乙肝HBV—DNA定量检测分析与临床定量的意义

用PCR进行HBV-DNA定性检查已应用于临床多年,对于指导乙肝的临床诊断及治疗起到了重要作用。但定性PCR需开盖检测,易造成PCR产物的污染,引起假阳性结果。2000年以来,山东省德州市人民医院使用中山医科大学达安公司提供的PE5700荧光定量基因分析仪,对500例乙肝病人进行了PCR-HBV-DNA定量检测,为临床诊断,药物的选择及治疗效果的判定,提供了更加可靠的量化依据。结果分析如下。     

慢性乙型肝炎血清HBV DNA定量检测及其临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）病人血清HBV DNA含量与HBeAg及肝损害程度的关系。方法 应用定量PCR法和ELISA法检测116例CHB病人血清HBV DNA含量与HBVM。结果 血清HBeAg阳性组HBV DNA含量显著高于HBeAg阴性组（P＜0．05）;CHB轻、中、重度血清HBV DNA含量逐渐降低（P＜0．05）。结论 基因水平证实HBeAg是HBV复制指标;随着肝损害程度加重,血清HBV DNA含量逐渐下降;定量检测HBV DNA对判断肝损害程度、指导抗病毒治疗有重要意义。     

血清HBV DNA定量检测的意义

目的　通过与血清乙肝标志物 (HBV- M)的比较 ,探讨血清乙肝病毒 (HBV) DNA定量检测的临床意义。方法　采用荧光定量 PCR法和 EL ISA法分别检测 84例乙肝患者和 2 3例 HBs Ag (- )者的血清 HBV DNA含量和HBV- M。结果　 HBe Ag (+)乙肝患者组 (32例 )、 HBe Ag (- )乙肝患者组 (5 2例 )和 HBs Ag (- )对照组 (2 3例 )的 HBV DNA阳性率分别为 10 0 %、 5 5 .8%、 13.0 % ,存在显著性差异 (X2 =4 3.3,P<0 .0 1) ;HBe Ag(+)乙肝患者组的 HBV DNA拷贝数为 10 6 .89± 1 .2 8/ m l,显著高于 HBe Ag (- )乙肝患者组和 HBs Ag (- )对照组 (P<0 .0 1)。结论　检测血清 HBV DNA含量弥补了 HBV- M只能定性、敏感性不足的缺点 ,从 HBV复制水平更准确反映乙肝患者HBV感染状态和传染性强弱 ,对判断乙肝患者病情意义重大 ;此外 ,HBs Ag(- )并不能排除 HBV感染 ,建议应对献血员开展 HBV DNA检测     

FQ-PCR技术检测438例HBV DNA结果分析

荧光定量ＰＣＲ(ＦＱ—ＰＣＲ)技术是近年发展起来的基因检测技术 ,现已在临床检验工作中得到广泛的应用 ,我院开展此项新技术以来 ,共检测ＨＢＶＤＮＡ４３８例 ,现报道如下。１材料及方法１ １材料 :(１)ＰＣＲ扩增仪 (美国ＰＥ９６００)。 (２)ＤＡ６２０微量荧光检测仪 (上海棱光技术有限公司生产)。 (３)ＨＢＶＤＮＡ试剂盒 (深圳市达尔安生物工程有限公司生产 )。 (４)标本来自我院２００１检测ＨＢＶＤＮＡ送检标本共４３８例 ,其中男２８５例 ,女性１５３例。１ ２方法 :(１)用一次性无菌注射器抽静脉血１ｍｌ于Ｅｐ ｐｅｎｄｏｆｆ…     

两种方法检测HBV标志物阳性患者血清HBV DNA载量结果

目的:观察不同方法检测乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中HBVDNA载量的相关性和临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)和核酸扩增(PCR)酶联免疫吸附(ELISA)两种方法检测HBV感染者血清HBVDNA载量。结果:HBsAg阳性各种模式两种方法检测结果比较,差异均有显著性(P<0.001)。模式Ⅴ(抗-HBs阳性+抗-HBc阳性+抗-HBe阳性)RQ-PCR检测结果<3.0lg拷贝/ml,PCR-ELISA检测结果为(3.80±1.61)lg拷贝/ml。模式Ⅵ(抗-HBc阳性+抗-HBe阳性)、Ⅶ(抗-HBc阳性)、Ⅷ(抗-HBe阳性)两种方法检测结果均﹤3.0lg拷贝/ml。结论:采用不同的方法检测HBV感染者血清中HBVDNA载量,结果存在不同程度的差异。     

HBV DNA血清含量与乙型肝炎标志物检测结果的关系

乙型肝炎病毒HBVDNA含量是判断病毒复制活跃和具有传染性的直接和可靠的依据，能直接代表患者病毒血症的水平，而ELISA法检测的是乙肝病毒基因表达产物及患者的免疫反应产物，只能间接地提供标本HBV感染的依据。因此，HBVDNA为乙型肝炎病毒（HBV）感染、复制及有无传染性的最为直接和可靠的依据。近年发展起来的荧光定量PCR技术（FQ—PCR）由于采用荧光技术的闭管检测，不仅可以僻饰常规PCR扩增产物易污染而导致的假阳件．     

荧光定量PCR和ELISA检测乙肝患者HBV标志物结果的比较

目的 检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系。方法 采用荧光定量PCR技术和ELISA方法.分别检测1242例乙型肝炎患者血清中HBV DNA含量和免疫学指标。结果 发现HBV DNA在各种模式的HBV标志物特阳性血清中均可检出。HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性组患者血清中存在高水平HBVDNA;HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性组患者血清中存在低水平HBV;HBsAg、抗HBc阳性组患者血清中存在低水平HBV。另发现28例抗HBs阳性组阳性率10．7％。结论 荧光定量PCR技术在乙肝诊断、治疗过程监测及药效评价方面有应用价值。     

定量聚合酶链反应检测HBV DNA的初步研究

对乙型肝炎病毒感染的诊断,通常是检测乙肝五项以及采用常规定量聚合酶链反应(PCR)方法检则HBVDNA。近年来,定量PCR方法已经用于临床,为精确检测病毒含量提供了灵敏的指标。我们采用定量PCR方法检测了33例乙型肝炎病人的39份血清的HBVDNA,并与定性PCR方法进行了比较,现将初步结果报告如下。1　材料与方法1.1　临床资料33例病人为我院1997年6月至1999年10月住院的乙型肝炎病人,其中男性29例,女性4例,年龄21～68岁。诊断符合1995年第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案。临床类型包括急性肝炎7例,慢性肝炎23例…     

多聚酶链反应检测HBV．DNA221例分析

我院应用多聚酶链反应 (ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎｒｅａｔｉｏｎ -ＰＣＲ )检测ＨＢＶ ＤＮＡ共２２１例 ,对其结果进行初步探讨。１对象与方法１ １对象 :病例均系我院１９９５年７月～１９９６年６月的住院患者共２２１例 ,男１３２例 ,女８９例 ,年龄１６～７０岁 ,按乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)标志检测的不同组合分为９组。１ ２方法 :以放免法 (ＲＩＡ)检测每份血清的ＨＢＶ标志 :ＨＢ ｓＡｇ、抗ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ和抗ＨＢＣ—ＩｇＭ并以ＰＣＲ检测同一份血液的ＨＢＶ ＤＮＡ。放免法药盒由中国原子能科学…     

不同慢性肝瘸患者血清HBV DNA定量检测及其临床意义

由HBVDNA水平与肝癌发生的关系。观察到血清HBeAg阴性患者有高滴度的HBVDNA。且分血清HBeAg阴转与慢性肝炎恶化。重型肝炎发生和慢性肝炎癌变密切相关。为探讨不同慢性肝病患者血清HBVDNA水平与肝脏病变程度关系，应用定量PCR法检测142例单纯感染HBV的慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者的血清HBVDNA水平，应用ELISA     

HBV DNA定量检测与HBVM的关系及临床意义分析

采用荧光定量ＰＣＲ方法 ,定量检测了 555例不同ＨＢＶ感染状况的患者血清ＨＢＶＤＮＡ含量 ,旨在探讨ＨＢＶＤＮＡ含量及其与乙肝病毒标志物 (ＨＢ ＶＭ )在反映体内乙肝病毒 (ＨＢＶ)复制方面存在的差异 ,进一步评价ＨＢＶＭ的临床意义 ,以及肝炎活动时肝功能损害与血清中ＨＢＶＤＮＡ含量的关系。　　　　　　　对象与方法一、研究对象 :555例ＨＢＶ感染者均为 1999年4月～ 10月我院门诊及住院患者 ,男性 361例 ,女性194例 ;年龄 38 97± 14 4 5岁。诊断符合 1995年北京第五次全国病毒性肝炎防治方案病毒性肝炎病原学诊断标准。二、检测…     

乙肝HBVDNA荧光定量检测与血清标志物结果相关性

目的研究乙肝血清学标志物（HBV—M）与HBV—DNA水平的关系,分析HBV—DNA与乙肝5项的相关性。方法随机抽取的门诊和住院患者血清502份,应用荧光定量PCR检测HBV—DNA和免疫化学,发光法检测乙肝血清学标志物并对结果进行分析。结果259份HBV—DNA阳性。其中123份1．3．5阳性（大三阳）血清中HBV-DNA的阳性率为92．48％;113份1．4,5阳性（小三阳）血清中HBV—DNA的阳性率为48．09％;12份1．5m性血清中HBV—DNA的阳性率为40．00％;11份1．3．4．5阳性血清中HBV-DNA的阳性率为78．57％,大三阳的阳性率与PCR—DNA的阳性率差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HBV—M与HBV—DNA两者之间互有联系但又有不同、对乙型肝炎患者进行多项指标的联合检测,对于临床判断其传染性及治疗效果非常必要。     

肝组织HBV DNA定量检查的临床意义

目的 由于对ＨＢＶ感染的认识正在不断深入，抗病毒治疗急待寻找判定效果的可靠方法，ＨＢＶ ＤＮＡ检测，特别是血液和肝组织定量检测显得极为重要。方法 在ＨＢＶ感染者作肝活检时随机留取小粒肝组织，同时采血作ＨＢＶ ＤＮＡ定量检查。结果 急慢性ＨＢＶ感染病例均示肝组织内ＨＢＶ ＤＮＡ检查明显高于血内检出率，同时肝组织ＨＢＶ含量明显高于血液内含量。结论 肝组织检测ＨＢＶ ＤＮＡ可以明显提高ＨＢＶ感染诊断率，血内ＨＢＶ ＤＮＡ阴转时不能说明肝组织内亦已阴转，血内ＨＢＶ ＤＮＡ阴转不宜随即停止治疗。     

肝癌病人血清HBV—DNA检测结果分析

肝癌是常见的癌症之一,流行于发展中国家。1983年世界卫生组织召开的肝癌预防和控制的专家会议的报告中指出,大约80%人类肝癌与乙型肝炎病毒(HBV)感染有关。HBV—DNA斑点杂交技术是检测HBV     

定量检测乙型肝炎病毒标志物与HBV DNA定量间的关系及临床意义

目的　探讨定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)与(HBV DNA)定量之间的关系及临床意义。方法　采用实时荧光定量PCR仪检测HBV DNA,采用时间分辨荧光免疫分析仪检测HBVM。结果　375例乙肝患者在HBV DNA含量分组中,随HBV DNA含量增高,HBs Ag、HBe Ag含量也增高,后两者与前者有良好的一致性,存在一定的相关性(r=0 .5 332 ,r=0 .380 9)。抗HBs,抗HBe及抗HBc与HBV DNA之间,无明显规律。HBs Ag含量:慢性轻度肝炎分别与急性肝炎、慢性重度、亚重肝、慢性重型肝炎,肝硬化比较差异有非常显著性(P<0 .0 1,0 .0 5或0 .0 0 1) ,HBe Ag含量:慢性轻度肝炎分别与急性肝炎、慢性中度、慢性重度、亚重肝、慢性重肝,肝硬化比较差异非常显著(P<0 .0 1或0 .0 0 1) ,HBs Ag含量及HBe Ag含量在其他临床分型中比较部分有统计学意义。HBV DNA阳性率及HBV DNA定量在部分临床分型中比较有统计学意义。结论　时间分辨荧光免疫(DEL FIA)是一敏感、特异方法,定量检测HBs Ag、HBe Ag能反映HBV DNA载量及复制情况;部分情况表明肝脏病变越重,其HBs Ag及HBe Ag血清含量越低,HBV DNA阳性率及HBV DNA载量与乙肝临床分型之间关系无确定性结论     

DNA提取后24h对荧光定量PCR检测HBV—DNA的影响

目的目前国内较多的医院采用荧光定量的方法对血清中的HBV-DNA进行定量检测。而在HBV-DNA检测过程中因多种因素的影响,需要HBV-DNA提取后存放一定时间再进行检测。该文旨在评价标本DNA提取后存放24h对荧光定量PCR检测HBV-DNA的影响。方法收集我院首诊和慢性肝炎血清标本15例。将此15例标本各取部分血清进行DNA提取后4℃保存24h为实验组;此15例标本剩余血清4℃保存于次日实验当天进行DNA提取为对照组,采用实时荧光定量PCR技术两组同时上机进行HBV-DNA的检测。结果对实验组与对照组检测结果进行配对t检验,DNA当天提取组结果为（4.07±1.68）1U/ml,DNA提取后存放24h组结果为（4.13±1.75）1U/ml。t=0.692,P=0.263。两组定量检测HBVDNA结果无显著性差别。结论标本DNA提取后存放24h对荧光定量PCR检测HBV-DNA的定量结果无影响,提示可定期成批检测HBV-DNA,更科学有效地使用实验室的人力、物力资源和更有利于为患者服务。     

恶性肿瘤患者血液HBV-M与HBV DNA的检测结果分析

目的探讨恶性肿瘤患者乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物(HBV-M)和HBV DNA检测结果及临床意义。方法采用化学发光免疫分析和荧光定量PCR方法,对所有病例及对照组进行HBV-M和HBV DNA检测。结果 405例各种恶性肿瘤患者HBV-M阳性共185例,阳性率为45.7%,HBV DNA检出率大三阳组为100%(19/19),小三阳组为60.0%(15/25),二者比较具有显著性的统计学意义(P<0.05)。肝癌患者的阳性率最高,达89.2%;其次为胃、食管、直肠癌,其阳性率分别为48.9%、45.5%、45.2%;白血病为35.8%;肺、鼻咽癌分别为32.4%、25.0%;(恶性)淋巴瘤、甲状腺癌、宫颈癌的阳性率分别为32.0%、28.8%、23.8%。与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),恶性消化道肿瘤患者HBV感染的阳性率与其他系统恶性肿瘤患者相比明显偏高(P<0.05)。结论恶性肿瘤患者的HBV感染阳性率高,其中消化道恶性肿瘤的HBV感染阳性率最高。