AC—920血液分析仪在有关红细胞系统疾病诊断中的应用

１９９７年５月我科将ＡＣ－９２０血细胞分析仪用于门诊检查。使用该分析仪对疾病的诊断、鉴别诊断快速、准确，极大的方便了病人。现对该仪器在有关红细胞系统疾病诊断中的应用价值作一探讨。１　仪器１．１　仪器：ＡＣ－９２０血液分析仪，分析结果有１２个参数，３个直方图即白细胞（ＷＢＣ）、红细胞（ＲＢＣ）和血小板（ＰＬＴ）。全血质控物校准各项指标均符合要求（四川省临检中心，批号９７０４０７７）。检验所需稀释液、溶血素、洗液均由中国南昌百特实业有限公司提供。采血针、微量吸管、试管均为一次性的。１．２　细胞体积分…     

SE-9000血液分析仪红细胞铁缺乏信息与血清铁检测结果的对比研究

Sysmex SE-9000全自动血液分析仪检测样本、综合数字数据、直方图、散点图等结果做出判断,给出易于理解的标记或信息,在IP中说明仪器的判断。我们对其红细胞IP中同时出现“Anemia”(贫血)、“Aniso'’(红细胞大小不等)、“IroD Def”(可能存在铁缺乏)的样本同时进行血清铁生化检测,观察仪器红细胞参数、红细胞IP与血清铁检测结果的符合程度。     

F—800血液分析仪对血瘀证的诊断价值

用Ｆ－８００血液分析仪，对临床确诊为血瘀证的５６例患者进行了白细胞计数（ＷＢＣ）、红细胞计数（ＲＢＣ）、血红蛋白浓度（ＨＧＢ）、血细胞压积（ＨＣＴ）、平均红细胞体积（ＭＣＶ）、平均红细胞血红蛋白量（ＭＣＨ）、平均红细胞血红蛋白浓度（ＭＣＨＣ）、血小板计数（ＰＬＴ）、红细胞体积分配宽度（ＲＤＷ－ｃｖ）、血小板体积分配宽度（ＰＤＷ）及平均血小板体积（ＭＰＶ）的测定，并与６０例健康者进行了对比分析，结果     

网织红细胞血红蛋白含量在诊断铁缺乏症的应用进展

网织红细胞血红蛋白含量(Ceuular hemoglobin reticulo-cyte,CHr)是一项诊断铁缺乏的新的血液学指标,可以直接反映新生红细胞中血红蛋白合成水平[4]。近年来随着网织红细胞自动分析仪及ADVIA120全血自动血细胞分析系统在血液学检验的普遍使用,引起了国内外临床医学界的广泛关注并为此进行了大量的临床应用研究。不少学者认为,无贫血个体的网织红细胞血红蛋白含量(CHr)大于红细胞血红蛋白含量(CH),若新近发生铁缺乏,则出现CHr相似文献   

小儿隐性铁缺乏症研究进展

铁缺乏症分铁缺乏 (irondepletion ,ID)、缺铁性红细胞生成 (irondeficienterythropoiesis,IDE)及缺铁性贫血 (irondefi ciencyanemi,IDA) 3期。隐性铁缺乏症 (LID)是指前两期 ,即指由于需铁量增加而摄入不足或铁消耗过多导致体内贮存铁及血浆铁都明显减少 ,红细胞内卟啉增多 ,但血红蛋白及红细胞压积尚在正常范围的血液学疾病 ,是一种亚临床缺铁状态。LID是儿童常见的营养缺乏病 ,国内流行病学调查结果显示发病率较高 ,特别是婴幼儿 ,达 4 0 %以上 ,其发生率高于IDA。儿科医生因常根据血红蛋白来评价儿童是否贫血 ,常常忽略了LID的…     

不同血液分析仪测定阻抗红细胞结果分析

目的:为了解不同血液分析仪测定阻抗红细胞样本的白细胞计数及分类功能,特对其结果进行分析。方法:使用阻抗红细胞抗凝全血样本及质控物,在XT-1800i、CD-3700血液分析仪上及手工法进行测定。结果:XT-1800i血液分析仪分析阻抗红细胞样本的白细胞计数及分类结果较可信,只需对Mono%>12者复查即可。以CD-3700血液分析仪病人模式分析WOC、WIC差异低于10%的阻抗红细胞样本与XT-1800i可比性好,可不复查;差异超过10%的样本以病人模式或RRBC模式测定的结果可比性差,应手工或以XT-1800i复查。     

红细胞冷凝集对自动血液分析仪测定结果的影响

先进的自动化血液分析仪可为临床的诊断和治疗提供许多有价值的检测，但日常工作中的质量控制则不容忽视的。红细胞冷凝集是常见的干扰血液分析仪检测结果的因素之一，现就我们发现的l例红细胞冷凝集对血细胞计数的干扰和处理方法报告如下。     

红细胞原卟啉测定在铁缺乏症中的应用

缺铁是一常见的营养缺乏症,近年来,不少学者认为红细胞原卟啉(ErythrocyteProtoporphyrinEP)测定是一敏感、稳定的指标,用来早期诊断缺铁并可作为铁剂治疗充分与否的依据。1　EP的测定原理及特性原卟啉是血红素的组成部分,未成熟红细胞内合成的原卟啉在铁络合酶的作用下与铁络合生成血红素,血红素与球蛋白迅速结合成血红蛋白。机体缺铁时,供给红细胞的铁不足,原卟啉不能与足量的铁结合,乃大量聚积于红细胞内,原卟啉在一定波长的光照下,发出很强的荧光,根据其荧光强度对原卟啉进行定量测定。七十年代,Lamola[1]发现缺铁性贫血原卟啉的荧光…     

血液分析仪检测尿红细胞平均体积鉴别血尿来源的临床价值评价

目的评价血液分析仪检测尿红细胞平均体积对鉴别血尿来源的临床诊断价值。方法按照纳入排除标准收集关于血液分析仪检测尿红细胞平均体积用来鉴别血尿来源的文献22篇，采用Meta分析方法进行统计分析。结果肾小球性血尿患者尿红细胞平均体积值小于非肾小球性血尿患者，两者差异有统计学意义：但不同文献报道尿红细胞平均体积的结果间存在显著异质性（P〈0．001）。结论所评价的文献提供的诊断性试验评价指标欠缺，用尿红细胞平均体积诊断血尿来源的标准尚不统一，不能肯定其临床诊断价值。     

血液学指标对儿童不同类型地中海贫血并IDA的临床价值

目的研究不同类型珠蛋白生成障碍性贫血并发缺铁性贫血(IDA)儿童各项血液学指标的变化,为指导临床筛查和治疗奠定理论依据。方法择取2012年2月至2015年3月就诊的360例贫血患儿,通过DNA诊断法及铁代谢筛查法确定患儿的基因类型及其相应铁代谢指标情况,并将患儿分为地贫组160例、地贫合并IDA组170例和IDA组30例,同时选择30名健康儿童为对照组,检测上述各组的血液学指标并进行统计学分析。结果与对照组比较,各组地贫患儿的红细胞相关参数均有差异性(P均0.05),其中α地贫轻型及β地贫杂合子型患儿表现小红细胞低色素症状,而α地贫Hb H型及β地贫纯合子型患儿表现中重度贫血症状;与非合并IDA组相比,合并IDA型患儿的血液学参数均有统计学意义(P均0.05),且部分且铁代谢指标有显著性差异(P0.05);与男性组患儿相比,女性组患儿合并IDA及IDA型的患病例数普遍高于男性组患儿例数。结论应密切关注正常儿童及地贫患病儿童的各项血液学指标变化,为贫血症的有效预防和临床筛查奠定理论基础。     

新型Th9细胞及其与包虫病关系的研究进展

CD4+T细胞亚群中最早被发现且研究的是Th1和Th2细胞,近年来不仅对调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞亚群17(Th17)的研究显著增加,还报道了一种新型Th细胞亚群,即辅助性T细胞亚群9(Th9).新近研究表明,在某些特定条件下,存在着不同于Th1、Th2和Th17的CD4+Th细胞亚群,即Th9.它有着独特的分化机制和免疫应答机制,可以产生大量的IL-9.Th9细胞已被证明其不仅参与了各种自身免疫性疾病,还参与了包虫病感染后的免疫应答过程,并且有利于棘球蚴继续寄生在宿主体内.包虫病的"免疫逃避"机制与辅助性T细胞的免疫应答有密切的关系.     

红细胞参数及形态学检查结合铁染色和铁蛋白在儿童缺铁性贫血诊断中的临床应用

目的：探讨异常红细胞形态学和红细胞参数检查结合骨髓铁染色及血清铁蛋白在儿童缺铁性贫血诊断中的应用价值。方法：对388例缺铁性贫血（iron deficiency anemia,IDA）患儿进行了异常红细胞形态检验并进行血清铁蛋白（serum ferritin,SF） 含量检测,还对其骨髓涂片进行铁染色检查。选取388例IDA及255例慢性病性贫血（chronic diseases anemia,ACD）患者进行平均红细胞体积（mean corpuscular volume,MCV）、平均红细胞血红蛋白量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC）、红细胞分布宽度（red blood cell distribution width,RDW）和SF的检测,并与203例健康对照比较,对结果进行统计学分析。结果：388例IDA患儿异常形态红细胞占56.25%～92.34%,骨髓细胞铁染色随血清铁蛋白检测指标的增高而增高。与ACD组比较,IDA组MCV、MCH、SF均明显降低,RDW增高,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,IDA组MCV、SF明显降低,ACD组MCV无明显变化,SF明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）;MCV、RDW和SF三项联合诊断IDA的敏感性最高,达99.9％。MCV、RDW和SF联合应用可在IDA诊断与鉴别诊断中发挥更大作用。结论：异常红细胞形态学和红细胞参数检查结合骨髓铁染色及血清铁蛋白在儿童IDA鉴别诊断中有临床参考价值。     

猪白血病抑制因子多克隆抗体的制备及其免疫定位

目的：构建猪LIF原核表达载体，表达并纯化重组猪LIF蛋白，制备兔抗猪LIF多克隆抗体并进行免疫定位。 方法：根据GenBank中猪LIF cDNA基因序列扩增出目的基因片段，将扩增的片段克隆进 PET-31b表达载体的NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点之间，经转化使其在大肠杆菌BL21中表达，产生重组猪LIF蛋白，纯化后作为抗原免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体；经ELISA和Western blotting分析鉴定抗体的效价和特异性；最后利用所制备的抗体进行LIF蛋白在猪体内的免疫定位。结果：酶切和DNA测序显示,所构建的原核表达质粒PET-31b-mpLIF含有编码成熟型猪LIF蛋白的cDNA序列；表达结果显示，诱导样品在相对分子质量约20 000的位置上有明显的增强表达条带；纯化结果显示，重组蛋白在相对分子质量约20 000的位置上有一条清晰、单一的条带；通过免疫新西兰大白兔，获得了特异性较高、效价达1∶10 000的多克隆抗体；应用该抗体进行的免疫定位显示，LIF蛋白在心肌细胞、脾索和脾被膜的单层上皮细胞、肺成纤维细胞中有弱表达。结论：重组猪LIF蛋白在大肠杆菌中进行了高效、正确表达；得到了效价较高、特异性较强的多克隆抗体；LIF蛋白在心肌细胞、脾索和脾被膜的单层上皮细胞、肺成纤维细胞中有弱表达。     

氯化镉诱导大鼠心肌细胞 H9c2 凋亡的作用机制

目的：研究不同浓度氯化镉（CdCl₂）引起大鼠心肌细胞 H9c2 凋亡及机制。方法：将培养的大鼠心肌细胞H9c2分为阴性对照组和镉处理组,阴性对照组为DMEM培养液,镉处理组分别暴露于 5﹑10﹑30﹑50和80 μmol•L^-1 CdCl₂ 作用6、12和24 h,采用MTT法检测细胞存活率;Annexin Ⅴ-FITC/ propidium iodide (PI)流式细胞技术(FCM)、丫啶橙（AO）/ 溴化乙啶（EB）双荧光染色法检测细胞凋亡情况。结果：镉处理组细胞存活率随着剂量的加大及时间延长明显下降,与阴性对照比较差异有显著性（P<0.05或P<0.01）;CdCl₂可引起H9c2细胞凋亡,各剂量组凋亡率明显高于阴性对照组（P<0.001）,各剂量组之间凋亡率差异无显著性（P>0.05）;AO/EB 染色镜下可见H9c2细胞呈典型早期凋亡形态学改变。结论：H9c2 细胞对CdCl₂的作用较敏感,低剂量﹑短时间作用即可引起细胞凋亡,但 H9c2 细胞对CdCl₂有一定耐受性。     

急性胰腺炎患者外周血单核细胞 TLR9 mRNA 的表达及意义

目的：观察急性胰腺炎（AP）患者外周血单核细胞（PBMCs）Toll样受体9（TLR9）mRNA的表达情况。方法收集52例发病24 h内的AP患者,采集第1、3、5天外周乙二胺四乙酸二钾（EDTAK2）抗凝静脉血,提取血浆低温冻存,用于成批检测胰弹性蛋白酶、促炎细胞因子、抗炎细胞因子等。同法采集其治愈后2～3个月的外周EDTAK2抗凝静脉血行上述检测,作为相应指标的基准水平值。分离外周血单核细胞用于随后成批作逆转录聚合酶链反应（RT‐PCR）检测 TLR9 mRNA的表达变化规律。同法采集其治愈后3个月的外周EDTAK2抗凝静脉血行上述检测,作为相应指标的基准水平值。最终将成功采得治愈后3个月血液标本的前36例患者纳入最终研究。结果 AP患者的外周血PBMCs TLR9 mRNA相对含量高于其痊愈后3个月的基线水平（P＜0．05）。AP患者的外周血PBMCs TLR9 mRNA相对含量表达改变与胰弹性蛋白酶、促炎细胞因子水平呈正相关,与抗炎细胞因子无相关性。结论 AP患者的外周血PBMCs TLR9 mRNA表达显著升高并与促炎细胞因子表达同步上调,提示AP的发生、发展可能通过TLR9介导。     

红细胞指标对鉴别诊断儿童地中海贫血和缺铁性贫血的应用价值

目的:探讨红细胞指标检测在鉴别儿童地中海贫血和缺铁性贫血的价值。方法:选取90例中轻型地中海贫血患儿为试验A组,90例缺铁性贫血患儿为试验B组,另选取同期来我院健康体检的90例未合并缺铁性贫血及地中海贫血者儿童为对照组,对比三组红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞平均体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、红细胞体积分布宽度(RDW)的变化情况。结果:两组试验组的Hb、MCV和MCH指标明显低于对照组(P<0.05),RDW指标明显高于对照组(P<0.05),但是试验A组RBC指标明显高于试验B组(P<0.05),而试验B组的RDW指标明显高于试验A组(P<0.05),组间比较差异有统计学意义。结论:联合检测红细胞指标RBC、Hb、MCV、MCH、RDW可较好的鉴别儿童地中海贫血与缺铁性贫血。     

DLL1在骨形态形成蛋白9诱导骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用

目的 探讨Notch配体Delta-like1(DLL1)在骨形态形成蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化中的作用及机制.方法 利用DLL1重组腺病毒上调永生化小鼠胚胎成纤维细胞(immortalized mouse embryonic fibroblasts,iMEF)中DLL1 mRNA的表达,分别采用细胞化学染色、活性测定对早期成骨指标碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和晚期成骨指标钙盐沉积的影响;其次裸鼠皮下异位成骨实验进一步了解DLL1的体内成骨作用;最后用qRT-PCR、Western blot和荧光素酶检测DLL1对BMP9经典信号通路中Ⅰ型受体、Smad1/5/8磷酸化和Smad结合元件(smad-binding element,SBE)转录活性影响.结果 与对照组相比,DLL1在体外能明显促进BMP9诱导的MSCs早期成骨指标ALP活性和晚期成骨指标钙盐沉积的生成;同时也能明显促进BMP9诱导的MSCs裸鼠皮下异位成骨作用;BMP9信号通路中ALK2表达明显增加,而对ALK1则没有影响;Smad1/5/8蛋白量没有明显变化,而p-Smad1/5/8蛋白及SBE活性明显增加(P＜0.05).结论 DLL1可以促进BMP9诱导的MSCs成骨分化,可能通过影响BMP9信号通路来实现其促成骨作用.     

葛根素对溶血磷脂酰胆碱诱导血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的：观察葛根素对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响,探讨葛根素抗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法：用不同浓度（1.0～10.0mg/L）的溶血磷脂酰胆碱（LPC）孵育体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞24h,观察培养上清液中MMP-9含量的变化。不同浓度（10^-6～10^-4mol/L）的葛根素预先孵育平滑肌细胞4h,然后加入LPC（5.0mg/L）作用24h,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清液中MMP-9含量,实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测平滑肌细胞MMP-9 mRNA的表达,蛋白印迹法（Western blot）检测NF-κB p65蛋白的表达。结果：LPC能明显增加上清液中MMP-9的含量,而预先应用不同浓度的葛根素干预后,MMP-9含量、mRNA表达以及NF-κB p65蛋白的表达水平均明显降低,并且具有剂量依赖性。结论：LPC通过激活NF-κB p65而使平滑肌细胞MMP-9表达增强,而葛根素对上述效应具有抑制作用。     

Ghrelin 预处理对 H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的：探讨 Ghrelin 预处理对 H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法培养 H9C2心肌细胞并建立心肌细胞缺氧(21 h)/复氧(6 h)模型。细胞随机分成4组：对照组,缺氧/复氧组(H/ R 组),缺氧/复氧+ Ghrelin 组(H/ R +G 组),缺氧/复氧+ Ghrelin +生长激素促分泌素受体(GH-SR)-siRNA 组(H/ R + G + G-siRNA 组);采用 siRNA 干扰技术阻断 Ghrelin 受体 GHSR 的表达以及 Hoechst 33258染色剂和流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot 法检测各组凋亡相关蛋白表达情况。结果 GHSR 存在于正常H9C2心肌细胞中,GHSR-siRNA 可以显著抑制 H9C2心肌细胞中 GHSR 的表达。与 H/ R 组相比,在 H/ R + G 组中缺氧/复氧损伤所导致心肌细胞的凋亡率明显下降(P <0．05),B淋巴细胞瘤-2蛋白/ Bcl-2相关 X 蛋白(Bcl-2/ Bax)比率明显上调(P <0．05),含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)表达水平被显著抑制(P <0．05)。而与 H/ R + G组相比,H/ R + G + G-siRNA 组心肌细胞凋亡率增加( P <0．05),Bcl-2/ Bax 比率显著下降(P <0．05),caspase-3表达上调(P <0．05)。结论 Ghrelin 具有减轻缺氧/复氧所引起的心肌细胞损伤、抑制心肌细胞凋亡的作用。