辐射对大鼠肝细胞色素P450氧化酶的影响

研究目的：辐射对大鼠肝细胞色素Ｐ４５０氧化酶（以下简称Ｐ４５０）的影响和辐射防护剂的防护作用。实验方法：雄性ＳＤ大鼠,设平行正常对照组、单独照射组和照前０５ｈ给ＷＲ２７２１（１００ｍｇ／只）组,每组５只动物。照射组大鼠１次接受６０Ｃｏγ射线７Ｇｙ全身照射,分别在照射后４ｈ、１,３,５ｄ处死,打开腹腔,用冷生理盐水进行肝原位灌流,取出肝脏,制成匀浆,用钙沉淀法制备肝微粒体。进行Ｐ４５０的光谱测定、氨基比林脱甲基酶活性、细胞色素ｂ５的光谱测定、体外直接照射肝微粒体蛋白后氨基比林脱甲基酶活性的测定。…     

复方丹参滴丸对大鼠肝细胞色素P450酶的影响

目的观察复方丹参滴丸及其单味药对大鼠肝细胞色素P450酶(CYP)主要亚型的影响。方法 SD大鼠分别ig给予复方丹参滴丸0.3258 g.kg-1,丹参0.27 g.kg-1,三七0.0528 g.kg-1和冰片0.003 g.kg-1,每天1次,连续28 d,取大鼠肝微粒体,与CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13,CYP2D2和CYP3A1特异性底物探针共孵育,用高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS/MS)测定底物的代谢产物,分析CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13,CYP2D2和CYP3A1酶活性,同时用PCR方法检测cyp1a2,cyp2b1/2,cyp2c11,cyp2e1和cyp3a1 mRNA表达的变化。结果与正常对照组相比,苯巴比妥(阳性对照)对CYP2D2和CYP3A1活性有明显抑制作用,对CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12和CYP2C13有明显诱导作用(P<0.05,P<0.01);复方丹参滴丸对CYP1A2和CYP2B6活性有明显抑制作用,对CYP2D2有诱导作用(P<0.05);丹参对CYP1A2和CYP2B6活性有明显抑制作用(P<0.05);三七对CYP1A2,CYP2B6,CYP2C13和CYP2D2活性有明显抑制作用(P<0.05);冰片明显抑制CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13和CYP2D2活性(P<0.01),且抑制强度高于复方丹参滴丸。与正常对照组相比,苯巴比妥对cyp1a2和cyp2b1/2 mRNA水平有明显诱导作用(P<0.05);复方丹参滴丸、丹参和三七对cyp1a2,cyp2b1/2,cyp2c11,cyp2e1和cyp3a1 mRNA水平无明显影响;冰片对cyp1a2,cyp2b1/2和cyp2c11 mRNA水平有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01)。结论复方丹参滴丸中各单味药对CYP酶的影响强于全方对CYP酶的影响,其中以冰片对药物代谢酶的影响最为显著。     

罗格列酮对大鼠肝细胞色素P450 3A活性的影响

[目的]探讨罗格列酮对细胞色素P4503A活性的影响。[方法]在正常大鼠肝细胞微粒体中加入浓度为0，0.1,0.25,0.5,1.0mmol/L罗格列酮，以红霉素为底物，测定细胞色素P4503A活性。[结果]加入不同浓度罗格列酮的大鼠肝微粒体中细胞色素P4503A活性无显著性差异。[结论]罗格列酮对大鼠的肝细胞色素P4503A活性无明显影响。     

加替沙星和环丙沙星对大鼠肝细胞色素P450酶系的影响

目的 研究加替沙星和环丙沙星对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响。方法 加替沙星和环丙沙星400 mg.kg-1灌胃给药大鼠,qd,7天后,用差速离心法制备大鼠肝微粒体,用Lowry法测定蛋白浓度,用分光光度计法检测6种肝微粒体细胞色素P450酶含量及活性,并用单因素方差分析进行统计。结果 加替沙星组的6种细胞色素P450酶的活性与空白对照组相比差异无统计学意义;而环丙沙星能抑制6种细胞色素P450酶中的b5、NADPH-CytC还原酶、氨基比林N-脱甲基酶、红霉素N-脱甲基酶和7-乙氧基香豆素脱烃酶的活性,对CYP450酶系有选择性抑制作用。结论 加替沙星对大鼠肝微粒体CYP450酶系无显著性影响,而环丙沙星对CYP450酶系有选择性抑制作用。     

中草药对肝细胞色素P450的作用

细胞色素P450（CYP450）是肝微粒体混合功能氧化酶中最重要的一族，据献报道它可被许多化合物诱导或抑制，但有关中草药对CYP450影响作用的研究尚不多见报导。本课题的目的是要筛选几种有潜力的、临床上经常应用的、毒副作用小的中药，采用体内实验和体外实验两种手段来评价中药对细胞色素P450的影响。     

辐射影响细胞色素P450的研究进展

随着科学的进步,核能和核技术已经广泛应用于医疗、能源、军事、食品加工等国防和国民生活的方方面面。可能受到辐射损伤的人群主要有接受放疗的癌症病人、从事与放射相关的工作人员和生活在高原地区的人们等。辐射条件下机体产生一系列生理性变化,部分为病理性变化,从而影响药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄,导致药物代谢动力学特征发生改变。关注这些人群的个体化用药,逐渐成为医学和药学科研人员研究的重点。本文综述了环境及临床治疗的电离及非电离辐射对细胞色素P450的影响。     

四氯化碳抑制大鼠肝细胞色素P450同工酶的研究

细胞色素Ｐ45 0 (ＣｙｔｃｈｒｏｍｅＰ45 0 ,ＣＹＰ) ,是四氯化碳(ＣＣｌ4 )在体内进行代谢活化的主要酶类。研究表明 ,ＣＣｌ4 的活化产物 ,如·ＣＣｌ3 等对ＣＹＰ酶类本身也产生破坏作用 ,而不同亚型ＣＹＰ对于ＣＣｌ4 的破坏作用表现不同的敏感性 ,并且可能受到不同剂量不同接触时间等因素影响[1～ 3] 。弄清这些问题 ,对揭示ＣＣｌ4 对机体的损伤机制 ,及对有效地进行ＣＣｌ4 的防护都有一定的意义。鉴于此 ,本实验主要对ＣＣｌ4对苯巴比妥钠 (ＰＢ)诱导型ＣＹＰ2Ｂ1和 3 甲基胆蒽 (3 ＭＣ)诱导型ＣＹＰ1Ａ1和 1Ａ2抑制作用的剂量效应…     

细胞色素氧化酶P450研究新进展

细胞色素氧化酶Ｐ45 0 (ＣＹＰ45 0 )是一类参与内源性和外源性化合物代谢的酶 ,主要存在于生物体的内质网内 ,属于混合功能氧化酶系统中的一种。这类酶有许多种同工酶 ,存在于细菌 ,真菌 ,植物及动物体内 ,已有 35亿年的历史。这类同工酶为何被称之为细胞色素氧化酶Ｐ45 0 ?一方面是其有血色素类似的结构 ,二是与ＣＯ作用后 ,在一定的条件下 ,用分光光度计测定时 ,在 45 0ｎｍ处有一个吸收高峰[1] 。由于这类酶在外源性和内源性化合物代谢中起着非常重要的作用 ,近几十年来 ,对该酶进行了广泛深入的研究。随分子医学技术的发展 ,近几年对该…     

心肌缺血再灌注损伤对大鼠肝细胞色素P450酶代谢的影响

目的探讨心肌缺血再灌注状态下,大鼠肝代谢功能和相关的氧化/抗氧化能力变化。方法雄性SD大鼠随机分为5组,除假手术组外,制备在体心肌缺血再灌注模型,并于缺血40min、再灌注15,60和180min分别处死大鼠,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性,肝匀浆丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;以红霉素N-脱甲基酶、五氧基异噁唑O-脱乙基酶和苯胺羟化酶法为探针测定肝细胞色素P450(CYP)3A,CYP2B1和CYP2E1催化功能;RT-PCR法检测肝Ⅰ相药物代谢酶CYP3A1,CYP2B1/2,CYP2E1,以及Ⅱ相解毒酶NAD(P)H醌氧化还原酶(NQO1)及其上游因子NF-E2相关因子(Nrf2)mRNA水平。结果再灌注60 min,肝匀浆MDA含量升高(P<0.05),SOD活力下降(P<0.01);再灌注180 min时,血浆ALT和AST活性升高(P<0.05)。Nrf2基因于再灌注60 min时显著激活(P<0.05),下游因子NQO1 mRNA于再灌注180 min时明显上调(P<0.05)。CYP3A催化功能和mRNA水平分别于再灌注60和180 min开始明显降低(P<0.05);CYP2B1/2 mRNA和催化功能水平分别于再灌注15和180 min开始明显降低(P<0.05);CYP2E1催化功能无明显改变。结论大鼠心肌缺血再灌注可引起肝组织氧化应激及并导致功能损伤。在再灌注早期,具有抗氧化功能的NQO1在转录水平显著上调,其机制可能与上游因子Nrf2被激活相关;CYP3A和CYP2B催化功能在转录和(或)转录后水平明显下调。     

rh-EGF对恒河猴肝细胞色素P450s的影响

目的研究重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rh-EGF)对恒河猴肝细胞色素P450s同工酶活性的影响.方法恒河猴口服rh-EGF 16,32,160μ*kg-1*d-1,qd,连续给药26周,于停药时及停药8周后,各解剖一半动物,制备肝微粒体,进行肝细胞色素P450s总量、肝微粒体蛋白含量测定,用荧光分光光度法和HPLC法进行肝细胞色素P450s同工酶中7-乙氧基试卤灵脱乙基酶(CYP1A1)、香豆素7-羟化酶(CYP2A6)、甲苯磺丁脲羟化酶(CYP2C8/9)、S-(+)-美芬妥英羟化酶(CYP2C19)、丁呋洛尔1-羟化酶(CYP2D6)、氯唑沙宗羟化酶(CYP2E1)比活性测定.结果给药26周和停药8周后,rh-EGF对恒河猴肝细胞色素P450s总量、微粒体蛋白含量无明显影响,肝细胞色素P450s同工酶(CYP1A1,CYP2A6,CYP2C8/9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1)活性无显著变化.结论本试验建立的恒河猴肝细胞色素P450s测定方法快速、简便,可广泛用于药物开发早期以及预测药物间相互作用和药物毒性的研究等.rh-EGF对恒河猴肝P450s部分同工酶无影响.     

药物代谢中的肝细胞色素P450

肝细胞色素Ｐ４５０参与许多外源性物质（包括药物）的生物转化。本文从肝细胞色素Ｐ４５０在体内的分布及命名,被诱导和抑制的机制,对映体代谢的选择性与代谢差异遗传多态性以及国内外关于Ｐ４５０的研究方法等方面介绍了该领域研究的新进展。     

中药莪术激活PXR及对大鼠肝细胞色素P450 3A的影响

目的考察莪术能否通过体外激活PXR调节细胞色素P4503A4(CYP3A4)的转录表达及对大鼠肝脏CYP3A在酶活性及mRNA表达的诱导作用。方法在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验研究莪术对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用;在大鼠体内,采用紫外分光光度法和RT-PCR技术检测莪术对大鼠肝脏CYP450含量及CYP3A同工酶红霉素N-脱甲基酶(ERD)的活性和CYP3A基因mRNA表达的影响。结果在体外报告基因实验研究中,莪术提取物及其有效成分能不同程度的诱导CYP3A4的表达;在大鼠体内实验中,莪术提取物能够增加CYP450蛋白含量和CYP3A酶活性;在mRNA水平上,莪术提取物能够明显诱导CYP3A1及CYP3A2的基因表达。结论莪术提取物及其有效成分能够明显激活PXR并诱导CYP3A4的转录表达;莪术提取物对大鼠体内CYP3A的酶活性及mRNA表达均有明显诱导作用。     

溴氰菊酯对大鼠脑组织细胞色素P450的影响

拟除虫菊酯是一类高效 ,广谱 ,低残留的杀虫剂 ,广泛用于农业害虫和家庭卫生害虫的防治[1] 。它对哺乳动物的毒性主要表现在中枢神经系统 ,出现流涎 ,乱抓 ,旋转性抽搐 ,痉挛直至死亡等症状[2 ] 。为了在实际生活中对其急性中毒的急救及慢性中毒的防治提供理论依据 ,国内外学者对其神经毒作用机制进行了较多的研究 ,但这些研究多集中在兴奋性神经递质影响等方面[3 ,4 ] 。而对脑组织中对外来化合物代谢起重要作用的Ｐ45 0的研究较少。 7 乙氧基试卤灵Ｏ 脱乙基酶 (ｅｔｈｏｘｙｒｅｓｏｒｕｆｉｎＯ ｄｅｅｔｈｙｌａｓｅＥＲＯＤ)是脑组织…     

细胞色素氧化酶P450及其遗传多态性

细胞色素氧化酶P45 0是药物代谢中的一个重要的酶系。近年来 ,对细胞色素P45 0氧化酶与药物氧化代谢多态性的关系进行了研究。CYP2C19与CYP2D6等在表型和基因型水平上均发现存在氧化代谢多态性 ,并对其分子机制有了深入的了解 ,而CYP2C9,CYP1A1等其他酶可能存在多态性 ,但其分子机制尚不清楚。本文综述了这些P45 0酶的底物 ,种族差异 ,遗传多态性 ,以及其对药物代谢和疾病易感性的影响     

正交设计法优化大鼠肝细胞色素P450的孵育体系

目的:考察大鼠肝细胞色素P450 1A2,2A6,2C9,2E1,3A2 5种亚型的最佳体外孵育条件。方法:通过正交试验,以对乙酰氨基酚、7-羟基香豆素、4-羟基甲苯磺丁脲、6-羟基氯唑沙宗、6-β羟基睾酮总含量为考察指标,优化大鼠肝细胞色素P450的体外孵育条件。结果:大鼠肝细胞色素P450最佳体外孵育条件为温度37℃,孵育时间90 min,酶含量0.6 mg.mL-1。结论:优选的体外孵育条件为研究经P450 1A2,2A6,2C9,2E1,3A2代谢的药物相互作用及其他物质对该酶的影响提供依据。     

细胞色素P450氧化酶基因多态性对药物代谢影响的研究进展

细胞色素P450氧化酶是人体内的一种重要代谢酶,它能代谢和/或活化许多种药物、前致癌物、前毒物和致变剂。细胞色素P450氧化酶的基因具有遗传多态性,在人类存在等位基因的突变体。本文从基因结构、底物和影响其活性的因素、遗传多态性的分子机制等方面综述细胞色素P450氧化酶的研究进展。     

药用辅料对细胞色素P450氧化酶的作用研究进展

药用辅料可显著影响药物代谢酶（CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4）的活性,进而影响药物的代谢、疗效和安全性。药用辅料的生物学效应研究引起重视。本文查阅了国内外发表的相关性文献,进行了分析、综合。     

细胞色素P450诱导剂对大鼠肝微粒体内HP450的影响

组胺受体可分为Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３３型,常用［３Ｈ］新安替根标记Ｈ１受体。肝中富含新安替根结合蛋白［１］,但它不是Ｈ１受体［２］,氨基酸序列分析表明其与ＣＹＰ２Ｄ亚家族成员相似,尤与ＣＹＰ２Ｄ１极相似,且可被ＣＹＰ２Ｄ１抗体识别,它可能是ＣＹＰ２Ｄ亚家族...     

黄芩苷对小鼠肝细胞色素P450的选择性诱导

目的　观察黄芩苷对小鼠肝细胞色素P450及其亚家族的影响。方法　用紫外分光光度法分别测定小鼠肝微粒体细胞色素P450与b5含量及氨基比林N-脱甲基酶(ADM)、7-乙氧基香豆素O-脱乙基酶(ECD)、苯并芘羟化酶(AHH)活性。用蛋白印迹杂交技术鉴定细胞色素P450同功酶。结果　黄芩苷可使小鼠肝微粒体细胞色素P450含量显著增加,并使ADM,ECD及AHH 3种酶活力显著增强。对6种P450同功酶的鉴定结果显示,黄芩苷可选择性诱导1A1,2B1及2C11 3种同功酶,对细胞色素b5含量及3A2,2D1和2E1 3种同功酶无诱导作用。结论　黄芩苷对小鼠肝细胞色素P450有选择性诱导作用。