木香烃内酯通过p38-MAPK通路影响慢性粒细胞白血病K562/ADR细胞对多柔比星敏感性的研究

目的探讨木香烃内酯对慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/ADR多柔比星敏感性的影响及其机制。方法取对数生长期K562/ADR细胞,分别以不同浓度木香烃内酯、多柔比星以及两药联合作用72 h,CCK-8法检测细胞增殖情况,计算细胞增殖率,获得两药半数抑制浓度(IC50)。以10μmol/L木香烃内酯、10μmol/L多柔比星及两药联合作用于K562/ADR细胞48 h,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测p38-MAPK通路相关蛋白的表达水平。结果木香烃内酯与多柔比星联用组细胞增殖率均低于相应浓度两药单用组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多柔比星对K562/ADR细胞的IC50为(13.50±0.86)μmol/L,木香烃内酯为(7.30±0.55)μmol/L,差异有统计学意义(t=7.044,P=0.002)。流式细胞术检测结果显示,10μmol/L木香烃内酯和10μmol/L多柔比星联用组K562/ADR细胞凋亡率均高于空白对照组、木香烃内酯单用组以及多柔比星单用组[(19.68±3.21)%比(2.96±0.87)%、(9.34±2.89)%、(9.18±2.13)%],差异均有统计学意义(均P<0.01)。与10μmol/L木香烃内酯单用组和10μmol/L多柔比星单用组相比,两药联用组凋亡抑制蛋白bcl-2表达下调,bad、p-p38、cleaved-caspase-3及cleaved-PARP蛋白的表达水平上调。结论木香烃内酯可增强多柔比星对慢性粒细胞白血病K562/ADR细胞增殖的抑制作用,促进多柔比星诱导细胞凋亡,其可能通过调控p38-MAPK通路逆转K562/ADR细胞的耐药性。     

硼替佐米增加耐药白血病细胞株K562/DNR对化疗药物的敏感性

目的:观察蛋白酶体抑制剂硼替佐米是否可以增加耐药白血病细胞株K562/DNR对化疗药物的敏感性.方法:MTT法计算硼替佐米逆转耐药倍数,流式细胞术(FCM)检测细胞调亡比及细胞内药物浓度.结果:表柔比星单独及联合硼替佐米作用于K562/DNR细胞株的IC50分别为417.0μg/ml和210.4 μg/ml,逆转倍数为1.98倍;柔红霉素单独及联合硼替佐米作用于K 562/DNR细胞株的IC50分别为457.7μg/ml和324.9 μg/ml,逆转倍数为1.4倍.单独应用表柔比星组细胞调亡比为(28.74±4.6)％,联合硼替佐米组细胞调亡比为(39.14±9.6)％.硼替佐米能使K562/DNR细胞内柔红霉素含量增加,而对K562/S细胞无类似影响.结论:蛋白酶体抑制剂硼替佐米能增加耐药白血病细胞株K562/ DNR的化疗药物的敏感性,逆转耐药性.     

盐酸千金藤素逆转K562／ADR细胞的多药耐药性及其与bcl-2的关系

目的 研究盐酸千金藤素(CEP)对K562／ADR细胞多药耐药性的逆转作用及逆转机制。方法 采用MTT法测定阿霉素(ADR)单用及与CEP，维拉帕米(VER)合用对K562，K562／ADR细胞的直接细胞毒作用；采用免疫组织化学(IHC)法测定K562细胞，K562／ADR细胞内bcl-2的表达，以及药物对bcl-2表达水平的影响。结果 联合应用ADR和4μmol／LCEP使K562／ADR细胞对ADR的IC50由13．5μmol／L降至1．73μmol／L，其逆转倍数为7．8倍，但对K562细胞无明显影响；联合应用ADR和4μmol／LVER使K562／ADR细胞对ADR的IC50降至7．50／μmol／L，其逆转倍数为1．8倍，但对K562细胞也无明显影响。用IHC法检测bcl-2的表达，K562／ADR细胞中bcl-2的表达量为26．79％，远高于K562细胞中表达量4．98％，而联合应用ADR和4μmol／LCEP使K562／ADR细胞中bcl-2的表达量降至13．16％。结论 CEP可部分逆转K562／ADR细胞的耐药性，其机制可能与降低bcl-2的表达有关。     

LY294002与化疗药物联用对白血病K562细胞多药耐药的逆转作用

背景与目的: 传统逆转白血病多药耐药的药物由于不良反应大而限制了其在临床中的应用,进一步研究白血病多药耐药产生机制和有效逆转靶点成为攻克白血病多药耐药的关键.为此,本研究探讨LY294002[磷脂酰肌醇-3-激酶(P13-K/Akt)通路抑制剂]对人类白血病K562细胞多药耐药的逆转作用.方法: 锥虫蓝拒染法测定细胞生长增殖.Western印迹榆测K562/S和K562/D细胞中P-gp及p-Akt的表达.流式细胞术检测细胞内药物积聚.结果: K562/D细胞对柔红霉素(DNR)、多柔比星(ADR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP16)交叉耐药,相对其亲本细胞的耐药倍数分别为65、52、134和50.DNR诱导了K562/D细胞的P-gp、p-Akt过度表达.LY294002使K562/D细胞内药物积聚增加,部分逆转了K562/D细胞对DNR、ADR、VCR、VP16的耐药性(相对耐药倍数降至23、21、63和29),而对敏感细胞K562/S的耐药性无影响. 结论:LY294002部分逆转K562/D细胞的多药耐药,可能于DNR诱导K562/D细胞的P-gp、p-Akt过度表达而LY294002抑SUP13-K/Akt信号转导通路有关.     

氧化苦参碱逆转多药耐药细胞系K562/A02耐药性的研究

目的:观察非细胞毒性浓度(生长率>95%)氧化苦参碱对耐阿霉素的人白血病细胞系K562/A02多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制.方法:采用MTT法测定氧化苦参碱的细胞毒性及其时K562/A02细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测非细胞毒性浓度的氧化苦参碱处理后K562/A02细胞膜表面糖蛋白P170表达的变化与细胞内柔红霉素的浓度,应用SPSS13.0软件包对实验结果进行统计学处理.结果:氧化苦参碱对K562/A02细胞有一定的细胞毒作用,其非细胞毒性浓度为50μg/ml,低细胞毒性浓度(生长率为85%～90%)为135μg/ml,把非细胞毒性剂量的氧化苦参碱作为最佳逆转浓度,非细胞毒性浓度氧化苦参碱可显著降低阿霉素对K562/A02细胞的IC50,使K562/A02细胞的IC50由原来的(34.9±0.21)μg/ml降低至(13.3±0.21)μg/ml,其逆转倍数为2.62倍;氧化苦参碱作用于K562/A02细胞后,细胞膜糖蛋白P170的表达从90.22%下调至44.24%(P<0.01);柔红霉素外渗试验显示,氧化苦参碱作用于K562/A02细胞后,细胞内化疗药物的浓度明显增加.结论:氧化苦参碱可部分逆转人白血病K562/A02细胞对阿霉素的耐药性,氧化苦参碱通过下调K562/A02细胞膜糖蛋白P170的表达,使其将化疗药物泵出细胞外的功能受到了抑制,使化疗药物在白血病细胞内能达到有效浓度,从而可以杀灭耐药的白血病细胞,达到逆转白血病细胞耐药性的目的.     

siRNA抑制K562/ADM细胞mdr1基因表达并逆转其耐药性

背景与目的：白血病耐药性是白血病治疗中的难点，RNAi技术具有特异、高效、毒性小的特点，可高效、特异地抑制特定基因的过度表达。本文研究小干扰RNA分子（siRNA）对白血病多药耐药K562／ADM细胞mdr1基因表达和耐药性的影响。方法：设计、筛选和合成针对mdr1基因的siRNAs（si—mdrl—1，si—mdr1—2），脂质体介导转染K562／ADM细胞；RT—PCR法检测mdr1 mRNA的转录；流式细胞术测定P-糖蛋白（P—gP）表达水平；MTT法检测K562／ADM细胞对多柔比星（阿霉素，ADM）的敏感性。结果：si—mdr1—1、si-mdr1-2转染24h和48h，si—mdr1—1的抑制率分别为55．5％和22．5％，而si—mdr1—2则分别为16．0％和57．6％。si—mdr1—1和si—mdr1—2作用72h时，P—gP的表达强度分别下降74％和85％。si—mdr1—1和si—mdr1—2均可提高K562／ADM细胞对多柔比星的敏感性、逆转其耐药性，逆转倍数分别为2．52倍和1．96倍。结论：siRNA可特异性地沉默mdr1基因的表达，逆转P—gP介导的白血病细胞耐药性。     

FasL抗体对人白血病细胞株(K562/ADM)多柔比星耐药性的逆转作用

目的：探讨FasL抗体对K562／ADM细胞的多柔比星(阿霉素)耐药性的逆转作用及其可能机制。方法：以K562／ADM细胞为研究对象，设立了对照组、VER处理组、anti-FasL处理组及anti-FasL VER处理组，进行MTT、FCM、TUNEL、S-P免疫组化及RT-PCR检测。结果：anti-FasL或VER处理能增强K562／ADM细胞对ADM的敏感性，其ID50分为200ng／ml、6μg／ml；从细胞周期分析曲线可见上述各组细胞凋亡DNA含量呈逐渐上升趋势(分为7．42％、32．10％、49．29％、56．26％)，TUNEL染色结果亦然(原位凋亡率分为4．5％、36％、45％、58％)；anti-FasL可影响各组细胞FasL及bcl-2的表达，但不影响Pgp的表达。结论：采用anti-FasL．封闭肿瘤细胞FasL表达可逆转K562／ADM细胞的耐药性，并与VER处理有协同作用，它可能为一种新型的肿瘤耐药逆转疗法。     

汉防己甲素联合屈洛昔芬逆转K562/A02细胞耐药与诱导凋亡

目的探讨汉防己甲素(Tet)联合屈洛昔芬(Drol)对耐药细胞系K562/A02的逆转作用及其与诱导凋亡的关系.方法采用甲基四唑蓝法(MTT)测定柔红霉素(DNR)的细胞毒性;采用DNA凝胶电泳法观察Tet、Drol单独及联合应用对K562/A02细胞凋亡诱导作用的影响.结果 0.62 μg/ml Tet、1.94 μg/ml Drol均能增加DNR对K562/A02的细胞毒作用,其半数抑制量IC50分别为7.28±2.06 μg/ml和7.58±3.44 μg/ml,逆转倍数分别为2.94倍和2.82倍.两药联合作用明显增强,其IC50为1.66±0.41 μg/ml,逆转倍数达12.9倍.0.62 μg/ml Tet、1.94 μg/ml Drol单独及联合应用均不会诱导K562/A02细胞凋亡.结论单独应用Tet、Drol可部分逆转K562/A02细胞的耐药性,两药联用具有明显协同效应.Tet、Drol逆转耐药的机理与诱导K562/A02细胞凋亡无关.     

细胞膜富含脯氨酸和谷氨酰胺的剪切因子维持急性髓系白血病HL-60细胞对多柔比星的敏感性

  目的　探讨细胞膜抗原富含脯氨酸和谷氨酰胺的剪切因子（SFPQ）在多柔比星（ADR）耐药的白血病细胞中的作用。方法　以急性髓系白血病细胞株HL-60及其ADR耐药株HL-60／ADR细胞为研究对象,通过免疫荧光法比较HL-60和HL-60／ADR细胞膜SFPQ表达丰度;应用单抗5D12封闭细胞膜SFPQ,通过MTT法测定5D12对HL-60、HL-60／ADR细胞增殖的影响,计算ADR的半数抑制浓度（IC50）和5D12对细胞增殖的促进率;流式细胞术检测5D12对罗丹明在细胞内蓄积的影响。结果　SFPQ在HL-60细胞膜表达高于HL-60／ADR细胞。5D12封闭膜SFPQ作用后,ADR作用HL-60细胞48 h的IC50由（0.19±0.03）μg／ml升高至（0.95±0.13）μg／ml,HL-60／ADR细胞的IC50由（4.41±2.42）μg／ml升高至（21.33±4.26）μg／ml。1、3、5、8、12 μg／ml的5D12作用细胞96 h后,HL-60细胞增殖促进率分别为（9.12±2.02）%、（16.63±0.92）%、（19.04±0.25）%、（24.17±0.53）%、（34.04±3.20）%,HL-60／ADR细胞分别为（7.40±2.23）%、（8.72±2.38）%、（10.47±3.78）%、（11.57±1.49）%、（13.97±0.91）%。结论　核蛋白SFPQ在HL-60细胞膜表达丰度高于HL-60／ADR细胞;该蛋白在细胞膜易位表达不改变药物在细胞内的蓄积,通过抑制细胞增殖维持HL-60细胞对ADR的敏感性。     

P13-K抑制剂LY294002逆转P-gP介导的白血病和胃癌细胞耐药

背景与目的：磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B[phosphatidylinositol-3-kinase（P13-K）／proteinkinaseB（Akt）,P13-K／Aktl通路是调控细胞生存的重要信号转导通路之一。本研究旨在探讨P13-K抑制剂LY294002对P-gP过表达的人类白血病K562／DNR和胃癌SGC7901／ADR细胞多药耐药性的逆转作用。方法：将细胞分为单纯药物组和LY294002预处理组,单纯药物组分别以柔红霉素（daunorubicin,DNR）、阿霉素（adriamycin,ADR）、长春新碱（vincristine,VCR）和依托泊甙（etoposide,VP-16）处理,LY294002预处理组在加药前以LY294002进行预处理。用台盼蓝拒染法及MTT法检测药物敏感性及LY294002对细胞耐药性的影响。Westernblot检测K562／DNR和SGC7901／ADR细胞中P．gP及p-Akt的表达。流式细胞术检测细胞内药物浓度。结果：2．5μmol／LLY294002预处理显著降低DNR、ADR、VCR和VP-16对K562／DNR细胞的IC50,相对逆转效率分别为72．4％、64．9％、60．4％和52．8％。此外,LY294002部分逆转SGC7901／ADR对ADR的耐药性,相对逆转效率为31．0％。LY294002预处理可部分抑制p-Akt和P-gP的表达。随着处理时间的延长．K562／DNR、SGC7901／ADR细胞内DNR、ADR的蓄积效应有增强的趋势。结论：LY294002通过抑制P13-K／Akt信号转导通路,部分逆转P-gp介导的白血病和胃癌细胞的多药耐药。     

Effect of PSC 833 on the cytotoxicity and pharmacodynamics of mitoxantrone in multidrug-resistant K562 cells

We examined the effect of PSC 833, a nonimmunosuppressive cyclosporin analogue, on the cytotoxicity, accumulation and retention of an anthraquinone antileukemia drug mitoxantrone (MIT). This was done in P-glycoprotein (PGP)-overexpressing multidrug-resistant K562/D1-9 cells and compared with the effect of cyclosporin A (CsA). We also compared MIT with the effect of PSC 833 on the cytotoxicity of daunorubicin (DNR) and doxorubicin (DOX). While PSC 833 and CsA had no effect on the cytotoxicity, accumulation and retention of MIT in the parent K562 cells, PSC 833 and CsA restored accumulation and retention of MIT in K562/D1-9 cells dose-dependently. Consequently, there was increased sensitivity of K562/D1-9 cells to MIT. The reversing activity of PSC 833 on the cytotoxicity of MIT was stronger than that of CsA, and was almost the same as the reversing activity of PSC 833 on the cytotoxicity of DNR and DOX. The resistance index of MIT decreased from 43.9-fold to 2.8-fold by 0.4 microM PSC 833, which is a clinically achievable plasma concentration. These results suggest that the combination of PSC 833 with MIT could be a promising treatment in reversing PGP-mediated MDR in leukemia patients.     

增加细胞内三氧化二砷浓度恢复耐三氧化二砷的K562细胞对其敏感性的研究

目的 探讨耐受三氧化二砷（ATO）的白血病ATO耐药K562细胞（K562/AS2细胞）内砷浓度与耐药性的关系.方法 亲代敏感K562细胞（K562/S细胞）按照逐步增加ATO浓度诱导,建立K562/AS2细胞.采用原子荧光光谱法检测细胞内砷浓度.采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度ATO对细胞的毒性作用.结果 1μg/ml ATO培养24、48、72h后,K562/S细胞内的砷浓度比K562/AS2细胞增高[（15.63±0.42） μg/L比0μg/L、（22.27±0.15） μg/L比（3.51±0.12） μg/L、（24.31±0.21） μg/L比（3.61±0.11） μg/L;均P＜0.05].随着ATO浓度的增加及培养时间的延长,K562/AS2细胞内砷浓度逐渐增加（P＜0.05）,在1μg/ml和2μg/ml间砷浓度增加较快.K562/AS2细胞生长抑制率也逐渐增加（P＜0.05）,在1μg/ml和2μg/ml间增加较快.直线相关分析显示,当K562/AS2细胞与ATO接触分别为24、48和72 h时,其细胞生长抑制率均与细胞内ATO浓度呈正相关.结论 增加ATO浓度或延长ATO作用时间均可增加耐药细胞内ATO浓度,细胞内ATO浓度与ATO对细胞的毒性呈正相关,增加细胞内ATO浓度能够增强耐ATO K562细胞对ATO的敏感性.     

Selection of non-P-glycoprotein mediated high-level etoposide resistant cell lines by adriamycin with P-gp inhibitors

In murine erythroleukemia (MEL) A20 cells (grown in 20 ng/ml adriamycin), mutation(s) producing 10-fold adriamycin (doxorubicin) resistance emerged via an unknown mechanism. Exposure of A20 cells to further stepwise increasing concentrations of ADR in combination with MDR modulators (PSC833 and verapamil) aimed to amplify the undetermined A20 mechanism while controlling P-glycoprotein (P-gp) overexpression. The growth of the derived cell lines A30P, A40P and A60P (grown in 30, 40 and 60 ng/ml ADR with PSC833 and verapamil) was initially slow, but eventually reached near WT rates. The new cell lines A30P and A40P were only 1.3- and 1.6-fold more resistant to adriamycin than PC4 A20. Resistance to vincristine was unchanged, but resistance to etoposide (VP-16) was 3.7-fold higher in A40P than A20 (itself 97-fold higher than wild-type). Expression of mdr3 and mrp mRNA tested by RT-PCR showed no increase. Daunorubicin and etoposide accumulation was not different among the cell lines, and no changes were detected in the number of daunorubicin fluorescent lysosomes. In comparison to WT, reduced topoisomerase IIalpha (EC 5.99.1.3) activity (20%) and protein expression (80%) was similar to the parental A20 cells. No mutations in the coding sequence of topoisomerase IIalpha could be located to account for the high etoposide resistance levels. The inhibitor combination of verapamil and PSC833 prevented the emergence of transporter mediated MDR, but not ADR selection of cell lines highly resistant to etoposide.     

Comparative Study on Reversal Efficacy of SDZ PSC 833, Cyclosporin a and Verapamil on Multidrug Resistance in vitro and in vivo

A non-immunosuppressive cyclosporin, SDZ PSC 833 (PSC833), shows a reversal effect on multidrug resistance (MDR) by functional modulation of MDR1 gene product, P-glycoprotein. The objective of the present study was to compare the reversal efficacy of three multidrug resistance modulators, PSC833, cyclosporin A (CsA) and verapamil (Vp). PSC833 has approximately 3-10-fold greater potency than CsA and Vp with respect to the restoring effect on reduced accumulation of doxorubicin (ADM) and vincristine (VCR) in ADM-resistant K562 myelogenous leukemia cells (K562/ADM) in vitro and also on the sensitivity of K562/ADM to ADM and VCR in in vitro growth inhibition. The in vivo efficacy of a combination of modifiers (PSC833 and CsA: 50 mg/kg, Vp 100 mg/kg administered p.o. 4 h before the administration of anticancer drugs) with anticancer drugs (ADM 2.5 mg/kg i.p., Q4D days 1, 5 and 9, VCR 0.05 mg/kg i.p., QD days 1-5) was tested in ADM-resistant P388-bearing mice. PSC833 significantly enhanced the increase in life span by more than 80%, whereas CsA and Vp enhanced by less than 50%. This reversal potency, which exceeded that of CsA and Vp, was confirmed by therapeutic experiments using colon adenocarcinoma 26-bearing mice. These results demonstrated that PSC833 has signficant potency to reverse MDR in vitro and in vivo, suggesting that PSC833 is a good candidate for reversing multidrug resistance in clinical situations.     

低剂量地西他滨联合伊马替尼对K562细胞的增殖抑制作用

 目的　研究低剂量地西他滨（DAC）联合伊马替尼（IM）对K562细胞株的增殖抑制作用及对bcr-abl表达的影响。方法　单药及两药联合后,通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察药物对K562细胞株的增殖抑制作用,流式细胞术检测药物对K562细胞株早期凋亡率及细胞周期,巢式反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量检测药物对K562细胞株bcr-abl mRNA表达。结果　DAC与IM单药对K562细胞的抑制作用呈浓度时间依赖性。两药联合用药抑制作用较单药组明显（F＝43.947、165.580、321.193、296.101,均P＜0.05）,24、 48、72 h各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义（F＝202.759、168.457、417.538,均P＜0.05）。DAC及IM单药作用药物对K562细胞株均使G1期细胞明显增多,IM 0.2 μmol／L作用于K562细胞株48 h可见6.7 %早期凋亡细胞,IM 0.2 μmol／L联合DAC 4 μmol／L早期凋亡细胞增加至8.4 %。bcr-abl mRNA表达水平降低,DAC 4 μmol／L作用48 h后可降低K562细胞中bcr-abl mRNA表达（约14 %）,IM 0.2 μmol／L降低约40 %,联合用药表达量明显降低（约60 %）。联合用药组与单药组比较差异有统计学意义（F＝71.981,P＜0.05）。结论　DAC 对K562细胞的增殖抑制作用与细胞周期阻滞、诱导凋亡及降低bcr-abl mRNA表达有关,两药联合可显著抑制K562细胞增殖。     

川芎嗪联合三氧化二砷逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的探讨川芎嗪与三氧化二砷联合逆转耐药人红白血病细胞株K562/ADM多药耐药的效果。方法采用WST-8法测定细胞的药敏性及抗药性逆转,应用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞内ADM浓度、P-gp蛋白的表达,采用免疫细胞化学二步法检测细胞GST-π表达。结果非细胞毒性浓度的TMP（20μg/ml）及As2O3（0.5μmol/L）可降低ADM对K562/ADM细胞的IC50（P〈0.05）,2种药物联合应用对ADM的逆转倍数明显高于两者单独应用（P〈0.05）,而且也高于两者单独应用之和;两者以非细胞毒性浓度联合应用提高K562/ADM细胞内ADM浓度和细胞凋亡百分率,作用大于两药单独应用,并且明显下调细胞P-gp和GST-π表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论非细胞毒性剂量的TMP和As2O3,均可部分逆转有多药耐药表型的细胞株K562/ADM对阿霉素的耐药性,两者联合应用效果优于单独应用,具有协同作用,其机制可能与下调P-gp和GST-π表达有关。     

辛伐他汀联合阿糖胞苷对K562细胞增殖与凋亡的影响

 目的　探讨辛伐他汀（SV）联合阿糖胞苷（Ara-C）对K562 细胞增殖与凋亡的影响。方法　不同浓度SV和Ara-C单用或者联合处理K562细胞,对照组为K562细胞。药物作用24、48、72 h后收集细胞,分别观察各组细胞形态,采用MTT法检测不同组别细胞的生长抑制率,采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率、细胞坏死比例。结果　SV联合Ara-C组与单药组相比细胞形态明显有核固缩现象,且可见凋亡小体形成,并且随着处理时间的增加,抑制率也增大。其中15 μmol／L SV联合20 μmol／L Ara-C的细胞抑制作用最为显著,72 h细胞抑制率为（72±1）%,明显高于15 μmol／L SV组的（45±2）%和20 μmol／L Ara-C组的（44±0）%（P＜0.01）,表现为协同抑制作用（24、48 h金氏Q值为1.24和1.19）。流式细胞术检测发现20、15和 10 μmol／L SV组K562细胞早期凋亡率AnnexinV明显高于对照K562细胞（P＜0.01）,而且随着时间延长和剂量的增大早期凋亡率也增加（P＜0.05）。20和15 μmol／L SV组早期凋亡率均高于10 μmol／L SV组,而前两者之间差异无统计学意义（P＞0.05）。晚期凋亡细胞率（PI）各组中差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论　SV 体外抑制K562细胞增殖及诱导细胞凋亡,SV 与Ara-C具有协同作用,增加了K562细胞对化疗药物的敏感性。15 μmol／L 可能为SV体外最佳作用浓度。     

丹参酮ⅡA抑制髓系白血病细胞株增殖及诱导凋亡的研究

目的 探讨丹参酮ⅡA（TanⅡA）对髓系白血病细胞株NB4、K562、THP-1增殖抑制作用及促凋亡作用.方法 将不同浓度TanⅡA与NB4、K562、THP-1细胞共培养24、48、72 h,以柔红霉素为阳性对照,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测TanⅡA对白血病细胞株的增殖抑制作用,AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,紫外分光光度法检测Caspase-3蛋白表达.结果 TanⅡA作用24、48、72 h对NB4细胞的IC50值分别为24.11、9.60、7.28 μmol/L,对K562细胞IC50值分别为31.75、11.88、6.81 μmol/L,对THP-1细胞IC50值分别为111.10、32.82、11.82 μmol/L.流式细胞术检测结果显示：与空白对照组相比,TanⅡA与各白血病细胞株作用48 h后,细胞凋亡明显增加,G1期细胞数增加,Caspase-3蛋白表达显著升高（P＜0.05）.结论 TanⅡA对白血病细胞具有增殖抑制与促凋亡作用,其作用强度从高到低依次为NB4、K562、THP-1细胞.其抗癌作用机制可能与阻滞细胞于G1期,上调Caspase-3表达有关.