人乳头状瘤病毒6B／11—DNA探针原位杂交在外阴疣状赘生物诊断上…

本文对２８３例外阴疣状赘生物进行人乳头状瘤病毒６Ｂ／１１型探针原位杂交的研究，同时作Ｈ．Ｅ染色。     

人乳头状瘤病毒6/11型原位杂交检测及挖空细胞与尖锐湿疣关系的对比研究

通过对2063例临床诊断为尖锐湿疣活检组织的形态学观察,并应用原位杂交检测方法分析尖锐湿疣组织中低危人乳头状瘤病毒（HPV）感染情况和组织形态学改变之间的关系,首次对挖空细胞在尖锐湿疣组织病理学诊断上所起的作用进行评价。     

30例喉乳头状瘤组织中HPV6B／11－DNA检测

采用定位准确、特异性强的原位核酸杂交技术，以地高辛配基标记ＨＰＶ６Ｂ／１１探针进行标记。在喉乳头状瘤石蜡包埋标本中检测人乳头瘤病毒。在３０例石蜡标本中１９例阳性，１１例阴性。结果表明喉乳头状瘤的病因与人乳头瘤病毒感染有关。     

30例喉乳头状瘤组织中HPV6B／11－DNA检测

采用定位准确、特异性强的原位核酸杂交技术，以地高辛配基标记ＨＰＶ６Ｂ／１１探针进行标记。在喉乳头状瘤石蜡包埋标本中检测人乳头瘤病毒。在３０例石蜡标本中１９例阳性，１１例阴性。结果表明喉乳头状瘤的病因与人乳头瘤病毒感染有关。     

汕头地区食管癌人乳头状瘤病毒的原位杂交检测

55例新鲜食管癌冰冻切片用ISH检测HPV感染状况，45例阳性，阳性率81.8%。不同病变HPV感染率不同，正常（87.50%)和单纯增生(81.40%)感染率明显高于原位癌(38.39%)和浸润癌(27.27%),不典型增生居中(64.70%);而且不同病变ISH阳性信号分布特征不同,在正常和单纯增生上皮呈层状分布,表层阳性细胞数多,信号强;原位癌层状分布特征消失,较弥散,浸润癌呈区域性阳性,本实验表明汕头食管癌组织HPV感染率高,HPV18可能在该地区食管癌的发病过程中起重要作用。     

原位杂交法检测喉癌组织中人乳头状瘤病毒的研究

采用原位核酸杂交技术，地高辛标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６Ｂ／１１，１６／１８型ＤＮＡ作探针，对４４例喉癌石蜡包埋标本中ＨＰＶ－ＤＮＡ同源序列进行了检测，同时用１６例喉息肉石蜡包埋标本作为对照。结果显示：ＨＰＶ６Ｂ／１１杂交阳性者在喉癌组为８／４４（１８．２％），喉息肉组为２／１６，（１２．５％）（Ｐ〉０．０５），ＨＰＶ１６／１８杂交阳性者在喉癌组为１９／４４（４３．２％），喉息肉组为２／１６（１     

免疫组化和核酸原位杂交在尖锐湿疣病理诊断中的意义

目的 探讨免疫组化和核酸原位杂交检验人乳头瘤病毒（HPV）和尖锐湿疣（CA）病理诊断中的意义。方法 44例病理形态学诊断为尖锐湿疣的石蜡包埋组织标本。用HPV多克隆抗体和HPV-11单克隆抗体行免疫组化染色，用分别针对HPV6和HPV11-DNA的寡核苷酸探针行原位杂交。结果 ①免疫组化染色：37/44例（84.1%)HPV多克隆抗体染色阳性；6/44型（13.7%）HPV-11单克隆抗体染色阳性；②原位杂交：有38/44例（86.4%)表达HPV-DNA，其中既表达HPV6-DNA又表达HPV11-DNA者26例（59.1%) ；③联合应用免疫组化和原位杂交技术检测，有43/44例（97.7%）呈阳性反应。结论 免疫组化和原位杂交技术检测HPV是病理诊断尖锐湿疣的重要辅助手段，二者的联合使用明显提高了HPV的检出率。在临床应用中结合形态学改变，可提高尖锐湿疣诊断的准确性。     

免疫组化和原位杂交联合应用在尖锐湿疣临床诊断中的价值

目的探讨免疫组化和核酸原位杂交检测人乳头状瘤病毒(HPV DNA)在尖锐湿疣病理诊断中的表达,为临床诊治提供依据。方法收集55例尖锐湿疣石蜡包埋组织标本,用HPV多克隆抗体行免疫组化染色,用HPV6/11DNA的寡核苷酸探针行原位杂交。结果免疫组化染色34例(61.8%)HPV多克隆抗体染色阳性;原位杂交46例(83.6%)表达HPV DNA阳性;其中18例(32.7%)在免疫组化染色中不表达或可疑表达而在原位杂交中表达阳性;联合应用免疫组化和原位杂交技术检测有52例(94.1%)呈阳性反应。结论免疫组化和原位杂交技术检测HPV是病理诊断尖锐湿疣的重要辅助手段,原位杂交法优于免疫组化法(P<0.05),二者联合应用明显提高了HPV的检出率。     

人乳头瘤病毒DNA的原位杂交检测

目的 探讨原位杂交检测人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）对尖锐湿疣的病因诊断意义及原位杂交的方法学，（２）方法 用地高辛标记原位杂交技术，对４５例临床疑为尖锐湿疣的组织进行了ＨＰＶ６Ｂ／１１ＤＮＡ检测，为减轻非特异性背景染色并获得最大杂交敏感性，对消化酶，变性及杂交温度和时间，洗涤液，显色剂等原位杂交方法进行了研究。（３）结果 ３２例病理诊断为尖锐湿疣者呈阳性，４例病理疑诊为尖锐湿疣者呈阴性。９例病理诊断为假     

人乳头瘤病毒DNA的原位杂交检测

①目的探讨原位杂交检测人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）对尖锐湿疣的病因诊断意义及原位杂交的方法学。②方法用地高辛标记原位杂交技术，对４５例临床疑为尖锐湿疣的组织进行了ＨＰＶ６Ｂ／１１ＤＮＡ检测。为减轻非特异性背景染色并获得最大杂交敏感性，对消化酶、变性及杂交温度和时间、洗涤液、显色剂等原位杂交方法进行了研究。③结果３２例病理诊断为尖锐湿疣者均呈阳性，４例病理疑诊为尖锐湿疣者呈阴性，９例病理诊断为假性湿疣者均为阴性。④结论ＨＰＶ原位杂交对尖锐湿疣的诊断更具可靠性     

核酸原位杂交检测尖锐湿疣的临床价值

提高尖锐湿疣的诊断正确率。正确选光镜下初诊尖锐湿疣病例１３例，临床怀疑尖锐湿疣而光镜下不典型者８例，进行尖锐湿疣乳头状瘤病毒６Ｂ／１１型核酸原位杂交检测。结果光镜下初诊尖锐湿疣的１３例中９例阳性，阳性率为６９％；光镜下不典型的８例中仅３例为阳性，阳性率为３８％。结论仅以临床表现诊断尖锐湿疣正确率低，病理组织学检查结合核酸原位杂交检测是确诊尖锐湿疣有价值的方法。     

SPECIFIC IDENTIFICATION OF HERPES SIMPLEX VIRUS IN HUMAN ESOPHAGUS WITH RAPID IN SITU HYBRIDIZATION IN 5 CASES

HUMAN herpes simplex virus esophagitis （HSVE） was first reported in 1940 by Johnson. ^1HSVE usually occurs in immunocompromised patients,such as those with acquired immunodeficiency syndrome （AIDS）, 2-4 malignancies, cutaneous burns, connective tissue diseases, inflammatory bowel disease, those taking immuno-suppressive therapy, and those undergoing organ transplantation,5 etc. In the immunocompetent individuals, HSVE is rare, having been reported in 39 cases and mainly affecting young males^6,7 The aim of this study was to delineate the clinical experience in the diagnosis of HSVE using rapid in situ hybridization and assess the various detection methods.     

HBV 感染者胃十二指肠粘膜HBV DNA地高辛原位分子杂交研究

目的：探讨HBV在胃十二指肠粘膜的分布,复制,表达及其意义。方法：应用地高辛原位分子杂交法检测62例HBV感染者胃十二指肠粘膜HBVDNA的分布状态,并与血清HBVM,胃十二指肠粘膜HBsAg,HBcAg,肝炎病情程度进行相关分析。结果：62例HBV感染者,27例（43．55％）胃肠粘膜检出HBV DNA,检出率与肝炎病情程度,血清HBsAg,HBeAg无明显相关,与血清HBVDNA,胃肠粘膜HBsAg,HBcAg密切相关,胃肠粘膜HBVDNA的表达表现为4种模式。结论：HBVDNA可在胃肠组织原位复制,其不同的表达模式反映了病毒复制或整合的状态。     

CONSTRUCTION AND IMMUNOGENICITY OF HUMAN PAPILLOMAVIRUS TYPE 6B L1 RECOMBINANT PLASMID

Objective To construct a DNA vaccine as a prophylactic model to prevent condyloma acuminatum and detect its immunogenicity in mice. Methods The major capsid protein (L1) gene of human papillomavirus (HPV) 6b was inserted into an eukaryotic expression plasmid (pcDNA3.1). The recombinant plasmid was transfected into COS-7 cells. Western blot were performed to detect whether L1 protein can be expressed in eukaryotic cells. Eighteen female BALB/c mice were tested for immunogenicity study. Results The recombinant plasmid (pcDNA3. 1-HPV6bL1) was verified as HPV6b L1 gene by sequencing. Western blot showed specific strip. Anti-L1 protein antibodies could be detected in the mice‘s sera inoculated with pcDNA3.1-HPV6bL1. Similarly, IL-4, IL-2, and IFN-γ were increased in the same mice. Conclusion HPV6b L1 recombinant plasmid was constructed successfully which had immunogenicity for BALB/c mice. It provided experimental evidence for the research of DNA vaccine of condyloma acuminata.     

鸡整胚原位杂交RNA探针的制备

目的：：建立一种快速、简便、高效的鸡胚整胚原位杂交地高辛标记的RNA探针的制备方法。方法：应用RT-PCR方法从鸡胚总RNA中扩增目的片段,连接到PGM-T克隆载体上,分别利用PGM-T载体中的SP6和T7 RNA 聚合酶上的启动子,以线性化的DNA为模板体外转录成地高辛标记的正反义 RNA探针。结果：成功得到地高辛标记的 RNA 探针,探针在鸡整胚原位杂交中有杂交信号。结论：成功转录得到地高辛标记的正反义探针,为后续的以鸡胚为模型整胚原位杂交试验做好了探针的准备。     

人乳头瘤病毒DNA 6B/11、16、18在喉鳞癌组织中的表达

为了证实人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）亚型的感染与喉鳞癌的关系，采用原位杂交技术，荧光素标记ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８ＤＮＡ为探针，分别对３２例福尔马林固定、石蜡包埋的喉鳞癌进行ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８型检测。结果显示：ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性１４例（４６％），ＨＰＶ１８型阳性９例（２８％），ＨＰＶ６Ｂ／１１阴性。提示：喉鳞癌的发生与ＨＰＶ１６、１８型感染有关。     

用原位杂交技术探讨EB病毒受体（EBVR／CR_2）在鼻咽癌发病中的作用

本文经原位杂交技术检测发现部分人胚鼻咽上皮细胞、鼻咽癌细胞株及高分化鼻咽癌中均有限强的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒受体（ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２）的病毒结合区ＳＣＲ１和ＳＣＲ２的表达，而低分化鼻咽癌中未检测到其表达，提示ＳＣＲ１和ＳＣＲ２的表达与ＥＢＶ的复制有关，ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２可以介导ＥＢＶ感染鼻咽上皮细胞导致鼻咽癌的发生。