Livin mRNA及Bel-2，p53蛋白在胰腺癌中的表达

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin在胰腺癌组织中的表达及其与Bcl-2和p53蛋白表达的关系。方法采用逆转录-多聚酶链反应（RT—PCR）法检测52例胰腺癌和12例正常胰腺组织中Livin mRNA的表达；用免疫组织化学法检测胰腺癌组织中Bcl-2和p53蛋白的表达。结果Livin mRNA在胰腺癌中的表达率为71．2％，明显高于正常胰腺组织（P〈0．01）。Livin基因表达与胰腺癌的分化程度和淋巴结转移有关（P〈0．05）。Livin基因表达与Bcl-2蛋白表达有关，而与p53蛋白无关。结论Livin基因在胰腺癌的发生发展中起重要作用；Livin与Bcl-2的异常表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用；Livin基因过表达与抑癌基因p53的失活无关。     

凋亡抑制基因Livin在食管癌中的表达及其与P53、Bcl-2的关系

目的探讨凋亡抑制基因Livin在食管癌组织中的表达及其与P53和Bcl-2表达的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）结合银染技术检测36例食管癌组织和18例癌旁正常组织中Livin mRNA的表达，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶（S—P）法检测食管癌组织中Livin、P53和Bcl-2蛋白的表达。结果RT—PCR检测结果显示：Livin mRNA在食管癌组织中的阳性表达较癌旁正常组织明显增强，两种异构体基本同时表达。免疫组织化学检测结果显示：Livin蛋白在食管癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（P〈0.01）。癌组织侵及食管外膜的Livin阳性表达率高于癌组织侵及食管肌层者（P〈0.05）；有淋巴结转移者的Livin阳性表达率高于无淋巴结转移者（P〈0.05）。Livin蛋白表达与P53蛋白表达无关（x^2=1．00，P=0．505），与Bcl-2蛋白表达有关（x^2=10．60，P=0．003）。结论Livin在食管癌组织中异常表达，有望成为食管癌诊断和基因治疗的新靶点。凋亡相关基因Bcl-2与Livin基因的异常表达可能在食管癌癌变中起协调作用。     

Survivin基因在胰腺癌组织中的表达及与bcl-2和p53蛋白表达的关系

目的探讨Survivin基因在胰腺癌中的表达及与bcl 2、p5 3蛋白表达的相互关系。方法用RT PCR法检测 4 9例胰腺癌、5例慢性胰腺炎和 12例正常胰腺组织中SurvivinmRNA的表达 ,免疫组织化学法检测胰腺癌中bcl 2、p5 3蛋白表达。结果SurvivinmRNA在胰腺癌中表达率为76 % ,在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中不表达 (P <0 0 5 )。Survivin基因表达与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性 (P >0 0 5 )。Survivin基因表达与bcl 2蛋白表达不相关 ,与p5 3蛋白表达显著相关。结论Survivin基因在胰腺癌中过度表达 ,提示该基因对胰腺癌发生和发展起重要作用 ;抑癌基因p5 3的失活与Survivin基因的表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用。     

胰腺癌组织中类肝素酶的表达及其临床意义

目的 探讨类肝素酶1(heparanasel,Hpal)在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌发生、发展的关系.方法 采用real-time PCR、Western blot法检测37例胰腺癌组织中Hpal基因和蛋白的表达情况,并分析其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.结果 real-time PCR检测结果 显示,Hpal mRNA在胰腺癌中相对表达量为23.53±4.13、在正常胰腺组织中为4.08±2.14、在癌旁组织中为16.93±3.06(P<0.01).Western blot检测结果 显示,Hpal蛋白在正常胰腺组织中的相对表达量为0.36±0.14、在胰腺癌旁组织中为1.21±0.37、在胰腺癌组织中为1.76±0.28(P<0.05).胰腺癌组织中Hpal mRNA与Hpal蛋白表达均高于癌旁组织和正常胰腺组织.胰腺癌组织中Hpal mRNA表达与胰腺癌TNM分期、浸润神经和血管以及淋巴转移有关(P<0.05),但是与组织学分化程度、肿瘤大小无关(P>0.05).结论 胰腺癌组织中Hpal蛋白呈高表达,Hpal蛋白的高表达可能与胰腺癌的发生及发展有关.     

胰腺癌中TFPI-2基因的表达及其意义

目的 探讨人胰腺癌中TFPI-2基因表达及其意义.方法 采用RT-PCR及Westernblot技术,检测TFPI-2基因在50例胰腺癌、35例转移灶、8例正常胰腺组织中的表达,同时用Boy-den小室及裸鼠皮下种植瘤模型检测胰腺癌细胞系Panc-1体内、体外侵袭及转移能力.结果 胰腺癌组织及转移灶中TFPI-2 mRNA及相应蛋白表达水平均低于正常胰腺组织(P<0.05).TFPI-2的表达水平与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,而与临床分期、尤其是有无远处转移及神经侵犯有关.Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中TFPI-2表达水平低于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);无远处转移、无神经侵犯的胰腺癌组织中TFPI-2表达水平高于有远处转移、有神经侵犯的胰腺癌组织(P<0.05).转染基因胰腺癌细胞系Pane-1-TFPI-2体外侵袭能力下降,无明显肌层浸润及肝、肺转移现象.结论 TFPI-2基因表达的降低与胰腺癌侵袭和转移有关,可能参与胰腺癌的侵袭和转移调控.     

TRAIL受体在胰腺癌中的表达

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）受体在胰腺癌中的表达及意义。方法 应用半定量RT～PCR法检测TRAIL受体（死亡受体DR4、DR5和诱骗受体DcR1、DcR2）mRNA在胰腺癌组织及正常胰腺组织中的表达。结果 死亡受体DR4和DR5在所有胰腺癌组织和正常胰腺组织中均有表达，且在胰腺癌组织中的表达明显强于在正常胰腺组织中的表达（P〈0．01）。诱骗受体DcR1和DcR2在所有正常胰腺组织中均有表达，而在胰腺癌组织中仅有18例表达DcR1，有20例表达DcR2；诱骗受体DcR1和DcR2的表达水平在胰腺癌和正常胰腺组织中差异无统计学意义（P〉0．05）。胰腺癌组织中DR5的表达与肿瘤的分化程度和临床分期有关，分化程度越低，DR5的表达量越低，Ⅲ、Ⅳ期肿瘤DR5的表达显著低于Ⅰ、Ⅱ期（P〈0．05）。DR4、DcR1及DcR2在胰腺癌组织中的表达与肿瘤的分化程度和临床分期无关（P〉0．05）。结论 ①胰腺癌组织中普遍存在TRAIL受体的表达，并存在受体类型的表达差异，TRAIL基因受体在胰腺癌凋亡的调控机理中可能发挥重要作用。②胰腺癌组织中DR5的表达与肿瘤的分化程度及恶性程度相关；死亡受体DR4及诱骗受体DcR1和DcR2不能作为判断胰腺癌分化程度及恶性程度的指标。     

人胰腺癌组织中Livin和IGF-2的表达及临床意义

目的：探讨人胰腺癌组织中凋亡抑制蛋白Livin表达情况及其与各临床病理因素的关系，以及与胰岛素样生长因子-2（Insulin-likegrowth factor－2，IGF－2）表达的相关性。方法：应用免疫组织化学SP法检测56例胰腺癌组织中Livin与IGF－2的表达。结果：胰腺癌组织中34例Livin表达阳性，阳性率为60．7％；35例IGF-2表达阳性，阳性率为62．5％；胰腺癌组织Livin、IGF－2的表达阳性率均高于非肿瘤胰腺组织（P〈0．05）。Livin和IGF－2的表达与肿瘤组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。相关性检验示Livin的表达与IGF－2之间有相关性（P〈0．01）。结论：人胰腺癌组织中Livin与IGF-2表达均上调；IGF－2与Livin相互作用共同参与人胰腺癌的发生、发展。     

核因子κB表达与胰腺癌转移及与MMP-2表达的关系

目的： 探讨核因子κB (NF-κB,p65)在胰腺癌（PC）中的表达与淋巴结转移及MMP-2表达的关系。方法：免疫印迹法检测45例PC(淋巴结转移30例，非转移15例)和9例正常胰腺组织(NP)中p65蛋白的表达；RT-PCR检测MMP-2mRNA的表达。 结果：p65，MMP-2在45例 PC组织中的阳性表达率分别为66.7%（30/45）和57.8%（26/45），在30例转移组织中的阳性表达率分别为83.3%（25/30）和73.3%(22/30)，在非转移组织中的阳性表达率分别为33.3%（5/15）和26.7%（4/15）， p65与MMP-2表达呈明显正相关（r=0.743,P<0.05）。结论：NF-κB异常表达与胰腺癌淋巴结转移有关，并与MMP-2正相关，NF-κB 可能通过对下游基因表达的调控，参与了胰腺癌的转移过程。     

核因子-κBp65及bcl-xL基因在胰腺癌组织中表达及意义

目的:探讨核因子-κB(NF-κBp65)及凋亡相关基因bcl-xL在胰腺癌组织中的表达及其意义.方法:应用免疫组织化学SABC法,检测52例胰腺癌组织中NF-κBp65及凋亡相关基因bcl-XL的基因蛋白产物,并分析其与胰腺癌临床病理的关系.结果:胰腺癌组织中NF-κ65及bcl-XL的表达率为63.5%和73.1%,显著高于胰腺正常组织(P＜0.01).NF-κΒp65的表达与肿瘤直径、ΤΝΜ分期、淋巴结转移有关,而与分化程度、病理类型无关.bcl-XL的表达与TNM分期有关,且与NF-κBp65呈显著相关.结论:NF-κBp65是一种与胰腺癌有关的癌蛋白,可能通过对bcl-xL的上调作用,进而影响胰腺癌的发生发展.     

错配修复基因启动子甲基化与胰腺癌发生的关系

目的通过对胰腺癌错配修复基因启动子甲基化及蛋白表达的检测与微卫星不稳定性的分析,探讨胰腺癌发病的分子机制。方法从35例胰腺癌病人的正常胰腺组织、癌组织中提取DNA;MSP法检测hMLH1及hMSH2基因启动子甲基化状态;SSCP法检测标本中微卫星不稳定性发生情况;免疫组化法检测错配修复基因hMLH1及hMSH2在胰腺癌中的表达情况。结果35例胰腺癌中hMLH1启动子甲基化发生率为60％（21／35）,正常组织中未发现甲基化,两者之间有统计学差异（P〈0.05）;而对于hMSH2仅有1例胰腺癌出现启动子甲基化;35例胰腺癌中微卫星高度不稳定7例,低度不稳定14例,稳定11例,正常组织中没有出现微卫星不稳定,两者之间有统计学差异（P〈0.05）;在微卫星不稳定的21例胰腺癌组织中有19例（90％）出现hMLH1启动子甲基化现象,微卫星稳定的ll例胰腺癌组织中仅有2例（6％）出现hMLH1启动子甲基化。hMLH1启动子甲基化在微卫星不稳定胰腺癌组织中常为缺失表达或低表达,在微卫星稳定胰腺癌组织中呈正常表达。hMSH2无论在MSI-H或MSI-L胰腺癌与正常胰腺组织中均无缺失表达,仅部分低表达。结论胰腺癌组织中错配修复基因的缺陷主要是hMLH1启动子甲基化,与胰腺癌微卫星不稳定性及蛋白表达缺失有关,在胰腺癌发生过程中起重要作用,是胰腺癌发生的重要机制之一。     

人RUNT相关转录因子3、细胞周期素在胰腺癌组织中mRNA水平的表达及其与临床病理因素的关系

目的 探讨人RUNT相关转录因子3(RUNX3)、细胞周期素(Cyclin D1)基因在胰腺癌组织和癌旁组织中mRNA表达水平与临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测RUNX3、Cyclin D1基因在42例胰腺癌组织及其癌旁组织中mRNA表达水平,并分析RUNX3、Cyclin D1基因mRNA表达与临床病理因素的关系.结果 (1)RUNX3基因在42例胰腺癌组织中mRNA表达量相对值为:0.2469±0.0708;相应癌旁组织中相对值为:0.7091±0.1764,两者差异有统计学意义(t=15.7036,P＜0.01).(2) RUNX3基因mRNA表达水平在分化程度、淋巴结转移、临床分期等病理因素的差异有统计学意义(P＜0.05),而与性别、年龄等因素无明显相关(P＞0.05).(3) Cyclin D1基因在42例胰腺癌组织中mRNA表达量相对值为:0.7769±0.1456;相应癌旁组织中相对值为:0.2860±0.1224,两者差异有统计学意义(t=18.9158,P＜0.01).(4) Cyclin D1基因mRNA表达水平在分化程度、淋巴结转移、临床分期等病理因素的差异有统计学意义(P＜0.05),而与性别、年龄等因素无明显相关(P＞0.05).(5)胰腺癌中RUNX3基因的mRNA表达抑制与Cyclin D1基因的过表达呈明显相关(r=-0.320,P＜0.05).结论 RUNX3基因在胰腺癌组织中mRNA 表达抑制,Cyclin D1基因在胰腺癌组织中mRNA过表达,RUNX3表达抑制或缺失及Cyclin D1过表达与胰腺癌的发生、发展有关.     

肾细胞癌中Livin的表达及其意义

目的 探讨凋亡抑制蛋白Livin的表达及与肾细胞癌发生、发展的关系.方法 应用免疫组织化学及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测38例肾细胞癌和10例正常肾组织中Livin的表达.结果 免疫组织化学及RT-PCR法检测38例肾细胞癌中Livin的阳性率分别为57.89%(22/38)、60.53%(23/38);而10例正常肾组织中Livin均无表达,肾癌组和对照组差异有统计学意义(P<0.01).Livin表达率与肾细胞癌的病理类型、临床分期、病理分级、肿瘤大小无明显相关性(P>0.05).结论 Livin在肾癌的发生、发展中起重要作用,可能成为肾细胞癌的重要诊断指标和治疗靶点.     

膀胱癌中Livin的表达及其与突变型P53的关系

目的探讨Livin在膀胱癌中的表达及意义，及其与突变型P53表达的相关性。方法采用34例膀胱癌石蜡标本及10例正常膀胱组织标本，通过免疫组化SP法检测Livin与突变型P53的表达。结果Livin在10例正常膀胱组织中不表达，而34例膀胱癌组织标本中有30例Livin阳性表达（P〈0．01）。在膀胱癌中Livin蛋白的阳性表达率和膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期、复发性无明显的相关性（P〉0．05）；突变型P53在正常膀胱组织中不表达，而34例膀胱癌组织标本中有18例突变型P53阳性表达（P〈0．01）；膀胱癌中Livin的表达率与突变型P53无相关性（P〉0．05）。结论Livin蛋白与突变型P53蛋白可作为诊断膀胱癌的特异性指标，亦为抗肿瘤基因治疗提供了新的靶点。     

P120catenin在胰腺癌中的表达及其基因多态性的研究

目的 探讨P120catenin在胰腺癌中的表达及其基因T755G位点多态性与胰腺癌发病因素的关系.方法 分别应用RT-PCR及Western Blot方法检测52例胰腺癌及癌旁正常胰腺组织中P120catenin的表达水平;应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对52例胰腺癌患者及60名正常对照的P120catenin基因T755G位点基因型分析.结果 胰腺癌组P120catenin mRNA及蛋白表达与癌旁正常胰腺组相比均减少,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.002);P120catenin mRNA异常表达更多见于低分化者(P=0.033)、淋巴转移者(P=0.004)、血管侵犯者(P=0.022)和高PTNM分期者(P=0.003).胰腺癌患者P120catenin基因T755G位点基因型频率及等位基因频率与正常组相比,差异有统计学意义(P=0.008,P=0.016).与TT基因型相比,GG基因型可增加胰腺癌发病风险(OR=2.765,95%CI为1.312～3.958).结论 P120catenin低表达与胰腺癌淋巴结转移、血管侵犯、pTNM分期密切相关,提示其可能在胰腺癌侵袭、转移过程中起重要作用.P120catenin基因T755G多态性与胰腺癌的发生风险相关,有利于胰腺癌的早期诊断与预防.     

抑癌基因P16在胰腺癌癌旁组织中的表达及意义

目的：研究抑癌基因P16在胰腺癌癌旁组织中的表达及意义。方法：采用免疫组化LSAB法检测6例正常胰腺组织,20例胰腺癌及与其相对的癌旁组织中P16蛋白的表达率。结果：癌旁组织与正常胰腺组织中P16蛋白的表达率间比较差异显著（P＜0.05);胰腺癌组织中P16蛋白的表达率与癌旁组织中的表达率正相关（P＜0.05);癌旁组织中P16蛋白表达率与胰腺癌分化程度正相关。结论：P16蛋白在胰腺癌癌旁组织中表达的异常可能与胰腺癌易复发及治疗困难有关;通过检测其表达率可以初步判定肿瘤的恶性程度。     

Grb2在胰腺癌中的表达及其意义

目的：探讨生长因子受体结合蛋白2（Grb2）在胰腺癌中的表达及其意义。 方法：分别采用real-time PCR和Western blot方法检测6种胰腺癌细胞株中Grb2基因和蛋白表达水平;采用组织芯片检测80例胰腺癌组织及癌旁胰腺组织中Grb2的表达情况,并分析Grb2表达状态与胰腺癌患者临床病理特征的关系。 结果：Grb2的mRNA与蛋白在高侵袭力、低分化细胞株PANC-1、MIA-PaCa-2、AsPC-1中呈相对高表达,而在低侵袭力、高分化细胞株BxPC-3、SW1990、capan-2中呈相对低表达;Grb2在胰腺癌组织中均有表达,而在癌旁胰腺组织中不表达或低表达,统计分析显示,Grb2的高表达与肿瘤低分化以及淋巴结或者远处转移有关（均P<0.05）。 结论：Grb2的表达与胰腺癌的分化程度和侵袭转移力密切相关,高表达者肿瘤恶性程度高,预后差。     

Nectin-4在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的 检测胰腺癌与正常胰腺组织中nectin-4蛋白的表达水平,探讨nectin-4蛋白的表达情况与胰腺癌临床病理特征之间的关系及临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测40例胰腺癌组织及12例正常胰腺组织中nectin-4蛋白的表达情况,并分析其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.结果 (1)各组中nectin-4蛋白的表达水平:胰腺癌组,累积吸光度值2.43±0.75,阳性区域面积值9.73±1.86;正常胰腺组,累积吸光度值1.06±0.68,阳性区域面积值4.76±1.70.胰腺癌组织中nectin-4蛋白的阳性表达量高于后者,差异有统计学意义(P＜0.01);(2)nectin-4蛋白与胰腺癌临床病理参数的关系:在不同性别、不同年龄间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);与组织病理分化程度(P＜0.01)、有无淋巴结转移(P＜0.05)均明显相关.结论 胰腺癌组织中nectin-4蛋白呈高表达状态,其过量表达与胰腺癌的恶性程度密切相关.     

p27kip1及相关分子skp2在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白27(p27kip1)和细胞S相激酶相关蛋白2(skp2)表达与肺癌发生的关系.方法 应用免疫组织化学SP法检测56例肺癌组织中p27kip1、skp2蛋白的表达,并与19例癌旁正常肺组织作对比.结果 p27kip1蛋白阳性表达率在肺癌中为46.42%,而癌旁肺组织中为89.47%(P<0.01).skp2蛋白阳性表达率在肺癌组织中为32.14%,而癌旁正常肺组织为10.52%(P<0.05).p27kip1与skp2蛋白在肺癌组织中的表达呈负相关(P<0.01).结论 检测p27kip1和skp2蛋白有助于肺癌的临床诊断及判断预后.     

p28GANK在胰腺导管癌中表达的临床意义

目的：探讨p28GANK在胰腺导管癌中表达及其临床意义。 方法：用免疫组化法检测p28GANK在48例胰腺导管癌及其癌旁组织中的表达,分析p28GANK胰腺导管癌中表达与患者临床病理因素及术后生存率的关系。 结果：p28GANK在胰腺导管癌组织中阳性表达率明显高于对应的癌旁组织（P<0.01）;p28GANK在胰腺导管癌组织中高表达与高TNM分期、低级别分化程度、转移有关（均P<0.05）,而与患者性别及年龄无关（均P>0.05）。p28GNAK阳性患者术后3年生存率明显低于阴性表达者（P=0.01）。 结论：p28GANK在胰腺导管癌中表达上调,其高表达与患者恶性进展程度密切相关。     

前列腺癌中p53和PTEN的表达对于临床分级及预后判断的作用分析

目的 探讨前列腺癌中p53和PTEN的表达对于临床分级及预后判断的作用.方法 采用免疫组织化学检测80例前列腺癌组织和癌旁组织以及40例正常组织中PTEN和p53蛋白表达水平,比较其表达水平和前列腺癌分级、预后等病理参数关系.结果 前列腺癌组织中p53表达率显著升高(P＜0.05),PTEN表达率显著降低(P＜0.05).不同分化程度、分期、转移和预后的癌组织中PTEN表达水平差异有统计学意义(P＜0.05).不同分化程度和预后的癌组织中p53表达水平差异有统计学意义(P＜0.05).p53和PTEN表达水平无相关性(P＞0.05).结论 凋亡相关基因p53和PTEN参与到了前列腺癌的分级并因此影响了患者的预后,但两者间无相关性.