瘤内注射pSTbAT-脂质体复合物对裸鼠移植瘤抑制效应的实验研究

目的:构建血管生成抑制因子arresten基 因的真核表达载体,并观察瘤内注射质粒DNA 脂质 体复合物对裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用 PCR方法,由重组质粒pGEM Arr中扩增出基因;将 该基因定向克隆于真核表达载体中。20只裸鼠皮 下注射HepG 2细胞,成瘤后以成功构建的质粒 DNA 脂质体复合物瘤内注射,治疗后采用免疫组化 方法检测肿瘤血管密度,并利用arresten基因瘤内注 射的方法对抑制肿瘤的效果进行分析。结果:我们 成功构建arresten基因真核表达载体(pSTbAT)。实 验组肿瘤生长速度较对照组慢(实验组平均15.3个 阳性血管/10个视野,对照组平均112.5个阳性血 管/10个视野)。结论:瘤内注射arresten基因质粒 DNA复合物能抑制裸鼠移植瘤的血管生成,并能抑 制移植瘤的生长。     

瘤内注射紫杉醇PLGA微球对人喉癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的: 评估紫杉醇-乳酸-羟基乙酸共聚物[paclitaxel-poly(1actic-co-glycolic acid),TAX-PLGA]微球行瘤内直接注射对裸鼠Hep-2喉鳞癌移植瘤的疗效.方法: 建立荷Hep-2喉鳞癌裸鼠实体瘤模型,分别对模型鼠采取不同的治疗方法,通过观察各实验组肿瘤体积和质量的改变,计算抑瘤率和肿瘤体积三倍增时间(tripling time,TT).采用免疫组织化学法检测移植瘤微血管密度(microvessel density,MVD)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达.结果: 用药21 d后,与0.9%氯化钠溶液瘤内注射(intratumoral injec-tion,i.t.)组相比,TAX治疗各组的肿瘤体积和质量均明显下降(P<0.05),TT均明显延长(P<0.01);低剂量TAX-PLGA微球i.t.组的TT明显大干TAX针剂i.t.组和腹腔注射(intraperitoneal injection,i.P.)组(P<0.05);高剂量TAX-PLGA微球i.t.组的TT明显大GF其他TAX治疗各组(P<0.01).TAX针剂i.P.组、TAX针剂i.t.组、低剂量和高剂量TAX-PLGA微球i.t.组的抑瘤率分别为35.99%、39.37%、47.83%和59.90%,PLGA空白微球不影响肿瘤的生长.实验未发现明显的不良反应.TAX治疗各组的MVD计数、bFGF和VEGF表达较氯化钠溶液对照组有不同程度下降(P<0.05),其中TAX-PLGA微球i.t.给药对bFGF的抑制作用更明显,具有更强的抗肿瘤血管新生作用.结论: 在肿瘤局部直接注射多聚物缓释系统药物对喉鳞癌的治疗具有一定应用前景.     

透明质酸对鼻咽癌细胞增殖及裸鼠移植瘤生长特性的影响

研究透明质酸对鼻咽癌细胞体内外增殖特性的影响。方法以鼻咽吕ＣＮＥ－２Ｚ细胞为对象,采用增殖实验,裸鼠内成瘤实验,图像分析及免疫组化等方法,观察ＨＡ对癌细胞体内外增殖力的影响。结论ＨＡ对鼻咽癌细胞体外增殖及裸移植瘤的生长有明显促进作用,有助于进一步研究鼻咽癌的侵袭和转移机理。     

瘤内注射紫杉醇脂质体对小鼠H22移植瘤抑制作用的研究

目的比较瘤内注射和静脉注射紫杉醇脂质体对小鼠H22肝细胞癌皮下移植瘤的抑瘤作用,探讨瘤内注射微球化疗药物应用的可行性。方法采用ICR小鼠建立H22皮下移植瘤模型,随机分为瘤内注射紫杉醇脂质体组（IT-PL）、静脉注射紫杉醇脂质体组（IV-PL）和瘤内注射5％葡萄糖溶液组（IT-GS）。10天后待瘤体生长至直径10mm左右,分别予经超声引导瘤内注药及尾静脉给药处理。紫杉醇脂质体的给药浓度为3mg／ml,剂量为75mg／kg,每周1次,共2周。采用近红外荧光活体显像法观察注药24h内药物在小鼠体内的分布情况。隔日记录瘤体积变化并观察小鼠的不良反应,计算各组的抑瘤率。瘤体组织石蜡包埋后行HE染色。结果超声引导下瘤内注射紫杉醇脂质体时,针头附近区域见回声增高有助于确认药物分布于瘤体内。近红外荧光活体显像示瘤内注射24h药物持续集中在瘤体内,无明显全身分布;静脉注射药物则逐渐集中至瘤体,但瘤体内的药物浓度低于瘤内注射组。IT-PL组与IV-PL组的抑瘤率分别为95.0％和56.1％,差异有统计学意义（P＜0.05）。病理组织学检查示IT GS组的肿瘤细胞生长旺盛,而IT-PL组的瘤体内及周边有脂质沉积,仅边缘少量残存肿瘤细胞。瘤内注射部位皮下组织未见溃破、糜烂;未观察到明显全身不良反应。结论紫杉醇脂质体瘤内注射有可能成为针对局部实体肿瘤安全、有效的给药模式。     

裸小鼠移植瘤的转移研究

Rygaad和Povlsen 1969年首次将人结肠癌在裸小鼠移植成功,迄今大多数人恶性肿瘤均可在裸小鼠移植。大量研究表明裸小鼠人癌移植瘤是目前人体外最接近人类肿瘤的整体实验模型。但人癌裸小鼠移植后,能否保持其原浸润转移的恶性生物学行为,研究结果意见不一。利用人癌裸小鼠移植瘤模型研究人类肿瘤     

人T细胞白血病裸鼠异种移植瘤生长过程的病理形态学的动态观察

本文采用裸鼠皮下多点移植的方法,动态地观察了人T细胞白血病裸鼠异种移植瘤在体内的生长过程,发现在潜伏期内移植的瘤块大部分坏死,由残留周边部的瘤细胞开始增殖。在瘤细胞增生旺盛期,少数瘤细胞出现凋落和瘤细胞吞噬凋落体现象。晚期瘤块中心出现坏死。这些观察为正确地判定抗癌药物的疗效有重要意义。     

瘤内注射脂质体IL-2基因复合物治疗实验性肝癌

利用瘤内注射法将治疗基因直接转入体内的肿瘤细胞并获得表达，一方面可以提高治疗基因对肿瘤细胞的针对性，减少对非靶细胞可能带来的毒副作用，另一方面也较简便，更适应临床应用的需要。本文初步探讨了瘤内注射脂质体-IL-2基因复合物在实验性肝癌基因治疗中的应用将IL-2基因克隆人真核表达载体pME18S，     

红景天对裸鼠乳腺癌移植瘤的影响

背景与目的：体内外的肿瘤研究显示红景天具有一定的抗肿瘤作用，本文探讨红景天对于乳腺癌移植瘤的生长的抑制作用及其可能的机制。方法：以人乳腺癌MDA—MB-435细胞的裸鼠移植瘤模型作为研究对象，采用免疫组织化学方法，从转移瘤内的肿瘤细胞增殖活性方面，探讨红景天对乳腺癌移植瘤的作用。结果：与生理盐水对照组相比，红景天治疗组的移植瘤体积有所缩小，但未达到统计学意义（99．95mm^3比174．60mm^3，P=0．535）；红景天治疗后移植瘤内乳腺癌细胞增殖指标Ki-67染色比例、染色强度降低，其综合评价指数H-分数均值明显降低（152．8比86，P=0．014）；移植瘤内增殖指标PCNA的染色强度和比例的综合评价指数H-分数均值有所降低，但未达到统计学意义（242比210，P=0．221）。结论：红景天的体内抗癌机制可能部分通过抑制肿瘤的增殖活性而实现。     

转染REGγ基因对乳腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的:研究转染蛋白酶体激活因子REGγ基因的乳腺癌MDA-MB-231细胞在裸鼠体内的成瘤作用及其机制.方法:以脂质体转染法将构建的重组质粒pcDNA3.1-REGγ导入MDA-MB-231细胞,以G418(600 mg/L)筛选获得稳定高表达该基因的细胞株(实验组).以转染空载体及未施加处理因素的细胞作为对照组.将此3组细胞接种于裸鼠皮下,观察移植瘤的生长情况并计算抑瘤率.RT-PCR检测REGγ基因在移植瘤中的表达,FCM检测移植瘤的肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)中CD16的表达以及肿瘤细胞周期和细胞凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中p21的表达.结果:与对照组相比,实验组的移植瘤生长速度较快、体积较大,瘤体质量明显增加(P＜0.05);REGγ基因在移植瘤中的表达增加(P＜0.01);FCM检测提示CD16阳性率明显降低(P＜0.05);G0/G1和G2/M期细胞减少,S期细胞明显增多,肿瘤细胞的凋亡率明显降低(P＜0.05);p21的表达明显降低(P＜0.05).结论:REGγ基因在体内具有促进乳腺癌发生、发展的作用,其机制可能与加速细胞周期、抑制细胞凋亡、抑制自然杀伤细胞活化以及对p21的特异性降解有关.     

裸小鼠原位接种肝癌经瘤体内蓖麻蛋白注射后疗效及其骨髓抑制的研究

目的 为了观察蓖麻蛋白在介入治疗肝癌中的疗效,比较蓖麻蛋白与丝裂霉素对骨髓抑制的差别。方法 用ＬＣ－４１２移植瘤瘤块,植入实验裸鼠肝内建立裸鼠原位肝癌模型,以瘤体内注入生理盐水和碘油水乳剂作用对照,比较蓖麻蛋白、碘油乳化蓖麻蛋白、丝裂霉素、在肝癌瘤体内注射后的疗效,观察肿瘤生长抑制率、甲胎、血像及骨髓抑制。结果 蓖麻蛋白、磺油乳化蓖麻蛋白、丝裂霉素组肿瘤生长受到显著抑制（Ｐ〈０．０５）,肿瘤组织发     

瘤内注射DNCB治疗小鼠移植性肿瘤的研究

本文探讨瘤体内注射ＤＮＣＢ溶液对小鼠移植性肿瘤的治疗效果及其作用机理。结果表明，瘤体内注射ＤＮＣＢ溶液对昆明种小鼠的艾氏实体瘤有明显疗效，可有效抑制肿瘤生长，使肿瘤体积缩小直至完全消退，小鼠寿命显著延长，同时可使小鼠获得抵抗肿瘤再次接种的全身免疫力。病理组织学研究结果表明，瘤体内注射ＣＮＣＢ溶液既可直接引起瘤体组织坏死，又能在瘤体局部产生具有细胞免疫反应特点的淋巴细胞浸润，说明该疗法既有非免疫机制作用也有免疫机制参与。     

胃泌素对人结肠癌裸鼠移植瘤细胞内cAMP含量的影响

目的 :探讨胃泌素对人结肠癌裸鼠移植瘤细胞内环磷酸腺苷 (cAMP)含量的影响。方法 :建立人结肠癌SW4 80 裸鼠移植瘤模型 ,实验动物随机分为 5肽胃泌素 (PG)组及对照组 (生理盐水 ) ,观察移植瘤的体积、重量及细胞内cAMP含量的变化。结果 :移植瘤的体积、重量、细胞内cAMP含量 ,PG组均显著高于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :胃泌素在体内使人结肠癌移植瘤细胞内cAMP含量增加 ,从而促进移植瘤的生长     

人外周血γδT细胞对裸鼠人肺癌移植瘤治疗作用的研究

目的:探讨人外周血γδT细胞对已建立肺癌裸鼠的免疫治疗作用.方法:用人肺癌细胞株A549接种BALB/c裸鼠皮下,建立肺癌裸鼠模型.从健康人外周血中提取γδT淋巴细胞, 体外特异性扩增γδT细胞.将已建立肺癌的裸鼠随机分为两组,对照组用RPMI1640培养液,治疗组用γδT细胞分别注入裸鼠腹腔内,观察种植瘤裸鼠生存时间及肿瘤体积,并同时检测肿瘤细胞c-jun的表达.结果:裸鼠接种5×106肺癌细胞后第14天,在接种部位均有肿瘤形成,直径平均为2 mm.在首次治疗后49 d时,对照组、治疗组平均肿瘤体积分别为(0.97±0.32)和(0.46±0.25) cm3,差异有统计学意义,P<0.05.至75 d时,对照组种植瘤裸鼠全部死亡,治疗组生存天数较对照组差异有统计学意义,P<0.05.结论:人外周血γδT细胞对肺癌裸鼠种植瘤具有显著的抑瘤作用,为肺癌免疫治疗提供了一种新的治疗方法.     

益气解毒复方中药对人胃癌移植瘤裸鼠肿瘤生长及胃癌组织Ki-67表达影响的实验研究

目的:探讨益气解毒复方中药对SGC-7901荷瘤裸鼠的抑瘤作用及对肿瘤组织Ki-67表达的影响,为其临床应用提供实验依据.方法:胃癌细胞株SGC-7901接种于裸鼠右后肢皮下.对照组灌胃生理盐水10 mL/kg,5-FU组肌肉注射30 mg/kg,益气解毒复方中药大、中、小剂量组分别灌胃1 500、750和375 mg/mL的药液,各组连续给药14 d,各鼠脱臼处死,计算瘤质量系数,肿瘤组织用于免疫组织化学染色检测肿瘤组织Ki-67表达.结果:对照组的瘤质量系数为3.060±2.426,显著高于5-FU组和益气解毒复方中药大、中剂量组(0.273±0.146,P<0.01;0.696±0.585, P<0.01;1.197±1.271,P<0.05),与益气解毒复方中药小剂量组(1.727±1.721)相比差异无统计学意义,P>0.05.免疫组织化学结果显示,5-FU组、中剂量的益气解毒复方中药组的肿瘤组织Ki-67过度表达率(36.8±10.3)%,(32.5±20.4)%显著低于对照组(59.5±13.9)%,P<0.05.结论:益气解毒复方中药对胃癌细胞增殖和Ki-67表达具有较好的抑制作用.     

雷帕霉素抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长活体成像的观察

目的:观察雷帕霉素(RA-PA)对不同PTEN表达子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:通过慢病毒转染构建稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的HEC-1A(PTEN阳性)和Ishikawa(PTEN阴性)细胞株,建立裸鼠移植瘤模型。活体成像系统观察肿瘤的生长情况。观察RAPA治疗后肿瘤的体积及重量的变化。HE染色观察肿瘤的病理形态学变化。结果:建立稳定表达GFP的子宫内膜癌细胞系及裸鼠移植瘤模型,活体荧光成像显示,治疗组裸鼠荧光强度较对照组明显减弱。治疗组肿瘤体积及重量明显小于对照组(P<0.05),Ishikawa细胞组的抑瘤率(67.1%)较高于HEC-1A细胞组的抑瘤率(48.1%)。治疗组的肿瘤组织可见大片肿瘤细胞坏死,对照组肿瘤细胞坏死少。结论:RAPA对PTEN阳性及阴性的子宫内膜癌生长均有明显的抑制作用,PTEN的丢失可增加RAPA抗子宫内膜癌的敏感性。     

"彗星"分析法检测人癌裸鼠移植瘤的放射敏感性

目的　探讨“彗星”分析法应用于人实体肿瘤放射敏感性检测的可能性。方法　应用“彗星”分析法 ,以尾力距之比 (RTM)作为终指标 ,检测人肺腺癌、人食管鳞癌和人鼻咽鳞癌等 3种人癌裸小鼠移植瘤的放射敏感性。裸小鼠移植瘤组织被消化并稀释成细胞浓度为 4× 10 4ml的单细胞悬液后 ,分成对照组 (0Gy)和不同剂量照射组 ,照射组分别给予 2、5、10和 15Gy的 6MVX射线的冰上照射 ,照射后立即进行“彗星”分析。结果　 3种人癌裸小鼠移植瘤细胞未照射时 (0Gy)的尾力矩 (TM)差异有显著性意义 (F =9.11,P <0 .0 1)。不同剂量 (2、5、10和 15Gy)照射后 ,3种人癌裸小鼠移植瘤细胞未做校正时的TM所反映放射敏感性由高到低的变化趋势依次为 :肺腺癌 >食管鳞癌 >鼻咽鳞癌 ,显然与临床一般印象不符 ;而经与对照组进行“本底”校正后的RTM所反映放射敏感性由高到低的变化趋势依次为 :食管鳞癌 >鼻咽鳞癌 >肺腺癌 ,则符合临床一般印象。结论　①应用“彗星”分析法检测实体肿瘤的放射敏感性 ,尾力矩必须进行“本底”校正 ,即扣除对照组本底误差后的尾力矩才能很好地反映实体肿瘤的放射敏感性差异。②“彗星”分析法可用于检测人体肿瘤组织的放射敏感性。     

多肽p166结合顺铂对结肠癌裸鼠移植瘤抑制作用的观察

目的:观察计算机辅助药物设计合成的特异性多肽p166结合顺铂对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及毒副反应,并探讨其作用机制.方法:建立人结肠癌细胞株HCT-116裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为生理盐水组、顺铂组(1 mg/kg)和p166结合顺铂组(4 mg/kg,其中顺铂浓度为1 mg/kg).连续腹腔注射给药10 d,给药期间测瘤体体积计算抑瘤率,第11天处死裸鼠,采血测肝肾功能,剥离瘤体标本HE染色,采用免疫组化法检测凋亡因子Bcl-2、Bax、Cyt C和Caspase-3的表达.结果:p166结合顺铂组和顺铂组,抑瘤率分别为56.98%和41.96%.p166结合顺铂组血清BuN、Cr、ALT和AST水平均低于顺铂组,其中Cr、ALT和AST水平与顺铂组比较差异有统计学意义,P<0.05.免疫组化结果显示,与顺铂组比较,p166结合顺铂组Bcl-2蛋白表达减少,Bax、Cyt C和Caspase-3蛋白表达增强.结论:p166结合顺铂对HCT-116人结肠癌裸鼠移植瘤具有显著抑制作用,且能减少顺铂对裸鼠肝肾功能的影响.其机制可能与p166结合顺铂后能增加顺铂穿透肿瘤细胞胞膜的能力有关.     

槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤抑制作用的研究

目的 :研究槲皮素对人乳腺癌细胞株MCF 7裸鼠移植瘤的抑制作用及其对细胞增殖的影响。方法 :复制MCF 7裸鼠移植瘤动物模型 :2 4只移植成功的裸鼠分为对照组、槲皮素组、多柔比星组及联合用药组 4组 ,每组 6只。观察比较移植瘤的生长情况、移植瘤质量、光镜及电镜观察移植瘤结构的变化 ,Ki 67免疫组化分析对细胞增殖的影响。结果 :对照组移植瘤生长速度明显快于槲皮素组、多柔比星组及联合用药组。移植瘤质量对照组明显大于槲皮素组、多柔比星组及联合用药组 ,P <0 0 1。槲皮素组及联合用药组抑瘤率分别为 3 6 46%和 41 49%。Ki 67标记指数为对照组最高 ( 83 5 3 % ) ,槲皮素组次之( 66 95 % ) ,均高于联合用药组 ( 5 8 80 % ) ,P <0 0 1。结论 :槲皮素可抑制MCF 7裸鼠移植瘤生长及增殖 ,并可与多柔比星协同抑制移植瘤的增殖作用