Notch信号通路在肝癌细胞迁移过程中的作用及机制

目的:探讨Notch信号通路在肝癌细胞迁移过程中的作用及相关机制。方法:体外培养肝癌细胞系SMMC-7721、MHCC97H和正常非肿瘤肝细胞系HL-7702,利用Transwell小室检测细胞的迁移能力,Western blot检测Notch1、Snail、E-cadherin、COX-2(环氧化酶-2)蛋白的表达。分别采用5μmol/L DAPT（3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S苯基甘氨酸t-丁酯,γ-分泌酶抑制剂）阻断Notch信号通路和50μmol/L NS-398阻断COX-2,比较对细胞迁移能力的影响以及对肝癌细胞中Snail、E-cadherin表达的影响。结果:Notch1、Snail、E-cadherin、COX-2参与了肝癌细胞迁移过程,DAPT通过阻断Notch显著上调E-cadherin,影响细胞的迁移（P<0.05）,下调Snail和COX-2,NS-398通过阻断COX-2影响细胞的迁移（P<0.05）。结论:Notch信号通路在肝癌细胞迁移过程中起着非常重要的作用,其机制初步认为与Snail、E-cadherin、COX-2的表达有关。     

Notch信号通路调控肿瘤细胞凋亡机制研究进展

Notch信号通路在许多肿瘤细胞中异常表达,因其高表达相关性,表现为原癌或抑癌基因作用。当肿瘤细胞因外部刺激或细胞内信号影响Notch信号表达后,Notch信号通过与其他细胞信号通路的“串扰”,或直接调控凋亡蛋白,从而促进或抑制肿瘤细胞凋亡。本文综述了Notch信号通路促进和抑制肿瘤细胞凋亡及其作用机制,通过Notch信号通路在各种凋亡途径中的不同作用机制,为Notch信号通路抗肿瘤治疗提供理论支持。     

Notch1信号通路调控乳腺癌肿瘤细胞放疗敏感性的机制研究

摘　要：［目的］ 探讨抑制Notch1信号通路对乳腺癌肿瘤细胞放疗敏感性的影响及机制。［方法］ Western blot检测人乳腺癌MCF-7细胞中加入5、10、20μmol/L的Notch1信号通路抑制剂γ分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitor,GSI)后Notch1、Hes1蛋白表达;克隆形成实验检测细胞经GSI和照射处理后增殖情况;后续实验分为对照组、GSI组和GSI+8Gy组,48h后CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测Ki67、Cleaved caspase3蛋白表达。［结果］ 随着GSI的浓度增高,Notch1和Hes1蛋白表达随之降低(P<0.05),且呈剂量依赖性关系。GSI与照射同时处理细胞较单纯用照射有较高的增敏比。GSI组和GSI+8Gy组细胞吸光值均显著性低于对照组(P<0.05),而GSI+8Gy组吸光值显著性低于GSI组(P<0.05),除对照组,GSI组和GSI+8Gy组随着处理时间的延长均明显降低(P<0.05),呈时间依赖性关系。GSI组和GSI+8Gy组细胞凋亡率均显著性高于对照组,GSI+8Gy组细胞凋亡率显著性高于GSI组(P<0.01)。GSI组和GSI+8Gy组Ki67蛋白表达显著性低于对照组(P<0.05),Cleaved caspase3蛋白表达显著性高于对照组(P<0.05),GSI+8Gy组Ki67蛋白表达显著性低于GSI组,Cleaved caspase3蛋白表达显著性高于GSI组(P<0.05)。［结论］ 抑制Notch1信号通路可增强乳腺癌的放疗敏感性。     

Notch信号通路在肿瘤微环境中的调控作用

摘 要：肿瘤细胞与肿瘤微环境（tumor microenvironment,TME）之间通过多种信号通路相互作用,其中Notch信号被认为是重要的信号通路之一。现已证实Notch信号与TME之间的相互作用参与调节肿瘤的血管生成、肿瘤干细胞干性的维持、免疫细胞的浸润和对治疗的抗性。此外,Notch信号还介导许多分子的分泌,影响TME中的细胞功能。大量研究表明,Notch信号在TME中的作用与不同肿瘤中Notch的促癌和抑癌特性有关。该综述讨论了Notch信号在调节TME不同组分之间的相互作用中发挥的重要作用,还从治疗的角度讨论了Notch―TME相互作用的结果。     

Notch信号通路与肿瘤细胞凋亡的研究进展

Notch信号通路是一种生物进化中高度保守的信号转导通路,在多种细胞的增殖、分化和凋亡中起到关键作用.目前Notch信号通路的配体和受体,以及信号转导途径已经基本研究阐明,有关Notch信号通路与肿瘤细胞凋亡的研究也取得了较大的进展.本文综述了Notch信号通路对血液恶性肿瘤和实体肿瘤细胞凋亡的影响及机制的最新研究结果...     

Notch信号通路与乳腺癌

Notch信号传导通路是影响细胞命运决定的重要通路之一,相邻细胞间通过Notch受体传递信号可以调节包括干细胞在内的多种细胞的分化、增殖和凋亡,影响器官形成和形态发生。Notch信号传导通路中某些分子的基因突变与多种肿瘤的发生发展有关。Notch信号在肿瘤中的作用多样,在不同类型肿瘤中呈现出不同的促癌或抑癌功能。在深入研究Notch信号传导通路的基础上,以其作为靶点设计药物。本文综述了Notch信号通路的组成、其激活方式和主要相关分子以及Notch信号通路在乳腺癌中的作用。     

LINC00536负调控Notch信号通路对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨长基因间非蛋白质编码RNA 536(LINC00536)在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用。方法 采用实时荧光定量PCR(q PCR)检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF7的LINC00536水平,向MCF7细胞转染LINC00536干扰序列si-LINC00536或阴性对照序列si-NC后采用q PCR和Western blotting检测Notch1和Hes1的水平。将MCF7细胞分为未转染的对照组、转染si-NC的阴性对照(si-NC)组、干扰LINC00536的si-LINC00536组和LINC00536干扰+Notch激动剂丙戊酸(si-LINC00536+VPA)组。MTT法、伤口愈合实验和Transwell小室实验分别评估细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 MCF7细胞的LINC00536水平高于MCF7细胞(P<0.05)。与未转染和转染si-NC的细胞相比,MCF7细胞转染si-LINC00536后的LINC00536、Notch1和Hes1水平降低(P<0.05)。si-LINC00536组MCF7细胞的增殖活力、划痕愈...     

PRMT7通过调控Notch信号转导通路抑制膀胱癌细胞增殖和迁移

背景与目的：膀胱癌是常见的泌尿系统恶性肿瘤之一,蛋白质精氨酸甲基转移酶7(proteinarginine methyltransferase 7,PRMT7)在消化道肿瘤中的作用已有研究报道,但在膀胱癌中的生物学作用及机制尚未明确,本文旨在探究PRMT7对人膀胱癌细胞增殖和迁移能力的影响及其可能的作用机制。方法：体外培养人膀胱癌细胞系5637、T24、RT112、UM-UC-3和输尿管上皮永生化细胞系SV-HUC-1,采用蛋白质印迹法（Western blot）检测PRMT7的表达情况。采用RNA干扰技术沉默PRMT7基因的表达,设立阴性对照组（si-NC）及实验组（siPRMT7#1、siPRMT7#2）,采用质粒转染法过表达PRMT7基因,设立阴性对照组（p-PCMV3）及实验组（p-PRMT7）。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）及Western blot验证PRMT7的转染效率,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,...     

Notch及Wnt信号通路与子宫内膜癌

Notch信号通路是少数反复调节细胞增殖和凋亡的信号转导系统;Wnt信号通路是一个多环节、多作用位点的生长发育调控信号通路.二条通路的异常激活或结构性活化与子宫内膜癌的发生发展有关,本文就Notch及Wnt信号通路与子宫内膜癌发生发展的研究概况作一综述,为未来子宫内膜癌的治疗提供理论参考.     

Notch信号通路与多发性骨髓瘤发病机制的关系

 Notch信号通路调控机体正常组织器官形态发生、细胞凋亡和增殖等生理过程,是造血微环境调节造血细胞增殖与分化的重要信号通路。多发性骨髓瘤(MM)的发生、发展与骨髓微环境密切相关,有多种信号通路参与。新近研究发现Notch信号通路参与包括MM在内的多种肿瘤的发生发展,且是影响肿瘤侵袭、耐药的关键因素,为多发性骨髓瘤治疗的新靶点。     

HECA通过Wnt通路抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:拟在通过影响肝细胞癌HepG2细胞株中HECA基因表达变化,观察与HECA基因相关联的Wnt通路上重要调节分子的变化,讨论此通路影响肝癌细胞增殖能力状况及其相关作用机理。方法:HECA慢病毒感染肝癌细胞株HepG2,细胞株中稳定上调HECA,用HECA siRNA转染HepG2细胞株下调HECA,在HECA表达上调的细胞株中用qPCR检测Wnt通路中β-catenin、TCF4、CDK2、CDK9、Cyclin A和Cyclin K的mRNA表达水平的变化,用Western blot检测qPCR结果中差异明显的β-catenin、TCF4蛋白表达水平的变化,应用FH535抑制剂处理HECA过表达的HepG2细胞,进一步验证HECA基因与Wnt通路的关系,利用Western blot检测HECA的表达水平,用MTT、划痕、克隆形成以及Transwell实验检测对肝癌细胞侵袭、迁移、增殖能力的影响。结果:qPCR法以及Western blot法对其相关基因表达水平进行测定,结果显示在HepG2细胞株内HECA过表达后,与HECA相关联的Wnt通路重要调节分子中β-catenin、TCF4的表达水平显著降低;FH535抑制剂处理HECA过表达的HepG2细胞,Western blot实验结果显示FH535处理过的过表达组HECA水平更高,细胞功能实验也表明FH535处理过的过表达HECA组,其细胞增殖及侵袭能力下降最明显。结论:HECA基因抑制肝细胞癌增殖及侵袭的分子机制可能为:HECA通过Wnt/β-catenin这一经典通路内β-catenin与TCF4的结合活性降低而发挥作用。     

TQ inhibits hepatocellular carcinoma growth in vitro and in vivo via repression of Notch signaling

Thymoquinone (TQ) has been reported to possess anti-tumor activity in various types of cancer. However, its effects and molecular mechanism of action in hepatocellular carcinoma (HCC) are still not completely understood. We observed that TQ inhibited tumor cell growth in vitro, where treatment with TQ arrested the cell cycle in G1 by upregulating p21 and downregulating cyclinD1 and CDK2 expression; moreover, TQ induced apoptosis by decreasing expression of Bcl-2 and increasing expression of Bax. Simultaneously, TQ demonstrated a suppressive impact on the Notch pathway, where overexpression of NICD1 reversed the inhibitory effect of TQ on cell proliferation, thereby attenuating the repressive effects of TQ on the Notch pathway, cyclinD1, CDK2 and Bcl-2, and also diminishing upregulation of p21 and Bax. In a xenograft model, TQ inhibited HCC growth in nude mice; this inhibitory effect in vivo, as well as of HCC cell growth in vitro, was associated with a discernible decline in NICD1 and Bcl-2 levels and a dramatic rise in p21 expression. In conclusion, TQ inhibits HCC cell growth by inducing cell cycle arrest and apoptosis, achieving these effects by repression of the Notch signaling pathway, suggesting that TQ represents a potential preventive or therapeutic agent in HCC patients.     

miR-124通过调节Jagged1/Notch信号通路影响肾细胞癌OS-RC-2细胞的恶性生物学行为

目的：探讨miR-124通过调节Jagged1(JAG1)/Notch信号通路对肾细胞癌(RCC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法：收集2018年6月至2021年10月在武汉市第三医院治疗的38例RCC患者的RCC组织和癌旁组织标本,并体外培养RCC细胞(Caki-2、A498、ACHN、786-O、OS-RC-2)和人正常肾细胞(293T),采用免疫组织化学法、qPCR和WB法检测miR-124和JAG1蛋白在RCC组织和细胞中的表达水平。选择miR-124表达与293T细胞差异最大的OS-RC-2细胞进行转染,按转染物不同分为Control组、NC mimic组、miR-124 mimic组、miR-124 mimic+pcDNA组和miR-124 mimic+pc-JAG1组。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-124与JAG1的关系;q PCR法检测miR-124、JAG1 mRNA表达;免疫组化法分析JAG1蛋白表达;WB法检测JAG1、凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3、BAX和Bcl2)和Notch信号通路相关蛋白(NICD、HES1和HES5)的表...     

Notch信号转导通路与乳腺癌靶向治疗

Notch信号转导通路参与调控细胞增生、分化及凋亡.异常的Notch信号转导通路可以诱导转基因鼠乳腺癌的发生,而在乳腺癌患者中,高表达Notch受体和(或)配体则与预后不良相关,因此靶向抑制Notch信号转导通路可能对乳腺癌治疗有益.     

敲低Plk1对人肝癌血管内皮细胞迁移影响研究

目的研究人Polo样激酶1(polo-like kinase 1,Plk1)在人肝癌血管内皮细胞(human hepatocellular carcinoma tumor-derived endothelial cell,TEC)迁移过程中的作用。方法用含有20%胎牛血清的RPMI1640培养基培养TEC细胞,合成Plk1和阴性对照小干扰片段。实验设置Plk1siRNA处理组和siRNA阴性组(对照组)。分别用Plk1siRNA和阴性对照siRNA转染TEC,采用蛋白质印迹法验证Plk1siRNA干扰能否有效降低TEC细胞的Plk1蛋白表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验评估Plk1siRNA转染后TEC迁移能力的变化。结果蛋白质印迹法检测结果显示,Plk1siRNA转染后TEC细胞中Plk1蛋白表达降低。Transwell细胞迁移实验发现,Plk1siRNA处理组12h穿膜细胞数为130.9±23.0,低于siRNA阴性组的184.9±26.6,t=-5.943,P<0.001。细胞划痕实验显示,Plk1siRNA处理组细胞12h迁移距离为(17.5±7.0)像素,低于siRNA阴性组的(72.6±12.4)像素,t=-6.698,P=0.006;Plk1siRNA处理组细胞24h迁移距离为(70.9±6.9)像素,低于siRNA阴性组的(137.9±18.9)像素,t=-5.761,P=0.016。结论敲低Plk1能显著抑制人肝癌血管内皮细胞的迁移能力,提示Plk1可能在人肝癌血管内皮细胞转移中具有一定作用。     

牛蒡子苷元调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的：探究牛蒡子苷元（ARC）通过调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌（OSCC）HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制。方法：使用不同质量浓度的ARC处理人HSC-3细胞,CCK-8法检测ARC对细胞增殖活力的影响,以选择适宜的药物浓度。将HSC-3细胞分为对照组、ARC-L组（10 mg/L ARC）、ARC-M组（20 mg/L ARC）、ARC-H组（40 mg/L ARC）和ARC-H+Jagged1/FC组（40 mg/L ARC+1.2μg/mL Jagged1/FC）。采用EdU法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞的迁移、侵袭能力及细胞周期和细胞凋亡率,WB法检测增殖（c-Myc、cyclin D1）、凋亡（BAX、Bcl-2、survivin）、EMT(E-cadherin、vimentin、Snail)及Notch/Hes-1通路（Notch 1、Hes-1、NICD）相关蛋白的表达水平。结果：与0 mg/L相比,10～80 mg/L的ARC均能显著降低HSC-3细胞增殖活力（均P<0.05）。与...