射线损伤对睾丸Claudin-11 mRNA表达的影响

目的:Claudin-11为支持细胞紧密连接的组分,在构建血睾屏障及维持生精上皮空间构象中呈现重要作用。本研究拟通过射线局部照射致睾丸氧化应激,观察Claudin-11转录水平变化,探讨氧化应激损伤精子发生的作用机制。方法:48只雄性昆明小鼠随机分配至A、B、C、D 4组,每组12只,A组空白对照,B、C、D 3组分别以2、6、10 Gy剂量60Co-γ射线局部照射实验动物下腹部1次,于4周后处死,测定实验小鼠体重及双睾丸重量;HE染色观察睾丸组织学变化;酶联免疫法检测血清性激素水平;实时荧光PCR监测睾丸组织内抑制素βB及Claudin-11转录水平变化。结果:不同剂量射线致睾丸氧化应激损伤后睾丸重量,A组为(182.9±8.43)mg,B组为(129.4±10.81)mg,C组为(87.5±16.83)mg,D组为(56.1±12.36)mg,呈下降趋势,与A组相比,差异有显著性(P<0.05);睾丸指数A组为(4.28±0.31)mg/g,B组为(3.39±0.57)mg/g,C组为(2.46±0.46)mg/g,D组为(1.63±0.44)mg/g,下降更为明显,与A组相比,差异有显著性(P<0.01);组织学分析示,与A组相比,受射线照射3组生精小管分化指数(TDI)下降明显(P<0.01),生精小管直径减小,生精上皮高度显著降低并层次紊乱。血清FSH,A组为(5.77±1.62)IU/L,B组为(6.74±1.95)IU/L,C组为(8.41±2.44)IU/L,D组为(10.93±3.16)IU/L,逐渐升高,D组较A组升高1.9倍。伴随照射睾丸射线剂量增加,组织内抑制素βB mRNA含量下降,Clau-din11转录水平呈现增高趋势,C、D两组Claudin-11 mRNA水平高于正常对照A组(P均<0.01)。结论:射线局部照射致睾丸氧化应激,组织内抑制素βB mRNA降低、血清FSH升高,支持细胞合成及分泌功能受损;同时,睾丸组织Claudin-11表达量则增加。增加的紧密连接组分同升高的FSH致使血睾屏障重建周期延长,生精上皮内处于减数分裂的精母细胞数量减少,导致不育发生。     

Daxx基因在小鼠睾丸精子发生过程中的表达特征

目的:研究死亡结构域相关蛋白(Daxx)基因在小鼠睾丸精子发生过程中的表达特征,初步探讨其在生精过程中的作用。方法:通过实时荧光定量PCR(q PCR)、Western印迹及免疫荧光等方法检测Daxx在不同周龄野生型小鼠睾丸组织以及成年睾丸支持细胞雄激素受体特异性敲除(SCARKO)和雄激素受体敲除(ARKO)小鼠睾丸中的表达特征。结果:q PCR、Western印迹和免疫荧光结果表明,Daxx基因在出生4周后小鼠睾丸中高表达,且主要定位于细胞核;与野生型小鼠相比,SCARKO小鼠睾丸中DAXX的表达差异不显著(0.853±0.058 vs1.000±0.015),但在生精细胞细胞核中呈极性分布;DAXX在ARKO小鼠睾丸表达显著降低(0.299±0.026 vs1.000±0.015,P0.01)。结论 :Daxx基因在小鼠睾丸发育中期时表达最高。ARKO小鼠中DAXX的表达与野生型相比显著降低,睾丸支持细胞中AR基因特异性敲除影响DAXX定位。DAXX可能参与调控小鼠的精子发生过程。     

褪黑素对大鼠睾丸扭转术后氧化应激及凋亡相关信号通路的影响

目的:研究褪黑素对大鼠单侧睾丸扭转/复位后睾丸氧化应激和凋亡相关基因信号通路的影响,探讨其保护性作用。方法:雄性SD大鼠24只,随机分成对照组、扭转组和褪黑素组,每组8只,建立720°2 h睾丸扭转动物模型。扭转组和褪黑素组于复位前15 min分别腹腔注射生理盐水和褪黑素(17 mg/kg),术后24 h留取手术侧睾丸。应用FCM检测各组生精细胞凋亡;qRT-PCR对Fas、FasL和Bax mRNA进行定量分析;Western印迹检测细胞色素C含量;分光光度法测定睾丸组织中髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)。结果:与扭转组相比,褪黑素组睾丸正常细胞百分比升高[(77.81±6.52)%vs(88.61±7.93)%,P0.05],早期凋亡生精细胞百分比减少[(16.74±3.16)%vs(6.97±1.65)%,P0.05],Fas、FasL和Bax mRNA表达显著下调[(4.52±0.29)vs(2.66±0.37);(2.82±0.30)vs(1.73±0.18);(2.39±0.18)vs(1.50±0.14),P均0.01];同时胞质中细胞色素C含量显著降低[(1.40±0.38)vs(0.67±0.30),P0.01],睾丸组织T-AOC活性显著回升[(0.76±0.25) U/mg prot vs(1.55±0.32) U/mg prot,P0.01],MPO和MDA含量显著下降[(0.52±0.15) U/g prot vs(0.19±0.10) U/g prot;(6.37±1.73) nmol/mg prot vs(3.98±0.90) nmol/mg prot,P0.01]。结论:褪黑素可能参与调控凋亡相关基因的表达,发挥组织抗氧化作用,对睾丸扭转术后的生精功能具有明显的保护性作用。     

先天性双侧输精管缺如患者睾丸组织中CFTR蛋白的表达及意义

目的通过观察中国CBAVD患者CFTR蛋白在睾丸组织中的表达水平,探讨其与睾丸生精功能之间的关系。方法免疫组化检测66例中国先天性双侧输精管缺如患者睾丸组织CFTR蛋白表达水平并对睾丸生精功能进行评分,探讨先天性双侧输精管缺如患者CFTR蛋白的表达情况以及其与睾丸生精功能的关系。结果免疫组化结果显示CFTR蛋白可表达于睾丸内支持细胞及生精上皮细胞,以细胞膜和细胞浆为主;CFTR蛋白在CBAVD患者睾丸生精上皮及支持细胞的表达以阳性和弱阳性为主,比例分别为50%(33/66)和37.87%(25/66),部分患者可见阴性表达,比例为4.54%(3/66);睾丸生精Johnsen评分7~10分的比例分别为4.45%(3/66)、40.9%(27/66)、42.42%(28/66)和12.23%(8/66)。部分患者存在生精功能障碍。CFTR蛋白在睾丸组织中的表达与生精功能强正相关性,相关系数为0.785(P<0.01)。结论BAVD患者睾丸内的CFTR蛋白表达以阳性和弱阳性为主;部分CBAVD患者存在生精功能障碍,CFTR蛋白在睾丸组织中的表达水平与生精功能存在强正相关性。     

非梗阻性无精子症患者外科取精技术的Meta分析

目的探讨非梗阻性无精子症(NOA)患者常用外科取精技术的获精率及其与睾丸病理类型的关系.方法通过计算机检索系统检索1997年至2011年发表的关于NOA患者外科取精的文献,并对所得文献进行Meta分析.结果在NOA患者睾丸进行外科取精,获精率最高的方法是显微切开睾丸取精术(MD)(51.9%);获精率与睾丸病理类型密切相关,精子发生功能低下(H S )、精子成熟阻滞(M A)和唯支持细胞综合征(SCO)患者的获精率分别为81.5%、48.8%和30.6%.结论 NOA患者行显微切开睾丸取精术获精率较高,不同病理类型中精子发生功能低下者获精率较高.     

不同病因非梗阻性无精子症患者显微切开睾丸取精及ICSI结局比较

目的:比较不同病因非梗阻性无精子症(NOA)患者显微切开睾丸取精术(micro-TESE)的成功率及配偶卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)结局。方法:回顾分析2016年9月至2017年12月155例行micro-TESE NOA患者的临床资料,根据不同病因将其分为先天性NOA(n=49)、获得性NOA(n=15)和特发性NOA(n=91) 3组,比较3组患者年龄、睾丸体积、生殖激素水平、超声表现、micro-TESE取精成功率。同时,根据女方情况,纳入符合要求的取精成功患者对受精率、可利用胚胎率和临床妊娠率进行分析。结果:先天性NOA患者睾丸体积[(6. 4±5. 0) ml)]显著小于获得性NOA患者[(10. 2±2. 0) ml]和特发性NOA患者[(9.9±3.2) ml](P 0.05);先天性NOA患者LH[(15. 2±10. 1) IU/L]显著高于获得性NOA患者[(9. 1±6. 5) IU/L)]和特发性NOA患者[(7. 8±3. 5) IU/L)](P 0. 05);而特发性NOA患者T[(11. 8±4. 8) nmol/L]显著高于先天性NOA患者[(8. 9±4. 5) nmol/L](P 0. 05)。先天性NOA患者micro-TESE取精成功率为73. 5%(36/49),获得性NOA患者为100%(15/15),特发性NOA患者为24. 2%(22/91),3组间差异显著(P 0. 05)。获得性NOA患者配偶ICSI后受精率为(73. 1±23. 3)%,显著高于先天性NOA患者[(48. 9±21. 7)%]和特发性NOA患者[(52. 6±22. 7)%](P 0. 05)。不同病因NOA患者配偶ICSI后可利用胚胎率和临床妊娠率间无显著差异。结论:获得性NOA患者micro-TESE取精成功率最高,且ICSI后受精率、可利用胚胎率以及临床妊娠率最高,其次是先天性NOA患者;特发性NOA患者取精成功率及ICSI结局较差。     

不同睾丸活检术对睾丸功能及抗精子抗体的影响

目的:研究不同睾丸活检术对无精子症患者血清抑制素B(INHB)、血清抗精子抗体(As Ab)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)的影响。方法:选取无精子症患者210例,根据不同的睾丸活检手术方式,分为睾丸切开活检取精术(TESE)组50例、睾丸穿刺抽吸取精术(TESA)组56例、睾丸细针穿刺抽吸取精术(TEFNA)组64例、显微睾丸切开取精术(micro-TESE)组40例,分别检测睾丸活检术前及术后1、3个月患者血清INHB、FSH、T水平和As Ab阳性率。结果:4组患者术后1、3个月FSH与术前比较均无显著性差异[TESE:(8.76±3.07)IU/L、(7.24±3.32)IU/L vs(8.51±4.34)IU/L;TESA:(7.90±4.57)IU/L、(8.04±3.65)IU/L vs(7.70±2.72)IU/L;TEFNA:(6.08±2.70)IU/L、(6.10±3.32)IU/L vs(6.04±3.17)IU/L;micro-TESE:(6.89±1.78)IU/L、(6.75±2.57)IU/L vs(6.59±2.74)IU/L,P均>0.05]。TESE组和micro-TESE组术后1个月As Ab Ig M阳性率(14.00%和15.00%)较术前(0.00和2.50%)明显升高(P<0.05)。TESE组和micro-TESE组患者术后1个月T水平[(9.25±5.76)nmol/L和(8.23±4.12)nmol/L]较术前[(16.52±6.25)nmol/L和(14.16±5.45)nmol/L]明显下降(P均<0.05)。TESE、TESA、TEFNA、micro-TESE4组患者术后1、3个月血清INHB较术前均明显下降[TESE:(42.63±15.34)pg/ml、(44.05±18.47)pg/ml vs(70.56±23.17)pg/ml;TESA:(40.55±20.51)pg/ml、(42.11±19.34)pg/ml vs(68.71±14.74)pg/ml;TEFNA:(46.31±19.28)pg/ml、(48.32±20.54)pg/ml vs(76.81±27.04)pg/ml;micro-TESE:(45.27±18.83)pg/ml、(47.64±28.34)pg/ml vs(74.74±28.35)pg/ml,P均<0.05],但不同方法组组间无统计学差异(P>0.05)。结论:不同睾丸活检术对无精子症患者睾丸功能及As Ab有影响,且存在一定差异。     

脂多糖对雄性大鼠睾丸组织病理学和生殖内分泌功能的影响

目的:研究脂多糖诱导的炎症对雄性大鼠睾丸组织病理学和生殖内分泌功能的影响,初步探讨炎症影响雄性生育的可能机制。方法:36只雄性SD大鼠(400~450g)随机分为4组,每组9只。对照组(A组)大鼠腹膜内注射无菌生理盐水,余下3组大鼠腹膜内注射脂多糖(LPS,5 mg/kg,溶于无菌生理盐水中),分别于注药12 h(B组)、24 h(C组)和72 h(D组)后麻醉处死。取各组大鼠左侧睾丸,制成组织切片,HE染色,镜下观察睾丸组织病理学改变;取各组大鼠血清进行血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)含量检测。结果:①大鼠睾丸组织HE染色显示:与A组相比,B组大鼠睾丸生精小管结构清晰,各级生精细胞排列整齐,部分生精小管管腔内精子数目有所减少,并可见脱落的生精细胞;C组大鼠睾丸生精上皮变薄,生精小管结构较紊乱、不规则,各级生精细胞减少且排列不整齐,生精小管管腔内成熟精子数目减少,并可见脱落的生精细胞;D组大鼠睾丸生精上皮变薄,生精小管结构紊乱、不规则,各级生精细胞明显减少且层次紊乱,生精小管管腔内成熟精子数目减少,可见较多生精细胞脱落并阻塞管腔。②各组大鼠血清T、LH、FSH含量,A组T为(0.490±0.028)ng/ml,LH为(6.290±0.515)ng/L,FSH为(1.837±0.127)IU/L;B组T为(0.460±0.024)ng/ml,LH为(5.881±0.124)ng/L,FSH为(1.707±0.098)IU/L;C组T为(0.417±0.021)ng/ml,LH为(5.123±0.271)ng/L,FSH为(1.620±0.115)IU/L;D组T为(0.378±0.021)ng/ml,LH为(4.504±0.279)ng/L,FSH为(1.562±0.216)IU/L;与A组相比,B组大鼠血清T、LH和FSH含量均降低,但无统计学差异(P0.05);C、D组大鼠血清T和LH明显降低(P0.01),FSH降低,有统计学差异(P0.05)。结论:脂多糖(5 mg/kg)腹膜内注射诱导炎症可损害雄性大鼠睾丸组织,并影响大鼠生殖内分泌功能,导致血清T、LH和FSH含量降低,可能影响雄性生育。     

邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露导致性发育期子代大鼠睾丸细胞凋亡和空泡化

目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)孕期暴露对性发育期子代大鼠睾丸细胞凋亡的影响。方法:受孕SD大鼠10只,随机分为空白对照组和DBP染毒组,妊娠12~19 d,空白对照组和DBP染毒组分别给予橄榄油1 ml/d和DBP 500 mg/(kg·d)灌胃,于性发育期(PND45)取出睾丸标本,透射电镜观察睾丸细胞结构,HE染色观察各级生精细胞发育情况,TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况,免疫组化和Western印迹观察凋亡调控蛋白Bcl-2、Bcl-XL、Bax和p53的表达。结果:电镜观察见DBP染毒后性发育期子代大鼠睾丸细胞凋亡增加和细胞空泡化,HE染色见各级生精细胞明显减少,TUNEL检测结果显示DBP染毒组细胞凋亡指数明显高于空白对照组(12.00±5.22 vs 3.17±1.47,P0.01),免疫组化和Western印迹提示DBP染毒组促凋亡蛋白Bax和p53的表达较空白对照组显著升高(P0.05)。结论:DBP孕期染毒导致性发育期雄性子代大鼠睾丸生殖细胞和支持细胞凋亡增加及细胞空泡化,促凋亡蛋白Bax和p53的表达明显增高。     

六味地黄丸降低手机频率电磁辐射对大鼠睾丸组织的损伤

目的:观察六味地黄丸对手机频率电磁辐射雄性大鼠睾丸组织形态学、氧化损伤和细胞凋亡的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常组、辐射组、六味地黄丸组,每组各10只。正常组不辐射,辐射组和六味地黄丸组大鼠每天暴露于900 MHz手机频率辐射4 h共18 d;六味地黄丸组大鼠每日灌胃六味地黄丸悬液(1 ml/100 g体重),其他组大鼠每天灌胃等量纯净水。实验结束后腹腔麻醉取材处死大鼠,分别取睾丸组织固定和冷冻,常规HE染色观察组织形态学变化,比色法检测睾丸组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平,免疫组化法观察睾丸细胞bax,bcl-2蛋白表达的平均光度值。结果:与正常组相比,辐射组大鼠睾丸生精小管细胞结构松散,精母细胞层数减少,内有空洞出现;睾丸组织MDA水平显著升高[(0.36±0.07)μmol/g prot vs(0.25±0.06)μmol/g prot,P0.05],GSH水平显著降低[(42.10±5.08)mg/g prot vs(52.29±4.16)mg/g prot,P0.05];辐射组大鼠睾丸生精细胞bax蛋白表达显著增强(0.91±0.10 vs 0.21±0.01,P0.01),bcl-2蛋白表达显著减弱(0.18±0.07 vs 0.70±0.94,P0.01)。六味地黄丸组大鼠睾丸组织形态学接近正常,与辐射组比较,睾丸组织MDA含量显著降低[(0.30±0.05)μmol/g prot,P0.05],GSH含量无明显变化[(45.34±5.21)mg/g prot,P0.05],睾丸生精细胞bax蛋白表达(0.41±0.05)明显减弱(P0.01),bcl-2蛋白表达(0.27±0.08)明显增强(P0.01)。结论:六味地黄丸可改善手机频率电磁辐射造成的大鼠睾丸组织结构损伤,降低睾丸组织氧化损伤,减少睾丸细胞凋亡。     

胸腰椎骨折椎弓根内固定断裂与植骨融合方式的相关性分析

[目的]探讨胸腰椎骨折椎弓根螺钉内固定系统内固定术后,椎弓根螺钉断裂与植骨融合方式之间的关系,以探讨胸腰椎骨折植骨融合的最佳方式。[方法]回顾性研究1995年5月~2005年12月本院脊柱外科收治的胸腰椎骨折病人197例,其中A组单纯内固定(不植骨)患者14例,B组“H”形椎板植骨21例,C组横突间植骨67例,D组椎间、椎内联合横突间植骨95例。[结果]术后随访6~32个月,内固定断裂12例,其中A组4例,B组3例,C组5例,D组0例,4组中D组内固定断裂率显著低于其他3组(P<0.05)。[结论]椎间、椎体内联合横突间植骨重建脊柱三柱的稳定性,符合人体生物力学原理,能有效降低内固定断裂的发生。     

Influence of the design of the prosthesis on the outcome after hemiarthroplasty of the shoulder in displaced fractures of the head of the humerus

We reviewed 39 patients with displaced three- and four-part fractures of the humerus. In 21 patients (group A) we had used an anatomical prosthesis for the humeral head and in 18 (group B) an implant designed for fractures. When followed up at a mean of 29.3 months after surgery the overall Constant score was 51.9 points; in group A it was 51.5 and in group B 52.4 points. The subjective satisfaction of the patients was assessed using a numerical rating scale and was similar in both groups. In group A complete healing of the tuberosities was found in 29% and 50% in group B. Partial integration was seen in 29% of group A and in only one patient in group B, while resorption was noted in 43% of group A and 44% of group B. The functional outcome was significantly better in patients with complete or partial healing of the tuberosities (p=0.022). The specific trauma prosthesis did not lead to better healing of the tuberosities. The difference in clinical outcome obtained by the two designs did not reach statistical significance.     

Radiographic assessment of the relative lengths of the bones of the fingers of the human hand

The study assessed whether a relationship existed between the lengths of the phalanges of the fingers of the hand. The centres of rotation of the joints in each finger were determined by dissection of cadaveric hands. Using these data, the distances between the joint centres was determined on anteroposterior hand X-rays taken for clinical purposes. The study has shown that, for all the fingers, there is a ratio of 1 for the distance between the metacarpophalangeal and proximal interphalangeal joint and the distance between the proximal interphalangeal joint and the finger tip. The ratio for the distances between the interphalangeal joints and the distal joint and the tip approximates to 1.3 for the index, middle and ring fingers and to 1.0 for the little finger. No evidence was found to support Littler's hypothesis that the interarticular distances of the finger follow the Fibonacci sequence.