应用荧光原位杂交技术对精子染色体非整倍体的研究

目的 探讨人类精子染色体数目异常与自然流产的相关性。方法 采用多色荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH)方法，利用CEP（chromesome enumeration DNA probes)X、Y、18及LSI（locus specific identifier DNA probes)13、21两种探针混合液与二硫苏糖醇处理过的自然流产者丈夫的精子核杂交，记数杂交信号，与对照组进行比较。结果 经卡方检验，自然流产组丈夫精子染色体X、Y、18、13、21双体型及其它数目异常明显高于正常对照组（P＜0．005），说明流产者丈夫精子染色体异常是流产的重要原因之一。结论 FISH技术是一种快速、准确、简单、实用性强的检测精子染色体的好方法。     

用荧光原位杂交技术检测人精子核的非整倍性

用荧光原位杂交技术检测人精子核的非整倍性黄建民黄天华方小武庄天罡刘鸿禧染色体数目异常是最普遍的一类人类染色体异常，导致极端严重的染色体遗传病，在新生儿中占０．３％，自然流产多达５０％是由于染色体数目异常引起的［１］。人们对母亲因素，如高龄妊娠往往导致...     

用荧光原位杂交技术检测流产绒毛染色体非整倍畸变

目的探讨流产病因及评估荧光原位杂交(FISH)技术在检测流产绒毛染色体非整倍体畸变中的价值.方法采用18、x和Y染色体着丝粒探针及13、21染色体单一序列探针,对58例自然流产绒毛标本同时进行FISH检测和常规染色体核型分析.结果FISH技术异常核型检出率24.1±O.12%,高于常规染色体核型分析(15.5%);常规染色体核型分析检出2例FISH探针计划检测外的异常核型46,xx,Ddel(2)(q21)和47,xx,+16.结论FISH技术能快速、准确地诊断流产绒毛染色体非整倍体畸变,与常规染色体核型分析结合运用,可为临床流产病因的探讨提供更为准确的依据.     

用双色荧光原位杂交检测人精子染色体非整倍体率

目的检测人精子染色体非整倍体率。方法采用双色荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）方法,取少量精标本经洗后制片,用二硫苏糖醇（ＤＴＴ）和二碘水杨酸锂（ＬＩＳ）处理,使精子头部染色质去凝集。然后,与生物素标记的α卫星Ｘ染色体特异ＤＮＡ探针（ＤＸＺ１）和地高辛标记的α卫星Ｙ染色体特异ＤＮＡ探针（ＤＹＺ３）进行原位杂交。用ＣＹ３－链亲和素、山羊抗链亲和素检测Ｘ染色体探针杂交信号;用鼠抗地高辛抗体、与荧光素结合的兔抗鼠抗体检测Ｙ染色体探针杂交信号。结果在Ｎｉｋｏｎ荧光显微镜下可以清楚看到精子头部的杂交信号,头部有１个红色荧光杂交信号的精子为Ｘ染色体精子（Ｘ精子）,有１个绿色荧光杂交信号的精子为Ｙ染色体精子（Ｙ精子）。精子头部有２个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子。若用１条常染色体探针和１条性染色体探针进行ＦＩＳＨ,可以区别头部有２个相同颜色荧光杂交信号的精子属非整倍体精子或二倍体精子。结论双色荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）方法,可以用于测定接触致突变剂和非整倍体诱导剂后,人精子染色体非整倍体率的变化。     

用荧光原位杂交方法检测染色体结构异常患者的精子染色体

目的 通过检测染色体结构异常患者的精子染色体结构,分析其减数分裂中染色体分离规律。方法 用荧炮原位杂交方法,其中例1核型为45,XY,ter rea(15;18)(p13:p11),用CEP15,CEP18探针,例2核型为45,XY,（13;14）,用VysisLSI13q14,Tel Vysion14q探针,分别对他们的精子进行荧光原位杂交检测,结果 例1的2214条精子中,15/18占58.4%,15,15/18占5.28%,-/18占6.86%,15/18,18占7.77%,15/--占7.68%。例2的1524条精子中,13q/14q占49.67%,13我3我3我4ak 14我3q/14q,14q)分别占8.86%、8.27%,13q/--占7.68%,--/14q占5.18%。结论 通过荧光原位杂交方法检测染色体结构异常患者的精子,可以分析其减数分裂中染色体分离规律。     

精卵细胞非整倍性研究进展

非整倍性是人类染色体异常中最常见的一种类型。本通过对精卵细胞非整倍性研究的进展进行综述，阐述非整倍性与父母年龄、减数分裂不分离和染色体基因重组的关系，并简介非整倍性机理的几种假说。     

荧光原位杂交同时检测精子X和Y染色体的方法

用实验手段分离X和Y染色体精子或富集特定性别染色体精子．对于预防性连锁遗传病具有潜在应用价值。建立精子X和Y染色体鉴定方法对于评估分离或富集特定性别染色体效果至关重要。本文介绍采用CY3TM和FlourXTM探针作荧光原位杂交（FISH），同时检测精子Y和X染色体。10份正常精液标本分析结果显示：X染色体精子为50．23％，Y染色体精子为49．77％；有效杂交率达91．99％。FISH方法比传统的精子染色体核型分析和奎纳克林染色检查Y荧光小体更具有简易、特异和快速的优点。     

应用荧光原位杂交技术检测自然流产组织染色体数目异常

为评估荧光原位杂交技术在检测自然流产组织染色体数目异常中的价值和意义,本研究应用FISH技术检测105例自然流产绒毛或胎儿肌肉组织的13、21、18、X、Y染色体的数目,结果显示染色体数目异常的样本为45例,占其中42.86%;数目异常率大于60%的样本为39例;数目异常率介于10%-60%的样本为6例,其中早期流产组织中染色体异常的为29例,占64.44%;常见的数目异常类型为常染色体三体和X单体。与传统的制备染色体技术相比,FISH技术具有快速准确、稳定性高等特点,可以为查明流产原因提供依据,具有很高的临床应用价值。     

Inv(Y)患者精子染色体荧光原位杂交分析

目的 探讨Y染色体臂间倒位患者精子减数分裂形成中性染色体的分离规律.方法 采用G带、C带及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)对中期分裂相进行分析.应用三色探针CEPX、Tel Xp/Yp、Tel Xq/Yq对5例inv(Y)(p11.1q11.2)患者精子进行FISH,同时以染色体正常男性的正常精液作为对照.结果 5例inv(Y)(p11.1q11.2)精于性染色体数目及重组Y染色体异常率与对照组比差异无统计学意义.结论 inv(Y)(p11.1q11.2)患者精子无明显性染色体数目与结构异常,精子FISH分析可为其提供更准确的遗传咨询及指导植入前遗传学诊断.     

精卵细胞非整倍性研究进展

非整倍性是人类染色体异常中最常见的一种类型。本文通过对精卵细胞非整倍性研究的进展进行综述，阐述非整倍性与父母年龄、减数分裂不分离和染色体基因重组的关系，并简介非整倍性机理的几种假说。     

精子间期核荧光原位杂交及其应用

精子间期核荧光原位杂交是近年来检测非整倍体精子的新方法，具有荧光信号直观易分辨，短时间内能分析大量精子和实验结果准确可信等优点；在一定程度上取代了繁琐费时的人精子－仓鼠卵融合技术，本介绍了精子间期核荧光原位杂交的基本实验方法，在遗传学各研究领域的应用，以及目前尚存在的问题     

荧光原位杂交技术在染色体非整倍体产前诊断中的应用研究

目的建立荧光原位杂交技术应用于未培养羊水标本的染色体非整倍体产前诊断。方法对于符合产前诊断指征的孕妇,于孕16-25周抽取羊水25ml,其中20ml用于传统的细胞培养和染色体G显带分析,其余5ml用荧光原位杂交方法诊断13、8、21、X、Y染色体非整倍体。结果100例受检样本中,染色体数目异常3例,其中21三体2例,45,X 1例。FISH方法与传统羊水细胞核型分析符合率100%。结论FISH技术具有快速、简便、特异的特点,可作为部分染色体非整倍体的快速产前诊断方法。     

新疆地区荧光原位杂交产前诊断非整倍体的应用价值

目的探讨荧光原位杂交（FISH）技术产前诊断常见染色体非整倍体的应用价值。方法采用21、18、13、和Y染色体特异性DNA探针对96例孕18～23周孕妇的未培养羊水细胞进行FISH检测,同时行羊水细胞染色体核型分析。结果 FISH检测98例成功96例（97.9%）,其中染色体数目正常93例（48例为46,XX;45例为46,XY）染色体数目异常3例（2例47,XX,＋21;1例47,XX＋18）。FISH诊断结果与核型分析结果一致,染色体数目异常的3例与传统核型分析结果完全一致。结论 FISH技术用于产前诊断常见染色体非整倍体,具有简便、快速、特异性强敏感性高、所用样本量少等优点。     

应用荧光原位杂交技术测定不同的染色体畸变

应用荧光原位杂交技术测定不同的染色体畸变王明荣，王秀琴，吴旻ＢｅｒｎａｒｄＰｅｒｉｓｓｅｌＰａｕｌＭａｌｅｔ染色体分析已成为产前诊断、先天性畸形诊断及癌症诊断的主要方法之一。传统的核型分析一直采用染色体显带的手段，但用单纯的显带法常难确定标记染色体、...     

荧光原位杂交技术研究人类体外未受精卵的17号染色体非整倍体

目的 对比两种不同间期核制备方法的效果，并比较25－30岁和31－35岁这两个女性年龄组、不同的体外受精－胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）指征、不同超排方案等与17号染色体非整倍体率之间的关系。方法 采用0.1% Tween 20/0.01 mol/L HCl和3：1的甲醇：冰醋酸两种方法制备人类未受精卵间期核，选用人类17号染色体端粒探针（17qter），按说明书步骤进行荧光原位杂交并在方法上稍作改进。结果 36个未受精卵中，正常17号单体24枚，二体7枚，三体5枚，非整倍体出现率为33.3%（12／36）；25－30岁和31－35岁这两个女性年龄组、不同IVF指征、不同超排方案的患者的17号染色体非整倍体发生率差异无显著性。结论 两种方法信号检出率均为100％，但前者间期核制备效果较好，易于操作，避免甲醇冰醋酸刺激性气味对环境的污染，卵母细胞17号染色体的非整倍性是造成体外受精失败的重要原因之一。     

荧光原位杂交法检测严重少精子症患者精子染色体非整倍体

目的检测严重少精子症患者精子染色体非整倍体。方法收集10名严重少精子症患者和5名正常患者精液,三色荧光原位方法检测精子非整倍体。结果同正常精液患者相比,严重少精子症患者有显著高的X,Y,18非整倍体精子。     

精子细胞的荧光原位杂交

在新生儿中大约1／500出现染色体非整倍体（aneuploid）[1]，特别是在精子配子中其发生频率较高，是引起自然流产、婴儿死亡及神经系统发育迟缓的重要原因[2]。因而人类配子细胞已经成为筛查染色体非整倍体及估计染色体不分离发生的焦点之一。1970年Barlow等曾用阿的平对人类精子核Y染色体长臂染色，通过计数荧光信号判断Y染色体数目[3]，但由于非特异背景，两个Y的频率较高[4]。1978年Rudak首次描述了以“仓鼠穿卵法”制备精于染色体，并用来检测染色体数目及结构异常[5]。但方法复杂，技术难度大，并且只能对那些能穿透仓鼠卵细胞的精子进行分析，因而至今不能做一种常规的检测方法[6]。本文介绍一种简便而快速的检测精子染色体数目异常的方法，以D21Z1／D13Z1、TRX探针与精子问期核进行荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization，FISH），能准确的计数精子核中染色体数目。     

用荧光原位杂交技术检测流产绒毛染色体非整倍体畸变

目的　探讨流产病因及评估荧光原位杂交 (FISH)技术在检测流产绒毛染色体非整倍体畸变中的价值。方法　采用18、X和Y染色体着丝粒探针及 13、2 1染色体单一序列探针 ,对 5 8例自然流产绒毛标本同时进行FISH检测和常规染色体核型分析。结果　FISH技术异常核型检出率 2 4 1± 0 12 % ,高于常规染色体核型分析 (15 5 % ) ;常规染色体核型分析检出 2例FISH探针计划检测外的异常核型 4 6 ,XX ,del(2 ) (q2 1)和 4 7,XX , 16。结论　FISH技术能快速、准确地诊断流产绒毛染色体非整倍体畸变 ,与常规染色体核型分析结合运用 ,可为临床流产病因的探讨提供更为准确的依据     

双色FISH检测人精子染色体非整倍体方法的建立

目的　建立用双色FISH检测人精子染色体非整倍体的方法。方法　采用双色荧光原位杂交 (FISH)方法取适量精子标本用EDTA/PBS处理 ,然后用二硫苏糖醇 (DTT) ,使精子去凝集。固定后滴片 ,然后与双色荧光直接标记探针杂交。结果　在OLYMPUS荧光显微镜下可以清楚看到精子头部的蓝色杂交信号 ,头部有 1个绿色荧光杂交信号的精子为X染色体精子 (X精子 ) ,有 1个红色荧光杂交信号的精子为Y染色体精子 (Y精子 )。精子头部有 2个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子。结论　双色荧光原位杂交 (FISH)方法可以用于测定人精子染色体非整倍体率的变化。