藏药洮河红景天trnS-G基因与红景天苷含量变异的相关性研究

本研究采集不同地区的洮河红景天植株,采用改良CTAB法提取总DNA。采用PCR方法扩增trn S-G基因片段,对扩增产物进行序列测定,分析红景天trn S-G基因多态性。同时,采用高效液相色谱法(HPLC)测定不同洮河红景天红景天苷含量,分析红景天苷含量差异。结果表明:不同洮河红景天trnS-G基因序列存在多样性。扩增得到的目的序列长度在597~600 bp之间。8个洮河红景天样品中,trnS-G基因片段可分为5个单倍型,其中:H1、H2、H3单倍型对应的样品均未检测到红景天苷的存在,H4、H5单倍型样品中检测到红景天苷的积累,H4单倍型样品的平均含量为0.18%,H5号单倍型仅有1个样品,含量为0.2%。洮河红景天trnS-G基因多态性与地理来源有一定的相关性,trnS-G单倍型与红景天苷含量具有相关性。     

HPLC法测定红景天居群中红景天苷的分布式样

本文以HPLC法作为测定红景天苷的方法,调查红景天苷在红景天不同种、不同居群中的分布式样。实验中采集不同种、同种不同居群、同居群不同个体的红景天样品,进行红景天苷的含量测定。结果表明红景天苷在不同红景天中分布差异较大,同种不同居群间多型性、居群内及个体间多态性显著。HPLC比法简便、快速、准确、重复性好,适用于研究红景天苷在药用红景天居群中的分布。     

红景天根中总黄酮和多糖的微波提取及含量分析

目的;从红景天中提取有效成分总黄酮,多糖,并测定其含量。方法：分光光度法,结果：测得红景天总黄酮含量4．62％,平均回收率为98．59％,RSD1．23（n=3),多糖含量9．12％,平均回收率为99．25％,RSD1．12％（n=3)。结论：运用微波技术辅助测定红景天中总黄酮和多糖的含量,反应速度加快,收率提高。     

不同地区红景天植物红景天苷含量比较研究

采用高效液相色谱法(HPLC)测定了6种不同地区红景天植物红景天苷含量.以甲醇为提取溶剂,室温超声提取45 min,HPLC测定条件:岛津C18柱(4.6×250 mm,5 μm);流动相为甲醇∶水=3∶7;柱温25℃;检测波长为275 nm.结果表明,红景天苷含量分别为:大花红景天0.36%,狭叶红景天(狮子七)0.32%,宽果红景天0.14%,白三七0.04%,在小丛红景天、洮河红景天中未检测到红景天苷.     

红景天UGTs基因与有效成分含量的相关性研究

本研究采集青藏高原地区不同种的红景天植株,采用改良CTAB法提取红景天总DNA。PCR扩增UGTs基因片段,对扩增产物进行序列测定,分析红景天UGTs基因多态性。同时,采用高效液相色谱法(HPLC)测定不同植株中红景天苷、酪醇、没食子酸的含量,分析三种有效成分的含量差异。结果表明:不同红景天植物UGTs基因序列存在多样性,三种有效成分的含量也存在一定差异。7个样品为7种不同的单倍型,不同种的红景天中有效成分的含量与地理分布有一定的联系,不同植株不同单倍型和同一植株不同单倍型所含的红景天苷、酪醇和没食子酸的含量都存在一定的差异,选用的红景天植物材料所对应的单倍型与红景天苷含量、酪醇含量之间无显著性差异,与没食子酸含量之间差异显著。     

氮素营养水平对高山红景天生长和红景天苷含量的影响

在温室中采用砂培法以4种氮素营养水平(1．75、3．50、7．00和14．00mmol／L)培养移栽的高山红景天,50d后测定了生长状况和根的红景天苷含量。株高、全株生物量、地上部分生物量随氮水平的增加而增加,而根生物量、根冠比则随着氮水平的增加而降低。在氮水平为7mmol／L左右时,高山红景天根中红景天苷的含量和产量最高,而低氮水平和高氮水平均不利于红景天苷的积累。     

青藏高原红景天属植物药材中五种有效成分HPLC分析(英文)

为了比较红景天属不同红景天药材的有效成分的差异,采用HPLC-DAD法建立了同时测定青藏高原14种红景天属药材中红景天苷、酪醇、没食子酸、儿茶素、表儿茶素含量的方法.色谱柱为Phenomenex Luna C18(250×4.6 mm,5μm);以甲醇-水为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为276 nm;柱温为30℃。结果表明,在五种化合物在选定的条件下能得到较好的分离,线性关系良好。方法回收率在97.36%以上,RSD小于2.31%。该方法简单快速,可为红景天属药材的质量控制提供科学依据。     

保健食品中红景天甙含量测定及其稳定性研究

测定保健食品中红景天甙的含量以控制产品质量。采用十八烷基硅烷键合硅胶柱;以乙腈-水（1：9）为流动相,流速为1.0mL／min,检测波长为280nm。结果表明红景天甙在0．4—4．0μg范围内呈线性关系,平均回收率（n=6）为98．96％（RSD=1.16％）。该方法简便、准确、重现性好,可用于保健食品中红景天甙的质量控制。     

大海林地区不同生境高山红景天根部红景天甙含量的差异

在黑龙江省大海林地区海拔１４００－１６２０ｍ的高山上,依据高山红景天的生境于岳桦林内、高山草甸、苔原上选择了６个样地,测定了高山红景天根部的红景天甙含量。生境不同的高山红景天,根部红景天甙的含量有明显差异,红景天甙含量范围内０．１０１％－０．６８４％。从测定结果看,光照条件好、土壤肥沃的生境下高山红景天根部的红景天甙含量较高。     

遮荫和红膜处理对高山红景天根生物量及红景天甙含量季节变化的影响

采用纱布遮荫(覆以透明膜)和红色滤光膜处理人工种植生长3年和4年的高山红景天,观察了根生物量和红景天甙含量的季节变化结果表明,纱布遮荫处理(相对光强为全光照的51．8％)下根的生物量显著下降;红景天甙含量略有增加,红景天甙产量(红景天甙含量与根生物量乘积)则有所降低,但差异均不显著,红色滤光膜处理(相对光强为全光照的51．8％)与纱布遮荫处理相比,根生物量减少但不显著,红景天甙的含量和产量则显著增加,生长季末前者的红景天甙含量为后者的1．63倍(生长3年)和1．55倍(生长4年),红景天甙产量为后者的1．44倍(生长3年)和1．45倍(生长4年)。     

温室栽培光强和光质对高山红景天生物量和红景天甙含量的影响

为探讨光强及光质对高山红景天(Rhodiola sachalinensis)生物量和红景天甙含量的影响。于2000年4月至6月在东北林业大学温室内以移栽于大兴安岭加格达奇圃地人工种植生长3a的高山红景天为材料,通过纱布遮荫及遮以不同颜色的滤光膜分别进行了光强、光质控制实验(处理45d)。随着光强的降低,高山红景天全株生物量、根生物量、根的红景天甙含量和产量以及叶中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素的含量均有降低的趋势,但叶绿素含量变化很小,不同光强及对照之间的差异均未达到显著水平。相对光强为67．75％和44．71％的两种处理下的全株生物量、根生物量、根的红景天甙含量和产量差异不显著,它们的全株生物量和红景天甙含量与对照(全光照)的差异也不显著,但根生物量和红景天甙产量与对照的差异显著。当相对光强减弱至31．96％,全株生物量、根生物量、根的红景天甙含量和产量均大幅度下降,根冠比显著增加。4种滤光膜处理均使高山红景天的全株生物量及根生物量显著降低,蓝膜和绿膜处理的降低幅度大于红膜和黄膜处理的。红膜处理的红景天甙的含量和产量均高于对照,但黄膜、蓝膜和绿膜处理的红景天甙含量和产量则低于对照。通过计算去除4种滤光膜的光强因素,仅从光质的作用看。4种滤光膜处理仍是减小了全株生物量和根生物量,红膜和绿膜处理提高了红景天甙的含量和产量,而黄膜处理降低了红景天甙的含量和产量,蓝膜处理几乎没有效果。4种滤光膜处理均使叶绿素含量增加,但只有蓝膜处理的与对照差异显著。红膜处理不仅显著提高根中红景天甙的含量(为对照的3．42倍),而且对根生物量的影响较小(为对照的90．24％)。因而提高了高山红景天根的红景天甙产量,这意味着在生产上可能会有一定的实践意义。     

青藏高原红景天药材的HPLC指纹图谱

利用高效液相色谱法建立了青藏高原红景天的色谱指纹图谱。固定相采用C28反相色谱柱,流动相为甲醇：0．1%磷酸水(v／v=15：85);检测波长220nm;流速为1．0mL／min。通过比较发现红景天样品的8个主要共有峰．可作为鉴别红景天药材的主要依据。方法简便快速。为中药品种的鉴定提供了较全面的信息。     

高效液相色谱法测定红景天根中红景天甙的含量

建立了一种高效液相色谱法测定红景天根中红景天甙的含量。色谱柱为Hypersil—C18（5μm,150mm×4．6mm）,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,在250nm波长处检测。研究结果表明：红景天甙的检测限为50μg/L,线性范围为4—40mg／L,回归方程为Y=5．6348X-4．0931,r=0．9996,加样回收率为98．05％。方法操作简便、快速、准确。     

红景天苷生物合成机制及其基因工程研究进展

红景天苷主要来源于红景天,是红景天属植物的重要活性物质,具有抗辐射、抗缺氧、抗肿瘤等多种药用功效。由于红景天野生资源少,且红景天苷在红景天中含量极少、提取率低,因此,研究提高红景天苷产量的生产方法具有重要的意义和价值。在研究红景天苷生物合成机制的基础上,通过基因工程技术来提高红景天苷的产量具有一定的前景和研究价值。综述了红景天苷的生物合成机制、代谢途径中的关键酶和利用代谢工程合成红景天苷的方法,并对其研究前景进行了展望,以期为红景天苷的生物合成相关研究提供参考。     

丽江产红景天的化学成分研究

从丽江产红景天粗提物中分离得到了14个化合物,经波谱数据分别鉴定为二十六烷醇(1-hexamsanol,1),β-谷甾醇(β-sitosterol,2),胡萝卜苷(daucostexol,3),酪醇(tyrosol,4),红景天苷(salidroside,5),没食子酸(galic acid,6),山奈酚(kaempferol,7),草质素-7-O-(3″-β-D-葡萄糖基)-α-L-鼠李糖苷(rhodiosin,8),德钦红景天苷(rhodionin,9),对羟基苯甲酸(4-hydroxybenzoic acid,10),geranyl 1-O-α-L-arabinopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside(11),2,7-anhydro-β-D-heptul-opyranoses(the altro isomer,12),乙酸二十六烷醇酯(cerotylacetate,13),1,2,3,4,6-五没食子酰基-β-D-喃葡萄糖(1,2,3,4,6-pentagalloyl-β-D-glucopyranose,14)。根据分离所得的单体,用HPLC对商业化粗提物色谱中的8个峰进行了指认,并测定了云南千山生物工程有限公司利用不同工艺流程所得四批粗提物中红景天苷的含量。     

超临界CO2萃取红景天中红景天苷、苷元酪醇的研究

采用超临界CO₂ 萃取法和乙醇常温浸提法相比较, 研究从红景天中提取红景天苷、苷元酪醇的工艺条件, 结论是:采用超临界CO₂ 萃取法能萃取出红景天生药中红景天苷的1.2%, 提取率不高, 但该方法能萃取出80%的苷元酪醇, 萃取液中苷元酪醇的相对含量可达45.68%;乙醇常温浸提法能将红景天苷、苷元酪醇同时有效萃取, 且得率较高, 但是萃取液中两物质相对含量较低, 进一步分离纯化将有难度。本研究结果表明, 将超临界CO₂ 萃取法和乙醇常温浸提法有效结合, 可实现两物质的有效分离, 推进红景天有效成分的产业化进程。     

红景天苷通过调节p38和JNK信号通路抑制BV-2细胞分泌炎性因子

红景天苷是传统中药红景天的主要成分,已有研究显示红景天苷具有一定的抗炎性作用。本研究旨在探讨红景天苷对BV-2细胞炎性反应的调节作用及可能机制。实验分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组、红景天苷组、红景天苷预处理+LPS组,用100μg/L LPS和/或10 mg/L红景天苷处理BV-2细胞,收集细胞培养基上清(条件培养基),采用real-time PCR方法检测细胞IL-6和TNF-αm RNA表达水平,ELSIA方法检测培养基IL-6和TNF-α含量,条件培养基处理PC12细胞24 h后,Hoechst 33258染色检测细胞核形态学改变,cell counting kit 8(CCK-8)试剂盒检测细胞活力,免疫印迹方法检测BV-2细胞p38和JNK的磷酸化水平。结果表明100μg/L LPS处理可显著提高BV-2细胞内IL-6和TNF-α的表达水平(P0.05)。红景天苷可显著下调LPS诱导的BV-2细胞IL-6和TNF-α表达量(P0.05),下调p38和JNK的磷酸化水平(P0.05)。SB202190和SP600125可降低LPS引起的IL-6和TNF-α表达,与红景天苷共处理后可拮抗LPS的诱导效应。与LPS组相比,红景天苷预处理+LPS组的条件培养基处理后,PC12细胞的细胞活力显著升高(P0.05),同时细胞核固缩和聚集情况减少(P0.05)。以上结果提示,红景天苷可在一定程度上抑制小胶质细胞活动,通过调节p38和JNK信号通路减少炎性因子释放,从而降低PC12细胞的损伤。     

RP-HPLC法测定酸枣仁汤中甘草苷的含量

目的：建立测定酸枣仁汤中甘草苷含量的反相高效液相色谱分析方法。方法：色谱柱：WatersC18（250nm×4．6mm,5wm）;流动相：乙腈一0．1％磷酸水溶液,梯度洗脱;流速：1．0ml／min,检测波长：276nm。结果：芒果苷在0．093μg·0．744μg范围内与峰面积线性关系良好（r==0．9999）,平均加样回收率为98．04％,RSD为0．41％。结论：本方法简便、准确、可靠、重复性好,可作为酸枣仁汤中甘草苷的含量测定方法。     

红景天苷对运动后自由基和能量代谢改变的影响

目的:探讨红景天苷在运动过程中对自由基和能量代谢相关指标的作用,从抗氧化系统、能量代谢系统等方面研究红景天苷抗运动性疲劳的机制。方法:本研究采用小鼠运动模型,40只雄性小鼠随机取分为4组(n=10):红景天苷运动组,红景天苷安静组,运动对照组,安静对照组。红景天苷运动组和安静组两组以150 mg/(kg.d)的红景天苷灌胃给药,运动和安静对照组两组以同样体积蒸馏水灌胃,连续给药2周;末次灌胃30 min后,运动组进行无负重游泳120 min,然后测定与运动性疲劳相关的生化指标。结果:研究结果表明,红景天苷能够提高运动小鼠肝脏内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶活性,降低丙二醛(MDA)含量;红景天苷具有稳定运动小鼠血糖,增加肝、肌糖原储备,防止长时间运动后血糖和肝、肌糖原水平降低的作用;红景天苷可提高运动小鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及游离脂肪酸(FFA)的水平,有影响不同状态下的脂肪代谢,促进脂肪利用的作用。结论:红景天苷对运动过程中自由基和能量代谢改变的影响是其抗运动性疲劳的机制之一。     

红景天苷抑制高糖损伤神经元活性caspase 3和促进BDNF表达

目的探讨红景天苷对高糖所致原代培养神经元损伤是否具有保护作用及其机制。方法原代培养大鼠皮质神经元,分为对照组,50 m M高糖处理组,50μM红景天苷+50 m M高糖处理组,以及100μM红景天苷+50 m M高糖处理组。用免疫印迹检测cleaved caspase-3和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,用ELISA方法检测培养基中BDNF的含量。结果原代培养的皮质神经元纯度为95%以上。免疫印迹结果表明,与对照组比,高糖可诱导cleaved caspase 3的表达,表明高糖可以诱导神经元凋亡。与单纯高糖处理组相比,红景天苷预处理可显著降低cleaved caspase 3的表达。同时,高糖降低培养基中BDNF含量,而红景天苷可以抑制此作用。结论红景天苷通过调节BDNF的表达和分泌,降低cleaved caspase 3的表达,进而减轻高糖所致的神经元损伤。