广东地区慢性丙型肝炎患者IL28B基因多态性与抗病毒疗效的关系

目的 研究广东地区慢性丙型肝炎患者（CHC）白细胞介素28B（IL28B）基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）的分布特点及其与抗病毒疗效之间的关系,为合理选择经济有效的个体化抗病毒治疗方案提供依据,提高CHC的治疗应答率.方法 对74例CHC患者给予聚乙二醇干扰素（PEG-IFN）联合利巴韦林（RBV）抗病毒治疗,疗程48周或72周,停药后随访24周.通过PCR测序,检测所有患者的IL28B（rs8099917、rs12979860、rs12980275）位点SNP,以快速病毒学应答率（RVR）及持续病毒学应答率（SVR）作为疗效的主要评价指标,比较IL28B不同基因型与抗病毒疗效的关系,评估IL28 BSNP在CHC患者治疗应答中的作用.结果 74例患者中,rs8099917位点基因型为TT、TG、GG各63（85.1％）、11（14.9％）、0（0％）例,rs12979860位点基因型为CC、CT、TT各60（81.1％）、14（18.9％）、0（0％）例,rs12980275位点基因型为AA、AG、GG各57 （77.0％）、17（23.0％）、0（0％）例.对HCV 1型患者,上述三个位点中仅rs12979860 CC型与SVR有关,结果有统计学差异（SVR组vs NonSVR组,88.4％ vs 58.3％,P＜0.05）;对非HCV1型患者,rs8099917、rs12979860、rs12980275三个位点与RVR和SVR无关,结果无统计学差异（P＞0.05）.结论 广东地区CHC患者IL28B基因rs8099917、rs12979860、rs12980275位点分别以TT、CC、AA为主;对于HCV 1型CHC患者,rs12979860位点的基因型可以作为治疗前SVR的一个重要预测因子.     

IL-28B基因多态性与丙型肝炎相关性研究进展

白细胞介素-28 B(Interleukin-28B,IL-28 B)属于Ⅲ型干扰素家族,是一种新型的白细胞介素.它通过活化JAK- STAT信号通路,调节干扰素刺激基因转录,发挥抗病毒等生物学效应.新近研究发现,IL-28B基因多态性与丙型病毒性肝炎的发病、抗病毒治疗应答和疾病转归等密切相关.因此,通过对二者相关性的研究,可能有助于临床医师更合理的选择丙型肝炎的治疗措施、开展个性化治疗、及早判断患者的预后.     

慢性乙型肝炎患者血清IL-17、IL-6水平研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清白细胞介素-17（IL-17）水平变化及其在慢性肝炎肝损伤中的意义.方法 采用ELISA方法检测42例慢性轻度乙肝患者、37例慢性中度乙肝患者、38例慢性重度乙肝患者及50例正常对者血清IL-17浓度,采用放射免疫方法测定血清IL-6、IL-8浓度.结果 IL-17、IL-6、IL-8水平在各组乙肝患者血清中均高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）,慢性轻度乙肝患者与中度患者相比,差异无统计学意义,慢性重度患者与轻、中度患者相比明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 IL-17可能在慢性乙型肝炎的疾病过程中扮演着免疫与炎症的双重角色,作为一种新近发现的细胞因子,它可能在临床上对乙肝患者的治疗提供一种新的思路.     

IL-28B基因多态性与丙型肝炎自然转归的相关性研究

目的:探讨IL-28B单核苷酸多态性与丙型肝炎病毒(HCV)感染自然转归的相关性。方法:采用Sanger基因测序法检测广州地区无偿献血人群中266名HCV感染者(107名自发清除者和159名慢性感染者)和97名健康献血者IL-28B rs12979860位点基因型和等位基因,并统计分析其在HCV感染者与健康献血者,HCV慢性感染者与健康献血者,HCV自发清除者与慢性感染者中的分布差异。结果:159名HCV慢性感染者,107名自发清除HCV者和97名健康献血者多表现为CC基因型,分别占83.6%、95.3%和86.6%,CT基因型分别占16.4%、4.7%和13.4%,未发现TT基因型。HCV感染者和健康献血者,HCV慢性感染者和健康献血者CC/CT基因型分布差异均无统计学意义(χ2=0.204,P=0.652;χ2=0.406,P=0.524),但在HCV慢性感染者和自发清除HCV者中CC/CT基因型分布差异有统计学意义(χ2=8.474,P=0.004),自发清除组中CC基因型比率高于慢性感染组,自发清除组C等位基因的频率高于慢性感染组(χ2=7.949,P=0.005)。结论:在广州献血人群中,IL-28B rs12979860基因多态性与HCV的易感性不相关,但与HCV感染的自发清除相关,表现为C等位基因有利于丙型肝炎病毒(HCV)的自发清除。     

血清HBeAg定量变化与慢性乙型肝炎治疗应答的相关性研究

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗过程中血清HBeAg定量动态变化对治疗应答的预测价值.方法 对接受α-干扰紊(α-IFN)治疗的53例患者和核苷类似物(NA)治疗的70例患者,采用电化学发光免疫分析法( ECLIA)测定治疗前、治疗后12、24、48周时血清HBeAg定量,并分析血清HBeAg动态定量与治疗应答相关性.结果 干扰素或核苷类似物治疗48周,完全应答者与非完全应答者血清HBeAg基线水平差异无统计学意义(P＞0.05),而治疗12、24周血清HBeAg水平及下降幅度差异有统计学意义(P＜0.05).治疗24周血清HBeAg定量水平＜100U/ml、下降幅度＞90％的患者完全应答率高(P＜0.05).结论 α-干扰素或核苷类似物治疗慢性乙型肝炎过程中,血清HBeAg定量的动态变化对治疗应答有一定的预测价值.     

慢性丙型肝炎患者氧化损伤的研究

目的 探讨慢性丙型肝炎(CHC)患者体内氧化损伤的情况.方法 52例CHC患者,按丙氨酸转氨酶(ALT)水平分为A组(ALT上升组)和B组(ALT正常组).正常对照组为20例健康志愿者.利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定研究对象血清黄嘌呤氧化酶(XOD),丙二醛(MDA),氧化型谷胱甘肽(GSSG),谷胱甘肽(GSH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),谷胱甘肽巯基转移酶(GST),谷胱甘肽还原酶(GR)及维生素C(Vc)水平,并作出统计分析.结果 CHC患者血清XOD,MDA,GST和GR水平较正常对照组显著升高,而GSH,GSH-Px和Vc水平则明显降低.同时,A组患者血清XOD,MDA,GSSG,GST及GR水平较B组患者显著上调,而GSH,GSH-Px和Vc水平则显著下调.在CHC患者中,血清XOD,MDA,GSSG,GST水平与ALT水平呈正相关,血清GSH,GSH-Px,Vc与ALT水平呈负相关;血清XOD,MDA,GSSG,GR,GST水平与AST水平呈正相关,血清GSH-Px水平与AST水平呈负相关;血清GR水平与GGT水平呈正相关,血清GSH水平与GGT水平呈负相关;血清MDA,GR水平与AKP水平呈正相关.在CHC组中,仅血清XOD水平与血清HCV RNA水平间存在正相关关系.结论 CHC患者体内存在一定程度的氧化损伤,随血清ALT水平的升高,机体氧化损伤程度进一步加重.     

IL-12对慢性丙型肝炎病毒感染者淋巴细胞增殖的影响

目的：观察重组人白细胞介素１２（ｒｈＩＬ－１２）对慢性丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者淋巴细胞增殖的影响。方法：外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分别与植物血浆凝素（ＰＨＡＳ）,ＨＣＶ抗的ｅ２２,ｅ１００－３、ｒｈＩＬ－１２和抗ＩＬ－１２抗体孵育５天后,加入胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）,然后收集细胞于液闪仪测定每分钟脉冲数（ｃｐｍ）。结果：不论是健康对照者（Ｐ〈０．０２５）,抑或慢性ＨＣＶ感染者（Ｐ〈０．     

慢性丙型肝炎干扰素治疗失败患者的干扰素再治疗研究

目的探讨慢性丙型肝炎干扰素治疗失败患者的再治疗获得持续病毒学应答（SVR）的方案。方法回顾54例慢性丙型肝炎干扰素治疗失败患者所采用的PEG—IFNα联合利巴韦林标准治疗或强化方案再治疗方案,比较SVR率的差异并进行统计学分析,讨论标准治疗或强化方案的适用人群。结果54例慢性丙型肝炎干扰素治疗失败患者,再治疗后SVR率可达75．92％。其中复发者再次治疗SVR率为88．46％,无应答者再治疗SVR率64．29％。在初始普通干扰素治疗失败组、普通干扰素联合利巴韦林失败组、单用PEG—IFNα-2a失败组,再治疗后SVR率分别为95．45％、64．71％、60％。初治复发患者再治疗SVR率明显高于初治无应答患者。结论初治失败的慢性丙型肝炎患者选择标准或强化方案再治疗仍可获得60％～90％的SVR率。初始治疗单用普通干扰素失败或普通干扰素联合利巴韦林治疗复发患者可选择标准方案再治疗;初始治疗采用普通干扰素联合利巴韦林治疗无应答、单用PEG-IFNα-2a无应答及初始治疗选用标准治疗失败患者需选择强化方案再治疗。     

慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗前PBMC细胞因子的研究

目的 研究准备抗病毒治疗的慢性丙型肝炎患者的免疫特点.方法 将30例慢性丙型肝炎患者和10例正常对照外周血单个核细胞(PBMC)体外培养72 h后,用ELISA法检测培养上清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、IFN-γ和TNF-α的浓度.结果 (1)慢性丙型肝炎患者PBMC培养上清中IFN-γ、IL-10和TNF-α的水平明显升高(P＜0.05),没有检测到IL-2、IL-4、IL-12的基础分泌.(2)不同病情患者间的细胞因子的分泌水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 慢性丙型肝炎患者体内TH2型细胞因子的分泌占优势.提示通过调整TH1/TH2失衡可能达到抗病毒治疗目的.     

基于扩增阻碍突变系统实时荧光PCR的IL28B基因SNP位点联合检测方法的建立

目的 建立基于扩增阻碍突变系统和实时荧光定量PCR相结合的IL28B基因多SNP位点联合检测方法,为进一步研究丙型肝炎患者抗病毒治疗效果提供技术平台.方法 分别构建包含IL28B基因的rs12979860和rs8099917两个SNP位点的野生型和突变型质粒标准品;采用ARMS技术,结合Taqman探针技术,建立能够同时检测上述两个SNP位点的实时荧光ARMS-PCR方法.然后采用本方法检测60例丙型肝炎住院患者血清标本并以基因测序结果为金标准进行方法学评价.结果 实时荧光ARMS-PCR能够有效的鉴别rs 12979860位点的CC、CT、TT基因型和rs8099917位点的TT、TG和GG基因型,通过和测序结果进行比对,二者符合率为100％ （P ＜0.05）.结论 本研究建立的双重实时荧光ARMS-PCR能够快速可靠的对IL28B的rs12979860和rs8099917位点进行基因型多态性的联合检测,为慢性丙型肝炎患者实现个体化治疗奠定基础.     

丙型肝炎病毒血清型对慢性丙型肝炎干扰素抗病毒疗效影响的研究

目的研究丙型肝炎病毒血清型对慢性丙型肝炎于扰素抗病毒疗效的影响。方法对慢性丙型肝炎患者的血清进行ALT检测，采用Cobas amplicor monitor test，version 2．0（v2．0）试剂进行HCVRNA定量和Abbott公司的Murex HCV Serotyping 1-6 Assay试剂进行HCV血清学分型检测。对慢性丙型肝炎患者进行聚乙二醇于扰素a-2a（派罗欣）与罗荛愫（Roferon—A）治疗24周和24周随访结束的生化指标和病毒学应答进行观察，分析不同HCV血清型患者在抗病毒治疗后生化和病毒学应答的差异。结果98例患者共检出血清6型2例、5型1例、4型1例、3型10例、2型23例和1型44例，仍有17例未能分出血清型。派罗欣治疗组24周治疗结束时各血清型和未分型组之间的ALT复常率和病毒应答率无差异，而48周随访结束血清非1型的ALT复常率（76．2％）和持续病毒应答率（66．7％）高于血清1型，血清1型ALT复常率和持续病毒应答率分别为27.3％和27．3％，差异有统计学意义（P=0．035）。罗荛愫组末分型组、血清1型和非1型之间24周治疗结束时和随访结束时的ALT复常率和病毒学应答率均无差异。结论在6个月的IFN抗病毒疗程时，HCV血清型仅在派罗欣治疗组影响慢性丙型肝炎抗病毒治疗的持续病毒应答率。     

No association between the IL28B SNP and response to peginterferon plus ribavirin combination treatment in Korean chronic hepatitis C patients

Background/Aims

There are few available data regarding the association between the single nucleotide polymorphisms (SNPs) of the gene encoding interleukin 28B (IL28B) and a sustained virologic response (SVR) to peginterferon (PEG-IFN) plus ribavirin (RBV) therapy in Korean chronic hepatitis C patients.

Methods

This was a retrospective cohort study of 156 patients with chronic hepatitis C virus (HCV) infection who received combination treatment of PEG-IFN plus RBV. Blood samples from these patients were analyzed to identify the IL28B SNPs at rs12979860, rs12980275, rs8099917, and rs8103142. Association analyses were performed to evaluate the relationships between each IL28B SNP and SVRs.

Results

Seventy six patients with HCV genotype 1 and 80 with genotype non-1 were enrolled. The frequencies of rs12979860 CC and CT genotypes were 90.4% and 9.6%, respectively; those of rs12980275 AA and AG genotypes were 87.2% and 12.8%, respectively; those of rs8099917 TT and TG genotypes were 92.3% and 7.7%, respectively; and those of rs8103142 TT and CT genotypes were 90.4% and 9.6%, respectively. Among the patients with HCV genotype 1, the SVR rates were 69.7% and 80.0% for rs12979860 CC and CT, respectively (P=0.71). Among the HCV genotype non-1 patients, SVR rates were 88.0% and 100% for rs12979860 CC and CT (P=1.00), respectively.

Conclusions

Genotypes of the IL28B SNP that are known to be favorable were present in most of the Korean patients with chronic hepatitis C in this study. Moreover, the IL28B SNP did not influence the SVR rate in either the HCV genotype 1 or non-1 patients. Therefore, IL28B SNP analysis might be not useful for the initial assessment, prediction of treatment outcomes, or treatment decision-making of Korean chronic hepatitis C patients.     

丙型肝炎病毒包膜区变异与感染慢性化关系的初步研究

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)包膜区变异与其感染慢性化的关系。方法 3份HCV慢性感染者和3份急性感染者血标本，采用逆转录—聚合两链反应(RT—PCR)扩增HCV的E1区C端及E2区N端片段(573bp)，扩增产物进行克隆，以单链构象多态性(SSCP)和异质性双体(HD)分析对每份血清30个克隆的E1／E2区准种(quasispecies)进行筛选，挑选每份标本HCV的优势株与劣势株序列进行测定，分析非同义替换碱基数与同义替换碱基数比率(dN／dS，间接反映选择压力)和推导的氨基酸序列。结果 HCV慢性感染者病毒准种的复杂性和E2区dN／dS明显高于急性感染者。HCV慢性感染者的E2区氨基酸替换率(8．46％)比急性感染者(1．02％)更高，而两者的E1区氨基酸替换率(分别为2．74％和1．09％)均较低。尽管HVR1变异程度更高，但仍存在高度保守的氨基酸位点。结论 HCV持续性感染与准种复杂性增高和宿主对HVR1的免疫选择有关。     

患者顺应性对干扰素治疗慢性丙型肝炎疗效影响的研究

目的 探讨慢性丙型肝炎患者顺应性对IFN抗HCV治疗效果的影响。方法 对聚乙二醇干扰素α-2a单药和与联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的疗效与安全性的开放、多中心对照研究中患者的干扰素治疗进行回顾性研究。以持续病毒学应答作为疗效的主要评价指标，分析患者顺应性对IFN疗效的影响。结果 190例患者用IFN治疗，其中未完成全部治疗而脱落的病例为63例，脱落率为33．20％。完成12周治疗的179例患者中，102例（56．98％）取得早期病毒学应答。127例完成了整个疗程，79例取得持续病毒应答，PP人群的持续病毒应答率为62．2％，11Tr人群的病毒持续应答率为23．68％，两者之间差异具有统计学意义（x^2=152．5，P〈0．0001）。结论 患者顺应性对慢性丙型肝炎IFN治疗效果的影响较大。     

慢性乙型及丙型病毒性肝炎的超声表现与病理对照分析

目的探讨慢性乙型(HB)与慢性丙型(HC)病毒性肝炎超声表现的差异及与病理的联系。方法应用B超检查130例HB和106例HC患者,观察其肝脏声像表现与病理结果并作对照研究。结果HB声像图显示肝脏回声增粗、增强、或条索样不均匀表现,与病理结果高度相关(P<0.001),HC声像表现以回声细微、致密为主,与病理改变高度相关(P<0.001)。两型肝炎合并脂肪肝程度都不相同(P<0.001)。结论超声检查有助于乙型肝炎和丙型肝炎病理特征的鉴别诊断。     

恩替卡韦治疗拉米夫定失效慢性乙型肝炎的疗效预测初探

目的观察恩替卡韦治疗拉米夫定失效慢性乙型肝炎24周时对HBV的抑制程度，与治疗48周疗效之间的关系，探讨临床实用的疗效预测指标。方法拉米夫定治疗失效慢性乙型肝炎患者33名，采用恩替卡韦每日1．0mg治疗。根据治疗24周时血清HBVDNA的水平，将患者分为4组：PCR低于检测下限（QL）组（〈300拷贝／ml）、QL～〈10^3拷贝／ml组、103拷贝／ml～〈10^4拷贝／ml组和≥10^4拷贝／ml组，比较各组治疗48周时HBVDNA低于检测下限、ALT复常、HBeAg血清转换及发生病毒学反弹的比率。结果治疗48周时，血清HBV DNA自基线下降4．91log。HBV DNA低于检测下限的比例为33．3％。24周时HBV DNA水平越低，在48周HBV DNA达到PCR检测不到的水平和ALT复常的比率越高，发生病毒学反弹的比率越低。结论恩替卡韦治疗拉米夫定失效慢性乙型肝炎治疗24周时，PCR检测不到HBV DNA，提示在48周可达到较佳疗效，24周对HBV DNA的抑制程度可作为48周疗效的预测指标。