小胶质细胞活化抑制与中枢炎症反应关系的研究进展

近年来,小胶质细胞活化成为中枢神经系统疾病的研究热点,其活化导致的中枢神经系统炎症反应对帕金森病、阿尔茨海默病、脊髓损伤及脑损伤等许多神经系统疾病的发生、发展都有重要的影响。随着局部微环境的改变,小胶质细胞的表型及功能会发生不同的变化,从而产生促进或抑制炎症的效果,对疾病产生相应的影响。抑制小胶质细胞的活化从而改善中枢神经系统炎症反应是治疗上述多种疾病的重要研究方向。     

吗啡联合加巴喷丁对术后持续性痛大鼠脊髓小胶质细胞的影响

目的:观察鞘内注射吗啡联合加巴喷丁对皮肤/肌肉切口和牵拉(skin/muscle incision and retraction,SMIR)术后持续性痛大鼠脊髓背角小胶质细胞活化的影响。方法:选择鞘内置管成功的雄性SD大鼠120只,随机分为5组(n=24):假手术组、术后持续性痛组、吗啡组、加巴喷丁组和吗啡联合加巴喷丁组。按Flatters法制作大鼠SMIR术后持续性痛模型;应用机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)评定大鼠的疼痛行为学;应用免疫荧光技术检测脊髓背角活化的小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白分子-1(ionized calcium bindingadaptor molecule-1,Iba-1)的表达。结果:与假手术组比较,术后持续性痛组的MWT在术后第3 d、7 d、12 d、22 d明显下降(P<0.05),脊髓背角Iba-1表达在术后第3 d、7 d明显增加(P<0.05);与术后持续性痛组比较,吗啡组和加巴喷丁组的MWT和脊髓背角Iba-1的表达无明显变化;与术后持续性痛,吗啡组和加巴喷丁组比较,吗啡联合加巴喷丁组的MWT在术后第3 d、7 d、12 d、22 d明显增加(P<0.05),脊髓背角Iba-1表达在术后第3 d、7 d明显减少(P<0.05)。结论:吗啡联合加巴喷丁对大鼠SMIR术后持续性痛有镇痛作用,可能与抑制脊髓背角小胶质细胞的活化有关。     

小胶质细胞活化与神经病理性疼痛

神经病理性疼痛是一种顽固性的疼痛综合征,临床治疗的困境使得对其发生机制的研究一直成为疼痛医学的热点和难点.而作为神经元-胶质细胞网络中最为活跃的分子,小胶质细胞在神经病理性疼痛中的作用日益成为近年来学者们关注的焦点.     

电磁辐射后小胶质细胞活化状态和分泌功能的变化

目的:一定量的电磁辐射可引起中枢神经系统神经元的损伤,但其对小胶质细胞的影响尚不清楚。实验观察电磁辐射对小胶质细胞活化状态以及分泌功能的影响,揭示电磁辐射对小胶质细胞及中枢神经损伤的效应关系。方法:实验于2006-08/2007-05在解放军第三军医大学电磁辐射医学防护教育部重点实验室完成。取体外培养的N9小胶质细胞接受X波段脉冲波,平均功率密度为90mW/cm2的电磁波,一次性照射20min,在辐照后0,1,3,6,12,24h等6个时相点观察活化的N9细胞形态学,采用免疫组化的方法观察OX-42的表达情况,用酶联兔疫吸附测定方法检测N9细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α的水平,采用硝酸还原酶法检测培养上清液中NO浓度。以未接受电磁波辐照的N9小胶质细胞为假辐照组进行对照。结果:①电磁辐射后3hN9小胶质细胞OX-42表达开始明显增强,并一直持续到辐照后24h,细胞形态由静息状态转变为激活状态;②NO的浓度在辐照后1h开始升高(P<0.05),到辐照后6h达到峰值(P<0.01),12h后趋于恢复,24h后再次明显升高(P<0.05)。③肿瘤坏死因子α水平辐照3h后显著升高(P<0.01),并一直持续到12h,到辐射后24h又再次升高,并达到峰值(P<0.01)。结论:电磁辐射辐照可明显诱导小胶质细胞激活,活化后的小胶质细胞分泌NO、肿瘤坏死因子α等细胞因子的功能增强,分泌大量细胞因子反馈调节引起辐射后期的小胶质细胞激活。     

小胶质细胞的活化与细胞因子的研究进展

小胶质细胞(microglia,MI)是目前公认的对脑损伤和疾病进行反应的中枢神经系统效应细胞,其特征之一就是易被大脑任何类型的损伤或疾病活化.     

术前焦虑与术后谵妄

谵妄是一种严重、持续、尚未解决的心理或精神状态,有人统计外科病人发生轻重不等的谵妄者,约20.7%至50%左右.(?)的预后也欠佳。Weddington的研究证实.不少患者的谵妄与药物中毒、毒性物质、贫血、感染、电解质失衡或氮质血症有关,另外社会环境和某些心理因素对发生谵妄也有直接影响。手术前患者焦虑比较严重,对手术要求过高甚至拒绝手术的患者,术后心理方面的合并症就比较高。     

尿石素A通过抑制小胶质细胞激活缓解神经病理性疼痛

目的:探讨尿石素A(urolithin A,UA)对慢性压迫性损伤模型(chronic construction injury,CCI)小鼠痛阈的影响及其可能机制.方法:选取C57BL/6J 8周雄性小鼠50只采用随机数字表法分为3组(n=10):假手术组(Sham组)、模型组(CCI组)和给药组(CCI+UA组).检...     

蛛网膜下腔注射胶质细胞源性神经营养因子对神经病理性痛大鼠机械性痛敏和冷诱发的持续性疼痛的影响

目的:探讨蛛网膜下腔注射胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对大鼠脊神经结扎神经源性痛的影响.方法:采用大鼠L5～6脊神经结扎模型,将SD雄性大鼠随机分为正常组(n=6);假手术组(n=10);单纯脊神经结扎(spinal nenre ligation,SNL)组(n=10):蛛网膜下腔注射生理盐水;GDNF治疗组(n=10):蛛网膜下腔注射GDNF.大鼠脊神经结扎后不同时间点进行行为学评估,以引起50%缩足的机械刺激阈值评价机械性痛觉超敏,5min内在5±1℃冷板上的缩足次数反映冷诱发的持续性疼痛.结果:各组术前基础机械痛阈和冷刺激痛阈比较差异无统计学意义(P>0.05).与假手术组相比,SNL组术后第1d开始出现机械痛阈和冷刺激痛阈降低(P<0.05),一直持续到第14d,GDNF组术后7、14d时冷刺激痛阈差异无统计学意义(P>0.05);与SNL组相比,GDNF组术后第3d时机械痛阈升高,第5d时冷刺激痛阈升高(P<0.05),均持续到术后14d.结论:蛛网膜下腔注射GDNF能减轻神经病理性疼痛大鼠机械性痛敏和冷诱发的持续性疼痛.     

小胶质细胞和星形胶质细胞参与神经病理性痛和慢性炎性痛的机制

外周神经损伤和组织受损后可发展为慢性痛(如神经病理痛和慢性炎性痛)。已有文献报道,除了神经元以外,胶质细胞也参与慢性痛的机制。本文关注脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞参与神经病理痛和慢性炎性痛的机制。首先,采用3~4周龄(未成4     

栝楼桂枝汤对活化小胶质细胞抗炎作用的研究

目的:探讨栝楼桂枝汤对活化小胶质细胞抗炎因子的表达水平及上游炎症信号通路的活化情况。方法:先用MTT实验筛选出药物的最佳干预浓度,然后体外LPS刺激制备出小胶质细胞的细胞炎症模型,经栝楼桂枝汤水提液处理后,应用ELISA法、RT-PCR法、Western-blotting法分别检测细胞抗炎因子的表达及相关炎症信号通路蛋白的表达水平。结果:栝楼桂枝汤水提液可显著促进LPS诱导的小胶质细胞中抗炎因子的表达,并上调相应通路蛋白的表达水平。结论:栝楼桂枝汤可通过TRIF信号通路发挥抗神经炎症的作用。     

栝楼桂枝汤对活化小胶质细胞抗炎作用的研究

目的：探讨栝楼桂枝汤对活化小胶质细胞抗炎因子的表达水平以及上游炎症信号通路的活化情况。方法：体外LPS刺激制备小胶质细胞的细胞炎症模型,用MTT实验筛选药物最佳干预浓度,经栝楼桂枝汤水提液处理后,应用ELISA法、RT-PCR法、Western-blotting法检测细胞抗炎因子的表达及相关炎症信号通路蛋白的表达水平。结果：栝楼桂枝汤水提液可显著促进LPS诱导的小胶质细胞中抗炎因子的表达,同时可上调相应通路蛋白的表达水平。结论：栝楼桂枝汤可通过TRIF信号通路发挥抗神经炎症的作用,为栝楼桂枝汤的临床应用提供基础实验依据。     

缺血性卒中后小胶质细胞的异质性活化 对脑内皮细胞的作用

缺血性卒中是目前导致人类死亡的主要疾病之一.在卒中引起脑损伤的多种机制中,活化小胶质细胞 介导的神经炎症反应至关重要。新兴的单细胞测序技术促进了对小胶质细胞异质性活化的认识。血脑屏障 具有维持脑内环境稳态的关键作用,脑血管内皮细胞是血脑屏障的重要组成部分。研究发现血管相关的小 胶质细胞可以直接接触脑血管内皮细胞,进而影响血脑屏障的通透性,参与调控生理和病理状态下的脑血流 动力学,并促进血管内皮细胞的增殖和血管新生。进一步探索小胶质细胞的异质性活化对脑血管内皮细胞 作用,有望为缺血性卒中研发新的治疗思路。     

Notch信号通路在小胶质细胞活化中的作用

Notch信号通路是一种相邻细胞之间相互作用调控细胞命运的短程信号转导通路。Notch信号通路可以直接接收邻近细胞的信号,转导至细胞核,激活并调控相关转录因子,进而调控细胞的活化。作为中枢神经系统免疫防御的第一道防线,小胶质细胞是维持中枢神经系统稳态的固有免疫细胞,其活化与多种神经系统疾病有关。Notch信号通路在小胶质细胞的活化过程中发挥着重要作用,并可调控小胶质细胞释放炎症介质。     

脊髓CSF-1诱发小胶质细胞活化在长春新碱诱导神经病理性疼痛大鼠中的作用

目的探讨脊髓集落刺激因子1(CSF-1)诱发小胶质细胞活化在长春新碱诱导神经病理性疼痛大鼠中的作用。方法采用随机数表法将30只健康雄性SD大鼠分为3组(每组10只):对照组(Control组)、化学治疗痛组(CINP组)、化学治疗痛+CSF-1中和抗体组(CINP+anti组)。化学治疗药物诱导的神经病理性疼痛动物模型采用隔日腹腔注射长春新碱125μg/kg(共计4次)的方法建立,CINP+anti组在CINP组的给药基础上加予CSF-1中和抗体。于首次注射长春新碱前及注射后1、3、5、7 d采用机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)评价大鼠机械痛敏和热痛敏;采用蛋白免疫印迹法检测脊髓CSF-1以及脊髓小胶质细胞标志物离子化钙结合适配分子1(Iba1)的表达情况;采用逆转录PCR法检测脊髓CSF-1 mRNA和Iba1mRNA的表达水平。结果与Control组比较,CINP组大鼠在首次注射长春新碱后3、5、7 d的MWT和TWL更低(P均<0.01);与CINP组比较,CINP+anti组首次注射长春新碱后5、7 d的MWT和TWL更高(P均<0.01)。与...     

SOCS1调控小胶质细胞活化水平的最新研究进展

小胶质细胞过度活化可加剧中枢神经系统(CNS)炎症反应,引起中枢神经功能损害,小胶质细胞活化参与了脑中风、神经退行性疾病和脑外伤的发生与发展。因此,抑制小胶质细胞过度活化是防治多种CNS疾病的重要手段。细胞因子抑制信号蛋白1(SOCS1)是表达于小胶质细胞上的一种蛋白,大量研究表明,SOCS1蛋白表达变化可调控小胶质细胞活化水平,抑制小胶质细胞过度活化、降低CNS炎症因子浓度和炎症反应程度。白藜芦醇和姜黄素等生物活性药物还可通过增加小胶质细胞SOCS1表达,显著降低β淀粉样蛋白(Aβ)对小胶质细胞的活化水平并降低促炎症因子释放量,因此,SOCS1可能作为新的干预靶点,用于防治阿尔兹海默症等慢性CNS退行性疾病。     

三种细胞外基质蛋白对大鼠小胶质细胞活化的影响

目的:细胞外基质蛋白是整合素重要的配体,通过信号转导系统可影响细胞的形状、代谢、功能、迁移、增殖和分化.细胞外基质蛋白是否参与小胶质细胞的活化过程,是否参与小胶质细胞调控表达整合素而进一步参与一些疾病的进展,目前尚不清楚.实验拟观察纤维结合蛋白、玻璃体结合蛋白和层黏连蛋白3种细胞外基质蛋白对大鼠小胶质细胞整合素表达的影响.方法:实验于2006-05/2007-08在华中科技大学同济医学院临床神经研究中心完成.①实验材料:新生Wistar大鼠由同济医学院实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:体外分离培养和纯化大鼠小胶质细胞,应用纤维结合蛋白、玻璃体结合蛋白和层黏连蛋白包被培养板,以未加任何细胞外基质成分的为对照.③实验评估:采用流式细胞术检测3种细胞外基质蛋白对小胶质细胞MHCⅠ类分子的表达和整合素表达的影响.结果:①相对于对照组,添加纤维结合蛋白和玻璃体结合蛋白的培养基使小胶质细胞MHCⅠ类分子表达明显增加(P < 0.001),添加层黏连蛋白的培养基使小胶质细胞MHCⅠ类分子表达明显下降(P < 0.05).②相对于对照组,添加纤维结合蛋白的培养基可以上调小胶质细胞α4亚基的表达、α5亚基和Mac-1整合素(即αMβ2)表达(P均 < 0.005),添加玻璃体结合蛋白的培养基同样可上调α4亚基表达、α5亚基和Mac-1表达(P < 0.05,P < 0.005).层黏连蛋白对α4亚基,α5亚基和Mac-1整合素表达无影响,但可以上调小胶质细胞表达αⅤ亚基(P < 0.005),纤维结合蛋白和玻璃体结合蛋白对αⅤ亚基表达无影响.纤维结合蛋白、层黏连蛋白和玻璃体结合蛋白可小胶质细胞LFA-1(即αLβ2)表达增加(P < 0.001,P < 0.005),α6亚基表达下调(P < 0.005).结论:细胞外基质成分纤维结合蛋白和玻璃体结合蛋白可促进小胶质细胞的活化,使小胶质细胞α4β1和α5β1和Mac-1的表达增加.层黏连蛋白不能促进小胶质细胞的活化.     

脊髓小胶质细胞活化状态与前列腺的炎性疼痛

目的:观察化学性刺激大鼠前列腺后相应脊髓节段小胶质细胞活化的状况。方法:实验于2004-05/2005-11在第三军医大学神经生物学教研室实验室完成。①分组:健康雄性SD大鼠24只,随机分为4组:对照组6只;完全弗氏佐剂刺激3d组6只;完全弗氏佐剂刺激10d组6只;完全弗氏佐剂刺激28d组6只。②模型制备:对照组:取下腹部正中直切口,于前列腺腹侧叶注入生理盐水0.1mL,可吸收线缝合伤口;完全弗氏佐剂刺激组:取下腹部正中直切口,于前列腺腹侧叶注入完全弗氏佐剂0.1mL,可吸收线缝合伤口。③用免疫组织化学技术对不同时间段大鼠相应脊髓节段(L6和S1)的小胶质细胞活化进行检测。结果:24只大鼠均进入结果分析。完全弗氏佐剂刺激大鼠前列腺后3,10,28d,L6～S1脊髓背角浅层和深层小胶质细胞的活化与对照组相比均显著增加,其中3d时已显著增强,10d时增强最显著,28d时较10d时活化有所减少,但仍显著高于对照组。结论:完全弗氏佐剂刺激大鼠前列腺引起前列腺炎性疼痛,导致了相应节段L6～S1脊髓背角小胶质细胞的激活,提示小胶质细胞活化在前列腺炎性疼痛的神经病理过程可能发挥了重要作用。