不同方法提纯鸡减蛋综合征病毒的比较

通过相关系数的计算与显著性检验,结合病毒蛋白浓度的大小,同时进行电镜观察,证实了由鸭胚增殖的ＥＤＳ病毒采用６０％饱和度的硫酸铵或１０％聚乙二醇（ＭＷ６０００）深沉法初提后,再经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００层析法提纯的效果优于ＤＥＡＥ５２纤维素色谱法。     

鸡产蛋下降综合症（EDS76）地方毒株的分离与鉴定

鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）地方毒株的分离与鉴定钱凤芹，胡贞延，秦长川（山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南２５０１００）（山东省费县畜牧局）山东省某鸡场罗曼商品蛋鸡在１９９３年１～２月份发生了某一种以产蛋量大幅度下降和蛋质低劣为特征的疾病。利用病鸡...     

减蛋综合征1976病毒单克隆抗体的制备及其初步鉴定

采用经层析方法提纯的减蛋综合征１９７６（ＥＤＳ‘７６）病毒免疫ＢＬＡＢ／ｃ小鼠。最后一次加强免疫后第３ｄ制备脾脏细胞，然后用５０％的聚乙二醇（ＰＥＧ，分子量４００）融合脾脏细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞。通过选择培养、特异性抗体检测、筛选和克隆詈笾票赋觯抵攴置诳固宓南赴辏停玻停常停保埃停保春停停保怠Ｎ⒘垦种剖匝椋ǎ龋桑┲っ鳎停保档タ寺】固寰哂醒种苹钚裕龋杉畚叮ǎ欤铮纾玻     

减蛋综合征病毒(EDS_(76))的分离和鉴定

鸡减蛋综合征是由腺病毒引起的鸡的主要传染病之一,自1976年国外首次发现该病以来,已在包括我国在内的许多国家流行,给养禽业造成巨大的经济损失。2005年黑龙江省绥化市一个体养鸡场的190日龄商品蛋鸡突然出现产蛋下降,从发病鸡的输卵管中分离到一株具有血凝性的病毒。经过HI试验、AGP试验、理化特性和PCR序列扩增及测序,证明分离到的病毒是一株EDS_(76)V。     

减蛋综合征AQ毒株的分离与鉴定

通过鸭胚接种，从发生产蛋下降、产畸形蛋的鸡群中分离到一株病毒ＡＱ毒株。该病毒能在鸭胚和鸭胚成纤维细胞上生长，并能引起明显的胚体病变和细胞病变，对鸡红细胞的凝集作用能被ＥＤＳ７６标准阳性血清所抑制；病毒对氯仿不敏感、耐酸（ｐＨ３．０）、对热（５０℃３０ｍｉｎ）稳定，核酸型为ＤＮＡ，电镜观察见直径约７０～７５ｎｍ的圆形病毒颗粒。初步鉴定ＡＱ株是鸡减蛋综合征病毒。     

减蛋综合征病毒单克隆抗体的生物学特性鉴定

该研究在建立分泌减蛋综合征病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的基础上，鉴定了１０株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体（４Ｂ１，１Ｄ４，２Ｄ６，３Ｄ６，２Ａ１，３Ａ５，３Ｃ６，３Ｃ１，１Ｂ３和２Ｃ５）和生物学活性，这１０株杂交瘤细胞分泌的抗体有高度的特异性，只特异地作用于减蛋综合征病毒，微量血凝抑制试验（ＨＩ）发现４Ｂ１，３Ｃ１，２Ｃ５和３Ｃ６有血凝抑制活性，腹水效价分别为２４（ｌｏｇ２），４（ｌｏｇ２），７（ｌ     

PCR方法检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征(Egg drop syndrome 1976 EDS-76)病毒DNA序列,设计合成了1对能扩增300 bp DNA片段的引物,建立了EDS-76病毒的聚合酶链式反应(PCR)诊断方法。该方法对EDS-76病毒标准株AV-127扩增结果为阳性;对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的扩增结果均为阴性。结果表明该方法特异且敏感,检测的最低病毒DNA含量达到2.5×10-2pg,PCR检测表明,从试验感染鸡的心脏中不能检测出病毒,肝脏和肾脏只有在感染后7~15 d检出,在试验感染后4~21 d的子宫、血液和4~17 d的脾中均能检测到病毒。     

鸡产蛋下降综合征的研究及防制

ＥＤＳ７６是近几年传入我国引起蛋鸡产蛋下降的主要原因。研究结果表明：该病由腺病毒引起，可通过垂直和多种水平途径传播，对２６－４３周龄产蛋鸡影响最大，只产薄壳蛋、无壳蛋，卵巢和输卵管是该病侵害的主要部位，从鸡体分离鉴定的３个毒株经血清学交叉试验证明，与ＥＤＳ７６ＡＶ１２７标准株密切相关，而与其它禽腺病毒无关，用ＡＶ１２７特异性单抗建立的荚心ＥＬＩＳＡ特异，灵敏。筛选的Ｈ９１－１毒株制备的油乳剂灭活苗     

鸡减蛋综合征的防治措施探析

鸡减蛋综合征是一种流行非常广泛的传染病,该病主要危害鸡的生殖系统,其症状多表现为群体性产蛋率下降,采食量及产蛋质量下降,出现畸形蛋或软壳蛋等。通过该病的发病特点、临床症状、病理变化、血清学及病原分离和鉴定可对该病进行综合分析诊断。目前国内外仍没有十分有效的治疗手段和方法。为了减少该病对蛋鸡养殖业的危害,应以预防为基础,加强饲养管理,必要时接种疫苗。早发现早治疗,这样才能使蛋鸡养殖业的健康发展。     

鸡产蛋下降综合症的诊断及病毒分离

１９９２年春季在河南焦作、郑州、新乡等地对产蛋鸡进行了流行病学调查、临床症状及病病理剖检变化的观察，并通过病毒的分离和初步鉴定，确认该地流行鸡产蛋下降综合症，把分离出的毒株与ＥＤＳ－１２７标准毒株进行交叉ＨＩ试验，证实均为同一血清型的病毒，但其流行特点与文献报导不同。     

鸡减蛋综合症病毒（EDS—76）的分离与鉴定

采取新疆五家渠某鸡场发病鸡病料，接种鸭胚，分离病毒，病料在鸭胚中盲传至第５代，鸭胚尿囊液ＨＡ效价达２１７，ＨＡ可被ＥＤＳ－７６标准阳性血清抑制。免疫电镜观察到了病毒颗粒，表明该病是由ＥＤＳ－７６病毒所致     

鸡产蛋下降综合症（EDS—76）Z16毒株的分离和鉴定

从５个爆发产蛋下降综合的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ－Ｚ１６、Ｚ２、Ｗ４、Ｔ１和Ｔ３株。病毒大小７０－８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ＰＨ３－５下稳定，５０～６０℃１小时不被实例灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ－１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ－７６病毒。ＣＡＶ－Ｚ１６株能在鸭胚上繁殖，致死鸭     

鸡产蛋下降综合症（EDS_（－76））Z_（16）毒株的分离和鉴定

从５个爆发产蛋下降综合症的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）、Ｚ＿２、Ｗ＿４、Ｔ＿１和Ｔ＿３株。病毒大小７０～８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ｐＨ３～５下稳定，５０～６０℃１小时不被完全灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ—１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ＿（－７６）病毒。ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）株能在鸭胚上繁殖，致死鸭胚，ＨＡ效价达２￣（１３）～２￣（１７），也能在鸭胚成纤维细胞上繁殖，产生ＣＰＥ，但ＨＡ效价仅有２￣７～２￣（１０）。初次分离ＥＤＳ＿（－７６）病毒选用鸭胚较佳，从生殖道分离成功率较高。     

鸡减蛋综合征病毒基因组提取方法的比较

分别采取PEG-6000沉淀法、酶直接消化法和超速离心法浓缩、纯化减蛋综合征病毒，并提取基因组DNA。结果表明：上述三种方法对1．5mL鸭胚尿囊液(HA≥14(log2))提取的DNA量分别为148．4，189．2和210．4μg；其OD260／OD280值分别为1．702，1．635，1．738，均在1．6～1．8之间，完全符合要求的纯度；经电泳显示，三种方法提取的DNA图谱也完全一致。提示，在无超速离心机的条件下，酶直接消化法和PEG-6000沉淀法提取的EDSV基因组DNA在纯度和数量方面，完全可以满足分子生物学的研究需要，且利用PEG-6000沉淀法，在时间、设备和试剂方面更为节简，可作为一般实验室操作时的首选方法。     

鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从江西省一以产蛋下降、呼吸道症状为特征的蛋鸡群中分离到一株病毒，经血凝试验、干扰NDV、鸡胚发育试验等，证实该分离毒株为鸡传染性支气管炎病毒。