新型自由基清除剂依达拉奉的脑保护作用

新型自由基清除剂依达拉奉通过转移一个电子给自由基产生依达拉奉基团以打断脂质过氧化反应链来保护神经细胞。目前大量的动物实验研究证明,依达拉奉对实验性脑梗死有清除自由基、抗脑水肿、缩小梗死体积及改善神经功能等作用,对实验性蛛网膜下腔出血所致的血管痉挛有解痉的作用。在一些临床实验中初步显示依达拉奉对缺血性和出血性卒中有神经保护和改善神经功能的作用。     

依达拉奉对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨依达拉奉对脑缺血神经细胞损伤的保护作用和对凋亡的影响.方法 实验目标为出生24 h内SD乳鼠的脑细胞,培养7 d后进行分组培养,分别检测各组的指标,包括神经细胞存活率、LDH的漏出率、细胞凋亡率等,进行统计学分析.结果 依达拉奉组与正常对照组相比存活率无显著下降（P＞0.05）,正常对照组与其他损伤组细胞存活率比较显著下降（P＜0.05）.细胞凋亡率观察依达拉奉组与正常对照组相比无显著下降（P＞0.05）,药物损伤组、低浓度异丙酚组、中浓度异丙酚组、高浓度异丙酚组与正常对照组比较均较高（P＜0.05）.结论 依达拉奉是一种自由基清除剂,抑制细胞膜过氧化,增强细胞总抗氧化能力,提高细胞稳定性,对脑缺血神经细胞损伤起到保护作用,减少细胞凋亡率,增加细胞存活率.     

依达拉奉对缺血性脑卒中的治疗作用及机制研究进展

作为一种氧自由基清除剂而开发的依达拉奉,目前已广泛应用于临床,作为神经保护剂治疗急性缺血性卒中.其治疗作用经多项临床及实验研究证实,相关机制主要包括清除氧自由基、抑制脂质过氧化、对抗炎症细胞因子、调节花生四烯酸代谢和调控凋亡相关基因的表达等,从而减少缺氧对机体组织的损害,发挥神经保护作用.     

依达拉奉对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨依达拉奉在脑缺血再灌注损伤中的保护作用及机制。方法选取2011-01-2011-05来我院就诊的脑部或心血管疾病中发生脑缺血再灌注损伤的患者40例,按随机分为治疗组和对照组,治疗组患者在使用常规保护的同时使用依达拉奉进行保护,对照组的患者使用0.9%氯化钠进行常规保护,并在治疗后分别对2组患者进行脑组织NO、NOS及SOD含量检测。结果治疗组的患者在经过治疗之后,血清和脑组织中的NO、NOS含量明显上升、SOD含量明显下降,2组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论在治疗脑缺血再灌注损伤的过程中,使用依达拉奉可以起到明显的保护作用,由于常规保护机制,值得在临床过程总进行推广使用。     

依达拉奉对急性脑梗死再灌注损伤保护临床分析

目的探讨依达拉奉对急性脑梗死再灌注损伤保护。方法选取我院2006-01～2009-12收治的312例急性脑梗死患者随机分为治疗组162例,对照组150例。对照组组采用:基础治疗,治疗组基础治疗加用依达拉奉治疗,观察神经功能缺损评分变化及临床疗效。结果治疗组和对照组2组治疗5 d、15 d后神经功能缺损程度评分比较P0.05有显著的差异性。2组临床疗效比较,显效率、总有效率P0.05有显著差异性。结论依达拉奉是一种强效的羟自由基清除剂及抗氧化剂,能够有效的对脑缺血再灌注损伤起到保护作用,防止再灌注损伤,减少脑细胞凋亡,减轻临床症状,促进疾病康复。     

依达拉奉对脊髓缺血再灌注损伤后自由基及Oaspase-3表达的影响

目的探讨自由基清除剂依达拉奉对脊髓缺血再灌注损伤后自由基及Caspase-3蛋白表达的影响。方法采用腹主动脉夹闭法将3（）只家兔制作成脊髓缺血再灌注损伤模型,并随机分为2组,用腹腔注射法给予依达拉奉组注射依达拉奉,空白对照组注射生理盐水,共14d,检测家兔血清自由基（MDA、SOD、NO）水平的变化,采用病理及免疫组织化学方法评估脊髓损伤的病理变化以及Caspase-3表达情况,治疗结束后采用Jacobs法对家兔后肢运动功能评分。结果治疗后依达拉奉组家兔血清MDA、SOD、NO水平显著低于对照组,脊髓病理学也进一证实依达拉奉组脊髓损伤程度较对照组轻微,且损伤节段脊髓组织Caspase-3蛋白的表达水平明显低于对照组,依达拉奉组家兔双下肢Jacobs评分也明显高于对照组。结论依达拉奉能明显降低脊髓损伤后自由基水平,抑制Caspase-3蛋白的表达,可能对脊髓缺血再灌注损伤有保护性作用。     

依达拉奉治疗急性脑梗死的临床分析

研究表明,自由基在脑梗死后继发性脑损伤中起重要作用,依达拉奉(化学名3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)为自由基清除剂,对脑细胞有保护作用,近年开始应用临床,2007-01~2008-06使用依达拉奉治疗急性脑梗死30例,取得较好疗效,现报道如下.     

依达拉奉对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡及caspase-3蛋白表达的影响

目的 探讨依达拉奉对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经功能损伤、细胞凋亡及caspasc-3蛋白表达的影响.方法 雄性SD大鼠24只采用随机数字表法分为假手术组、脑缺血再灌注组、生理盐水治疗组、依达拉奉治疗组,每组6只.除假手术组外,其余3组均采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型.依达拉奉治疗组于脑缺血开始时及再灌注后12 h分别腹腔注射依达拉奉3 mg/kg,生理盐水治疗组同时间注射等量生理盐水;假手术组同样过程造模,但不插入尼龙线造成缺血.造模后24 h后进行大鼠神经行为学评分;应用免疫组织化学及Western blot检测caspase-3蛋白表达水平的变化;利用原位缺口末端标记法(TUNEL法)研究神经细胞凋亡的变化.结果 与脑缺血再灌注组及生理盐水治疗组相比,依达拉奉治疗组大鼠神经行为学评分明显减少,caspase-3免疫阳性细胞及蛋白表达明显减少,凋亡细胞也减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 依达拉奉能有效减轻脑缺血灌注损伤后神经细胞凋亡.改善神经功能缺损症状,推测其机制与抑制caspase-3蛋白表达有关.     

丁苯酞联合依达拉奉治疗急性缺血性脑卒中对细胞凋亡的影响

目的探讨丁苯酞注射液联合依达拉奉对急性缺血性脑卒中的临床疗效及对细胞凋亡的影响。方法选择急性脑梗死患者136例,随机分为联合用药组和依达拉奉组,每组68例。依达拉奉组给予依达拉奉注射液治疗,联合用药组在依达拉奉组治疗的基础上加用丁苯酞,共治疗14 d。比较治疗前后NIHSS、ADL评分,测定细胞脂质过氧化水平及抗氧化酶活性及血清Bax、Bcl-2含量。结果联合用药组治疗后NIHSS评分低于依达拉奉组,ADL评分高于依达拉奉组,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平低于依达拉奉组(P0.05);联合用药组治疗后血清Bax含量低于依达拉奉组,血清Bcl-2含量高于依达拉奉组(P0.05)。结论丁苯酞注射液联合依达拉奉治疗急性缺血性脑卒中,可减轻缺血再灌注过程中氧化应激反应及细胞凋亡,从而减轻脑缺血再灌注(I/R)所引起的脑损伤。     

依达拉奉对鼠脑缺血再灌后内质网应激相关因子表达的影响

[摘要]目的 研究依达拉奉对内质网应激相关因子表达及神经细胞凋亡的影响。 方法 使用SD大鼠短暂性MCAO模型,RT-PCR法检测缺血侧顶叶皮层PERK mRNA、CHOP mRNA表达,免疫组化法检测p-PERK、CHOP蛋白表达,TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果 PERK mRNA表达与p-PERK蛋白表达均于再灌注后1h达高峰,其后逐渐下降;再灌注1h缺血侧顶叶皮层CHOP mRNA表达增加,于再灌注12h表达达高峰,再灌注1h缺血侧顶叶皮层可见CHOP蛋白表达,再灌注24h表达达高峰;再灌注1h缺血侧梗死灶周围可以观察到凋亡细胞,至再灌注24h达高峰;依达拉奉能下调PERK、CHOP表达,减少神经细胞凋亡。 结论 依达拉奉能下调PERK、CHOP等ERS基因表达,减少神经细胞凋亡,可能通过抑制内质网应激在上游发挥神经保护作用。     

神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在神经元缺氧复氧损伤中的保护作用

目的：观察组织型纤溶酶原激活物（tPA）对体外不同条件培养的神经元的损伤作用，探讨神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂（NSP）是否可以减轻tPA对神经元的损伤。方法：体外原代培养大鼠皮质神经元，建立缺氧复氧（H／R）模型。在不同的培养条件下使用不同的试剂干预方法。采用倒置相差显微镜观察免疫荧光染色后的细胞形态学变化、活细胞计数试剂盒测定神经元存活率、LDH释放实验测定细胞毒性和Tunel试剂盒测定细胞凋亡率。结果：tPA对正常神经元具有毒性损伤作用。经tPA干硕的H／R组与单纯H／R组相比，前者神经元损伤加重（P〈0．05）。NSP＋tPA联合干预的H／R组细胞损伤均轻于tPA干预的H／R组（P〈0．05）。结论：NSP可减轻tPA对神经元的毒性损伤而起到保护神经元的作用。     

P~(38)激酶在PC12细胞缺氧/再给氧损伤中的作用

目的:探讨PC12细胞缺氧/再给氧损伤的信号转导机理。方法:培养的PC12细胞先缺氧(95％N2/5％CO2)6h,然后重新给氧,观测不同时间点细胞的存活率和caspase-3的活性;用MTT法测存活率,caspase-3检测试剂盒测caspase-3活性。用p38拮抗剂SB203580孵育细胞2h,之后缺氧/再给氧,观察SB203580对细胞存活率和caspase-3活性的影响。结果:PC12细胞缺氧/再给氧后caspase-3活性明显增加并使细胞存活率下降,SB203580明显降低缺氧/复氧后caspase-3的活性并使细胞死亡减少。结论:PC12细胞缺氧/再给氧后至少可以通过激活p38、caspase-3信号分子诱导PC12细胞死亡。     

依达拉奉治疗急性重型颅脑损伤的临床疗效观察

目的探讨依达拉奉对急性重型颅脑损伤的疗效及安全性。方法69例急性重型颅脑损伤患者,分为3组,依达拉奉治疗组32例;阳性药物对照组32例,用脑苷肌肽注射液治疗;空白对照组5例,给予常规治疗。治疗10d后,观测GCS、APACHE-Ⅱ评分及不良反应。结果与空白对照组相比,治疗组和阳性药物对照组GCS评分明显升高(P<0.05),APACHE-Ⅱ评分显著下降(P<0.01),但两组间差异无显著性。结论早期应用依达拉奉治疗急性重型颅脑损伤,可促进患者神经功能恢复,降低死亡风险,且副作用少,安全可靠。     

缺氧/复氧条件下星形胶质细胞水通道蛋白4和5表达变化的研究

目的：观察缺氧/复氧条件下星形胶质细胞水通道蛋白（AQP）4和5表达的变化,探讨脑缺血再灌注后脑水肿与AQP4和AQP5的关系。方法：取新生24h内的SD大鼠皮质新鲜脑组织,进行原代和传代培养。以95%N2和5%CO2造成细胞缺氧,用倒置相差显微镜对细胞进行形态学观察,用锥虫蓝染色法测定缺氧及复氧后不同时间点星形胶质细胞的死亡数以反映星形胶质细胞的存活能力,应用细胞免疫化学技术测定星形胶质细胞缺氧及复氧后各个时间点AQP4、AQP5表达的变化。结果：缺氧4及8h后细胞形态变化不明显,随着复氧时间的延长出现细胞损伤的表现。与对照组比较,缺氧后4及8h有少量细胞死亡（P〈0.05）,随着复氧时间延长细胞死亡数亦逐渐增多（P〈0.01）;缺氧4及8h后,AQP4、AQP5阳性表达细胞数均减少（P〈0.01）,而复氧后AQP4、AQP5阳性表达细胞数逐渐升高并随时间延长呈增高趋势（P〈0.01）。结论：星形胶质细胞对缺氧的耐受能力较强,但复氧时出现明显损伤;AQP4、AQP5表达的变化与缺血-再灌注损伤后脑水肿存在相关性。     

依达拉奉治疗急性大面积脑梗死患者的疗效观察

目的观察依达拉奉治疗急性大面积脑梗死的疗效。方法急性大面积脑梗死患者48例,随机分为依达拉奉治疗组(依达拉奉组,24例)和常规治疗对照组(对照组,24例)。2组患者入院后均给予脑梗死常规治疗,依达拉奉组再给予依达拉奉30mg加入生理盐水100ml静脉滴注,每天2次,连用20～25d。分别于治疗前及治疗后进行神经功能缺损程度评分(NDS)、血浆纤维蛋白原(Fib)、凝血功能、超氧化物歧化酶(SOD)检测,比较两组的疗效。结果2组治疗后NDS比治疗前均有明显降低(均P<0.05),血SOD活力较治疗前明显升高(均P<0.05);依达拉奉组改善程度明显优于对照组(均P<0.05)。2组治疗前后血浆Fib含量、凝血功能差异无统计学意义(均P>0.05)。依达拉奉组的显效率(87.5%)显著高于对照组(45.8%)(P<0.05)。依达拉奉组中出现轻度转氨酶升高2例,尿素氮升高4例,经相应治疗,短期内均恢复正常。结论依达拉奉治疗急性大面积脑梗死的疗效较好,无明显不良反应。     

Edaravone promotes functional recovery after mechanical peripheral nerve injury

Edaravone has been shown to reduce ischemia/reperfusion-induced peripheral nerve injury. However, the therapeutic effect of edaravone on peripheral nerve injury caused by mechanical factors is unknown. In the present study, we established a peripheral nerve injury model by crushing the sciatic nerve using hemostatic forceps, and then administered edaravone 3 mg/kg intraperitoneally. The sciatic functional index and superoxide dismutase activity of the sciatic nerve were increased, and the malondialdehyde level was decreased in animals in the edaravone group compared with those in the model group. Bcl-2 expression was increased, but Bax expression was decreased in anterior horn cells of the L4–6 spinal cord segments. These results indicated that edaravone has a neuroprotective effect following peripheral nerve injury caused by mechanical factors through alleviating free radical damage to cells and inhibiting lipid peroxidation, as well as regulating apoptosis-related protein expression.     

群多普利对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 观察群多普利对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用,并探究其可能作用机制。 方法 采用改良ZeaLonga's法制作大脑中动脉闭塞（middle c erebral a rtery o cclusion,MCAO）模型。将 健康雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、群多普利低剂量组（5 mg/kg）、群多普利高剂量组 （10 mg/kg）等四组,观察各实验组大鼠神经功能评分、脑梗死体积、脑组织白细胞介素（i nterl euki n, IL）-1β及IL-10含量变化。 结果 与假手术相比,模型组神经功能缺损程度评分显著提高,脑组织IL-1β及IL-10含量显著增加 （P＜0.05）;与模型组比较,群多普利低剂量和高剂量均能显著减轻缺血再灌注损伤大鼠神经功能 缺损,减小脑梗死体积（P＜0.05）;群多普利低剂量和高剂量均能显著降低IL-1β的含量;群多普利 高剂量可进一步增加IL-10的含量。 结论 在脑缺血再灌注损伤大鼠中,群多普利可能通过调节IL-1β及IL-10的分泌,重建促炎因子与抗 炎因子之间的平衡,从而起到神经保护作用。     

依达拉奉治疗急性重型颅脑创伤的临床研究

目的探讨依达拉奉对急性重型颅脑创伤的治疗作用及安全性。方法108例患者随机分为2组,依达拉奉组54例：常规治疗基础上加用依达拉奉治疗；依达拉奉30mg稀释后30min内静滴完,1次/12h,连续10d。对照组54例：采用常规治疗,不给予脑保护治疗。研究开始10d后,观测颅内压、头部CT变化、GCS,APACHE-Ⅱ评分及不良反应。结果给药组伤后10d内颅内压显著升高和重度脑水肿者比例均较对照组明显减少；且给药组GCS评分升高,APACHE-Ⅱ评分下降,组间差异具有显著性。结论早期应用依达拉奉治疗急性重型颅脑创伤,可以降低急性重型颅脑创伤患者颅内压的升高幅度,缩短昏迷时间,促进患者神经功能恢复,降低伤残率,促进患者神经功能恢复,改善预后,且副作用少,安全可靠。     

缺氧-复氧对大鼠海马培养神经元Bcl-2、Bax表达和神经元凋亡的影响

目的 观察缺氧-复氧对体外培养海马神经元Bcl-2和Bax表达和神经元凋亡的影响。方法 取培养12d的海马神经元，置于恒温(36℃)密闭容器内，连续充以无氧气体[90％(体积分数)N2、10％(体积分数)CO2]，在缺氧条件下继续培养4h后，再于常氧培养箱内复氧培养24h和72h。于不同时间观察神经元存活数，并分别用抗Bcl-2和Bax抗血清进行免疫组织化学染色，观察缺氧-复氧后大鼠海马培养神经元Bcl-2和Bax表达。并用原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞术分别检测缺氧-复氧对体外培养海马神经元凋亡的影响。结果 缺氧-复氧后24～72h,海马神经元对Bcl-2的表达逐渐减弱，对Bax的表达逐渐增强，对Bax／Bcl-2比值逐渐增大，凋亡神经元百分率逐渐增多。结论 缺氧-复氧后24～72h神经元凋亡的发生与神经元Bcl-2表达逐渐减弱，Bax表达逐渐增强，Bax／Bcl-2比值逐渐增大有关。     

Posthypoxic reoxygenation-induced neurotoxicity prevented by free radical scavenger and NMDA/non-NMDA antagonist in tandem as revealed by dynamic changes in glucose metabolism with positron autoradiography

Using a positron autoradiography technique, dynamic changes in the cerebral glucose metabolic rate (CMRglc) induced by hypoxia/reoxygenation were investigated in living brain slices. After incubating fresh rat brain slices (300 microm thick) with [(18)F]2-fluoro-2-deoxy-D-glucose ([(18)F]FDG) in oxygenated Krebs-Ringer solution at 36 degrees C, serial two-dimensional time-resolved images of [(18)F]FDG uptake in the slices were obtained on imaging plates. As compared to the unloaded control values, with hypoxia-loading [(18)F]FDG uptake increased markedly, suggesting enhanced glycolysis. The net influx constant (K) of [(18)F]FDG at pre-hypoxia-loading and after reoxygenation with loading hypoxia for various periods of time was quantitatively evaluated by applying the Patlak graphical method to the image data. Regardless of the brain region, with hypoxia of /=20 min duration only partial or no recovery was seen, indicating irreversible neuronal damage. The 30-min administration of either N-methyl-D-aspartate (NMDA)/non-NMDA antagonist or a free radical scavenger at the same time as reoxygenation after 20 min hypoxia showed a neuroprotective effect inhibiting the decrease in the post-hypoxia-loading K value. In contrast, no such neuroprotective effect was evident with administration of either of these agents only during hypoxia loading, possibly indicating that immediately after reoxygenation neuronal damage was induced mediated by excitatory amino acids and free radicals in tandem. These results demonstrate that serial quantitative evaluation of CMRglc using this technique may be of use in investigating the brain tissue injury associated with hypoxia/reoxygenation as well as clarifying the underlying mechanisms and protective effect of various drugs against such injury.