烟草赤星病菌对嘧菌酯及其添加水杨肟酸后的敏感性检测

为了解烟草赤星病菌对嘧菌酯的敏感性现状,采用菌丝生长速率法,检测了采自山东和湖北烟区的33株烟草赤星病菌对嘧菌酯的敏感性,分析了水杨肟酸协同下烟草赤星病菌对嘧菌酯敏感性的影响。结果表明:嘧菌酯对所有供试烟草赤星病菌的EC₅₀介于60.5230~111.7918 mg·L-1,平均为83.9068±2.4339 mg·L-1;嘧菌酯对采自山东烟区和湖北烟区的赤星病菌的平均EC₅₀分别为82.7986±2.5515 mg·L-1和88.0230±6.6785 mg·L-1。在水杨肟酸协同作用下,嘧菌酯对所有供试烟草赤星病菌毒力的EC₅₀介于19.9090~35.6684 mg·L-1,平均为29.2007±0.7801 mg·L-1,比嘧菌酯单独作用毒力提高了0.70~2.98倍,平均提高了1.87倍;添加水杨肟酸的嘧菌酯对采自山东和湖北烟区的赤星病菌毒力的平均EC₅₀分别为28.5494±0.8914 mg·L-1和31.6197±1.3290 mg·L-1,与嘧菌酯单独作用相比,毒力分别提高了1.90和1.78倍。研究表明,嘧菌酯对烟草赤星病菌的菌丝生长具有一定的抑制作用,添加水杨肟酸能够显著提高嘧菌酯对烟草赤星病菌的毒力,但不同菌株之间的提高倍数有差异。      

烟草赤星菌毒素诱导烟草微细胞死亡及对TMV的抗性

烟草赤星菌毒素是烟草赤星病菌产生的重要毒性因子,在病原菌致病过程中具有重要作用。该毒素诱导烟草微过敏反应及对TMV抗性的研究结果表明,用不同浓度的毒素粗提液处理烟草,可诱导烟草对TMV的抗性,抗性诱导效果为83.3%-94.4%;对毒素诱导抗性的时间效应测定发现,诱导后1-5d接种TMV,可诱导烟草产生显著的抗性;对毒素处理的烟草组织病理学观察发现,毒素喷雾处理烟草,可诱导烟草微细胞死亡。     

烟草灰霉病菌嘧菌酯抗药性突变菌株的诱导及其生物学习性分析

  目的  为了解烟草灰霉病菌对嘧菌酯潜在的抗药性风险。  方法  通过紫外诱变诱导烟草灰霉病菌对嘧菌酯的抗药性突变菌株,分析其对嘧菌酯的敏感性和生物学习性。  结果  嘧菌酯对烟草灰霉病菌分生孢子萌发具有较高的抑制作用,其抑制孢子萌发的EC₅₀为2.28 mg/L。紫外诱变获得5株不同抗性水平的嘧菌酯抗药性突变菌株,对嘧菌酯抗性是诱变前菌株的1.69~10.41倍。继代培养11代后,各突变菌株对嘧菌酯的敏感性稳定;突变菌株菌丝生长速度高于或低于初始菌株;所有突变菌株的分生孢子产量和萌发率均低于初始菌株;突变菌株菌核产量同初始菌株一致或有所降低;所有突变菌株具有致病力,部分致病力强于初始菌株。  结论  嘧菌酯对烟草灰霉病菌分生孢子萌发具有较强的抑制作用;若使用嘧菌酯防治烟草灰霉病,存在烟草灰霉病菌对嘧菌酯产生抗药性的风险。      

安徽烟草赤星病菌生物学特性及致病力分化研究

研究了安徽地区烟草赤星病菌的生物学特性和致病力分化,结果表明,该菌在10～35℃条件下均能生长,最适生长温度为25～30℃,温度低于7℃或高于40℃菌丝不能生长;分生孢子致死温度是53℃5 min和50℃10 min,幼菌丝致死温度是52℃5min和49℃10 min.病菌在pH 4.0～11.0的范围内均能牛长,呈现双峰曲线,即在pH 6.0～pH 8.0生长较快,尤以pH 6.0和pH 8.0的条件下菌丝生长更快;分生孢子在pH 4.0～11.0之间均可以萌发;在pH 6.0时,产孢量最高.在光照和黑暗交替的条件下,有利于菌丝的生长和孢子产生.致病力测定结果表明,不同菌株之间致病力存在显著差异,根据接种K326烟草后所致病情指数的大小可供试菌株致病力划分为致病力强、中等、弱和不致病4种类型,说明安徽烟草赤星病菌存在明显的致病力分化;在不同烟区间和同一烟区内均存在不同致病力类型的菌株,致病力类型的分布与菌株地区来源有一定的相关.     

线粒体旁路氧化途径抑制剂水杨肟酸(SHAM)协同下烟草赤星病菌对嘧菌酯的敏感性

测定了线粒体旁路氧化途径抑制剂水杨肟酸(SHAM)协同下烟草赤星病菌对嘧菌酯的敏感性。结果表明:嘧菌酯抑制病原菌菌丝生长和孢子萌发的EC₅₀值分别为25.8300 mg/L和0.0500 mg/L,在100 mg/L SHAM协同下,EC₅₀值分别降低为15.5200和0.0038 mg/L;SHAM对烟草赤星病菌菌丝的生长和分生孢子的萌发没有影响。研究说明SHAM增强了嘧菌酯对烟草赤星病菌的毒力,线粒体电子传递的旁路氧化途径存在于烟草赤星病菌中,且在孢子萌发中的增效强于菌丝生长阶段。      

烟草赤星病菌的Biolog代谢表型分析

为了解我国烟草赤星病的2种主要致病菌链格孢菌Alternaria alternata和长柄链格孢菌Alternaria longipes的碳氮源代谢表型。采用Biolog表型芯片技术分析了2株链格孢菌（中等致病力的CQ1和GZ11）及2株长柄链格孢菌（强致病力的HuN2和弱致病力的YN4）对PM1、PM2微孔板中190种碳源物质和PM3微孔板中95种氮源物质的代谢情况。结果发现,4株赤星病菌均能代谢PM1-PM3微孔板中24.21%的碳源和86.31%的氮源。不同致病力菌株间的碳氮源代谢能力表现出一定差异,长柄链格孢菌的强致病力菌株HuN2比弱致病力菌株YN4对D-甘露糖、D-木糖、D-甘露醇、b-环糊精、L-缬氨酸、D-天门冬酰胺、腺苷和i-赤藓糖醇等物质的代谢更显著;链格孢菌的中等致病力菌株CQ1比GZ11对L-鼠李糖、海带多糖和二羟基丙酮的代谢更好;弱致病力菌株YN4比强致病力菌株HuN2和中等致病力菌株CQ1、GZ11对水杨苷的代谢更明显。表明烟草赤星病菌的不同种群菌株对碳氮源的代谢情况总体趋势一致,但不同致病力菌株间存在一定差异。     

烟草细胞及原生质体对烟草赤星病菌毒素(AT毒素)的抗性表现

从烟草赤星病病原菌的过滤培养液中提取的天然 AT 毒素,用来处理对该病菌具有不同抗性的烟草栽培品种的液体培养细胞,在浓度为3%(V/V)的 AT 毒素处理下,不管其品种对这一病原菌的抗性如何,所有烟草品种的细胞生长都受到抑制。然而,用细胞染色法判断抗病品种的细胞死亡率要比感病品种低得多。对经过4天培养的叶肉原生质体用 AT毒素处理24小时,也观察到这种差异,细胞分裂及进一步形成细胞团块仅发生在抗病品种的原生质体中,而感病品种的原生质体则不能。因此,用 AT 毒素处理烟草培养细胞或原生质体也许是一种鉴定烟草品系对赤星病抗性的有效方法。     

氨基酸对烟草赤星病菌毒素毒性的影响

采用摩擦接种处理法、浇根处理法和发芽种子根处理法测定了烟草赤星病菌毒素的毒性,确定了烟草发芽种子根处理法作为烟草赤星病菌毒素毒性的测定方法.用8种氨基酸分别以5种不同浓度与烟草赤星病菌GL-6毒素混合接种,测定结果表明L-精氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酸、L-丙氨酸和L-天门冬氨酸所有供试浓度均增强病菌毒素毒性;而L-脯氨酸、L-色氨酸和L-缬氨酸对病菌毒素毒性有抑制作用,其有效浓度分别为0.02～0.2、0.02～0.2和0.02～2mg/mL.     

烟草野火病菌生物学特性研究

研究了烟草野火病茵的部分生物学特性，涉及致病性、菌株的保存与复壮、生长曲线及O.D.600值与CFU／mL之间关系、病菌毒素的产生等诸方面。研究发现用甘油溶液保存病菌4年后仍具有较强的致病力，并且通过复壮可使致病力进一步增强：不同菌株的产毒能力存在明显的差异，以致病力强的菌株产毒能力为更强；改用对病菌更敏感的鼠伤寒沙门氏菌为指针成功地测定了烟毒素的活性。     

烟草菌核病菌生物学特性的研究

研究结果表明，烟草菌核病菌的菌丝生长温度范围５－３１℃，适宜温度１５－２３℃。菌核萌发产生菌丝的温度范围１０－３１℃，适宜温度１５－２９℃。病菌生长相对湿度范围７５．５－１００％，适宜湿度８５－１００％。菌丝的致死温度为４４℃１０分钟；菌核致死温度为５０℃１０分钟。病菌生长ＰＨ值范围２－８。适宜ＰＨ值５－６．５。有无光照对菌丝的生长无明显影响，但光照对菌核的形成有利。病菌适宜的培养基为ＰＤＡ和ＰＳ     

烟草赤星病菌生理及农药毒力测定研究

本试验对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)进行了生理和农药毒力测定。结果表明:该菌最适生长温度为26～28℃;最低生长温度6℃,最高生长温度37℃。分生孢子致死温度分别为50℃5分钟和49℃10分钟,幼菌丝致死温度分别为50℃10分和52℃5分钟。菌丝生长最适pH值为6～8,孢子萌发最适pH值6～7,生长和萌发最低pH值均为3。64％杀毒矾和58％瑞毒霉锰锌对该菌抑制效果最好。     

烟草白绢病菌生物学特性的研究

经研究观察烟草白绢病菌(Sclerotium rolfsii Sace)菌丝生长温度范围为 10—40℃,适宜温度30—33℃。菌核萌发温度13—40℃,适宜温度25—35℃。病菌生长相对温度范围为62.5—100％,适宜温度93—98％。菌丝的致死温度为48℃10分钟,菌核为50℃10分钟。病菌生长pH值范围2—9,适宜pH值3—7,最适为pH5。菌丝在黑暗条件下生长较快,光照对菌核的形成有利。病菌对紫外线菌丝比菌核敏感。病菌生长适宜的培养基为PDA和PSA,最需要的矿物质元素是碳,其次是氮、磷、钾和铁;对镁不需要,最好的碳源是蔗糖、淀粉和葡萄糖;最好的氮源是酵母膏,蛋白胨次之,有机氮明显好于无机氮,对硝态氮利用好于氨态氮。     

烟草菌核病菌生物学特性的研究

研究结果表明，烟草菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）的菌丝生长温度范围５—３１℃，适宜温度１５—２３℃，最适２３℃。菌核萌发产生菌丝的温度范围１０—３１℃，适宜温度１５—２９℃。病菌生长相对湿度范围７５．５—１００％，适宜湿度８５—１００％。菌丝的致死温度为４４℃１０分钟；菌核致死温度为５０℃１０分钟。病菌生长ｐＨ值范围２—８，适宜ｐＨ值５—６．５。有无光照对菌丝的生长无明显影响，但光照对菌核的形成有利。病菌适宜的培养基为ＰＤＡ和ＰＳＡ，病菌最需要的矿质元素是磷，其次是碳、氮；最好的碳源是蔗糖、淀粉和葡萄糖；最好的氮源是酵母膏和蛋白胨。对有机氮的利用明显好于无机氮，氨态氮好于硝态氮。     

烟草白粉病菌的生物学特性研究

采用水琼脂玻片法测定不同的环境和营养因子对烟草白粉病菌Golovinomyces orontii(Castagne)V.P.Heluta分生孢子萌发的影响。研究表明:分生孢子萌发的最适温度为25℃,致死温度为42℃10min;适宜相对湿度范围为93%-100%;对光照要求不严格;在p H5-p H8范围分生孢子萌发率无显著差异;在碳氮源利用方面,该菌对供试碳源均能利用,其中果糖的效果最好;但供试氮源对分生孢子均有不同程度的抑制作用。     

烟草白绢病菌生物学特性的研究

经研究观察烟草白绢病菌(Sclerotium rolfsii Sace)菌丝生长温度范围为10-40℃,适宜温度30-33℃。菌核萌发温度13-40℃,适宜温度25-35℃。病菌生长相对温度范围为62.5-100%,适宜温度93-98%。菌丝的致死温度为48℃ 10分钟,菌核为50℃ 10分钟。病菌生长pH值范围2-9,适宜pH值3-7,最适为pH5。菌丝在黑暗条件下生长较快,光照对菌核的形成有利。病菌对紫外线菌丝比菌核敏感。病菌生长适宜的培养基为PDA和PSA,最需要的矿物质元素是碳,其次是氮、磷、钾和铁;对镁不需要,最好的碳源是蔗糖、淀粉和葡萄糖;最好的氮源是酵母膏,蛋白胨次之,有机氮明显好于无机氮,对硝态氮利用好于氨态氮。      

农抗TS99对烟草赤星病菌作用的研究

农用抗生素TS99对烟草赤星病菌具有明显的抗生作用.用稀释10倍的TS99粗提液处理后,菌体细胞膜被破坏,内含物外渗,原生质凝集,液泡消失,菌丝体产生瘤状畸形或断裂,其生长能力完全被抑制;20倍稀释液处理8d后,对菌丝生长的抑制率达85%,其产孢能力完全丧失.同时,TS99对孢子萌发也有持久的抑制作用,4倍稀释液能完全杀死孢子.     

烟草低头黑病菌生物学特性的研究

对烟草低头黑病菌生物学特性研究表明:病原菌生长发育温度范围为3～38℃,适宜温度为25～30℃,最适温度是28℃;病原菌生长pH值范围为1.8～13,最适pH值为6.7;在PDA培养基上生长最好,产孢最适宜的培养基是麦芽糖培养基。分生孢子萌发的适宜温度是25～28℃,致死温度在50～55℃之间10分钟,在相对湿度35％～100％和水滴中均能萌发,在相对湿度100％和水滴中萌发率最高。病原菌能有效地利用各种碳源,以麦芽糖最佳,淀粉、葡萄糖次之;氮源利用以硝酸钾最好,丙氨酸、尿素次之,硫酸铵最差。     

烟草赤星病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

为实现对烟草叶片中烟草赤星病菌的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR(q-PCR)快速检测,根据链格孢属ITS基因序列差异位点,设计了1对特异性引物.通过构建含有目的片段的重组质粒,建立了标准曲线,构建了q-PCR快速定量检测方法并对感病叶片进行检测,灵敏度达到1.0×10-3 ng/μL.实验样品验证表明,该方法可...     

非病原细菌对烟草赤星病菌的生物抑制作用研究

从烟草根际土壤和烟草、黄瓜、番茄、桑树的茎、叶部位分离了５０株非病原芽孢杆菌和假单孢杆菌,在培养条件下对烟草赤星病菌进行了生物拮抗性测定。结果表明,非病原细菌对烟草赤星病菌有效强的拮抗作用。在不同来源的非病原细菌中,以来自烟草根际的非病原细菌对烟草赤星病菌的拮抗作用最强。在拮抗菌对目标菌烟草赤星病菌生长发育影响中发展,受拮抗菌作用,目标菌菌丝形态产生变异,生长发育受到影响。选取拮抗性较强的拮抗菌,在温室条件下处理（喷洒）烟苗,结果对烟草赤星病具有明显的抑制作用。     

云南省烟草赤星病菌致病力分化及生物防治研究

从省内烟草种植区分离到烟草赤星病菌39株,利用离体叶片悬滴法,在感病品种RG17上进行致病力分化测定。结果表明,上述病菌的致病力按照病情指数可分为4种类型：即强、中、弱、不致病。从上述代表不同致病力的菌株中选取7株菌,采用对峙法与18株木霉菌对峙培养,从中筛选出一株对赤星病菌具极强拮抗作用的菌株TV-1。TV-1与赤星病菌的孢子混和液在PDA平板上的孢子萌发试验表明,TV-1不能抑制病菌孢子的萌发但能抑制其芽管的伸长。用TV-1制成的菌剂进行离体叶片、烟草苗期、大田期防效测定。结果表明：该菌剂为10^5个／mL时,具有抑制离体叶片病斑扩展的作用;浓度达10^7个／mL时,可明显防止病斑出现;同时它还能促进烟苗生长,其中苗期施用量,TV-1菌剂：营养土=1：15,促生效果显;苗期防猝倒病与对照相比防效达86．5％;大田营养袋亩施颗粒剂31kg、62kg,叶面喷施孢子液剂10^4个／mL4次,与对照相比对赤星病的防效分别高达60．57％、70．53％。