应用胶体金试纸条快速检测赭曲霉毒素A的研究

本文介绍了一种快速检测赭曲霉毒素A的胶体金试纸条的研制方法，其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、试纸条的组装和测试等步骤。测试结果表明赭曲霉毒素A快速检测试纸条的检测限为10ng／ml，检测时间为10min，加上使用方便，经济适用，使之适合于赭曲霉毒素A现场快速检测之用。     

赭曲霉毒素A胶体金快速检测试剂条的研制

为建立一种快速检测饲料中赭曲霉毒素A的检测方法,应用胶体金免疫层析技术,研制了一种饲料中赭曲霉毒素A的免疫胶体金快速检测试剂条.将羊抗鼠IgG、特异性结合抗原和金标抗体三者经过反复调试优化,以适宜浓度和包被量分别包被到硝酸纤维素膜和胶体金结合垫上,包被后的硝酸纤维素膜、样品垫、胶体金结合垫、吸水垫及其他辅料组装成试剂条.试剂条的最低检测限为25μg/kg,与其他霉菌毒素的交叉反应率小于1％.该试剂条可用于饲料中赭曲霉毒素A的快速检测.     

胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A研究

该研究应用胶体金免疫层析技术建立一种快速检测食品和饲料中赭曲霉毒素A方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,标记抗赭曲霉毒素A单克隆抗体,标记胶体金抗体喷涂于玻璃纤维上,赭曲霉毒素A偶联抗原OTA-OVA和二抗兔抗鼠IgG分别喷涂于硝酸纤维膜上作为检测限和质控线,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装成试纸条并装卡。测试结果表明,赭曲霉毒素A快速检测试纸条灵敏度为5 ng/mL,检测时间为10 min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。该法简单方便,非常适于现场快速检测赭曲霉毒素A。     

胶体金技术快速测定葡萄酒中赭曲霉毒素A

目的利用胶体金免疫层析技术建立葡萄酒中赭曲霉毒素A的快速筛查方法。方法样品经过层析、孵育,通过i Check-单卡单测快检仪的图像分析进行定量检测,同时对进口与市售国产葡萄酒进行筛查。结果赭曲霉毒素A在添加水平为2.0、5.0μg/L时,红葡萄酒的平均回收率分别为92.5%、72.0%;相对标准偏差(RSD,n=6)分别为5.84%、2.59%;桃红葡萄酒的平均回收率分别为87.0%、76.6%;相对标准偏差(RSD,n=6)分别为7.70%、5.56%;白葡萄酒的平均回收率分别为84.0%、78.4%;相对标准偏差(RSD,n=6)分别为5.67%、3.54%。该方法定量限为1.0μg/L。同时与酶联免疫方法和液相色谱方法比较,通过t检验表明胶体金法不存在系统误差。市售葡萄酒赭曲霉毒素A的含量低于欧盟的限量标准(2.0μg/L)。结论胶体金的方法具有快捷、灵敏、特异性等特点,适合于大批量葡萄酒样品的现场快速筛查。     

胶体金测试条快速定量测定呕吐毒素技术在粮食中的应用

采用胶体金测试条法对粮食中呕吐毒素进行快速定量检测,结果表明,呕吐毒素的检测限为118μg/kg,定量限为316μg/kg, 500～5000μg/kg质量浓度范围内,相关系数r为0.9987. 采用有证实物参考物质进行比较,正确度为90.3%～116.6%,变异系数为47%～19.6%. 采用配对t-检验,与高效液相色谱法的测定结果相比较,二者无显著差异.     

农产品中赭曲霉毒素A免疫层析试纸条快速检测技术研究

基于胶体金免疫层析原理建立了一种快速检测赭曲霉毒素Ａ（ｏｃｈｒｏｔａｘｉｎＡ,ＯＴＡ）的胶体金试纸条的研制方法,包括胶体金的制备、金标记探针的制备、试纸条各条件参数的测试和优化等。试纸条检测ＯＴＡ的肉眼可视检测限为０．２５ｎｇ／ｍＬ,检测时间为１０ｍｉｎ,试纸条能特异性识别ＯＴＡ而不与赭曲霉毒素Ｂ及其他真菌毒素发生交叉反应,使用简单、方便、成本低,重复性好,保质期长,尤其适用于农产品中ＯＴＡ的现场快速筛查。     

赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的研制及与传统胶体金试纸条的比较

本实验介绍了赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的研制方法,其中包括胶体金的生产、金标抗体的制备、无毒体系试纸条的组装等步骤。所制备的赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条和传统的胶体金试纸条进行了比较,测试结果表明,赭曲霉毒素A无毒体系胶体金试纸条的检测限和检测时间与传统的胶体金试纸条相同,适合于赭曲霉毒素A现场筛查之用。     

粮食中赭曲霉毒素A的快速定量检测-超高效 液相色谱法

建立了免疫亲和柱净化-超高效液相色谱法快速定量测定粮食中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)的检测方法。样品经提取后,用免疫亲和柱净化、浓缩, Waters Acquity UPLC BEH C₁₈(50 mm?2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱分离,以乙腈∶水∶冰醋酸(体积比 100∶98∶2)为流动相,流速为0.2 mL/min,进样量为1μL,用Acquity荧光检测器激发波长为310nm,发射波长为465 nm处进行检测,赭曲霉毒素A的保留体积小于1.15mL,从样品前处理到分析整个过程小于45 min。根据3倍信噪比的峰响应值,确定赭曲霉毒素A的检出限为0.25pg,在1～50.0 pg范围内呈线性相关,相关系数R₂值为0.998;在小麦、玉米、稻谷样品中加标回收率分别为81.5%～101.2%,81.3%～85.5%,87.8%～97.5%,精密度为3.3%～6.4%。本方法简便快速、灵敏度高、重现性好、溶剂用量少,适用于粮食中赭曲霉毒素A的快速测定。     

化学发光免疫分析方法检测粮食谷物中赭曲霉毒素A残留

目的建立粮食谷物中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)残留检测的化学发光免疫分析方法。方法人工改造OTA半抗原、制备包被原和多克隆抗体工作液,优化检测步骤,验证各项评价指标,比较化学发光免疫分析方法和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)的实际样本检测结果的一致性,以此来实现化学发光免疫分析方法的建立。结果 50%抑制浓度(IC_(50))为0.278μg/L;OTA的最低检出限为5.0μg/kg,样本添加回收率在65.4%到115.8%之间,批内、批间相对标准偏差15%。同时,通过对实际样本检测,证明化学发光免疫分析方法具有显著的准确度和可靠性。结论基于化学发光免疫分析方法能够实现粮食作物中的OTA残留的快速检测,灵敏度高、成本低、时间短,为食品中霉菌毒素残留的快速检测提供了新的技术参考。     

基于寡核苷酸链信号放大快速检测谷物中赭曲霉毒素A

该研究以柠檬酸钠还原法制备粒径均一的金纳米粒子（gold nanoparticles,AuNPs）,并将AuNPs与赭曲霉毒素A（ochratoxin A,OTA）抗体通过静电吸附作用偶联,再与6-羧基荧光素（6-carboxyfluorescein,6-FAM）修饰的寡核苷酸链（single stranded DNA,ssDNA）通过金硫键偶联,制备出荧光探针,利用AuNPs近距离淬灭荧光基团信号作用和1,4-二巯基苏糖醇（dithiothreitol,DTT）解离寡核苷酸链作用,建立基于寡核苷酸链信号放大快速检测谷物中OTA的方法。经过优化试验条件,该方法的检测限为0.004 4 μg/L,特异性良好。使用该方法测定玉米、大米、燕麦3种谷物中的OTA含量,添加回收率为91.2%～102.3%,变异系数小于10%,检测结果与超高效液相色谱串联质谱检测结果接近,证明该方法能够用于检测谷物样品中OTA的含量。     

玉米赤霉烯酮胶体金快速检测试剂板的研制

目的 应用胶体金免疫层析技术, 研制一种玉米等谷物中玉米赤霉烯酮残留免疫胶体金快速检测试剂板。方法 将制备的羊抗鼠IgG、人工结合抗原和金标抗体三者经过反复调试优化, 以适宜浓度和包被量分别包被到硝酸纤维素膜和胶体金结合垫上。包被后的硝酸纤维素膜和样品垫、胶体金结合垫、吸水垫及其他辅料组装成试纸条。结果 该试剂板的最低检测限为100 μg/kg, 整个检测过程仅15 min, 与其他霉菌毒素无交叉反应。结论 该试剂板可用于玉米赤霉烯酮残留快速检测。     

基于纳米金与适配体的赭曲霉毒素A检测方法研究

以赭曲霉毒素A适配体作为识别分子荧光素发射的荧光作为检测信号、纳米金作为荧光信号淬灭剂,建立一种高灵敏度的赭曲霉毒素A荧光检测方法。结果表明:该检测体系检测限达到10nmol/L,在25~1 000nmol/L浓度范围具有线性关系,相关系数为0.991,具有较好的实用性。该荧光检测法同传统方法相比,提高了检测效率,为更好地进行赭曲霉毒素A检测控制提供了技术支持。     

胶体金免疫层析法定量检测猪肉中克伦特罗

建立了基于T/C比值的胶体金免疫层析法快速定量检测猪肉中克伦特罗残留的新方法。胶体金免疫层析试纸条的定量检测线性范围为0.1～1.5 ng/g,检测猪肉中克伦特罗残留的最低检测灵敏度为0.19 ng/g。比较了5种猪肉组织样本中克伦特罗的简便提取方法,其中采用0.02 mol/L,含2.8%NaCl的HCl溶液抽提猪肉样品2次的提取方案,克伦特罗的平均回收率达到76.7%,变异系数为7.4%。实际样本加标回收实验显示,加标量为0.5、1.0、2.0及3.0 ng/g时,胶体金试纸条检测回收率分别为(60.4±12.8)%,(70.24±4.2)%,(75.9±4.9)%,(71.1±5.0)%。与传统ELISA方法比对,结果显示2种方法具有较好的相关性(R2=0.9136)。以上实验结果证实,基于T/C比值法的胶体金免疫层析试纸条可用于猪肉组织样品中克伦特罗的快速及定量检测。     

烟草赤星病病原长柄链格孢菌快速检测胶体金试纸条的研制

为实现大田期烟叶烟草赤星病的快速测定,以胶体金标记特异性识别长柄链格孢菌的单克隆抗体,利用侧流免疫层析技术构建了长柄链格孢菌快速检测试纸条.结果表明,该试纸条对目标真菌的检出限为20 ng/mL,且与烟草相关病原体无交叉反应,灵敏度高、特异性好.利用该试纸条对加标鲜烟叶进行检测,10 min内可完成检测,操作简便快速,...     

胶体金法结合HPLC法快速检测AFB_1在油料收购中的应用

HPLC法具有准确度高、可靠的优点,但存在检测成本高、费时的缺点。胶体金法可在短时间内完成样品的半定量,判定出样品的阴阳性。对阳性样品可采用HPLC法进一步定量。胶体金法结合HPLC法检测黄曲霉毒素B_1具有简单、经济、快速、稳定可靠的优点。适合植物油厂对油料收购中黄曲霉毒素B_1实际控制。     

胶体金免疫层析技术快速检测谷物中3种真菌毒素的研究

目的应用胶体金免疫层析技术开发一种快速检测谷物中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的三联检测卡。方法优化胶体金溶液p H值、金标抗体量及抗原包被量制备3种胶体金试纸条,将试纸条组装成检测卡,研究该卡的检测限、准确度、特异性和稳定性。结果 AFB_1、ZEN和DON 3种试纸条的胶体金溶液最适p H值分别为7.5、7.5和7.0,金标抗体量分别为4.2、7.2和9.6μg/ml,抗原包被量分别为1.0、1.4和0.8 mg/ml。检测卡的检测结果与仪器检测结果基本一致,重复性较好,与结构类似物及其他霉菌毒素无交叉反应,在室温条件下可以保存12个月。结论该三联检测卡操作简便、快速、准确、稳定,且能同时检测3种真菌毒素,在谷物的现场检测中有较好的应用前景。     

胶体金免疫层析技术在真菌毒素快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术具有快速、简便、特异、敏感等特点, 弥补了真菌毒素传统检测方法的不足, 适用于真菌毒素快速现场筛选。本文主要介绍了胶体金免疫层析技术的原理及其在真菌毒素快速检测中的应用及发展前景。     

胶体金试纸条在豆芽喹诺酮快速检测的应用

目的 研究胶体金免疫层析法检测豆芽中诺氟沙星、氧氟沙星、双氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氟罗沙星、达氟沙星、培氟沙星、洛美沙星和沙拉沙星10种喹诺酮类药物的适用性。方法 取豆芽样品2 g,经5 mL提取液提取、过滤、2倍稀释后,加入至金标微孔孵育,后与试纸条反应。通过比较检测线（T线）与控制线（C线）的颜色深浅判读结果;考察与6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、甲硝唑、尿素、氯吡脲交叉反应;通过真实阳性样品和加标样品考察方法的可靠性。结果 方法检出限可达到5 μg/kg;常规检出水平条件下,6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、甲硝唑、尿素以及氯吡脲等与喹诺酮类药物不发生交叉反应;真实阳性样品和多水平加标样品证实方法可靠。结论 该方法简单快速,对试剂、耗材、人员等要求不高,易于判读,结果准确可靠,适合现场快速检测。