人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,将40只裸鼠随机分为4组:对照组、重组人生长激素(rhGH)组、曲古抑菌素A(TSA)组和rhGH+TSA组,各组腹腔注射给药,2周后,观察各组药物对肿瘤生长的影响.MTF法检测肿瘤细胞的增殖,免疫组织化学检测肿瘤细胞增殖,缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果 与对照组相比,TSA组和rhGH+TSA组S期细胞、肿瘤质量及细胞增殖指数明显降低(P<0.05),凋亡指数、G0/G1期及G2M期细胞明显升高(P<0.05),但TSA组与rhGH+TSA组以及rhGH 组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 人生长激素在体内对人胰腺癌细胞既无明显的增殖作用,也无明显的凋亡作用.     

局部热化疗对鼠胶质细胞移植瘤细胞增殖及其蛋白表达的影响

目的　研究局部热化疗对鼠胶质细胞移植瘤细胞增殖及PCNA、IGF I表达的作用 ,探讨其作为胶质瘤辅助治疗的可行性。方法　将传代培养的C6细胞接种于大鼠背部皮下 ,肿瘤生长至直径为 1.5～2 .0cm时 ,分组进行局部热疗、化疗和热化疗。继续观察皮下肿瘤生长情况 ,测量瘤体体积和重量 ;用免疫组化S P法检测PCNA、IGF I蛋白表达 ;用HE染色法、电镜观察肿瘤增殖状况。结果　热疗、化疗、热化疗与对照组比较 ,瘤体缩小 ,瘤重减轻 (分别为 2 .95 ,1.95 ,1.86和 1.0 9g ,P值均 <0 .0 1) ;PCNA蛋白和IGF I蛋白表达降低 (P <0 .0 1) ,且热化疗较单纯热疗和化疗降低更明显 (P <0 .0 1)。出现核染色质凝聚 ,凋亡小体 ,细胞增殖明显受抑制。结论　①热疗、化疗、热化疗能抑制肿瘤增殖 ,且热化疗有协同作用。②热疗、化疗、热化疗能减低PCNA、IGF I蛋白表达。③热化疗抑制胶质瘤的PCNA合成与表达 ,抑制IGF I的合成与分泌 ,是其治疗肿瘤的机制之一。     

局部热化疗对鼠胶质瘤血管再生及细胞凋亡的影响

目的研究局部热化疗对大鼠胶质瘤血管再生及细胞凋亡的影响，探讨其治疗胶质瘤的机理。方法制作大鼠胶质瘤动物模型并分组，各组分别进行局部热疗、化疗或热化疗。用FVI—RA染色标记血管内皮细胞，以微血管密度作为定量检测指标；用免疫组化S-P法检测VEGF、bax及bcl-2蛋白表达，用透射电镜观察肿瘤细胞及血管结构的变化。结果热疗组、化疗组、热化疗组与对照组比较，发现各治疗组胶质瘤体积明显缩小。重量减轻；VEGF蛋白表达降低，bax蛋白表达增强，bcl-2蛋白表达则无明显变化，VEGF表达与MVD呈正相关。大鼠胶质瘤经热化疗后，肿瘤微血管外径变小，血管壁变厚，血管密度降低，血管内皮细胞紧密连接增多，细胞连接间隙减小，有的血管甚至只能观察到完整的基膜而缺乏内皮细胞。结论①热疗、化疗、热化疗均能抑制肿瘤血管再生，且化疗与热疗联用具有协同作用，可提高疗效；②热化疗能显著降低肿瘤细胞VEGF的合成与分泌，抑制肿瘤血管再生；③热化疗能增强bax蛋白表达，使bcl-2／bax比值降低，诱导肿瘤细胞凋亡。     

人生长激素对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨人生长激素对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,将40只裸鼠随机分为4组:对照组、重组人生长激素(rhGH)组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组和rhGH+5-FU组,各组腹腔注射(ip)给药,2周后观察各组药物对肿瘤生长的影响.分别采用MTT法和免疫组化检测肿瘤细胞增殖,TUNEI法检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果 与对照组相比,5-FU组和rhGH+5-FU组S期细胞、肿瘤质量及PI明显降低(均P＜0 01),凋亡指数、G0/G1期细胞明显升高(均P＜0.05);与5-FU组相比,rhGH+5-FU组的肿瘤质量、细胞增殖指数(PI)及G2M期下降率明显优于5-FU组,G0/G1期上升率明显优于5-FU组(均P＜0.05),而rhGH 组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 人生长激素在体内对人乳腺癌细胞既无明显的增殖作用,也无明显的凋亡作用,但与5-FU联用后能增强MCF-7乳腺癌细胞的化疗效果,且具有协同作用.     

EVn-50对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究EVn-50体外对人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养Hela细胞,台盼蓝拒染法检测细胞活力;AO/EB染色荧光显微镜观察EVn-50诱导Hela细胞凋亡形态学改变;DNA凝胶电泳确证EVn-50诱导Hela细胞凋亡作用;PI染色流式细胞仪检测EVn-50诱导Hela细胞凋亡率。结果:EVn-50体外对人宫颈癌Hela细胞的增殖具有显著抑制作用,呈浓度依赖性。EVn-50可诱导Hela细胞凋亡,AO/EB染色可见典型凋亡小体;DNA凝胶电泳在EVn-50浓度100μg/mL作用48h出现典型"梯形"DNA条带;PI染色流式法显示EVn-50在10、100μg/mL作用Hela细胞48h后,凋亡率分别为(8.80±0.16)%及(20.93±0.62)%,呈浓度依赖性。结论:EVn-50具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖并诱导细胞凋亡作用。     

转染人livinα基因对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究人livinα基因表达对Jurkat细胞增殖、凋亡的影响。方法基因转染获得稳定表达livinα的Jurkat细胞克隆（Jurkat/livinα）;MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率,通过观察细胞生长和凋亡情况,探讨livinα对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响;RT-PCR检测细胞中livinα和caspase-3 mRNA的表达。结果Jurkat/livinα组livinαmRNA表达高于对照组（Jurkat细胞组）（P＜0.05）,转染后caspase-3 mRNA受到抑制,表达减弱,细胞生长曲线显示Jurkat/livinα组细胞生长速度增快,倍增时间缩短9-10 h（P＜0.05）,细胞凋亡率计算显示Jurkat/livinα组细胞凋亡率较Jurkat细胞组明显减少（P＜0.01）。结论 livin α基因能促进Jurkat细胞生长,可能通过抑制细胞凋亡而在急性T淋巴细胞白血病发生发展中起重要作用,有望成为白血病治疗的新分子靶点。     

富铁对HL-60细胞增殖及化疗药物诱导其凋亡的影响

铁是细胞生长所必需的元素之一 ,是细胞代谢酶的必需成分 ,同时 ,铁还可激活催化ＤＮＡ合成的核糖核酸还原酶。动物实验表明富铁饲料可促进肿瘤的生长[1,2 ] ,肝癌细胞在富铁的培养基中生长更快 ,细胞团更大[3 ] 。因而 ,研究富铁对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响 ,对防止医源性铁过多和肿瘤治疗有重要的意义。新近我们探讨了富铁对白血病细胞株ＨＬ 6 0的增殖及对化疗药物诱导凋亡作用的影响 ,现报道如下。材料和方法1　细胞株　白血病细胞株ＨＬ 6 0引自华西医科大学细胞分子生物学实验室。2　细胞培养　ＨＬ 6 0细胞培养于含体积分数为 10 %灭…     

热疗联合组织因子靶向治疗对人大肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨热疗联合组织因子(TF)靶向治疗在体内和体外对人大肠癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 用RNA干扰的方法 敲低大肠癌LOVO细胞系中TF的表达,MTT法、流式细胞术、Western blot方法 测定热疗联合TF敲低对LOVO细胞体外增殖抑制及细胞凋亡的影响.将人大肠癌细胞注射到裸鼠腹股沟皮下建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同治疗方法 对肿瘤生长的影响.结果 用RNA干扰的方法 可以有效降低大肠癌LOVO细胞系中TF的表达.与单独热疗和单独TF敲低相比,联合治疗能够明显抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的发生(P<0.05).热疗联合TF敲低能够有效抑制裸鼠体内的肿瘤生长.结论 热疗和TF敲低联合应用能够抑制大肠癌细胞增殖并且诱导其凋亡,热疗联合TF靶向治疗是一个潜在的治疗大肠癌的新策略.     

阿霉素化疗与热化疗对人肺腺癌细胞株A549细胞抑制作用的比较研究

目的 探讨阿霉素（adriamycin，ADR）化疗与热化疗（热疗联合化疗）对人肺腺癌细胞株A549细胞的抑制作用与细胞内阿霉素浓度的关系。方法 不同浓度的阿霉素作用于体外培养的A549细胞，42．5℃作用30、60min后，37℃继续培养，然后用MTT法检测细胞的毒性作用，用流式细胞仪检测细胞内阿霉素浓度。结果 化疗、热化疗对A549细胞均有抑制作用，与对照组比较差异有非常显著性（P〈0．01），且均存在浓度、时间的依赖性；热化疗对细胞的抑制作用明显强于单纯化疗（P〈0．01）；热化疗组细胞内阿霉素的浓度明显高于单纯化疗组（P〈0．01）；各组细胞内药物浓度与细胞的抑制率呈直线相关（P〈0．05）。结论 阿霉素热化疗可以显著增强对A549细胞的抑制，其抑制作用与细胞内浓度有关。     

阿霉素加热化疗对人肝癌细胞耐药模型-7721/Adm多药耐药性的影响

目的 探讨阿霉素（ＡＤＭ）化疗与４３℃加热化疗对人肝癌细胞－７７２１（以下简称７７２１细胞）和耐药人肝癌细胞模型－７７２１／Ａｄｍ（以下简称７７２１／Ａｄｍ细胞）的细胞毒作用。方法 以体外培养的人肝癌细胞－７７２１和我们培养建立的人肝癌细胞模型－７７２１／Ａｄｍ为研究对象,采用水浴加温法,体外细胞毒试验（ＭＴＴ法）,观察ＡＤＭ化疗与加热化疗对细胞的生长抑制规律的影响;采用流式细胞技术检测加热对７７２１细胞和７７２１／Ａｄｍ细胞内阿霉素浓度的影响。结果 （１）７７２１／Ａｄｍ细胞对阿霉素的敏感性明显低于７７２１细胞;（２）加热可以明显提高两种细胞对阿霉素的敏感性;（３）流式细胞检测显示加热可明显提高这两种细胞内的阿霉素的浓度,尤其是７７２１／Ａｄｍ细胞内的阿霉素浓度。结论 加热可以显提高人肝癌细胞－７７２１和耐     

内皮抑素基因对ACHN RCC细胞增殖和凋亡的影响

目的利用已构建的带有内皮抑素基因真核表达载体质粒导入裸鼠ACHN肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）细胞中,研究内皮抑素基因对RCC细胞增殖和凋亡的影响。方法ACHN细胞浓度1×10^7个/L,经裸鼠右侧背部皮下注射0.2 ml,共注射24只裸鼠。荷瘤裸鼠随机分为3组,每组8只。治疗组：每只裸鼠瘤内3点注射复合物100μl（内含30μl梭华-SofastTM和30μg pSecES质粒）;对照组：每只裸鼠瘤内3点注射复合物100μl（内含30μl梭华-SofastTM和30μg pcDNA3.1质粒）;空白组：每只裸鼠瘤内3点注射生理盐水100μl。各组每只裸鼠间隔3 d注射1次,连续注射3次。以增殖细胞核抗原（PCNA）作为细胞增殖状态,按链霉亲和素生物素法（SABC）进行免疫组化染色。细胞凋亡检测用TUNEL法。结果内皮抑素真核表达质粒能显著抑制裸鼠ACHN RCC肿瘤体积增长,pSecES治疗组平均瘤重明显小于空白组和对照组（P〈0.01）,与空白组的肿瘤生长抑制率为34.48%,与对照组的肿瘤生长抑制率为40.68%。治疗组肿瘤细胞的凋亡指数（AI）明显高于对照组和空白组（P〈0.01）。pSecES治疗组肿瘤组织的AI/PI比值明显高于对照组和空白组（F=189.27,P〈0.05）。Spearman相关分析表明,肿瘤体积与细胞增殖之间无明显相关性（r=-0.041 2,P〉0.05）,肿瘤体积与细胞凋亡呈负相关（r=-0.734 6,P〈0.01）。结论内皮抑素基因治疗可使裸鼠ACHN RCC肿瘤细胞凋亡增加,肿瘤细胞的数量减少,在总体上表现为肿瘤的生长变慢、体积变小。     

胰岛素对人腹膜间皮细胞增殖、损伤及凋亡的影响

目的明确胰岛素是否对人腹膜间皮细胞具有毒性或者保护作用。方法使用人腹膜间皮细胞细胞株，传代培养。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定HPMC的增殖程度。采用全自动生化分析仪测定培养液中乳酸脱氢酶LDH水平示细胞损伤，Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学变化及计算凋亡细胞百分比。分为单纯培养基对照组，4．25％葡萄糖组，不同浓度胰岛素组和不同浓度的胰岛素加4．25％葡萄糖组。结果与对照组相比，4．25％葡萄糖致LDH水平明显增高，并显著降低NIT渗入量，明显增加凋亡细胞百分比；不同浓度的胰岛素对HPMC增殖无影响，不同浓度胰岛素24h后可明显升高LDH水平(P＜0．05)，不同浓度胰岛素作用12h均后导致凋亡细胞百分比显著升高(P＜0．05)；不同浓度葡萄糖胰岛素组12h、24hMMT渗入量较葡萄糖组明显升高(P＜0．05)，组间差异无显著性(P＞0．05)，浓度大于25U／L胰岛素加葡萄糖组作用24h后与葡萄糖组相比显著降低LDH水平(P＜0．05)；不同浓度胰岛素加葡萄糖组作用12h后与葡萄糖组相比凋亡细胞百分比明显下降(P＜0．05)。结论胰岛素能导致HPMC损伤、诱导凋亡，同时在一定范围内可缓解高糖对HPMC的毒性作用。     

17-DMAG对人LX2肝星状细胞增殖及凋亡作用的研究

目的研究HSP90抑制剂17-DMAG在体外对人LX2肝星状细胞生长增殖及细胞凋亡的作用。方法 ?体外培养人LX2肝星状细胞,用细胞毒试验法(MTT)观察不同浓度和作用时间的17-DMAG对LX2细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测药物作用后LX2细胞凋亡的发生;Western blot检测α-SMA的表达,并与对照组进行对比。结果 17-DMAG能抑制人LX2肝星状细胞生长,且呈浓度和时间依赖性(P<0.01),随药物浓度加大和作用时间延长,存活细胞数量逐渐减少;流式细胞仪证实17-DMAG可诱导LX2细胞凋亡,与对照组比较,实验组细胞凋亡率明显增加(P<0.01);Western blot可以证实17-DMAG可使LX2细胞α-SMA表达减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 17-DMAG可呈浓度和时间依赖性的抑制人LX2肝星状细胞的生长,其机制为诱导细胞凋亡,并且通过这种机制来减少α-SMA的表达来抑制胶原的产生。     

Lobaplatin suppresses proliferation and induces apoptosis in the human colorectal carcinoma cell Line LOVO in vitro

Lobaplatin, as the third-generation platinum antineoplastic agent, showed promising antineoplastic effects in variety of preclinical test tumor models. We investigated the inhibition effect of lobaplatin on the colorectal carcinoma cell line LOVO in vitro, and explored its mechanism of action. The MTT assay was used to determine the inhibitory effect and inhibition ratio of lobaplatin on LOVO at various lobaplatin concentrations (500 μM, 1000 μM, 2000 μM). Apoptosis was detected by terminal deoxynucleotide transferase-mediated dUTP nickend labelling (TUNEL). The cell cycle and apoptotic rate were analyzed by flow cytometry (FCM) and the expression of caspase-3,8,9 in cells was detected by chromometry. The results of MTT assay showed that proliferation of LOVO cells was inhibited by lobaplatin in a concentration-dependent manner. Apoptosis was detected in LOVO cells by TUNEL. The FCM assay indicated that lobaplatin altered the cell cycle and induced apoptosis of the LOVO cells when treated for 24 h, the percentages of cells in the S phase transition were increased, whereas the percentages of cells in the G₂ transition were decreased. The expressions of caspase-389 is higher than the control group after LOVO cells were treated by lobaplatin. Lobaplatin can inhibit the proliferation of colorectal carcinoma cell line LOVO by inducing apoptosis in vitro. The mechanism may be related to the “S” cycle arrest in cell cycle distribution and the up-regulated expression of caspase-8 and caspase-9 which up-regulated the expression of caspase-3.     

NOB1影响胶质瘤细胞增殖、凋亡的实验研究

目的 利用RNA干扰（RNAi）在人胶质瘤U251和U87-MG细胞中沉默NOB1基因的表达,探讨NOB1对恶性胶质瘤细胞增殖以及凋亡的影响.方法 构建NOB1基因的短发卡（shRNA）慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒并感染人胶质瘤U251和U87-MG细胞,采用实时定量聚合酶链反应检测NOB1在恶性胶质瘤细胞系中的表达.采用甲基噻唑基四唑（MTT）比色法和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力情况;同时利用PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡情况,观察NOB1基因对U251和U87-MG细胞增殖、凋亡的影响.结果 NOB1基因在人胶质瘤U251、U87-MG细胞系中均明显高表达.NOB1-shRNA慢病毒能有效感染胶质瘤细胞,实验结果显示感染后U251和U87-MG细胞的增殖能力明显下降;U251克隆形成能力明显受到抑制;细胞周期在G0/G1停滞,而且细胞出现显著性凋亡;上述差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论 NOB1在人胶质瘤U251和U87-MG细胞中高表达;降低NOB1基因的表达,可以显著降低胶质瘤细胞的增殖,并促进胶质瘤细胞凋亡;NOB1基因在体外对胶质瘤细胞的发生发展可能具有癌基因的调节作用.     

萘普生对体外宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨萘普生对人子宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法:用含不同浓度的萘普生细胞培养液(1、10、100、300、500μg/mL)于不同作用时间(6、12、24、48h)处理宫颈癌Hela细胞48h后,采用MTT法检测不同浓度的萘普生细胞培养液在不同作用时间下对Hela细胞增殖率的影响;用500μg/mL的萘普生细胞培养液处理宫颈癌Hela细胞48h后荧光显微镜观察细胞形态变化,并采用Annexin V-FITC/PI染色,以流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:(1)MTT法显示,不同浓度的萘普生细胞培养液对Hela细胞均有抑制作用,不同药物浓度组在同一作用时间下对Hela细胞生长抑制率的差异有统计学意义(P<0.01),同一药物浓度在不同作用时间组之间的细胞生长抑制率的差异也有统计学意义(P<0.01)。(2)Hoechst33342染色后,经荧光显微镜观察,可见到染色质浓缩及凋亡小体等凋亡特征。(3)流式细胞仪检测显示萘普生处理宫颈癌Hela细胞48h后,细胞凋亡率明显增加。结论:萘普生在体外对Hela细胞增殖具有抑制作用,且抑制作用呈时间依赖性及浓度依赖性。     

抗菌肽LL-37对口腔鳞癌SCC-090细胞增殖、侵袭和凋亡影响的体外实验研究

目的 研究抗菌肽LL-37对口腔鳞癌SCC-090细胞的增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 体外培养口腔鳞癌SCC-090细胞,设置空白对照组(抗菌肽LL-37为0μg/mL)、不同浓度的抗菌肽LL-37(25、50、100、150、200μg/mL),分别培养细胞24、48、72 h后,细胞增殖-毒性法检测细胞的增殖情况,...