舒肝安乐宁浸膏对肝纤维化大鼠肝脏组织的影响

目的研究舒肝安乐宁浸膏对实验性肝纤维化大鼠肝脏组织的影响,探讨其抗肝纤维化作用机理,为开发中药新药提供实验依据。方法皮下注射CCl4花生油溶液建立大鼠肝纤维化模型,以秋水仙碱为阳性对照,测定肝组织Hyp、MDA的含量和SOD、GSH—Px的活力,病理观察HE和Masson染色后的组织形态以及肝纤维化病变程度。结果舒肝安乐宁能明显降低肝组织中Hyp、MDA的含量,同时升高肝组织中SOD、GSH—Px的活力;病理组织形态学检查表明,舒肝安乐宁能明显减轻大鼠肝纤维化病变程度。结论舒肝安乐宁对CCl4造成的实验性肝纤维化大鼠具有一定的抗过氧化脂质、抗肝纤维化作用,以舒肝安乐宁高剂量组效果为佳。     

宫内注射胎肝细胞对大鼠肝移植排斥反应的影响

目的：研究宫内注射胎肝细胞对大鼠移植免疫反应状态的影响。方法：将LOU／CN大鼠的胎肝细胞注射子宫内CHN胎鼠的腹腔。以分娩7－9wk龄时的CHN雄性大鼠作为受体，LOU／CN雄性大鼠作为供体，进行原位肝移植。观察受体大鼠存活时间，并以混合淋巴细胞培养检查移植排斥反应状态。结果：和对照组相比较，宫内注射组大鼠的存活时间明显延长。 混合淋巴细胞培养显示，移植排斥反应被明显抑制（P＜0．01）。结论：胎肝细胞宫内注射于胎鼠可延长大鼠肝移植的存活期，使移植排斥反应产生明显的抑制作用。     

重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因治疗大鼠肝纤维化的实验研究

目的:评价携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的重组腺病毒对大鼠肝纤维化模型的治疗作用。方法:DMN法建立W istar大鼠肝纤维化模型后,将8.6×109pfu的Ad-HGF经尾静脉注射入大鼠体内,对照组注射同剂量的Ad-GFP。第40天心脏采血,检测血清GPT、GOT、TP和TB il,并取肝组织做HE染色,观察两组大鼠肝脏的病理形态。结果:治疗组部分动物肝功能有所改善,对照组不明显。与对照组相比,治疗组大鼠的肝组织损伤程度较轻,汇管区看不到明显的纤维增生,并可见双核肝细胞和分裂相细胞。结论:腺病毒介导的HGF基因可能有部分治疗大鼠肝纤维化的作用。     

桑黄对实验性肝纤维化大鼠血液动力学的影响

目的 研究桑黄对肝纤维化大鼠血液动力学的影响。方法 采用四氯化碳为主要刺激物，结合高脂低蛋白饲料及乙醇饮食，诱导大鼠肝纤维化模型，大鼠分正常对照组，模型组和桑黄治疗组，分别取血测定血液流变学指标。结果 桑黄能显降低肝纤维化大鼠的全血粘度，红细胞压积和红细胞刚性指数（P＜0．01，P＜0．05），血浆粘度和红细胞聚集指数也有一定程度的降低。结论 桑黄能改善血液动力学性能，提高肝区微循环，是其抗肝纤维化的作用机理之一。     

MRI定量评估不同肝纤维化分期大鼠肝脏脂肪含量

目的 探讨MRI定量评估不同肝纤维化分期大鼠肝脏脂肪含量的价值.方法 S0～4期肝纤维化大鼠36只,进行双回波化学位移T1 WI(DixonIP/OP)、呼吸触发快速自旋回波T2 WI(抑脂+不抑脂)成像,测量肝脏信号强度值,计算DixonIP/OP脂变指数(FI)、呼吸触发快速自旋回波T2 WI(抑脂+不抑脂)相对信...     

苦参素抗大鼠肝纤维化作用的实验研究

目的　研究苦参素对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化肝组织Smad基因表达的影响。方法　 90只SD大鼠分为 3组 ,正常对照组 (C组 )、模型组 (M组 )和苦参素干预组 (T组 )。以CCl4皮下注射法诱导大鼠肝纤维化 ,干预组大鼠在造模的同时给予苦参素注射液腹腔注射 ,正常对照组给予液体石蜡皮下注射和生理盐水腹腔注射 ,8周实验结束时处死动物。酶联免疫吸附法检测血清TGFβ1水平 ,HE和Masson染色观察大鼠肝组织病理学变化和胶原沉积 ,免疫组化法检测Smad3基因表达情况。结果　苦参素干预组大鼠血清TGFβ1水平下降 (32 .6 5± 8.71)vs(96 .37± 16 .5 4 )mg/L ,P <0 .0 5 ) ,肝组织组织学积分 (1.9± 0 .3vs3.6± 0 .8,P <0 .0 5 )和胶原面积 ((94 .4 1± 37.2 6 )vs(6 90 .86± 188.71) μm2 ,P <0 .0 5 )明显减少 ;Smad3蛋白表达阳性率减少 ((2 .33± 1.6 4 )vs(9.5 6± 1.34) % ,P <0 .0 5 )。结论　苦参素干预性治疗能够有效地减少大鼠肝组织胶原沉积 ,使其血清TGFβ1水平下降 ,并抑制Smad3基因表达 ,干扰TGFβ介导的肝纤维化信号转导     

筛选适宜于构建工程化肝组织的凝胶材料支架

目的使用不同可注射性凝胶支架体外进行新生大鼠肝细胞立体培养,为后期体内植入筛选相容性较好的支架材料。方法使用胰酶冷消化法分离新生大鼠肝细胞。将肝细胞分别与纤维蛋白胶、壳聚糖凝胶、鼠尾胶原、透明质酸钠支架材料复合,形成工程化肝组织凝胶,接种于培养板中,并通过定期光镜来观察大鼠肝细胞,四唑盐(MTT)比色法评价细胞活性。溴甲酚绿法测上清白蛋白含量,脲酶比色法测定上清尿素含量。结果四组均可形成三维生长的工程化类肝样组织。培养第4天,生物蛋白胶及壳聚糖组的培养上清液中尿素含量达到高峰,分别为培养第1天的1.31倍和1.28倍,随后含量缓慢下降。培养第7天,新生大鼠肝细胞在纤维蛋白凝胶及壳聚糖凝胶中密集生长,同时MTT显示细胞活性及白蛋白分泌达到高峰,OD值分别为培养初期的1.11倍和1.17倍,上清白蛋白含量分别是初期的1.13倍和1.15倍。而在透明质酸钠及鼠尾胶原凝胶中则细胞生长缓慢,白蛋白及尿素含量持续下降。结论 4种可注射性支架中,壳聚糖和生物蛋白胶对于新生大鼠肝细胞生物相容性较好,透明质酸和鼠尾胶原较差,前两者更适合用于工程化肝组织的构建。     

活动性肝纤维化大鼠模型中注射钆塞酸二钠后的钆沉积及肝纤维化

摘要目的评估钆塞酸二钠对活动性肝纤维化大鼠模型中纤维化的影响。材料与方法本研究已获动物实验委员会批准。在12周内腹腔注射四氯化碳(CCl4)诱导出肝纤维化。在CCl4的最终剂量后开始连续5d给予10mmol/kg的钆塞酸二钠(临床剂量为0.25mmol/kg)。使用3组SD大鼠进行实验。第1组的6只大鼠用钆塞酸二钠处理,第2组的9只大鼠用CCl4处理,第3组的9只同时使用钆塞酸二钠和CCl4处理。     

肝纤维化大鼠血清四种糖苷酶的变化及意义

目的：探讨肝纤维化模型大鼠血清四种糖苷酶（β－NAG、BDGP、NAGS、AFU）活性的变化及其与传统的血清纤维化指标、肝组织病理学变化的相关性，为肝纤维化的非创伤性诊断提供新的简便的血清指标。方法：用CCL皮下注射法诱导SD大鼠肝纤维化模型，观察大鼠血清肝纤维化指标、四种糖苷酶活性以及肝脏组织病理学的变化。结果：肝纤维化模型大鼠血清β－NAG、BDGP水平明显增加，其敏感性分别为82．4％、47．1％，特异性分别为80．8％、70．0％，准确率分别为81．5％、55．6％，并与PCⅢ、CⅣ、HA的增加及肝纤维化程度正相关，而血清NAGS、AFU水平无显著变化。结论：CCL4诱导的肝纤维化大鼠血清β－NAG、BDGP活性明显增加，其检测有助于肝纤维化的无创诊断，并为临床应用提供了可靠的实验依据。     

肝纤维化大鼠血清TGF-β1的变化及复方红景天对其影响

目的:探讨实验性肝纤维化大鼠血清TGF-β_1水平的变化及其与传统纤维化血清指标的相关性,了解复方红景天干预性治疗对血清TGF-β_1水平的影响,初步探讨复方红景天抗肝纤维化机制。方法:用四氯化碳皮下注射法诱导SD大鼠肝纤维化模型,同时以复方红景天颗粒口服防治,实验结束以ELISA法检测大鼠血清TGF-β_1水平,放免法检测血清PCⅢ、CIV、HA水平,比色法检测血清纤维化相关酶活性。结果:肝纤维化模型大鼠血清TCF-β_1水平较正常组明显升高,P<0.01;复方红景天干预性治疗可使其减低;模型大鼠血清PCⅢ、CIV、HA水平与正常组比较明显增加,P<0.01;AST、β-NAG和MAO活性较正常组明显增加,P<0.01;血清TGF-β_1水平与血清纤维化指标、血清酶活性变化呈正相关。结论:四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠血清TGF-β_1水平明显增加,并随药物干预治疗而下降,能在一定程度反映药物的疗效,其检测有助于肝纤维化的无创诊断。     

骨髓间质干细胞移植对肝纤维化模型大鼠治疗效果

目的探讨骨髓间质干细胞(MSCs)对肝纤维化模型大鼠肝功能及肝纤维化的改善情况。方法将39只健康雌性SD大鼠分为对照组(n=14)和肝纤维化模型组(n=25)。对照组给予普通食水喂养;肝纤维化模型组给予四氯化碳液体橄榄油混合液皮下注射及乙醇喂养,建立大鼠肝纤维化模型。建模成功后将存活的大鼠随机分为对照组、模型组和移植组(每组各9只)。取健康SD大鼠骨髓,利用全骨髓贴壁的方法原代培养骨髓MSCs,然后将MSCs通过大鼠尾静脉对肝纤维化模型大鼠进行移植。移植后4周,检测血清白蛋白、转氨酶、胆红素、Ⅳ型胶原;HE和Masson染色观察肝纤维化程度。结果 MSCs移植后4周,移植组和模型组大鼠肝的纤维组织增生较对照组大鼠重,差异有统计学意义(P<0.01);但移植组大鼠肝的纤维组织增生较模型组大鼠显著减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组和移植组的肝功能较对照组差,差异有统计学意义(P<0.01);但与模型组比较,移植组大鼠血清白蛋白显著增高,胆红素、转氨酶、Ⅳ型胶原显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝纤维化模型大鼠骨髓MSCs移植4周后肝功能改善,肝纤维化程度显著减轻。     

苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的作用。方法采用复合因素法复制肝纤维化大鼠模型,测定各组大鼠血清中LN、HA、PⅢNP的含量,光镜下观察各组大鼠肝组织病理切片。结果模型组大鼠血清中LN、HA、PⅢNP的含量均显著升高(P<0.01),丹参治疗组、苦碟子治疗组血清中LN、HA、PⅢNP的含量均显著降低(P<0.05或P<0.01);光镜下模型组肝组织病理切片胶原纤维增生程度积分最高,在用药治疗的各组中,丹参治疗组、苦碟子治疗组积分均有所恢复。结论苦碟子注射液有一定程度的抗肝纤维化作用。     

组织弥散定量分析运用于肝纤维化程度判定的研究

目的：探讨超声弹性成像组织弥散定量分析对肝纤维化程度判定的应用价值,以期为肝病患者的病情评估及早期预防提供方法。方法选取2011年1月～2013年7月消化内科150例慢性乙肝患者为试验组研究对象,行肝脏穿刺术,根据肝纤维化病理分期标准分为5期（S0～S4）。另选取健康志愿者40例为对照组。所有研究对象均行超声成像检查组织弥散定量分析。比较试验组与对照组研究对象中11项组织弥散特征量之间的差异性,并根据统计学结果,将有统计学意义的指标进行试验组不同病理分期患者组内比较,并分析其与肝纤维化病理分期的相关性。结果在11个弹性特征量中,试验组应变均值较对照组明显降低,蓝色领域百分比较对照组明显增高,差异有统计学意义（P均＜0.05）。在试验组患者中,随着肝纤维化病理分期的增高,应变均值逐渐降低,而蓝色领域百分比逐渐增高,结果具有统计学意义（ P均＜0．05）。spearman相关性分析显示,肝纤维化病理分期与组织应变均值存在显著负相关关系（ r＝-0．931, P ＝0．000）,与蓝色区域所占百分比存在显著正相关关系（ r ＝0．913, P ＝0．000）。结论超声弹性成像组织弥散定量作为一种无创监测技术能够间接判断肝纤维化病理分期的程度,值得在临床上广泛应用,对肝病患者疾病的评估及早期预防性治疗,具有重要意义。     

受体肝分步切除的二袖套法大鼠原位肝移植模型的建立

目的 :改进二袖套法大鼠原位肝移植操作使该模型能够普及应用。方法 :共施行 78例大鼠原位肝移植 ,其中 34例采用传统方法 ,44例采用改进术式 ,对两种术式的操作时间、无肝期以及手术成功率等进行了比较。结果 :采用改进术式 ,肝下下腔静脉和门静脉吻合时间均不到 1min ,无肝期和受体手术时间分别缩短至 1 4min和 37min左右 ,与传统方法比较相差显著(P <0 .0 5) ,手术成功率为 95 .5 % (42 /44) ;传统操作方法组受体手术时间 43min左右 ,无肝期平均 1 7min ,成功率为 88.2 %(30 /34)。结论 :受体肝分步切除二袖套大鼠原位肝移植术 ,吻合单人操作即可快速完成 ,而且不易发生袖套吻合处血管扭曲成角 ,能缩短手术时间和无肝期 ,减少并发症发生 ,便于推广。     

脂肪肝对超声诊断肝纤维化的影响

目的：探讨不同程度脂肪肝对超声诊断肝纤维化的影响。方法回顾性分析我院363例肝病患者,均经肝穿刺活检确诊为肝纤维化,病理分期为S1-S4四期,其中脂肪肝患者223例,无脂肪肝患者140例,按纤维化分期及脂肪肝分度,分别观察肝脏实质回声的改变,采用秩和检验的统计学方法,分析不同程度脂肪肝对肝纤维化超声诊断结果的影响。结果轻度脂肪肝对各程度肝纤维化超声诊断结果的影响差异无统计学意义（P〉0.05）,中、重度脂肪肝使诊断的准确率下降,中度脂肪肝与无脂肪肝组比较,在S1-S2期差异有统计学意义（P〈0.05）,重度脂肪肝与无脂肪肝组比较,在S1-S3期差异有统计学意义（P〈0.05）,S4期的诊断受肝细胞脂肪变性的影响较小,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论不同程度脂肪肝对超声诊断肝纤维化存在影响,并可能使诊断结果偏轻于病理结果。     

成年大鼠肝细胞的分离及培养

用含有0.5mmol/L EGTA的Hanks液100ml灌流大鼠肝脏,然后用100U/ml胶原酶溶液100ml循环灌流10min,再用100ml的0.5%胰酶灌流。分离的肝细胞用台盼蓝排斥试验显示87%～89%活率,产率可达4.7×10~8,具有~3H-TdR掺入活性。原代培养3d出现新增殖的肝细胞,20d增殖约5倍,可进行连续传代培养。     

大鼠原位肝癌纤维间质成分与MR延迟强化的关系

目的：探究大鼠原位肝癌纤维间质成分的特点及其与 MR延迟强化的关系。方法4只 Wistar大鼠原位肝癌模型行肝脏 MR扫描及多期延迟增强扫描,取12个肝癌标本行 HE、苦味酸-天狼猩红染色、Verhoeff Van-Gieson染色、Gordon-Sweets 染色及α-SMA免疫组化染色,观察肿瘤内及周边纤维间质特点及 MR延迟强化特点。结果肝细胞癌内胶原纤维分布于病灶内的纤维间隔中;弹力纤维分布于肿瘤内的纤维间隔及动脉血管壁;网状纤维分布于癌灶内、汇管区及假包膜纤维组织中。胶原、弹力、网状纤维的平均面密度值分别为0.102±0.020、0.063±0.018、0.109±0.032,胶原纤维及网状纤维与弹力纤维间有统计学差异(P<0.01),胶原纤维与 MR延迟强化间正相关(P<0.05)。结论大鼠肝癌 MR延迟强化与病灶内胶原纤维关系密切,MR 可对肝癌内胶原纤维进行无创评估。     

改良二袖套法大鼠原位肝移植模型的建立

目的:探讨改良二袖套法大鼠原位肝移植模型的建立。方法:在Kamada等的袖套法吻合血管的基础上进行改进,供体门静脉进行肝脏灌注,肝上下腔静脉用缝合法吻合,门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合,胆总管采用单管内支架胆管端端吻合下进行原位肝移植。结果:供体手术时间34±5.5 min;袖套准备12±6 min;受体手术时间42±6 min;无肝期22±4 min。手术后24 h内死亡4例,因为肝上下腔静脉出血2例,肝下下腔静脉出血1例,门静脉出血1例。手术成功率为93.3%。1 w生存率为88.5%。结论:改进的大鼠原位肝移植术操作简便,手术成功率高,可作为肝移植实验可靠、稳定的动物模型。     

肝癌经皮酒精注射术后肝再生的研究

目的：研究经皮酒清注射术（PEI）后，周围叶的正常肝脏组织是否存在肝细胞再生，有其再生的特点。方法：VX2肝癌动物模型兔50只，分别行经皮酒精注射术和肝癌肝叶切除术（PH），分别检测术后24h、72h的兔肝组的有丝分裂指数（MI），以流式细胞术（FCM）行DNA含量分析，测量S期细胞比率（SPF），DNA指数（DI）的变化。结果：PEI要后24小时兔肝有丝分裂指数、S期细胞比率、DNA指数较对照组均明显升高（P＜0．001）；术后72h，有丝分裂指数、S期细胞比率较对照组均无明显差异（P＞0．05），DNA指数较对照组升高（t＝2．78，P＞0．05）。并且术后24h，PEI要后肝细胞增殖明显弱于肝癌肝叶切除要，各项指标差异明显。结论：PEI要后兔肝组织存在一定程度的再生，弱于肝叶切除要后再生，其原因可能与酒精的局限性扩散和肝内酒精浓度升高作用有关。     

苦黄注射液联合复方蛋氨酸胆碱治疗酒精性脂肪肝的疗效及对肝纤维化的影响研究

目的 探究复方蛋氨酸胆碱结合苦黄注射液在酒精性脂肪肝治疗中的疗效及对肝纤维化的影响。方法 按照随机数字表法将2019年1月至2021年12月海安市人民医院收治并确诊的104例酒精性脂肪肝患者分为对照组和观察组,各52例。对照组给予复方蛋氨酸胆碱治疗,观察组苦黄注射液联合复方蛋氨酸胆碱治疗。两组患者均连续治疗1个月。采用全自动生化分析仪检测两组患者治疗前后血清丙氨酸转移酶（alanine transferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆固醇（total cholesterol ,TC）、三酰甘油（triacylglycerol,TG）、总胆红素（total bilirubin,TBil）水平;采用放射免疫法检测两组患者治疗前后血清层粘连蛋白（laminin,LN）、透明质酸（hyaluronic acid,HA）、Ⅲ型前胶原N端肽（type III procollagen N-terminal peptide,PC Ⅲ）及Ⅳ型胶原（type IV collagen,Ⅳ-C）水平。比较两组患者的临床症状改善情况、临床疗效、肝功能指标及肝纤维化指标。结果 观察组治疗后的腹胀、肝区不适、黄疸、痞满等症状消失时间分别为（3.9±0.1） d、（9.8±0.2） d、（11.5±0.7）d、（3.8±0.2） d,均短于对照组分别为（7.5±0.3） d、（14.3±0.4） d、（15.6±0.8） d、（7.4±0.3） d（均P<0.05）。观察组临床总有效率高于对照组（94.2% vs 78.9%）（χ2=5.283,P=0.022）。观察组ALT、AST、TC、TG、TBil水平分别为（31.5±5.3） IU/L、（36.4±3.4） IU/L、（4.1±0.2） mmol/L、（1.4±0.3） mmol/L、（12.6±3.1） μmol/L,低于对照组[分别为（57.4±5.6） IU/L、（54.7±3.5） IU/L、（6.4±0.4） mmol/L、（2.6±0.5） mmol/L、（21.2±5.3） μmol/L]（均P<0.05）。观察组治疗后LN、HA、PC Ⅲ、Ⅳ-C水平分别为（51.6±9.4） μg/L、（32.5±7.4） μg/L、（7.5±1.8） ng/mL、（32.3±4.2） μg/L,均低于对照组[分别为（80.5±10.3） μg/L、（58.7±12.2） μg/L、（16.5±3.6） ng/mL、（71.2±8.6） μg/L]（均P<0.05）。对照组和观察组不良反应发生率分别为7.68%、3.84%,两组比较无明显差异（χ2=0.707,P=0.400）。结论 复方蛋氨酸胆碱结合苦黄注射液在酒精性脂肪肝患者中的治疗疗效显著,可改善患者的临床症状和肝功能,延缓肝纤维化的进程,安全性高。