中药益髓生血颗粒对β-珠蛋白生成障碍性贫血患儿基因表达的影响

目的探讨益髓生血颗粒治疗β-珠蛋白生成障碍性贫血的作用机制。方法观察20例患儿治疗前后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、网织红细胞计数(Ret)和胎儿血红蛋白(HbF)的改变;选取3例有效病例。通过mRNA差异显示技术(DDRT—PCR)研究益髓生血颗粒对β-珠蛋白生成障碍性贫血患儿骨髓有核细胞的基因表达差异。结果与治疗前比较治疗后患儿各项血液学参数均有提高(P<0．05或P<0．01);患儿骨髓有核细胞的铁蛋白基因表达明显降低。结论益髓生血颗粒可以改善患儿的临床症状,明显降低患儿铁蛋白基因的表达,有效缓解患儿体内铁的蓄积,这可能是益髓生血颗粒治疗本病的分子机制之一。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓单个核细胞c-kitm RNA及CD117表达的影响。方法:分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及流式细胞技术检测CAA病人治疗前后骨髓单个核细胞c-kitm RNA及CD117水平的变化。结果:CAA患者骨髓c-kitm RNA及其CD117表达水平高于正常对照组,治疗后二者表达水平均有不同程度下降,并且补髓生血颗粒对二者表达水平的下调程度优于再障生血片对照组(P<0.05)。结论:CAA患者骨髓c-kitm RNA及CD117的表达存在异常;补髓生血颗粒剂可能通过调节骨髓c-kitm RNA及CD117的表达来改善CAA的骨髓造血功能,促进骨髓造血功能恢复。     

益髓生血方治疗慢性再生障碍性贫血的临床研究

目的 :探讨益髓生血方治疗慢性再生障碍性贫血 (CAA )的临床疗效及作用机制。方法 :将 6 0例 CAA患者随机分为两组 ,观察组 30例用益髓生血方加西药治疗 ,对照组 30例单用西药治疗。观察临床疗效并于治疗前后检测血浆 s Fas、s Fas L水平。结果 :观察组总有效率 86 .7% ,对照组为 6 3.3% ,两组总有效率比较差异有显著性(P<0 .0 5 ) ,观察组治疗后 s Fas水平较治疗前明显升高 (P<0 .0 1) ,与对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 1) ,两组s Fas L治疗前后与健康组比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :益髓生血方治疗 CAA疗效高、不良反应少。其作用机制可能是通过升高 s Fas水平从而与 Fas分子竞争结合 Fas L ,阻断了 Fas介导的细胞凋亡     

益髓生血颗粒加味对地中海贫血患者肾虚三证造血相关细胞因子的影响

目的:初步了解益髓生血颗粒加味对肾虚三证地中海贫血患者造血相关细胞因子的影响。方法:收集符合西医诊断标准的地中海贫血患者28例,按照中医辨证分型标准分为肾精不足证组(10例),肾阳虚组(7例),肾阴虚组(11例)。肾精不足证的地中海贫血患者服用益髓生血颗粒,肾阳虚证的地中海贫血患者服用益髓生血颗粒加味淫羊藿,肾阴虚证的地中海贫血患者服用益髓生血颗粒加味女贞子,疗程分别为3个月。检测治疗前后地中海贫血患者血清细胞因子(IL-1、IL-2、γ-INF、TNF-β)水平的变化。结果:肾精不足证、肾阴虚组的地中海贫血患者分别经经益髓生血颗粒及益髓生血颗粒加味女贞子治疗后,患者IL-1水平与疗前相比显著升高(P<0.05);γ-INF的水平显著降低(P<0.05);IL-2、TNF-β水平与疗前相比,有降低的趋势,但无统计学意义(P>0.05)。肾阳虚证的地贫患者经益髓生血颗粒加味淫羊藿治疗后,患者γ-INF、TNF-β、IL-2水平与疗前相比有降低的趋势,IL-1水平与疗前相比有升高的趋势,但均无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾益髓法益髓生血颗粒加味改善地中海贫血患者肾虚三证患者的临床症状,可能与上调造血正调控细胞因子IL-1水平,下调造血负调控细胞因子IL-2、TNF-β、γ-INF水平有关,其客观规律仍需要进一步临床试验进行验证。     

补髓生血颗粒对再生障碍性贫血大鼠造血祖细胞的影响

目的:观察补髓生血颗粒对再生障碍性贫血模型大鼠造血祖细胞增殖的影响。方法:Wistar大鼠经60Co-γ射线8.0Gy照射造成再障模型,分别给予再障生血片及低、中、高剂量补髓生血颗粒,连续给药3周后,采用甲基纤维素半固体集落培养方法培养骨髓红细胞集落形成单位(CFU-E)、粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM),观察补髓生血颗粒对再障模型大鼠造血祖细胞集落形成的影响。结论:补髓生血颗粒可刺激造血祖细胞的增殖,促进再障大鼠骨髓CFU-E、CFU-GM集落的形成,对再障大鼠骨髓抑制状态有显著改善作用。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者Th17细胞的影响

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者外周血中RBC、WBC、PLT数量及Th17细胞表达的影响。方法:将63例CAA患者随机分为试验组(33例)、对照组(30例),同时选取健康人10例作为正常对照组,其中试验组给予口服补髓生血颗粒,对照组给予口服再造生血片,观察周期为半年;采用血细胞分析仪检测RBC、WBC、PLT数量,采用流式细胞仪检测法分别对试验组、对照组CAA患者治疗前后外周血中Th17细胞表达水平进行对比,两组治疗后细胞表达水平分别与正常对照组进行对比。结果:试验组与对照组治疗前后比较,使外周血中血红蛋白数量、白细胞数量及血小板得到显著提升,显著降低了Th17细胞的表达水平(均为P0.01);治疗后试验组在升高白细胞总数及血小板数量与对照组相当(P0.05);治疗后试验组在升高血红蛋白数量上优于对照组(P0.05);治疗后试验组在降低Th17细胞的表达水平上优于对照组(P0.05)。结论:1补髓生血颗粒在升高外周血血红蛋白数量上优于再造生血片。2补髓生血颗粒在降低外周血Th17细胞的表达水平上优于再造生血片,Th17细胞可能参与了CAA的发病。     

基于“肾藏精生髓”理论治疗地中海贫血

探讨中药治疗地中海贫血的证治规律,总结近20年的临床实践,提出中医治疗地中海贫血的理论基础、中医的核心病机和治则治法以及针对核心病机辨证治疗的可行性。     

益髓生血颗粒治疗地中海贫血的前瞻性研究

目的评价益髓生血颗粒治疗地中海贫血的临床疗效。方法采用自身前后对照前瞻性研究方法,对36例地中海贫血患者(HbH病25例、β-地中海贫血11例)给予两个阶段的治疗,第一阶段服用安慰剂,第二阶段服用益髓生血颗粒,两阶段分别服药12周,阶段之间设4周的洗脱期。检测两阶段治疗前后的血液指标[血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、胎儿血红蛋白(HbF)、血红蛋白H(HbH)]和中医证候评分,并观察两个阶段治疗的有效率。结果 36例地中海贫血患者经益髓生血颗粒治疗后有效率为83.33%,优于安慰剂阶段的19.44%(P0.01),治疗后患者Hb升高水平明显优于安慰剂阶段(P0.05);HbH病患者经益髓生血颗粒治疗后有效率为96.00%,优于安慰剂阶段的24.00%(P0.01);β-地中海贫血患者经益髓生血颗粒治疗后有效率为54.55%与安慰剂阶段的9.09%差异无统计学意义(P0.05)。HbH病患者经益髓生血颗粒治疗后,心悸、气短、眩晕、咽干、潮热盗汗、面色萎黄的中医证候评分与治疗前相比明显降低,β-地中海贫血患者经益髓生血颗粒治疗后,气短、眩晕、咽干、潮热盗汗中医证候评分与治疗前比较亦降低(P0.05或P0.01)。结论益髓生血颗粒可有效改善地中海贫血患者的临床症状与血液参数,对HbH病、β-地中海贫血均有效,并且HbH病的临床疗效优于β-地中海贫血。     

益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血小鼠造血功能及T细胞亚群的影响

目的:研究益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠造血及免疫功能的影响。方法:72只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AA模型组、益血生髓颗粒低剂量组(低剂量组)、益血生髓颗粒高剂量组(高剂量组)和司坦唑醇阳性药组(阳性对照组),除正常对照组其他各组小鼠注射苯和玉米油混合液2 ml/kg,每周4次,建立AA模型,正常组注射同体积玉米油,7周后,低剂量组用药1.2 g/(kg·d),高剂量组用药4.8 g/(kg·d),阳性对照药组予司坦唑醇2 mg/(kg·d),连续给药15 d后,检测血细胞(WBC、RBC、HGB、PLT)、骨髓有核细胞数(BMNC)、T淋巴细胞亚群(CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、Th₁、Th₂)、血清白介素2(IL-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和HE染色骨髓病理学的变化情况。结果:与AA模型组比较,低、高剂量组和阳性对照组小鼠外周血四种血细胞数量、血清M-CSF、CD3⁺CD4⁺T和CD4⁺/CD8⁺比值升高(P<0.05),CD3⁺CD8⁺T、IL-2水平和Th₂细胞百分数降低(P<0.05),骨髓病理学显示骨髓组织增生较模型组活跃,造血细胞增多,非造血细胞减少。结论:益血生髓颗粒可通过对AA小鼠T细胞亚群的免疫调节和促进造血细胞增殖达到一定恢复造血功能的作用。     

补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞c-kit、CxCR4受体表达的影响

目的 :探讨补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者骨髓造血祖细胞c -kit、CXCR4受体表达水平的影响。方法 :采用免疫荧光法及流式细胞技术分别对使用该颗粒剂治疗前后的CAA患者骨髓造血祖细胞c-kit、CXCR4 受体表达水平进行检测 ,并与再障生血片对照组及正常组作比较研究。结果 :补髓生血颗粒剂组临床疗效与再障生血片组疗效存在显著差异(P <0 .0 5 ) ;两组疗前c -kit受体表达高于正常组 ,治疗后均表达下调 ;补髓生血颗粒剂组治疗后CXCR4 受体表达与再障生血片组存显著性差异(P <0 .0 5 )。结论 :慢性再障骨髓造血衰竭并非c -kit受体低表达所致 ;补髓生血颗粒剂在临床疗效与CXCR4 受体表达上调作用上优于再障生血片组 ,提示补髓生血颗粒剂通过提高造血祖细胞增殖分化与黏附归巢能力而刺激造血     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓NF-KB/p65表达的影响

目的 观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中NF-kB磷酸化表达水平的影响,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制.方法 40例CAA患者给予补髓生血颗粒治疗6个月,采用蛋白质印迹方法( Western-blot)观察CAA患者骨髓单个核细胞中NF-KB/p65的表达水平.结果 治疗前CAA患者骨髓单个核细胞NF-kB/P65表达水平低于正常对照组(P＜0.05),经补髓生血颗粒治疗后,NF-kB/P65表达有所上升,与治疗前相比具有显著性差异(P＜0.05).结论 CAA患者骨髓单个核细胞中的NF-kB/p65呈低水平表达,NF-kB/p65的异常表达可能参与CAA的发病机制过程,从而引起骨髓造血信号转导的异常.补髓生血颗粒可能通过调节NF-kB/p65的表达来改善CAA骨髓造血微环境.     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血细胞黏附作用影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)患者骨髓造血细胞相关黏附分子表达水平的影响.方法:采用免疫荧光法及流式细胞技术分别对使用该颗粒治疗前后的CAA患者骨髓造血干(祖)细胞受体c-kit、CXCR4、骨髓基质细胞的淋巴细胞归巢受体(HCAM/CD44)、细胞间黏附分子(ICAM-1/CD54)表达进行检测,并与再障生血片对照组(简称对照组)及正常组做比较研究.结果:两组患者治疗前c-kit/CD117表达明显高于正常组,而CXCR4、HCAM/CD44、ICAM-1/CD54水平明显低于正常组,治疗后两组患者CXCR4、HCAM/CD44、ICAM-1/CD54表达均有所升高,并且补髓生血颗粒实验组(简称实验组)CXCR4水平优于对照组,治疗后c-kit/CD117与正常组比较无显著差异,亦优于对照组.结论:CAA患者骨髓造血干(祖)细胞受体c-kit、CXCR4、骨髓基质细胞HCAM/CD44、ICAM-1/CD54表达异常,补髓生血颗粒可能是通过提高CXCR4、HCAM/CD44、ICAM-1/CD54的表达以及降低c-kit/CD117的表达而促进骨髓造血的.     

补髓生血颗粒对再生障碍性贫血模型大鼠外周血细胞影响的实验研究

目的:观察补髓生血颗粒对再障模型大鼠的血常规和网织红细胞的影响扣作用.方法:建立再生障碍性贫血的大鼠模型,观察补髓生血颗粒对其血常规和网织红细胞的影响.结果:补髓生血颗粒能够明显升高模型大鼠的白细胞、红细胞、血红蛋白和网织红细胞,且优于再障生血片对照组.结论:补髓生血颗粒能够提高再生障碍性贫血模型大鼠的外周血细胞数量,对再生障碍性贫血具有肯定的治疗作用.     

补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血的临床研究

目的：观察补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血（CAA）的临床疗效。方法：将58例CAA患者随机分为补髓生血颗粒观察组和再障生血片对照组,观察治疗前后外周血象和骨髓象的变化。结果：治疗组总有效率为73.33%,优于对照组的60.71%（P〈0.05）。提示补髓生颗粒疗效明显优于再障生血片。结论：补髓生血颗粒是治疗CAA的有效药物。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓NF-κΒ/p65表达的影响

目的：观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ磷酸化表达水平的影响,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法：40例CAA患者给予补髓生血颗粒治疗6个月,采用蛋白质印迹方法（Western-blot）观察CAA患者骨髓单个核细胞中NF-κΒ/p65的表达水平。结果：治疗前CAA患者骨髓单个核细胞NF-κΒ/P65表达水平低于正常对照组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,NF-κΒ/P65表达有所上升,与治疗前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓单个核细胞中的NF-κΒ/p65呈低水平表达,NF-κΒ/p65的异常表达可能参与CAA的发病机制过程,从而引起骨髓造血信号转导的异常。补髓生血颗粒可能通过调节NF-κΒ/p65的表达来改善CAA骨髓造血微环境。     

益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血患者自身对照比较研究

目的 观察补肾益髓法的代表方益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血临床效果。方法以高发区患者为观察对象，采用自身对照方法，30例重型、中间型β-地中海贫血患者先口服安慰剂再口服益髓生血颗粒，疗程均为3个月。观察服药前后患者临床症状、中医证候变化，并做血液指标血红蛋白（Hb）、红细胞（RBC）、胎儿血红蛋白（Ret）、网织红细胞（HbF）动态检测；中医临床证候表现按评分量表观察，记录不良反应。结果 患者自服安慰剂1个月至疗程结束，主要疗效性指标Hb、RBC均无升高，Hb在口服安慰剂第1个月有明显降低（P〈0．05），而改服益髓生血颗粒自第1个月起至疗程结束患者Hb、RBC与服安慰剂第3个月比均有非常明显提高（P〈0．001）；中医临床证候量表统计分析显示：口服安慰剂3个月后，患者临床中医证状无任何改善；经益髓生血颗粒治疗3个月后，患者除“面色萎黄”一项无明显改善外，“头晕目眩”、“心悸”、“气短”、“食少纳呆”、“倦怠乏力”等症状均有明显改善（P〈O．05）；无任何不良反应。结论患者服安慰剂后改服益髓生血颗粒3个月后，血液指标Hb、RBC、Ret、HbF与服安慰荆第3个月比均有非常明显提高。两个阶段β-地中海贫血患者疗效比较有非常显著性差异。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓AKT磷酸化水平的影响

目的：观察补髓生血颗粒对CAA患者骨髓单个核细胞中AKT磷酸化水平变化,探讨补髓生血颗粒治疗CAA的作用机制。方法：将30例CAA患者予以补髓生血颗粒治疗6个月,另取28例健康志愿者作为正常对照组。采用蛋白质印迹方法（Western-blot）观察CAA患者治疗前后骨髓单个核细胞中pAKT-Ty308的表达水平。结果：CAA患者治疗前骨髓单个核细胞pAKT-Ty308的表达低于正常对照组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,pAKT-Ty308的表达有所上升,与治疗前比较有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓单个核细胞PAKT-Ty308的水平均呈低水平表达,提示pAKT与CAA发病密切相关,补髓生血颗粒可能通过调节PAKT-Ty308的表达来改善CAA骨髓造血微环境。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓基质细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体的影响

目的观察补髓生血颗粒对治疗慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)患者的临床疗效及骨髓基质细胞相关细胞因子的影响。方法将124例CAA患者按随机数字表法分为两组,试验组(61例)使用补髓生血颗粒治疗,对照组(63例)使用再造生血片治疗,疗程均为6个月,并设立10名健康人作为正常对照组。观察患者治疗前后症状积分、疗效判定与外周血象的变化,采用RT-PCR法检测CAA患者治疗前后骨髓基质细胞中碱性成纤维细胞生长因子(b-fibroblast growth factors,bFGF)及碱性成纤维细胞生长因子受体(b-fibroblast growth factors receptor,bFGFR)信使RNA(messenger RNA,mRNA)表达变化。结果试验组总有效率(75.0%,45/61)明显优于对照组(58.7%,37/63),其症状积分及外周血象明显改善,也明显优于对照组(P<0.05)。CAA患者骨髓基质细胞bFGF及bFGFRmRNA表达水平较正常对照组明显降低(P<0.05),治疗后两组bFGF与bFGFRmRNA表达水平均有所提高(P<0.05,P<0.01),且试验组优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论补髓生血颗粒具有较好的临床疗效,能改善CAA患者症状积分以及外周血象,提高临床疗效,且对细胞因子bFGF与bFGFRmRNA表达水平有调节作用,通过调控CAA骨髓基质细胞的增殖和定向分化以及促进骨髓新生血管的形成改善了造血微环境,促进骨髓造血功能的恢复。     

益髓生血颗粒对β-地中海贫血患者SCF及EPOR mRNA表达的影响

目的 :探讨益髓生血颗粒对造血刺激因子SCF及受体EPOR的mRNA表达的影响 ,以阐述益髓生血颗粒的疗效机制及中医肾益髓生血的分子基础。方法 :收集、观察临床资料 ,并于治疗前、给药 4、8、12周分别记录和常规血检 1次。于治疗前和治疗后现场取样 ,采用RT -PCR法检测造血刺激因子SCF及EPORmRNA表达。结果 :治疗后 ,外周血EPOR、SCFmRNA表达明显增强 ,电泳带明显变亮。结论 :益髓生血颗粒可能是通过影响造血刺激因子SCF以及EPORmBNA表达来促进骨髓造血 ,提高Hb、RBC的水平 ,达到治疗 β -地中海贫血的目的 ;造血刺激因子SCF以及EPORmRNA表达的变化 ,为中医肾藏精、主骨、生髓理论提供了分子基础