艰难梭菌相关性腹泻的治疗进展及对我国的启示

艰难梭菌相关性腹泻（Clostridium difficile associated diarrhea,CDAD）是艰难梭菌感染（Clostridium difficile Infection,CDI）引起的一种机体严重疾病。随着艰难梭菌感染率的增加及高毒力株027／NAP1／BI的出现,导致该病在全球特别是北美、及欧洲等地区爆发性流行,对于该病的控制引起全球研究者的高度重视。本文就其治疗进展进行综述,并结合我国实际分析该病防治中存在的问题并提出建议。     

艰难梭菌特异性鸡卵黄抗体的研制及初步应用

目的制备艰难梭菌菌体特异性鸡卵黄抗体,探讨其对艰难梭菌感染小鼠的治疗作用。方法建立艰难梭菌相关腹泻(CDAD)小鼠模型,将30只CDAD小鼠随机分为5组,每组6只,以11.86mg/mL、1.186mg/mL、0.1186mg/mL艰难梭菌菌体特异性IgY灌胃,设立空白对照组及阴性对照组,1d/次,0.5mL/只,连续3d。末次治疗24h后处死小鼠,取盲肠组织中段制作病理切片;其余盲肠组织进行DAO、D-乳酸和TNF-α含量测定;测定回肠组织含水率。结果阴性对照组和空白对照组小鼠盲肠黏膜脱落伴大量炎细胞浸润;高IgY组小鼠盲肠黏膜完整,未见炎性细胞浸润;中IgY组小鼠盲肠黏膜少量炎细胞浸润;低IgY组小鼠盲肠黏膜上皮细胞脱落,少量炎细胞浸润。高IgY组小鼠盲肠DAO含量均显著高于空白对照组和阴性对照组(P0.01);中IgY组小鼠DAO含量高于阴性对照组(P0.05);中、高IgY组小鼠TNF-α含量均低于低IgY组、空白对照组和阴性对照组(P0.05)。结论艰难梭菌菌体特异性IgY对艰难梭菌感染小鼠具有治疗作用。     

艰难梭菌实验室快速鉴定方法检验效能的比较

目的评价3种艰难梭菌实验室鉴定方法的快速性及准确性。方法 2013年6月至2013年11月,收集136名ICU患者共248份标本进行24 h、48 h厌氧培养,并进行鉴定,同时对大便标本提取DNA进行tcd B毒素基因检测。以48 h培养结果为参考标准,评价24小时培养法和PCR扩增tcd B基因法鉴定艰难梭菌的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果 136名ICU发生腹泻的患者中,11名患者共有12份标本48 h培养为艰难梭菌阳性,艰难梭菌感染率为8.09%(11/136),标本阳性率为4.84%(12/248)。24小时培养法及PCR扩增tcd B基因法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为75.00%、100%、100%、98.74%和83.33%、99.15%、83.33%、99.15%。结论提取大便DNA tcd B毒素基因是最快速、灵敏度和特异度均较高的方法;48小时培养法时间相对较长,但稳定可靠,并可以保留菌株进行后续试验;24小时培养法,时间短、简便但会漏诊某些阳性病例。     

益生菌制剂在防治艰难梭菌相关性腹泻上的应用及前景

益生菌制剂(probiotics)通过各种机制调节肠道微生态环境,在维持肠道微生态平衡及防治艰难梭菌相关性腹泻(Clostridium difficile associated diarrhea,CDAD)上有着巨大的潜力。目前各国均有相关产品推出,但其防治CDAD的效果参差不齐。本文就益生菌制剂防治CDAD作一知识性回顾,并对益生菌制剂防治CDAD的前景进行展望。     

兰州地区腹泻患者艰难梭菌的感染状况调查

目的调查兰州地区腹泻患者中艰难梭菌的流行特点,揭示国内艰难梭菌感染的现况。方法通过细胞毒检测试验和酶联免疫吸附试验对206份临床粪便样品进行毒素检测。结果 206份粪便滤液经细胞毒检测有26份样品使非洲绿猴肾细胞（vero细胞）圆缩化,确认含有艰难梭菌毒素;经酶联免疫吸附试验有28份为阳性,其中23份与细胞毒检测结果一致,与细胞毒试验的符合率为88.5%。结论兰州地区住院腹泻患者中艰难梭菌感染率约为12.62%。     

住院腹泻患者艰难梭菌快速检测结果分析

目的 了解住院腹泻患者艰难梭菌带菌情况,为抗生素相关腹泻患者的诊断和治疗提供参考。方法 收集2015年9月至2016年8月住院腹泻患者粪便标本163份,用艰难梭菌快速检测试剂盒检测艰难梭菌。结果 艰难梭菌检出总阳性率为20.86%（34/163）,其中春季16.67%、夏季15.79%、秋季17.86%、冬季27.87%,经比较差异无统计学意义（2=2.943,P＞0.05）;成人粪便标本阳性率为22.52%（25/111）,儿童粪便标本阳性率为17.31%（9/52）,差异无统计学意义（2=0.583,P＞0.05）;男性粪便标本阳性率为21.69%（18/83）,女性粪便标本阳性率为20.0%（16/80）,差异无统计学意义（2=0.202,P＞0.05）;艰难梭菌阳性患者抗菌药物平均使用天数为12.74 d,阴性患者为8.21 d,差异有统计学意义（t=－7.81,P＜0.01）。结论 住院腹泻患者艰难梭菌阳性率高低与抗菌药物使用时间长短有关。     

艰难梭菌研究现状

艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)是产芽胞革兰阳性厌氧菌,产毒素艰难梭菌可导致艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)。产毒素艰难梭菌已被公认是抗菌药物相关性腹泻最常见的病原体,也是发达国家最常见的导致住院患者腹泻感染的原因之一。高毒力菌株导致全世界范围内CDI的发病率和死亡率增加。如何快速而准确地检测CD一直是备受关注的问题,国内外多推荐两步法和三步法进行检测。艰难梭菌治疗的一线用药是甲硝唑、万古霉素以及非达霉素,应用粪便微生物移植(faecal microbiota transplantation,FMT)也可作为治疗轻度或严重复发CDI(recurrence Clostridium difficile infection,rCDI)的可选方法。艰难梭菌的芽胞能抵抗不良环境,但抗菌药物的使用,医院环境的复杂性和医务工作者的手等因素会导致艰难梭菌易于传播,因此医疗机构应加强艰难梭菌的预防。本文主要对艰难梭菌的流行病学、致病机制、检测及治疗进行综述。     

艰难梭菌的检验

本文简要述及艰难梭菌毒素A和毒素B检验中的一些问题,着重于A^-B^ 分离菌株的检验,包括细菌培养、毒素的组织培养检定、毒素和共同抗原的酶联免疫吸附试验等,并对检验结果的临床意义进行了分析和讨论。     

具有临床代表性的艰难梭菌感染小鼠稳定模型的构建

目的构建临床代表性好、稳定性佳的艰难梭菌感染小鼠模型,为艰难梭菌感染相关疾病提供研究工具。方法选择C57BL/6、BALB/c、昆明小鼠,经抗生素诱导后,分别予以不同浓度(108 CFU/mL~10~(10) CFU/mL)的临床分离菌株混悬液灌胃,观察不同品系小鼠不同时间点腹泻、全身情况及结肠组织病理学变化。结果灌菌后,BALB/c小鼠10~(10) CFU/mL浓度组全部出现腹泻,死亡率为16.7%;其他实验组小鼠腹泻程度差异较大或仅部分出现轻度腹泻。腹泻小鼠表现为稀烂便甚至水样便和湿尾现象,体重减轻,肠道病理显示结肠黏膜充血水肿伴炎性细胞浸润。结论经5种抗生素灌胃9d+克林霉素腹腔注射诱导,10~(10) CFU/mL艰难梭菌活菌混悬液灌胃后构建的BALB/c小鼠艰难梭菌感染模型最稳定。     

艰难梭菌粘附的研究进展

艰难梭菌粘附的研究进展厦门大学生物系厦门３６１００５王隽,苏文金“艰难梭菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）是重要的肠道致病厌氧菌。它是抗生素疗法所引起的伪膜性结肠炎的致病菌,并且是引起抗生素相关的腹泻的最主要病原菌之一,同时还与一些非抗生...     

艰难梭菌的研究进展

艰难梭菌为革兰阳性厌氧芽胞杆菌,可引起艰难梭菌相关性腹泻,导致一系列肠道感染症状和相关临床表现。近年来由于高致病株的出现、菌株耐药性的增加,艰难梭菌感染在全球呈蔓延趋势。本文就艰难梭菌的耐药机制、检测技术、防治及国内感染现状等作一简要综述。     

艰难梭菌的超微结构观察

本文用扫描、负染、超薄切片等电镜技术对三株国外引进的艰难梭菌参考菌株作了超微结构的观察。在电镜下，艰难梭菌表现为长短不．的粗大杆菌，表面平整，未见鞭毛和菌毛。菌细胞壁两侧平行，有两个电子致密层和中间透明区结构，与细胞膜之间呈典型的双层单位膜。胞质中充满核糖体和散在的核区，并可见到与细胞膜相连的侧中膜小体。此外还观察到典型的芽胞以及存在于细胞壁外的荚膜结构。本实险结果为深入研究艰难梭菌的结构和功能提供了参考资料。     

艰难梭菌及其致病力

艰难梭菌(Clostridium difficile)被发现于1935年,命名为艰难芽孢杆菌(Bacillus difficilis)。1938年由Prevot根据其厌氧性质,将其划入梭菌属,改为现名。发现该菌时就发现它能产生毒素,引起实验动物死亡,但长期未引起重视。     

酶联免疫吸附试验检测艰难梭菌A毒素

实验用兔单特异抗艰难梭菌Ａ毒素ＩｇＧ包被酶标板,以羊抗艰难梭菌Ａ毒素ＩｇＧ标记辣根过氧化物酶作为第二抗体,采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测艰难梭菌Ａ毒素,可检测出０．９４ｎｇ的精制Ａ毒素,对６１株菌的培养液及６５份健康人粪便标本检测发现此法具有较高的特异性。用平行线定量法对几份典型产毒培养物进行了定量测定,结果表明,在一定剂量范围内线性及平行性好,结果准确、可靠。可用于临床粪便标本中艰难梭菌Ａ毒素的筛查及定量检测。     

艰难梭菌的快速鉴定试验

<正>现已充分证明,假膜性结肠炎几乎都是由艰难梭菌引起的,而且,抗生素相关性腹泻(约占25％)也与之有关。其实验诊断主要是取病人的粪便分离培养艰难梭菌,然后再行鉴定。然而现行的鉴定方法不是费时、需要贵重的仪器设备,就是重复性差或需要作补充鉴定试验。本文报道的是一种快速(30分钟内)、准确、重复性良好的确证方法。     

酪酸梭菌对艰难梭菌感染的防治研究

目的:观察酪酸梭菌对艰难梭菌感染的防治效果.方法:用艰难梭菌产毒株人工感染BALB/C小鼠,感染前后分别用酪酸梭菌进行预防与治疗,并检测盲肠内容物细胞毒性和进行肠黏膜病理观察.结果:酪酸梭菌不能预防艰难梭菌的感染,但在艰难梭菌感染后则能明显降低艰难梭菌的产毒力和盲肠黏膜的病理损伤.结论:酪酸梭菌对小鼠艰难梭菌感染有明显的治疗作用.     

艰难梭菌感染的临床诊断与治疗研究进展

艰难梭菌感染可引起相关腹泻,且在住院患者中的发病率不断升高.根据腹泻的程度不同,艰难梭菌相关腹泻可分为轻、中、重和暴发型4型,临床诊断除了血常规外,毒素鉴定与内镜诊断也是重要的辅助检查手段.目前在临床治疗中仍以甲硝唑或万古霉素等抗生素进行药物治疗,可通过益生菌来调节肠道菌群实现艰难梭菌相关腹泻的预防.     

艰难梭菌基因编辑技术研究进展

艰难梭菌Clostridioesdifficile是一种革兰氏阳性、产芽孢、专性厌氧细菌,是医院相关性腹泻的主要病原体。近年来,随着强毒株的出现(如核糖体027型),其流行性与致死率逐年上升,因此对艰难梭菌生理、生化特征及致病机制的研究受到广泛重视。艰难梭菌生理、生化特征及致病机制研究又以建立其稳定、高效的基因编辑方法为必要前提。借助基因编辑工具,研究者可以扰动艰难梭菌核心生物学过程,在分子水平研究其分子致病机制。如Clos Tron技术在艰难梭菌毒素A (Toxin A)和毒素B (Toxin B)与其致病力关系的研究中起到了关键作用。文中以时间为主线综述了艰难梭菌基因编辑技术的发展历程和最新进展,并对艰难梭菌基因编辑技术未来的研究方向进行展望。     

艰难梭菌引起假膜性结肠炎及腹泻的实验室诊断方法

<正>最近十余年内,对艰难梭状芽孢杆菌引起的,死亡率很高(高达22—44%)的假膜性结肠炎和抗菌缔合性腹泻,进行了广泛的实验室诊断研究。这些旨在改进细菌学方法的研究,包括培养基和其他条件(病原体的生物学特性)的深入研究,以及粪便中毒素的检验和与特异性血清反应中培养液的检验。 艰难梭状芽孢杆菌本身是孢子形成的革兰氏阳性杆菌,生成集合体外毒素(肠毒素-毒素A和细胞毒素-毒素B)。其生长温度为25—45℃,最佳温度为30℃。在5—20℃条件下,艰难梭状芽孢杆菌在粪便中能生存4到10昼夜。营养细胞在氧气作用下,可继续生存15分钟;有浓厚的培养基时,在由     

益生菌预防成人艰难梭菌相关性腹泻的Meta分析

目的 系统评价益生菌预防成人艰难梭菌相关性腹泻（Clostridium difficile associated diarrhea,CDAD）的临床疗效。方法 计算机检索PubMed、EMBASE、Cochrane、Web of Science、CBM、万方数据库、维普资讯网和中国知网全文数据库,纳入益生菌预防成人CDAD的随机对照试验（RCT）,采用随机效应模型进行Meta分析。结果 共有13项符合纳入标准的随机对照试验,包括5 179名患者,其中干预组2 730例,对照组2 449例。Meta分析结果显示,预防性使用益生菌可降低CDAD的风险（RR=0.49,95％CI 0.33‒0.75,I2=16.4％）。亚组分析发现益生菌高剂量（RR=0.41,95%CI 0.22‒0.77,P=0.043）、混合菌种（RR=0.43,95%CI 0.24‒0.75,P=0.037）与对照组相比,差异均有统计学意义。结论 辅助性益生菌的应用能够有效预防成人艰难梭菌相关性腹泻的发生。但受纳入研究数量较少与研究质量的参差不齐的影响,本结论尚需要开展更多高质量、大样本的研究予以证实。