不同产地土茯苓药材UPLC及HPLC指纹图谱的构建研究

目的 建立土茯芩药材超高效液相色谱(UPLC)及高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的分析方法,研究不同产地土茯苓药材的质量.方法 分别采用UPLC与HPLC对12批土茯苓药材进行指纹图谱分析,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件计算不同产地样品之间的相似度.结果 分别建立了土茯苓药材的UPLC与HPLC指纹图谱共有模式,两种方法均可标示出16个共有特征峰,12批样品的相似度均大予0.9.结论 建立的两种方法均准确可靠,重复性好,可用于土茯苓药材的质量控制.     

土茯苓药材HPLC指纹图谱研究

目的：采用反相高效液相色谱法（HPLC）,研究并建立土茯苓药材的指纹图谱。方法：采用YMC-Pack ODS-A（5μm,4.6mm×250 mm）色谱柱,乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱;流速0.8 ml/min;检测波长290nm。结果：方法学考察表明,本研究建立的分析方法有较好的重现性。不同来源土茯苓药材的指纹图谱相似度较好,土茯苓与其3种混淆品的指纹图谱有明显区别。结论：HPLC指纹图谱分析法可作为土茯苓药材的质量控制方法。     

土茯苓配方颗粒HPLC指纹图谱研究

目的:采用反相高效液相色谱法(HPLC),建立土茯苓配方颗粒的指纹图谱。方法:采用UltimateAQ-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.2%磷酸水溶液(35∶65)洗脱;检测波长290 nm;流速1.0 mL.min-1,进样量10μL,采集时间60 min。结果:分析方法有较好的重复性,共检出7个共有峰,并指认出落新妇苷(astilbin)、白藜芦醇(resveratrol)2个化学成分。10批土茯苓配方颗粒的指纹图谱相似度均>0.98。结论:HPLC指纹图谱重复性好,可作为土茯苓配方颗粒产品质量控制的技术手段之一。     

鲜姜有效部位HPLC指纹图谱研究

目的:研究建立鲜姜有效部位HPLC色谱指纹图谱,提供较完整的质量信息,更有效地监控质量。方法:采用RP-HPLC,色谱柱:Inertsil(ODS-3柱(100 mm×2.1 mm,3μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,柱温为30℃,检测波长为230 nm与190 nm~400 nm,分析时间为100 min,流速为0.2 ml/min,进行了鲜姜有效部位指纹图谱研究。结果:运用梯度洗脱法得到的色谱图各色谱峰分离较好,达到指纹图谱要求。结论:采用该法可为控制鲜姜有效部位的内在质量提供依据。     

益心舒片的HPLC指纹图谱

目的:建立益心舒片的HPLC指纹图谱,为益心舒片的质量评价提供方法。方法:样品经75%甲醇提取后,采用Waters Symmetry ShieildTMC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行检测,以乙腈-0.5%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长260 nm,柱温30℃。采用国家药典委员会出版的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012年版),对10批不同批次的益心舒片化学成分指纹图谱进行相似度计算,并且通过对照品比对及高效液相与质谱联用技术(HPLC-MS)对主要共有峰进行指认。结果:10批益心舒片指纹图谱中有29个共有峰,各峰分离度良好,各批次间共有峰的相对保留时间RSD均1.0%,样品间相似度均0.9,共指认出12个峰。结论:该方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,各共有峰间分离度高,可用于益心舒片的质量综合评价。     

不同产地石上柏指纹图谱及主要双黄酮含量测定

目的:建立不同产地石上柏双黄酮的HPLC指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析,用于石上柏药材质量的评价。方法:采用Dikma Diamons C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.6 m L·min-1,检测波长330 nm,进样量10μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对10批样品进行共有峰确认及相似度评价。运用SPSS 17.0统计学软件对HPLC指纹图谱进行聚类分析和主成分分析。结果:方法学考察指标的RSD均2.0%,表明在该色谱条件下,仪器精密度良好,样品在24 h内稳定性良好,方法准确度良好;根据10批药材测定结果表明,各共有峰较稳定,具有指纹图谱特征性,可初步确定为石上柏双黄酮的指目标成分群。在对照指纹图谱上共标定出9个色谱峰作为指纹图谱共有峰,指认了其中的3个化学成分,分别为穗花杉双黄酮、银杏双黄酮、扁柏双黄酮。10批样品的相似度计算结果均0.850,说明各产地的药材有较好的一致性;通过聚类分析可将10批样品可分为3类,第一类是重庆和四川产地的石上柏,第二类是贵州产地的石上柏,第三类是广西产地的石上柏,并且2个主成分的累计方差贡献率为98.096%。结论:该方法精密度高,重复性好,操作简便,可为石上柏药材的质量评价提供参考。     

鸡血藤干、鲜品黄酮部位的高效液相指纹图谱比较

目的:建立鸡血藤黄酮部位的HPLC指纹图谱,通过比较同一产地鸡血藤干、鲜品药材的指纹图谱,考察两者化学成分种类和含量上的差异。方法:采用高效液相色谱法,DiamonsilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长280 nm,检测时间80 min。结果:分别建立了干、鲜鸡血藤黄酮部位的HPLC指纹图谱共有模式,标定了11个共有指纹峰,并指认了4个共有峰,发现干、鲜品在成分和含量上均有差异。结论:该方法简便、准确,具有良好的重复性,可为鸡血藤化学成分深入研究及其加工利用提供科学依据。     

苦参中黄酮类成分的高效液相指纹图谱及5种成分的含量测定

采用高效液相色谱法建立苦参中黄酮类成分的指纹图谱,并同时测定3种异戊烯基黄酮(苦参醇I、苦参酮、槐属二氢黄酮G)和2种紫檀素(三叶豆紫檀苷和高丽槐素)的含量。色谱条件采用ULTIMATE XB-C₁₈色谱柱(4.6 mm× 250 mm, 5 μm),乙腈-水溶液为流动相进行梯度洗脱,以295 nm为检测波长。共收集了12批苦参和4批同属近缘种山豆根进行测定,运用中国药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价软件2004AB"进行评价,对黄酮类成分进行主成分分析,并对主要5种成分进行含量测定。建立了苦参黄酮类成分HPLC指纹图谱,标定了13个共有色谱峰,并采用对照品指认了5个主要色谱峰,4批同属近缘种山豆根与苦参黄酮对照图谱明显不同。主成分分析的结果表明,苦参酮、槐属二氢黄酮G等对其质量影响显著。含量测定条件通过方法学验证,平均加样回收率在96.3%~102.3%。该法所建立的苦参黄酮类成分指纹图谱特征性强、方法简便,结合主要成分含量测定可更好地控制其质量,对苦参的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。     

补阳还五汤挥发性成分指纹图谱的研究

目的：建立补阳还五汤挥发性成分的气相色谱-质谱联用（GC-MS）指纹图谱。方法：色谱柱：5HP-MS,载气：He,流速：1.0 mL·min-1,进样量：1 μL,分流比：1:20。质谱条件：电子轰击（EI）离子源,辅助线温度：280℃,离子源温度：230℃,四级杆温度：150℃,质量扫描范围：m/z 50~550。通过Chemstation 和Nist 05a 谱库检索认定共有峰。结果：采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004 A 版）对11 批样品的指纹图谱进行了匹配,确定并鉴定了9 个共有峰,指纹图谱的相似度均在0.93 以上。结论：本文建立的GC-MS 指纹图谱特征性及专属性强,可以作为补阳还五汤挥发性成分质量控制的稳定方法。     

化橘红黄酮类成分UPLC与HPLC指纹图谱的比较研究

目的 比较超高效液相色谱(UPLC)法与HPLC法分析化橘红总黄酮指纹图谱的效果.方法 分别采用UPLC法与HPLC法对17批化橘红药材的黄酮类成分进行指纹图谱分析.结果 分别建立了化橘红黄酮类成分的UPLC与HPLC指纹图谱共有模式.其中UPLC法标识出21个共有峰,HPLC法标识出17个共有峰,17批样品的相似度均大于0.9.结论 2种方法均可用于化橘红的质量控制,UPLC法较HPLC法更高效、快速、灵敏.     

土茯苓对急性汞中毒大鼠的保护作用研究

目的：探讨土茯苓对急性汞中毒大鼠的保护作用。方法：将大鼠随机分为正常对照组、模型组、土茯苓高、中、低剂量组（5,10,20 g·kg^-1）,模型组及土茯苓高、中、低剂量组sc 2.5 mg·kg^-1 HgCl₂溶液,连续2 d,造成汞中毒,正常对照组sc生理盐水;土茯苓水煎液低、中、高剂量组末次染毒后开始ig给药,ig体积10 mL·kg^-1,2次/d,早晚各1次,持续3 d,观察土茯苓对染汞大鼠血清尿素氮（BUN）、汞、尿蛋白、尿乳酸脱氢酶（LDH）、尿碱性磷酸酶（ALP）活力、尿汞、肾汞、肝汞含量及肾脏病理组织学变化的影响。结果：与正常对照组比较,模型组尿汞、血汞和肝汞、肾皮质汞含量,尿LDH及ALP活力,尿蛋白和血清BUN含量均显著提高（P<0.01）,肾脏损伤明显;与模型组对比,土茯苓水煎液高、中剂量组血清BUN、尿蛋白,尿LDH及ALP活力,肾、肝及血汞含量显著降低,尿汞含量显著增加（P<0.01或P<0.05）;肾脏病理组织学观察结果显示,高剂量组土茯苓对汞中毒大鼠肾损伤有较好的修复作用。结论：土茯苓具有能够改善汞中毒大鼠肝肾功能、去除体内汞蓄积的作用,对汞中毒大鼠具有一定的防治作用。     

大通筋化学成分研究

目的:对中药大通筋的化学成分进行研究。方法:利用硅胶柱色谱、薄层色谱等多种色谱分离技术进行分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从大通筋根茎中共分离得到9个单体化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1),表木栓醇(2),木栓酮(3),5,3',5'-三甲氧基-7-甲基黄酮(4),大黄素甲醚(5),大黄素(6),5,6,4'-三羟基-7,8-二甲氧基黄酮(7),β-胡萝卜苷(8),蒙花苷(9)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

绞股蓝黄酮类成分HPLC指纹图谱快速分析

目的:建立绞股蓝黄酮类成分HPLC指纹图谱。方法:采用反向高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6mm×150 mm,5μm);流动相乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,柱温30℃,检测波长360 nm,流速1.0 m L·min-1,进样量10μL。结果:建立了绞股蓝黄酮类成分HPLC指纹图谱,标定了11个共有指纹特征峰,方法学考察符合指纹图谱技术要求。结论:该方法稳定、可靠,精密度高,重复性好,可为绞股蓝药材的质量控制提供依据。     

绞股蓝黄酮类成分HPLC指纹图谱

目的:建立绞股蓝黄酮类成分HPLC指纹图谱。方法:反向高效液相色谱法,采用ZORBAX S_B-C_(18)色谱柱(4.6mm×150 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,柱温30℃,检测波长360 nm,流速1.0 m L·min~(-1),进样量10μL。结果:建立了绞股蓝黄酮类成分HPLC指纹图谱,标定了11个共有指纹特征峰,方法学考察符合指纹图谱技术要求。结论:该方法稳定、可靠,精密度高,重复性好,可为绞股蓝药材的质量控制提供依据。     

基于网络药理学探讨土茯苓治疗痛风的作用机制

目的运用网络药理学预测土茯苓抗痛风有效成分的作用靶点及通路。方法通过TCMSP数据库和Drugbank数据库获取土茯苓有效成分及作用靶点,并运用Cytoscape软件构建靶点间相互作用网络并进行交联分析,筛选出土茯苓治疗痛风的有效成分及作用靶点,采用MAS3.0生物分子功能系统获取通路的相关信息并制成靶点通路网络模型。结果预测得到土茯苓治疗痛风的有效成分11个和有效靶点39个,并推断其作用机制可能与脂肪细胞因子信号通路、ERbB信号通路,Toll样受体信号通路等有关,且MAPK1、RELA、PTGS2等靶点基因可能起着关键性的作用。结论基于网络药理学探讨了土茯苓治疗痛风多成分-多靶点-多通路的作用特点,为进一步开展土茯苓治疗痛风作用机制研究提供了新的思路和方法。     

齿叶白鹃梅叶总黄酮提取物HPLC指纹图谱研究

目的:建立齿叶白鹃梅叶总黄酮提取物的指纹图谱。方法:采用高效液相色谱法进行测定,用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价》(2004年A版)软件,对10批不同批次的齿叶白鹃梅叶总黄酮提取物中黄酮类成分指纹图谱进行相似度计算。结果:测定10批齿叶白鹃梅叶总黄酮的HPLC图谱,建立标准指纹图谱,有19个共有峰,通过与对照品的对照,指认了其中8个化合物色谱峰,各共有峰之间分离度较好;用中药指纹图谱相似度评价系统计算其相似度,各批总黄酮的相似度均>0.90。结论:该方法精密度、稳定性及重复性较好,特征性及专属性强,为齿叶白鹃梅综合利用开发提供了科学依据。     

光果甘草GgUGE基因的克隆和序列分析

目的:通过克隆光果甘草Glycyrrhiza glabra UDP-葡萄糖4-差向异构酶(UDP-glucose 4-epimerase,UGE)基因并进行生物信息学分析,探究光果甘草UGE基因与甘草酸生物合成分子调控之间的潜在关系。方法:从光果甘草主根中提取RNA,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆得到UGE基因c DNA序列,测序并进行序列分析。结果:成功克隆得到一条长度为1 121 bp的光果甘草UGE基因(Gg UGE) c DNA序列,包含1个长度为1 053 bp的开放阅读框(ORF),共编码350个氨基酸残基,在Gen Bank上对所得c DNA序列进行注册,序列注册号为MK638908。序列分析表明Gg UGE基因编码蛋白为不稳定亲水蛋白,理论相对分子质量为39. 02 k Da,等电点为6. 13,不含信号肽,无跨膜区,二级结构以α-螺旋为主,保守结构域含有葡萄糖4-差向异构酶基因家族结构域。Gg UGE基因的c DNA序列和氨基酸序列聚类分析结果表明其与豆科植物亲缘关系最近,而与杨柳科植物亲缘关系较远。结论:首次克隆得到了光果甘草Gg UGE c DNA序列,对其进行了生物信息学分析,为后续Gg UGE基因的功能研究以及甘草酸生物合成分子调控机制的解析提供参考。     

药用大黄地上部分化学成分

目的:对蓼科Polygonaceae植物药用大黄Rheum officinale的干燥地上部分进行化学成分研究,从物质基础的角度探寻其作为药用资源的可能性。方法:取干燥药用大黄地上部分5 kg依次用95%,75%乙醇回流提取,减压回收溶剂至无醇味,分别用石油醚、乙酸乙酯萃取,采用多种色谱技术对乙酸乙酯部分及萃取后剩余的水相进行分离纯化,应用~1H-NMR,~(13)C-NMR,2D NMR,MS等现代分析技术进行结构鉴定。结果:从乙酸乙酯部分及水相中共分离鉴定了16个化合物,分别为4-methyl-6,8-dihydroxy-7H-benz[de]anthracen-7-one(1),大黄素-8-甲醚(2),emodin bianthrones B(3),emodin bianthrones A(4),6'-乙酰基-大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(5),6'-乙酰基-大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(6),二氢高良姜醇(7),rumexneposides B(8),迷人醇(9),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(11),2″-O-galloylvitexin(12),槲皮素-3-O-刺槐双糖(13),山柰酚-3-O-芸香糖苷(14),1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid(15),kaempferol-3-O-[6″-O-(3-hydroxy-3-methylglutaroyl)glucoside](16)。其中6个蒽醌类化合物(2~6,9),7个黄酮类化合物(7,10~14,16),1个吲哚类化合物(15)及2个酚类化合物(1,8)。结论:化合物1~16均为首次从大黄属中分离得到。经综合对比,发现药用大黄地上部分的化学成分与传统药用部位根及根茎相似,主要为蒽醌类、黄酮类、酚类化合物等。这为大黄地上部分药用资源的开发利用提供了一定的化学依据。     

穿鞘菝葜化学成分的研究

目的 :对穿鞘菝葜的化学成分进行研究。方法 :有机溶剂提取 ,各种色谱手段分离纯化 ,理化常数和光谱分析鉴定结构。结果 :从穿鞘菝葜乙酸乙酯部分共分离得到了正十六碳酸 (Ⅰ ) ,β-谷甾醇 (Ⅱ ) ,Δ⁷-5α-胆甾烯 3-β-醇 (Ⅲ ) ,柚皮素 (Ⅳ ) ,丁二酸 (Ⅴ ) ,芹菜素 (Ⅵ ) ,白藜芦醇 (Ⅶ ) ,胡萝卜苷 (Ⅷ )和juncusylesterB(Ⅸ )共 9个化合物。结论 :其中正十六碳酸、柚皮素、芹菜素、Δ⁷-5α-胆甾烯 3-β-醇、JuncusylesterB都是首次从该属植物中发现。     

艾纳香中的黄酮类化学成分

目的:研究艾纳香Blumea balsamifera中的黄酮类化学成分.方法:运用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱对艾纳香中的化学成分进行分离,通过理化常数和波谱数据分析鉴定化合物.结果:从艾纳香中分离并鉴定了12个化合物,分别为3,3’,5,5’,7-五羟基二氢黄酮(1),3,3’,4’,5-四羟基-7-甲氧基二氢黄酮(2),金圣草素(3),3’,4’,5-三羟基-3,7-二甲氧基黄酮(4),香叶木素(5),3,3’,4’,5-四羟基-7-甲氧基黄酮(6),3,5-二羟基-3’,4’,7-三甲氧基黄酮(7),chrysosplenol C(8),3,3’,5-三羟基-4’,7-二甲氧基二氢黄酮(9),艾纳香素(10),3,3’,5,7-四羟基-4’-甲氧基二氢黄酮(11),3’,5,5’,7-四羟基二氢黄酮(12).结论:化合物1,3～5,8为首次从该属植物中分离得到;化合物6,7为首次从该植物中分离得到.