三种固定液对神经纤维冰冻切片固定效果之比较

目的:观察比较10%甲醛、丙酮和Bouin三种固定液对神经纤维的固定效果,为临床做出更好的神经纤维的快速冰冻切片提供实验基础.方法:取健康大鼠双侧坐骨神经,冰冻切片后分别用三种固定液固定,然后做HE染色,观察各自的组织结构及染色情况.结果:10%甲醛固定的神经纤维组织结构较清楚但是组织发生收缩;丙酮固定的神经纤维染色效果较好,组织没有发生收缩;Bouin固定液固定的神经纤维结构和染色都比较好但是组织收缩最明显.结论:三种固定液都可用于固定神经纤维,但丙酮效果最好.     

肾活检标本冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色结果的比较

目的:探讨冰冻切片与石蜡切片免疫荧光染色对肾活检标本病理诊断的影响.方法:将40例肾活检标本制成并分为冰冻切片组和石蜡切片组,其中石蜡切片组用高压加热抗原修复后行免疫荧光染色,比较两组切片免疫荧光染色结果.结果:石蜡切片组出现较多的假阴性结果和非特异性染色,与冰冻切片组相比,抗体IgG、IgA、C1q、C3的荧光强度均不同,差异有统计学意义.结论:肾活检标本石蜡切片用高压加热抗原修复后行免疫荧光染色可能影响肾活检标本的病理诊断.     

快速冰冻HE染色切片方法的改进

目的探讨改进冰冻切片质量方法。方法用冰冻切片机进行切片,HE染色并与常规石蜡切片进行比较。结果经改进的上述方法不仅切片效果好,而且大大缩短了制片时间。结论只有不断优化冰冻切片制作过程中的每一环节,才能制作出比较满意的切片。     

快速冰冻切片制作方法及经验

目的：探讨优质冰冻切片的制作经验。方法：新鲜标本取材后,冷冻托涂少量胶水,组织按包埋面平整放置于冷冻托上速冻,冻好后立即切片,粗修出组织最大面,调节好防卷板,待组织切片平铺于刀架贴面上,常温粘附载玻片贴片,立即于95％酒精固定,水洗,改良 Gill 苏木素2min,水洗,温水蓝化,伊红3－5s,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。结果：切片完整,厚薄均匀,无褶无刀痕,组织内无冰晶;染色核浆,红蓝对比分明。结论：高质量冰冻切片的关键因素是取材、冷冻的温度和时间、切片的技巧、固定及染色方法。     

改良微波辐射冰冻切片免疫荧光染色法

将微波技术应用于免疫荧光染色并作玻片置育的改良创新，结果表明，反置玻片中低火档５－７ｍｉｎ染色效果最佳，且避免了干燥。该方法大大缩短了孵育时间，加快以进程，降低背景染色，提高阳性强度及阳性检出率，防止了脱片，染色质明显提高。     

不同固定液对冰冻切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对冰冻切片质量的影响以指导临床应用.方法 冰冻切片采用五种不同固定液固定,HE染色,与同组织常规石蜡切片依照石蜡切片质量标准评判对照.结果 五种固定液都可用于冰冻切片,制片技术操作未发现问题,但不同固定液的冰冻切片镜下组织细胞形态有一定差别.结论 乙醚-无水乙醇固定液最佳,含有冰醋酸成分的固定液建议谨慎使用.     

300例术中冰冻切片与石蜡切片诊断的比较

目的比较术中冰冻切片与石蜡切片诊断的准确性，、方法将术中送检的新鲜标本共300例，经恒温式冰冻切片机切片，HE染色，剩余组织作石蜡切片对照，结果300例冰冻切片中，诊断恶性肿瘤43例占14．33％，冰冻切片诊断与最后石蜡切片诊断符合者296例，占98．70％，其中完全符合288例，占96％，不符合者为0．33％，不肯定者为1％，结论拳组300例，其中符合者296例，占98．70％，与国内外文献报道的资料基本相符。认为冰冻切片诊断主要应用于术中活体组织快速诊断如一时难以明确诊断，则应待石蜡切片确诊，并总结了本组的经验。     

固定时间对乳腺癌快速冰冻切片免疫组化结果的影响

目的分析固定时间对乳腺癌冰冻切片免疫组化结果的影响，探寻最佳的固定时间。方法利用AAF固定液（配方为丙酮85mL、冰醋酸5mL、40％甲醛10mL）以1min、2min、4min、6min、8min、10min、12min、15min不同时间对乳腺癌组织冰冻切片进行固定，然后利用6种乳腺癌相应抗体进行免疫组化染色，根据2004—2008年全国十次免疫组化质控活动所用的免疫组化质控评分标准对图像质量进行评分量化。结果固定时间可以直接影响乳腺癌冰冻切片免疫组化图像的质量，最佳的固定时间为6～8min。结论对乳腺癌冰冻切片固定6～8min可取得质量最高的免疫组化结果。     

微波无水乙醇双重固定在组织冰冻切片中的应用

微波无水乙醇双重固定在组织冰冻切片中的应用解放军第五医院病理科刘亚平，姜小军，王生录冰冻切片病理诊断的最大要求是快速，而冰冻切片质量的优劣又直接影响病理诊断水平。同石蜡切片一样，冰冻前的组织固定也是至关重要的。我们应用微波辐射固定新鲜标本，再用无水乙...     

不同固定液及固定时间对小鼠肝组织结构的影响

目的: 研究小鼠肝组织的最佳固定液及切片制作方法.方法:健康雄性成年昆明鼠,腹腔麻醉下取小鼠的肝脏中叶,分别入10%福尔马林、4%多聚甲醛、Bouin液及AAF液固定,固定时间为12、24及48 h.常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片,HE染色,观察比较不同固定液、不同固定时间下小鼠肝组织的光镜结构.结果: 10%福尔马林、4%多聚甲醛固定的肝组织小叶结构完整、清晰,肝细胞界限清楚,着色好,以固定24 h最为理想, 随固定时间延长,细胞出现过度收缩,细胞间隙有轻度增大,胞浆减少且部分细胞出现小空泡.Bouin液及AAF液固定的肝组织各时间点的肝细胞结构均不够完整,界限不清,胞浆中出现空泡,自溶现象明显.结论:肝组织固定剂首选10%福尔马林及4%多聚甲醛,固定时间以24h效果最佳.     

间接免疫荧光法检测麻疹抗原在麻疹早期诊断中的临床应用

目的:探讨间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence Assay,IEA)检测麻疹病毒抗原对儿童麻疹病毒(measles virus,MV)感染的早期诊断价值.方法:观察86例临床诊断麻疹的患儿,在发病的不同阶段IFA检测痰液MV抗原和酶联免疫吸附试验(engymelinked imgmunosorbent assay,ELISA)检测血清中MV特异性LgM抗体,采集30份上呼吸道感染患者痰液进行IFA麻疹病毒抗原检测,比较分析检测结果.结果:86例中发病7 d内IFA测抗原ELISA测抗体两种方法的阳性率为分别为97.1%和16.2%;7 d后为33.3%和88.9%,P均＜0.01.IFA测抗原阳性率与检测时间的相关系数为-0.91,P=0.02;ELISA测抗体阳性率与检测时间的相关系数为0.97,P=0.04.30份对照组的标本MV抗原检测均为阴性,IFA测抗原的特异性与敏感性分别是100%和97.1%.结论:IFA测抗原在疾病早期检出阳性率高,阳性检出率与检测时间成负相关,IFA测抗原痰液麻疹病毒抗原是一种早期快速、特异敏感的实验室检测方法.     

间接免疫荧光法(IFL)测抗伤寒、副伤寒沙门菌IgM抗体

目的 从敏感性、特异性、早期和快速检测的角度探讨新的伤寒和副伤寒的实验诊断方法，以提高伤寒及副伤寒的实验室诊断水平。方法 用间接免疫荧光法和肥达试验检测85例经血培养确诊的伤寒或副伤寒患者、20例献血员及65例非伤寒副伤寒发热病人血清伤寒及副伤寒IgM抗体，对检测结果进行统计学分析和处理。结果 IFL检测85例伤寒或副伤寒患者血清IgM抗体，79例阳性，阳性率92.9%，病程6d以内，阳性率为90%；肥达试验检测同样病例，47例阳性，阳性率55.3%，病程6d以内阳性率46.7%，两种方法的检测结果具有显著性差异（P〈0.01）。对献血员和其他发热病人检测，两种方法的阳性率均在2%以下，二者没有差异。结论 检测抗伤寒和副伤寒沙门菌IgM抗体，免疫荧光法比肥达试验的灵敏度更高，免疫荧光法比肥达试验更具早期和快速检出的特点。     

不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片HE染色效果.方法 应用SD大鼠肝脏组织分别在动物空腹和空腹条件下,选择三种常规的固定液：体积分数10％甲醛固定液、Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液,对肝脏组织进行固定、石蜡包埋、切片和HE染色,观察动物空腹与未空腹条件下组织固定对切片质量的影响,以及不同固定液对肝脏组织切片质量的影响.结果 在未空腹的条件下,肝脏组织结构显示不清晰,呈水样变性的形态改变;Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液固定的组织结构更清晰,但是切片色泽不如体积分数10％甲醛固定液的鲜亮.结论 大鼠是否处于空腹状态对肝脏组织结构影响很大,三种固定方法对大鼠肝脏组织切片质量影响差异不大.     

用Hela细胞检测Bip抗体间接免疫荧光法的建立

目的 建立抗免疫球蛋白结合蛋白(Bip)抗体检测的间接免疫荧光法(IIF),为探讨其在类风湿关节炎(RA)中的意义做出方法 学准备.方法 以Hela细胞为抗原基质固定于载片上,加入待测稀释血清温育,待抗原抗体特异结合后加入荧光素标记的抗人IgG与待测Bip抗体结合,最后置荧光显微镜下观察Hela细胞胞浆有无特异荧光出现.结果 RA患者血清检测中可见到Hela细胞胞浆中出现特异性荧光,而健康献血员血清检测中未发现Hela细胞胞浆中的特异性荧光,实验所见荧光模式与文献报道相符.结论 以Hela细胞为抗原基质的间接免疫荧光法能够对血清中Bip抗体进行检测.     

三种不同固定液对小鼠组织过碘酸雪夫染色效果比较

目的 比较小鼠肝脏、肾脏、小肠三种组织在质量分数4％多聚甲醛液、Carnoy's液、Bouin,s液三种固定液不同固定时间下的制片质量和过碘酸雪夫染色(PAS)效果,筛选出一种最为适用的固定方法.方法 取成年雄性C57BL/6小鼠肝脏、肾脏、小肠,分别固定于三种固定液,固定时间分别是质量分数4％多聚甲醛液:24h、48 h、72 h;Camoy's液:4h、8h、12 h;Bouin's液:12 h、24 h、48 h,充分固定后,常规制作石蜡切片,然后进行PAS染色,对比观察染色效果.结果 三种固定液对不同组织、不同固定时间下PAS染色结果存在差异.肝脏、肾脏、小肠经Camoy's液处理12h后PAS效果最佳,质量分数4％多聚甲醛液固定24 h基本满足观察检测效果,而经Bouin's液固定组织染色效果相对较差.结论 PAS反应对固定液和固定时间具有选择性,Camoy's液是组织进行PAS染色的理想固定液,但从固定效果、重复性、安全性、成本等多因素综合考虑,在PAS反应中,质量分数4％多聚甲醛液可以替代Camoy's液.     

冰冻切片的制作方法分析

目的：探讨冰冻切片制作方法,以提高冰冻切片的质量,确保实验结果科学性。方法：首先详细了解患者临床情况及既往有关的病理学检查情况,选择新鲜活体组织,取材后直接冷冻、切片,切片制成后,立即放入甲醇中固定10 s-20 s。染色1-2m in,水洗,逐级梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。结果：此方法简单,制片时间短,切片质量较好,染色鲜艳,镜下组织结构、切片组织切面完整、无裂纹;细胞形态清晰,细胞核、细胞浆染色佳,术后诊断符合率达96%以上。结论：冰冻切片是较难掌握的病理实验技术之一,具有简便快速,制片质量高等特点,可提高病理诊断的准确性。     

冰冻切片诊断甲状腺滤泡癌的探讨

目的探讨术中冰冻切片诊断甲状腺滤泡癌的标准。方法对48例有包膜浸润的甲状腺滤泡性癌的术中冰冻切片和术后石蜡切片,与60例甲状腺腺瘤和80例结节性甲状腺肿的术中冰冻切片和术后石蜡切片标本进行了观察比较。结果滤泡性癌不同于甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿的组织学表现：（1）滤泡大小不等,以小滤泡为主,其上皮有轻度以上的异型性;（2）细胞核大,深染或空泡状,核仁不明显,可有核沟或核内包涵体;（3）局部区域新生的纤维组织分割瘤组织,形成大或小的滤泡巢,或形成大小、形状、粗细不同的实性细胞条索;（4）滤泡上皮形成筛状结构;（5）滤泡性肿物内出现凝固性坏死;（6）肿块包膜较厚,厚薄不均。结论6种组织学表现可作为除浸润标准外冰冻切片诊断甲状腺滤泡性癌的综合参考依据。     

小鼠诺如病毒间接免疫荧光检测方法的建立

目的建立小鼠诺如病毒(MNV)的间接免疫荧光试验(IFA)的检测方法。方法将MNV-1接种RAW264.7细胞,培养36 h收集病毒培养物及未感染细胞培养物,点制抗原玻片;以107TCID50的MNV-1灌胃接种BALB/c小鼠,收集感染血清做阳性对照血清。收集人工感染后不同时间点的血清样品,以1:10的稀释度使用IFA法测定感染血清MNV抗体滴度。选取80份送检小鼠血清样品,以IFA和ELISA方法测定,差异样品使用Western blot方法进行验证。结果 MNV-1感染RAW264.7细胞(36~48)h,细胞感染率为60%,以36 h感染细胞状态为佳;IFA法测定感染小鼠血清,小鼠感染1周后抗体水平逐渐提高,在4周时抗体滴度达到最高值,之后维持稳定,采集感染4周的动物血清做IFA方法的阳性质控品;80份血清中,IFA法测定阳性27份,阴性53份,ELISA法测定阳性32份,阴性48份;Western blot方法对差异样品验证,其中阳性3份,阴性2份,IFA法和ELISA法检测符合率分别为96.0%和97.5%。结论 IFA方法检测小鼠诺如病毒基本可以反应小鼠的感染情况,偶有假阴性的出现,可以选择IFA方法和ELISA方法作为初筛,差异样品用Western blot方法验证。