NAS均降低(P0.05);与硫普罗宁组相比,芪茵颗粒中剂量组NAS降低(P0.05);与芪茵颗粒低剂量组相比,芪茵颗粒中、高剂量组NAS降低(P0.05)。与模型组相比,硫普罗宁组及芪茵颗粒中、高剂量组IRS-1、PI-3K m RNA表达均明显升高(P0.05);与硫普罗宁组及芪茵颗粒低剂量组相比,芪茵颗粒中剂量组IRS-1、PI-3K m RNA表达明显升高(P0.05)。结论芪茵颗粒能够提高NAFLD大鼠肝组织IRS-1、PI-3K m RNA表达,通过调节胰岛素代谢途径来达到改善IR、减轻肝损伤的目的。     

肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏组织TNF-α表达的影响

目的验证肝脂溶颗粒对NAFLD模型大鼠肝脏组织TNF-α表达的影响。方法观察肝脂溶颗粒对实验性大鼠肝脏组织TNF-α表达的影响。结果高剂量组大鼠肝脏组织内TNF-α的表达低于对照组(P0.05);中剂量组大鼠肝脏组织内TN F-α的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);低剂量组大鼠肝脏组织内TN F-α的表达高于高、中剂量组及对照组(P0.05)。结论肝脂溶颗粒具有降低NAFLD大鼠肝脏组织TNF-α表达的作用。     

肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏组织PPARα表达的影响

目的验证肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠肝脏组织PPARα表达的影响。方法观察肝脂溶颗粒对实验性大鼠肝脏肝脏组织PPARα表达的影响。结果 PPARαm RNA水平,高剂量组最接近正常组,显著高于其它药物干预组(P0.05);中剂量组与对照组相比无差异(P0.05);低剂量组低于高、中剂量组及对照组(P0.05)。结论肝脂溶颗粒具有提高NAFLD大鼠肝脏组织PPARα基因表达的作用。     

保肝汤对酒精性脂肪肝大鼠肝脂质过氧化和CYP2E1表达的影响

目的:观察保肝汤对酒精性脂肪肝模型大鼠肝组织SOD活力、MDA含量、和CYP2E1及其mRNA表达的影响。方法:以酒精灌胃加高脂饮食的方法建立酒精性脂肪肝大鼠模型(4周)。分设空白对照组、模型对照组、保肝汤治疗组(造模后服药4周)和防治组(全程服药8周)及硫普罗宁片阳性药治疗对照组,保肝汤治疗组分高、中、低三个剂量(3.30、7.50、15.00g生药.kg-1)。结果:1模型组MDA含量较空白对照组明显升高(P<0.05),SOD活力较空白对照组明显降低(P<0.05);保肝汤高、中剂量组、防治组和硫普罗宁组的MDA含量较模型组明显降低(P<0.05),SOD活力较模型组明显升高(P<0.05)。2模型组可见CYP2E1表达的强度增强,出现大量深染的棕黄色阳性颗粒,呈弥散性分布,其分布与肝细胞脂肪变的分布具有一致性(与空白组比较P<0.01);各药物组的CYP2E1的表达分布方式也呈弥散性,但强度受到不同程度的抑制(与模型组比较增强P<0.01)。3CYP2E1mRNA表达,模型组与空白对照组比较(P<0.01),各给药组均较模型组改善(P<0.01)。结论:保肝汤能明显抗脂质过氧化的作用和降低肝内CYP2E1的表达,可能是其防治酒精性脂肪肝的机制之一。     

糖肝康对糖尿病慢性肝损伤模型大鼠肝脏结构和细胞色素P450的影响

目的观察糖肝康对糖尿病慢性肝损伤大鼠肝脏组织光镜病理结构、电镜超微结构和肝功能、细胞色素P450(CYP450)的影响。方法将50只大鼠分为正常组、模型组、糖肝康小剂量组、糖肝康大剂量组、降糖甲组5组,每组10只。用链脲佐菌素和四氯化碳腹腔注射建立糖尿病慢性肝损伤大鼠模型。干预12周后,应用光镜和电镜观察各组大鼠肝脏病理结构和超微结构改变,比较各组大鼠肝功能,比较各组大鼠CYP450 1A1,CYP450 2E1,CYP450 3A1指标。结果光镜下,模型组大鼠肝细胞大量脂肪变性、增生有异型性,可见核分裂象,肝小叶间有少量纤维组织增生;糖肝康大剂量组肝脏结构基本正常。电镜下,模型组大鼠肝细胞体积小,核变形、皱缩,有切迹,核仁明显,常染色质团块状,异染色质边聚,线粒体肿胀,亦可见线粒体空泡化,线粒体嵴模糊;内质网肿胀;可见大量脂滴。糖肝康大剂量组肝细胞结构基本正常。糖肝康小剂量组与模型组相比,ALT明显降低(P0.05);糖肝康大剂量组与模型组相比,ALT明显降低(P0.01);降糖甲组与模型组相比,ALT明显降低(P0.01);糖肝康大剂量组与降糖甲组相比,ALT明显降低(P0.05)。糖肝康小剂量组与模型组相比,AST明显降低(P0.01);糖肝康大剂量组与模型组相比,AST明显降低(P0.01);降糖甲组与模型组相比,AST明显降低(P0.05);糖肝康大剂量组与降糖甲组相比,AST明显降低(P0.01)。糖肝康小剂量组、糖肝康大剂量组分别与模型组相比,CYP4501A1,CYP450 2E1,CYP450 3A1的表达均降低(P0.05);降糖甲组与模型组相比,CYP450 1A1,CYP450 2E1,CYP450 3A1的表达均降低(P0.05);糖肝康大剂量组与降糖甲组相比,CYP4501A1,CYP450 2E1,CYP450 3A1的表达均明显降低(P0.05)。结论糖肝康对肝脏的病理改变起到一定改善作用,还可以通过调节肝功能,CYP450 1A1,CYP450 2E1,CYP450 3A1的表达,起到对肝脏的保护作用。     

加味楂曲饮对实验性非酒精性脂肪肝大鼠FFA-CYP2E1-MDA路径的影响

目的研究中药加味楂曲饮(JiaWeiZhaQuYin,JWZQY)对实验性非酒精性脂肪肝大鼠血清游离脂肪酸(Free Fatty Acid,FFA)、肝组织丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、肝组织细胞色素氧化酶P4502E1(Cytochrome P4502E1,CYP2E1)mRNA及蛋白水平的影响,以揭示其作用机制。方法 SDF级大鼠随机分为4组:空白组、模型组、低剂量组、中剂量组。空白组大鼠给予基础饲料,其余各组大鼠给予高脂饲料造模,自造模第1天起,空白组、模型组大鼠灌服等体积生理盐水,低、中剂量组分别灌服等体积含1g/ml、2g/ml浓度JWZQY溶液,8周后,采用比色方法检测血清FFA,采用TBA法检测肝组织MDA,荧光定量PCR法检测肝组织CYP2E1mRNA水平,Western Bloting法检测肝组织CYP2E1蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组、低剂量组的FFA、MDA水平明显升高(P0.01),模型组、中剂量组的CYP2E1 mRNA水平明显升高(P0.01,P0.05),模型组中CYP2E1蛋白表达丰度升高。与模型组比较,中剂量组FFA、MDA水平明显降低(P0.01),中剂量组CYP2E1mRNA水平明显降低(P0.05),中剂量组CYP2E1蛋白表达丰度明显降低。结论 JWZQY对模型大鼠血清FFA、肝组织CYP2El、MDA具有一定作用,推测JWZQY防治非酒精性脂肪肝的作用可能与抑制氧应激和脂质过氧化相关路径FFA-CYP2E1-MDA有关。     

三七对酒精性肝病大鼠肝组织CYP2E1表达的影响

目的:观察三七对酒精性肝病大鼠肝组织CYP2E1表达及MDA含量、SOD活性的影响,探讨其防治酒精性肝病的作用机制。方法:采用白酒-玉米油-吡唑混合液连续灌服14周建立酒精性肝病模型,同时以高、低剂量的三七粉和硫普罗宁进行干预14周。免疫组化Envision法检测肝组织CYP2E1表达,黄嘌呤氧化酶法检测肝组织匀浆SOD活性,硫代巴比妥酸法检测MDA含量。结果:造模4周组织CYP2E1表达、MDA含量及SOD活性与同期正常组比差异无显著性;随酒精造模时间的延长,大鼠肝组织CYP2E1表达增强,MDA含量增加,SOD活性降低,造模8周、14周时CYP2E1表达和MDA含量较同期正常组明显增加(P<0.05,P<0.01),SOD活性则较同期正常组明显降低(P<0.05,P<0.01),且CYP2E1表达水平与MDA呈明显正相关(r=0.458,P<0.01),与SOD呈明显负相关(r=-0.541,P<0.01);应用三七和硫普罗宁干预14周后,CYP2E1表达和MDA含量较模型14周组明显下降,SOD活性较模型14周组明显增强。结论:三七能够显著的抑制酒精性肝病大鼠CYP2E1的表达,减轻脂质过氧化反应,这可能是其防治酒精性肝病的作用机制之一。     

芪茵颗粒治疗非酒精性脂肪肝大鼠的实验研究

目的:观察芪茵颗粒对实验性非酒精性脂肪肝(NAFL)大鼠生化指标和肝脏组织病理的影响,分析芪茵颗粒对非酒精性脂肪肝(NAFL)的干预效果.方法:60只Wistar大鼠雌雄各半,随机分为六组:空白组、模型对照组、易善复组、芪茵颗粒低、中、高剂量,每组10只.空白对照予以常规饲养,其余五组给予高脂乳剂持续喂养8周,随机抽取大鼠6只,确定造模成功.除空白组予以标准饲料喂养,并以同等剂量的蒸馏水每日灌胃,其余五组均继续以高脂乳剂15mL/kg灌胃,并分别给予芪茵颗粒低、中、高剂量、易善复灌胃,连续12周后处死大鼠.测定血清甘油三脂(TG)、胆固醇(CHOL),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝重、肝指数;HE染色后光镜下观察肝脏组织病理学改变.结果:芪茵颗粒可降低NAFL大鼠血清总胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量,肝重、肝指数(P<0.05),改善脂肪肝大鼠肝脏脂肪变(P<0.01).结论:芪茵颗粒可降低NAFL大鼠血清CHOL、TG、LDL-C的含量,升高HDL-C含量,改善肝脏脂肪变,从而达到治疗NAFL的目的.     

肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠血清Leptin表达的影响

目的验证肝脂溶颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠血清Leptin表达的影响。方法观察肝脂溶颗粒对实验性大鼠血清Leptin表达的影响。结果高剂量组大鼠血清Leptin的含量明显低于对照组(P0.05);中剂量组大鼠血清Leptin的含量与对照组比较(P0.05)差异无统计学意义;低剂量组大鼠血清Leptin的含量高于高、中剂量组及对照组(P0.05)。结论肝脂溶颗粒具有改善NAFLD大鼠瘦素抵抗的作用。     

加味楂曲饮对实验性大鼠非酒精性脂肪肝CYP2E1mRNA及蛋白水平影响

目的研究加味楂曲饮(JWZQY)干预非酒精性脂肪肝的药效学及部分作用机制。方法选用SDF级大鼠,给予高脂饲料建立非酒精性脂肪肝模型,用低、中、高剂量JWZQY进行干预,连续灌胃8周,观察肝脏组织形态学改变,检测肝组织细胞色素氧化酶P4502E1(CYP2E1)mRNA及蛋白表达水平。结果与空白组相比,模型组呈现明显脂肪变性。高、中剂量JWZQY治疗后肝脏脂肪变程度明显减轻,中剂量组CYP2E1mRNA水平明显降低、CYP2E1蛋白表达丰度明显降低。结论 JWZQY可有效防治实验性非酒精性脂肪肝,并降低模型大鼠肝组织CYP2E1 mRNA及蛋白表达水平。