丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸生殖细胞增殖及相关因素的作用

目的 通过观察睾丸增殖细胞核抗原(PCNA)和原癌基因c-fos表达的变化,探讨丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸生殖细胞增殖及相关因素的影响.方法 40只雄性SD大鼠随机分成4组(每组n=10),正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组.链脲佐茵素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型;待模型成功建立后,丝胶治疗组和阳性对照组大鼠分别给予丝胶(2.4 g·kg-1·d-1)和二甲双胍(55.33 mg·kg-1·d-1)灌胃35 d.采用ELISA方法检测大鼠血清睾酮水平;采用RT-PCR法和S-P免疫组化法分别检测睾丸PCNA和c-fos的表达.结果 糖尿病模型大鼠血清睾酮水平、睾丸PCNA和c-fos的表达均明显低于正常对照组大鼠(P<0.01).丝胶治疗组和阳性对照组大鼠血清睾酮水平、睾丸PCNA和c-fos的表达明显高于模型大鼠(P<0.01.P<0.05),且两组间比较无明显差别(P>0.05).结论 丝胶可通过上调睾丸PCNA和c-fos的表达,改善糖尿病大鼠的生精功能和雄性激素分泌水平,发挥对糖尿病生殖功能损伤的保护作用.     

2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体表达的变化和丝胶的作用

目的：：研究2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体(insulin receptor,IR)表达的变化及丝胶的保护作用。方法：36只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组3组,每组12只大鼠。采用链脲佐菌素连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型,待模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35d。采用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的空腹血糖,Western Blotting法和RT-PCR检测大鼠肝脏IR蛋白和mRNA的表达。结果：与糖尿病模型组大鼠比较,丝胶治疗组大鼠肝脏IR蛋白和mRNA的表达明显升高(P＜0.01)。结论：丝胶可能通过上调2型糖尿病大鼠肝脏IR的表达在降血糖中发挥作用。     

糖尿病大鼠肾脏PEDF表达的变化及丝胶的保护作用

目的：观察丝胶对糖尿病大鼠肾脏色素上皮衍生因子（pigment epthelium-derived factor,PEDF）表达的作用。方法：48只雄性SD大鼠随机分为4组（每组12只）：正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和丝胶预防组。链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,以血糖≥16.7mmol/L作为成模标准。分别检测各组大鼠的血糖,免疫组化染色和Western Blotting法检测肾脏PEDF蛋白的表达。结果：与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠的血糖明显升高,肾脏PEDF蛋白的表达明显降低（P〈0.01）;丝胶治疗组、丝胶预防组大鼠的血糖明显低于模型组,肾脏PEDF蛋白的表达明显高于模型组（P〈0.01）。结论：丝胶可通过上调肾脏PEDF蛋白的表达发挥对糖尿病大鼠肾脏的保护和预防保护作用。     

丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸生精细胞PCNA表达的影响

目的:研究丝胶对2型糖尿病大鼠血清睾酮水平和睾丸生精细胞PCNA表达的影响.方法:40只SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组10只.糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组大鼠均采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.待模型成功建立后,模型组大鼠不再作任何处理;丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4g/kg/d),阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃,时间均为35天.采用ELISA方法检测各组大鼠血清睾酮水平、SP免疫组化法检测睾丸生精细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:糖尿病模型大鼠血清睾酮水平、睾丸生精细胞PCNA的表达均明显低于正常对照大鼠(P<0.01).丝胶可明显提高糖尿病大鼠血清睾酮水平和睾丸生精细胞PCNA的表达(丝胶治疗组与模型组比较:P<0.01);且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差别(P>0.05).结论:丝胶可显著提高2型糖尿病大鼠睾酮的合成及睾丸生精细胞PCNA的表达,明显改善2型糖尿病大鼠的生精功能,且作用与二甲双胍相当.     

丝胶对糖尿病大鼠肾脏细胞外基质代谢相关因子PDGF和CTGF表达的调节作用

目的 探讨丝胶对2型糖尿病大鼠肾脏细胞外基质(ECM)代谢相关因子血小板衍生生长因子(PDGF)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的调节作用.方法 健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组(n=12).链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,丝胶治疗组大鼠按照2.4 g·kg-1·d-1的剂量灌胃给予丝胶、阳性对照组大鼠按照55.33 mg·kg·d-1的剂量灌胃给予二甲双胍.ELISA法检测各组大鼠血清Ⅰ型胶原(Ⅰ-C)和纤维连接蛋白(FN)的含量.Western blot和RT-PCR法检测各组大鼠肾脏PDGF和CTGF蛋白及其mRNA的表达.结果 丝胶治疗组较糖尿病模型组,24 h尿蛋白含量、血清Ⅰ-C和FN的含量明显降低,肾脏PDGF和CTGF的表达显著降低(P＜ 0.01,P＜ 0.05).结论 丝胶可通过下调糖尿病大鼠肾脏PDGF和CTGF的表达,恢复ECM合成和降解的平衡,延缓肾小球硬化和肾间质纤维化的发生发展,发挥对糖尿病肾脏损伤的保护作用.     

丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏组织中TNF-α和HNF-4α表达的影响

目的: 通过观察丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和肝细胞核因子4α(HNF-4α)表达的影响,探讨丝胶治疗糖尿病的可能机制。方法: 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只。链脲佐菌素(STZ)连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型。待模型成功建立后,模型组大鼠不做任何处理,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4 g·kg^-1·d^-1)灌胃35 d。采用免疫组织化学SP法染色、蛋白免疫印迹法和RT-PCR法检测大鼠肝脏组织中TNF-α和HNF-4α的表达。结果: TNF-α蛋白免疫产物为棕黄色和棕褐色颗粒状,位于肝细胞的细胞浆;HNF-4α免疫阳性产物为棕褐色,位于肝细胞的细胞核。与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠肝脏组织中TNF-α、HNF-4α蛋白和mRNA的表达水平明显升高(P<0.01);与糖尿病模型组比较,丝胶治疗组大鼠肝脏TNF-α、HNF-4α蛋白和mRNA的表达水平明显降低(P<0.01)。结论: 丝胶可能通过下调肝脏组织中TNF-α和HNF-4α的表达保护糖尿病时肝脏损伤。     

丝胶对糖尿病大鼠肾脏ERK信号通路的影响

 目的探讨彩色蚕茧提取物—丝胶对2型糖尿病大鼠肾脏细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的作用。方法雄性SD大鼠48只,随机均分为4组：正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组。糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠均建立链脲佐菌素（2%,25mg·kg^-1,3d）致2型糖尿病大鼠模型;模型成功建立后,丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠分别给予丝胶（2.4g·kg^-1·d^-1）和二甲双胍（55.33mg·kg^-1·d^-1）灌胃治疗35d。分别采用Westernblot和RT-PCR法检测ERK信号通路相关因子ERK、丝裂原活化蛋白激酶的激酶（MEK老师,“丝裂原活化蛋白激酶的激酶”的英文是mitogen-activatedproteinkinasekinase,缩写是MAPKK,也就是MEK。请见修改说明1,及发过去的文献）和原癌基因c-fos蛋白和mRNA的表达。结果糖尿病模型组大鼠肾脏ERK、MEK、c-fos的表达较正常对照组大鼠增高,差异具有统计学意义（P<0.01）;丝胶治疗组、二甲双胍组ERK、MEK、c-fos的表达较糖尿病模型组大鼠降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论肾脏ERK信号通路的激活可能参与了糖尿病肾脏损害的发生发展。丝胶可通过下调ERK及其上游MEK1/2、下游c-fos的表达,抑制糖尿病大鼠肾脏ERK信号通路的激活,发挥对糖尿病大鼠肾脏损伤的保护作用。     

丝胶对2型糖尿病大鼠视网膜NF-κB表达的影响

目的:探讨丝胶对2型糖尿病大鼠视网膜核因子-κ B(NF-κ B)表达的影响.方法:48只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和导升明组,每组12只.除正常对照组外,其余3组大鼠均采用高糖高脂饮食诱导联合小剂量链脲佐菌素(25mg/kg/d,3d)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.待模型建成后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d,35d)灌胃治疗,导升明组大鼠给予导升明(200mg/kg/d,35d)灌胃.Westem blot法检测视网膜NF-κB蛋白的表达,RT-PCR法检测视网膜NF-κB mRNA的表达.结果:与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠NF-κB蛋白和mRNA的表达明显升高(P＜0.05);与糖尿病模型组比较,丝胶治疗组和导升明组大鼠NF-κB蛋白和mRNA的表达显著降低(P＞0.05).结论:丝胶可通过下调NF-κB表达,发挥对糖尿病视网膜损伤的保护作用.     

丝胶对2型糖尿病大鼠肝糖原含量的影响

目的：观察丝胶对2型糖尿病大鼠血糖及肝糖原含量的影响。方法：60只雄性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组、阳性对照组、丝胶预防组,每组12只大鼠。链脲佐菌素(STZ)连续腹腔注射制作2型糖尿病大鼠模型。待模型成功建立后,模型组大鼠不做任何处理;丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃,阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃;丝胶预防组大鼠于注射STZ前给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃。采用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的空腹血糖,过碘酸-Schiff染色法观察各组大鼠肝糖原的含量。结果：与糖尿病模型组比较,丝胶治疗组、阳性对照组、丝胶预防组大鼠的空腹血糖显著降低(P＜0.01),肝糖原的含量明显增高(P＜0.01);且丝胶治疗组、丝胶预防组与阳性对照组比较无明显差别(P＞0.05)。结论：丝胶可通过增加2型糖尿病大鼠肝糖原的合成降低空腹血糖,发挥对肝糖原储备的保护作用。     

糖尿病大鼠HDL-C和LDL-C的变化及丝胶的调节作用

目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)的调节作用。方法：48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只大鼠。25mg/kg链脲佐菌素腹腔注射3d(1次/d)建立2型糖尿病大鼠模型;模型成功建立后,糖尿病模型组大鼠不再做任何处理,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35d,阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.3mg/kg/d)灌胃35d。分别检测各组大鼠的血糖以及血清HLD-C和LDL-C的水平。结果：与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠的血糖、LDL-C明显升高,HDL-C明显降低(P＜0.01,P＜0.05);与模型组大鼠比较,丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的血糖、LDL-C明显降低,HDL-C明显升高(P＜0.01)。结论：丝胶可通过提高HDL-C水平、降低LDL-C水平改善糖尿病时血脂代谢紊乱。     

糖尿病大鼠海马NO含量的变化及丝胶的保护作用

目的:探讨丝胶对糖尿病大鼠海马一氧化氮(NO)含量的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只大鼠。链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃,阳性对照组大鼠给予二甲双胍灌胃。分别检测各组大鼠的血糖和海马NO的含量。结果:与糖尿病模型组大鼠相比,丝胶治疗组和阳性对照组大鼠的血糖和海马NO含量明显降低(P<0.05)。结论:丝胶可通过降低海马NO的含量减轻过量NO对神经元的毒性,改善糖尿病时的认知功能障碍。     

2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α表达的变化

目的：：探讨2型糖尿病大鼠肝脏肝细胞核因子-4α(HNF-4α)表达的变化和意义。方法：24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,每组12只大鼠。链脲佐菌素连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型。采用SP免疫组织化学染色、Western Blotting法、RT-PCR法检测大鼠肝脏HNF-4α的表达情况。结果：与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠肝脏HNF-4α蛋白和mRNA的表达均明显升高(P＜0.01)。结论：肝脏HNF-4α表达的升高可能参与了2型糖尿病时肝脏损伤的发生发展。     

2型糖尿病大鼠大脑皮质HO-1表达的变化

目的:探讨2型糖尿病大鼠大脑皮质血红素加氧酶1(HO-1)表达的变化.方法:20只SD大鼠随机分为正常埘照组和糖尿病模型组,每组10只.正常对照组大鼠不做任何处理;糖尿病模型组大鼠采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,一周后以血糖≥16.7mmol/L作为成模标准.HE染色观察大脑皮质神经细胞的变化,分别采...     

丝胶对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛形态结构的影响

目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和胰岛形态结构的影响。方法：雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和二甲双胍组,每组12只。腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型;待成模后,二甲双胍组、丝胶治疗组大鼠分别给予二甲双胍（55．33mg／kg／d）和丝胶（2．4g／kg／d）灌胃35d。检测各组大鼠的血糖和血脂,HE染色观察胰岛的形态结构。结果：与模型组大鼠相比,丝胶治疗组、二甲双胍组大鼠的血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、游离脂肪酸明显降低,高密度脂蛋白明显升高,差异具有统计学意义（P〈0．01）。模型组大鼠胰岛分布稀疏且不均匀,轮廓欠圆润,边缘不规则,胰岛细胞数量减少;丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠胰岛的形态结构明显改善。结论：丝胶可明显改善糖尿病大鼠的糖脂代谢和胰岛的形态结构。     

解毒通络保肾胶囊对2型糖尿病大鼠血清脂联素、肾组织脂联素及MCP-1蛋白表达水平的影响

［摘 要］ 目的：探讨解毒通络保肾胶囊（保肾胶囊）对2型糖尿病大鼠肾组织脂联素及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)蛋白表达的干预作用,阐明其肾脏保护作用及机制。方法：将65只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(对照组,10只,喂饲常规大鼠饲料)、高脂膳食组(高脂组,10只)和糖尿病组（45只）,后2组大鼠实验期间喂饲高脂饲料。4周后糖尿病组大鼠腹腔注射低剂量链脲佐菌素复制2型糖尿病模型,造模后再随机分为糖尿病模型组（模型组）、保肾胶囊组（1.4 g/kg）和罗格列酮联合贝那普利组（阳性对照组）。连续进行相应处理12周后,测定大鼠血糖(BG)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿微量清蛋白排泄量(UAE)及血清脂联素水平,免疫组织化学法检测肾组织脂联素和MCP-1蛋白表达水平。结果：与对照组比较,保肾胶囊组糖尿病大鼠BG、Scr、BUN水平及UAE明显降低（P<0.01）。与对照组比较,模型组大鼠血清脂联素水平、肾组织脂联素蛋白表达水平明显降低(P<0.01),肾组织MCP-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。保肾胶囊组大鼠血清脂联素水平和肾脂联素蛋白表达水平较模型组分别升高1.5和3.0倍（P<0.01）,而肾组织MCP-1蛋白表达水平降低55%（P<0.01）。相关分析,血清脂联素水平与UAE（r=－0.466,P<0.01）、Scr水平（r=－0.563,P<0.01）、BUN水平（r=－0.512,P<0.01）及肾组织MCP-1蛋白表达水平（r=－0.526,P<0.01）　均呈负相关关系。结论：保肾胶囊处理可升高2型糖尿病大鼠血清脂联素水平,上调肾组织脂联素水平和下调肾组织MCP-1蛋白表达水平,这可能与保肾胶囊的肾脏保护作用有关。     

青刺果黄酮对糖尿病大鼠肾组织c-fos基因表达上调的抑制作用

目的探讨青刺果黄酮对糖尿病大鼠肾组织c-fos及c-jun基因表达的影响。方法大鼠随机分为正常对照组（A组）、糖尿病组（B组）及青刺果黄酮治疗组（C组）,采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素65mg·kg^-1建立糖尿病大鼠模型。治疗组给予青刺果黄酮300mg·kg^-1·d^-1腹腔注射。分别于第2周和4周末各组随机抽取4只大鼠处死,取肾脏称重;取第4周5只大鼠部分右肾皮质,采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测青刺果黄酮对糖尿病大鼠肾组织c-foszaBNA、c-junmRNA及其蛋白表达．的影响。结果糖尿病大鼠肾脏指数显著增加,治疗组肾脏指数显著降低;糖尿病大鼠肾组织c-fosmRNA、c-junmRNA及其蛋白表达明显上调,青刺果黄酮可显著抑制上述指标的表达。结论青刺果黄酮通过抑制糖尿病大鼠肾组织c-fos及c-jun基因表达上调而减轻糖尿病大鼠肾脏损伤。